异基因造血干细胞移植55例GVHD的临床观察

目的 探索异基因造血干细胞GVHD的有效防治方法.方法 异基因移植患者55例,慢性粒细胞白血病(CML)30例,急性髓系白血病(ALM)12例,急性淋巴细胞白血病(ALL)11例,急性混合细胞白血病(MAL)2例.同胞间人类白细胞抗原(HLA)全相合移植45例,非血缘异基因移植7例,HLA半相合移植3例.43例患者采用MMF、CsA联合短程MTX方案.12例患者采用MMF、CsA、短程MTX联合ATG方案.结果 所有患者造血均顺利重建,12例(21.1%)发生Ⅰ～Ⅱ度aGVHD;11例(20%)发生cGVHD,局限型8例,广泛型3例.aGVHD和广泛型cGVHD经甲强龙冲击治疗后均得到控制.结论 MMF、CsA、MTX、ATG三联方案能有效控制同胞间HLA全相合移植的aGVHD,加用ATG能理想的预防同胞间HLA半相合移植和非血缘异基因移植aGVHD的发生.     

异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病与肺损伤的关系

目的 分析研究异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(Agvhd)患者CT影像学特征和Agvhd诱导肺损伤的发病机制.方法 对47例Ⅱ～Ⅳ度Agvhd患者进行胸部CT检查及Agvhd发生时血清干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)测定,4例抗Agvhd治疗后肺损伤疗效不佳患者进行肺组织活检,生存期＞6个月的患者定期肺功能和CT检查.结果 47例患者在Agvhd后3 d内CT显示20例异常,其中17例疑诊为Agvhd诱导肺损伤(5例弥漫性间质渗出、7例弥漫性间质和肺泡渗出、5例弥漫性间质和部分小叶肺泡渗出);此外,9例患者有双侧胸腔和心包积液,4例伴心肌肥厚.血清IFN-γ和TNF-a水平在有肺损伤和无肺损伤患者分别为:(6.9±1.8)μg/L、(400±102)μg/L和(6.3±1.2)μg/L、(428±83)μg/,L,两者比较差异无统计学意义(均P＞0.05).肺组织病理显示组织结构破坏、上皮细胞损伤、间质纤维化和以T细胞或巨噬细胞为主的浸润.Agvhd治疗与肺损伤治疗有效率呈正相关(r=0.771,P=0.01).结论 肺是Agvhd作用的靶器官之一,T细胞、巨噬细胞和IFN-Γtnf-α与Agvhd造成肺损伤有关,Agvhd肺损伤可迁延为晚期非感染性肺损伤.     

异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的诊治

目的：探讨异基因造血干细胞移植后并急性移植物抗宿主病(aGVHD)的特点及有效防治。方法：2例(急性粒细胞白血病、急性粒单细胞白血病各1例)采用改良的马利兰、环磷酰胺方案进行预处理后，输注供者骨髓血或外周血干细胞。1例(慢性粒细胞白血病)予马法兰 阿糖胞苷 环磷酰胺 足叶乙甙方案预处理，回输外周血干细胞。aGVHD的预防均用环胞菌素A、甲氨蝶呤，出现GVHD后加用甲基强的松龙治疗。结果：移植后均获造血重建，发生较为严重的aGVHD2例。结论：联合各种免疫抑制剂，能有效防治GVHD，使患者获得长期造血重建。     

造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的CT表现及文献复习

目的阐述血液病患者造血干细胞移植（HSCT）治疗后并发急性移植物抗宿主病（aGVHD）的CT表现,探讨其在aGVHD诊断中的临床意义。方法对8例}JSCT患者进行胸部HRCT扫描及腹部动态增强CT扫描,分析aGVHD患者（8例）双肺、肝脏、胆囊、胰腺、脾脏及肠道CT图像改变特征。结果aGVHD患者中CT异常征象包括：双肺斑片状磨玻璃影、胆囊壁增厚、脾脏体积增大及肠壁增厚、肠粘膜明显强化等一系列改变。结论HSCT治疗后并发aGVHD患者的CT改变虽无明显特异性,但影像学检查对于造血干细胞移植后不同并发症之间的鉴别诊断和活检定位提供较为可靠的影像学依据。     

单倍体与同胞全相合造血干细胞移植治疗高危急性淋巴细胞白血病疗效观察

目的 分析异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,AlloHSCT)治疗高危急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的疗效,并探讨临床预后因素.方法 对我院2007年7月至2013年8月进行Allo-HSCT治疗并随访2年以上的69例ALL患者进行临床分析.按移植方式分为单倍体组(n=42)和全相合组(n=27),对各组患者的临床特征及治疗转归进行回顾性分析,应用Kaplan-Meier法进行生存分析,COX回归模型进行多因素预后分析.结果 单倍体组2年总体生存率(overall survival,OS)及2年无白血病生存率(leukemia-free survival,LFS)分别是63.4％、59.4％,而全相合组分别是53.9％、53.7％,两组间差异均无统计学意义(P＞0.05);两组间2年累积非复发死亡率(cumulative non-relapse mortality,NRM)差异也无统计学意义(P＞0.05);但2年累积复发率(cumulative relapse rate,RR)单倍体组明显高于全相合组(39.5％ vs 19.5％,P=0.014).造血重建方面,单倍体组中性粒细胞植入时间明显晚于全相合移植组(P =0.002),两组血小板植入时间无明显差异(P =0.072).单倍体组Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生率明显高于全相合组(P =0.008),两组间Ⅲ～Ⅳ度急性GVHD及慢性GVHD发生率差异无统计学意义(P＞0.05).单倍体组半年内的感染率明显高于全相合组(P=0.02).COX多因素分析显示患者移植前的疾病状态(非CR1)为异基因移植患者的危险因素(P =0.001),其危险度为7.581;而发生局限性慢性GVHD和初诊距离移植时间较短者为预后保护因素(P=0.013和P=0.012),危险度分别为0.178和0.688.结论 在高危组ALL患者的治疗中,单倍体Allo-HSCT与全相合Allo-HSCT的整体疗效相当,因此,单倍体供者可以作为合适的造血干细胞来源.     

造血干细胞移植应用研究

造血干细胞移植（hematopoietic stem celltransplantation,HSCT）是近30年来开始发展并逐渐完善与推广应用的治疗一些疑难重症的有效疗法。其治疗策略是采用超大剂量化疗和全身放疗,达到清除肿瘤细胞或异常细胞的目的,然后将正常人的造血干细胞植入患者的体内,使患者得以重建,恢复正常的造血功能,达到治愈疾病的目的。HSCT治疗成功,明显提高了恶性肿瘤、白血病、再生障碍性贫血和一些疑难重症的远期疗效,也使一些严重的、临床缺乏有效药物治疗的遗传性血液病和先天性免疫缺陷病得到根治。     

TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的预防作用

目的探讨TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法(1)用单向混合淋巴细胞培养方法检测TJU103对T淋巴细胞增殖的影响;(2)以BALB/c(H-2d)、CB6F1(H-2d/b)分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞 3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞 3.0×107脾细胞) TJU103(终浓度25μg/ml),此后腹腔注射TJU10350μg/d,共7d,然后观察其造血恢复、植入及GVHD的情况。结果(1)TJU103可以显著抑制T细胞活化增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,在25μg/ml浓度时,可以抑制83%细胞增殖。(2)由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而完全异基因移植实验组小鼠GVHD发生率仅为2/10,30d生存率增加至8/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01);半相合基因移植实验组小鼠GVHD发生率为1/10,30d生存率增加至9/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01)。结论TJU103不仅可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,而且可显著降低小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的发生率。     

非血缘造血干细胞移植的临床研究

目的探讨非血缘性(无关供者)异基因造血干细胞移植治疗白血病。方法HLA配型不相合非血缘脐血移植治疗儿童白血病3例(ALL,CR2),无关供者异基因外周血造血干细胞移植治疗成人白血病1例(M6,NR),输入的脐血有核细胞(4.98～6.68)×107.kg-1,CD34+(2.24～4.93)×105.kg-1。输入的外周血的单个核细胞7.04×108.kg-1,CD34+1.08×106.kg-l。预处理主要为:阿糖胞苷,马利兰,环磷酰胺,甲基环已亚硝脲,抗胸腺细胞球蛋白。结果4例患者完全植入,+15～+25天白细胞(WBC)>1.0×109L-1,+35天～+51天血小板(PLT)>20×109L-1。例1移植后+12及+51天出现可疑为急性GVHDI度,例4于+16天出现肝静脉闭塞综合征(轻型)(VOD),+17天出现急性消化道GVHDI度,+30天出现出血性膀胱炎(HC),例2于移植后六个月复发,放弃治疗而死亡。余3例正常生活或工作。结论无关供者或对于HLA不相合的异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法,且可以是安全、可行的。     

自体造血干细胞混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗恶性血液病

目的: 观察自体造血干细胞混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗恶性血液病的疗效及移植相关并发症. 方法: 分析1995-01/2003-01我院33例自体造血干细胞混合HLA半相合骨髓移植患者的临床资料. 结果: 17(51%)例患者发生了轻、中度口腔黏膜炎,重症出血性膀胱炎和肝VOD者各1例,白质脑病1例,全身放射治疗后发生脑水肿1例,1例移植期间出现结核性胸膜炎,并发间质性肺炎. 对可评估的性别不同的10例供受者性染色体分析发现3例(30%)移植后形成混合嵌合体,仅2例发生皮肤cGVHD. 随防42(6～96) mo,19例(57.6%)无病存活,4例(12.1%)移植相关并发症死亡,8例(24.2%)术后复发,2例(6.1%)发生了移植后MDS. 结论: 自体造血干细胞混合HLA半相合异体骨髓移植,能够有效诱导GVL效应,提高疗效,减少复发,且并无增加移植相关并发症.     

同期同胞人类白细胞抗原全相合与亲缘间单倍体相合外周血造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病的对比观察

慢性移植物抗宿主病（chronic graft versus host disease, cGVHD）是异基因造血干细胞移植（allogenic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT）后的晚期主要并发症,也是严重影响患者生活质量甚至导致患者移植后疾病非复发死亡的主要原因之一。随着同胞全相合、非血缘全相合、亲缘间单倍体相合allo HSCT,尤其是异基因外周血造血干细胞移植（allogeneic peripheral blood stem cell transplantation, allo PBSCT）在临床中的应用,以及非清髓移植后或复发后供者淋巴细胞输注,使得cGVHD的发生率呈上升趋势。 本研究回顾性分析了华北理工大学附属医院自2005年5月至2014年5月期间收治的56例生存期超过1年以上的allo HSCT患者（其中同胞全相合17例,亲缘间单倍体移植21例）, 现将cGVHD发生率及严重程度报道于下。     

异基因造血干细胞移植后IL-2与急性移植物抗宿主病关系的研究

目的：研究异基因造血干细胞移植（allo-HSCT)后细胞因子IL－2的变化与急性移植物抗宿主病（aGVHD)的关系,探讨IL－2在临床aGVHD发病中的作用。方法：30例恶性血液病患者行allo-HSCT,采用双夹心ELISA法检测aGVHD发生时15例患者外周血单个核细胞分泌的IL－2浓度,采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测IL－2的基因表达,并与未发生aGVHD患者进行比较。结果：所有患者均获得造血重建,15例发生aGVHD（10例Ⅰ度aGVHD,5例Ⅲ-Ⅳ度aGVHD）,发生aGVHD患者的IL－2浓度以及基因表达阳性率均显著高于未发生aGVHD者,并且IL－2浓度随着aGVHD严重程度的增高而增高。结论：IL－2在临床aGVHD发生中起重要的正向调节作用。     

单倍型相合小鼠急性移植物抗宿主病模型的建立

目的:建立单倍型相合小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型,探讨移植后继发血细胞减少的原因.方法:将受鼠分为单纯照射(R组)、照射 输注骨髓单个核细胞(B组)、照射 输骨髓单个核细胞 输脾单个核细胞(S组).移植后观察小鼠体重、体位、活性、毛发、腹泻及生存期,检测外周血象及嵌合体,濒死前行肝、小肠、皮肤、脾脏病理检查.结果:S组出现体重降低、弓背、活动度减低、脱毛,病理检查符合aGVHD,并发生继发白细胞及血红蛋白降低,同时检测嵌合体>90%.结论:C57BL/6N→BcF1 9.5 Gy60Co的照射剂量下,输注骨髓单个核细胞1×102,脾单个核细胞3×107、4×107、5×107均可建立aGVHD模型;aGVHD的发生是移植后继发血细胞减少的主要原因.     

CD25抗体在单倍型干细胞移植后肠道急性GVHD治疗中的应用

目的 观察CD25抗体(巴利昔单抗)治疗单倍型造血干细胞移植(HSCT)后发生肠道Ⅲ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)的疗效.方法 2004年10月至2009年9月北京军区总医院20例单倍型HSCT后发生肠道Ⅲ～Ⅳ度aGVHD的患者,男13例,女7例,于确诊肠道aGVHD当日给予巴利昔单抗治疗,同时使用甲泼尼龙1 mg·kg-1·d-1静脉点滴,巴利昔单抗分别在第1、4天静脉点滴,每次的剂量是20 mg,如果肠道aGVHD无改善,第2周再重复使用,分析治疗疗效,观察输注相关的不良反应和巨细胞病毒(CMV)感染情况.结果 20例患者中完全缓解10例,部分缓解为5例,总有效率75.0%.使用巴利昔单抗后1～12 d,患者肠道aGVHD症状开始缓解,平均取得缓解时间为7 d.随访时间6～64个月,中位随访时间25个月.在完全缓解的10例中8例持续完全缓解无aGVHD复发;2例aGVHD复发患者,再次用巴利昔单抗取得缓解.9例生存,最长存活64个月,其中4例患者停用糖皮质激素,另外5例用低剂量糖皮质激素维持.Kaplan-Meier生存计算2年无病生存率为47.5%.结论 巴利昔单抗治疗单倍型HSCT后发生的肠道Ⅲ～Ⅳ度aGVHD疗效显著,未增加白血病复发和感染率.     

异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病小鼠模型的建立和评价

目的 采用化疗药物预处理方案建立异基因造血干细胞移植的慢性移植物抗宿主病小鼠模型,并进行评价.方法 以BALB/cH-2kd小鼠作为供鼠,C57BL/6H-2kd小鼠为受鼠.对受鼠使用不同的化疗药物进行预处理[方案1:白消安20mg/(kg·d)×4d+环磷酰胺150mg/(kg·d)×2 d;方案2:白消安20mg/(kg·d)×4 d+环磷酰胺100mg/(kg·d)×2 d],然后经尾静脉注射不同剂量的供鼠脾细胞(6×107或4×107个)和(或)相同剂量的骨髓细胞(2×107个),建立慢性移植物抗宿主病小鼠模型;采用嵌合体分析、临床评分、组织病理学等进行评价.结果 采用白消安20mg/(kg·d)×4d-+环磷酰胺150mg/(kg·d)×2d的方案进行预处理、2×107个骨髓单个核细胞+6×107个脾单个核细胞进行移植可形成较高水平的供受者混合嵌合体.移植物抗宿主病发生时间多集中在供鼠脾细胞输注后30～90 d,化疗药物剂量大的预处理方案及移植细胞数高的移植组小鼠的临床评分和慢性移植物抗宿主病的发生率高于化疗药物剂量小的预处理方案及移植细胞数少的移植组(P＜0.05).模型小鼠肠、肝脏、皮肤、脾脏等器官出现细胞和结构异常、炎症细胞浸润等病理改变.结论 采用白消安和环磷酰胺预处理、给予2×107个骨髓单个核细胞+6×107或4×107个脾单个核细胞可形成较稳定的慢性移植物抗宿主病小鼠模型,为进一步指导临床治疗慢性移植物抗宿主病奠定了实验基础.     

小鼠单倍体相合外周血移植模型的建立

目的建立单倍体相合外周血移植小鼠模型,探讨移植后造血及免疫重建特性。方法经大剂量全身照射预处理BDF1小鼠后,经尾静脉输注新生第一天DBA/2小鼠的外周全血,移植后动态观察受体鼠的造血重建及急性移植物抗宿主病(GVHD)发生情况,并用流式双染色法进一步检测粒系、淋巴系造血细胞的长期植入水平。结果移植后小鼠的白细胞、血小板、血红蛋白分别在第18、21、18天明显回升,其中白细胞和血小板分别于第29天和36天恢复正常,而血红蛋白至第50天仍为部分恢复。受体鼠90%长期存活,且不发生明显的GVHD。移植后第50天流式细胞仪检测供鼠来源的造血细胞占总有核细胞的88.81%,其中含供者来源的粒细胞33.92%,T细胞16.83%。结论单份新生小鼠外周血含有足够的造血干细胞,能重建单倍体相合小鼠的造血及免疫系统而不引起明显的GVHD,并可形成稳定的以供者细胞为主的嵌合体,其中粒细胞为完全嵌合。     

Allo-HSCT患者术后环孢素A血药浓度与急性移植物抗宿主病的关系

目的研究异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者环孢素A(CsA)血药浓度水平与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关系。方法回顾性分析2007年1月至2011年12月期间广州医学院第一附属医院46例allo-HSCT患者术后的临床资料,分别比较术后aGVHD与无aGVHD患者的性别、年龄、体重、身高以及术后不同时段CsA血药浓度水平的差异,并且比较Ⅰ~Ⅱ级与Ⅲ~Ⅳ级aGVHD患者的CsA血药浓度水平差异。结果 39.13%(18/46)的患者发生aGVHD。aGVHD组与无aGVHD组间患者的性别、年龄、体重、身高以及术后第三个月CsA血药浓度的差异均无统计学意义(P>0.05);但两组患者术后第一、二、三、四周和第一、二个月CsA血药浓度的差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ级与Ⅲ~Ⅳ级aGVHD患者的CsA血药浓度差异有统计学意义(P<0.05)。结论 allo-HSCT患者aGVHD的发生与术后前两个月CsA血药浓度水平具有明显相关性。术后发生Ⅲ~Ⅳ级aGVHD患者的CsA血药浓度明显低于Ⅰ~Ⅱ级aGVHD的患者,说明低CsA血药浓度更易导致Ⅲ~Ⅳ级aGVHD的发生。     

成人急性淋巴细胞白血病自体移植与异基因移植

目的分析成人急性淋巴细胞白血病(ALL)自体移植与异基因移植的疗效,并探讨相关临床预后因素。方法对1986年11月~2004年6月移植治疗的96例成人ALL患者随访至2005年2月28日,按治疗方式分为自体移植组(56例)和异基因移植组(40例),其中自体移植组进一步分为移植物体外净化和移植后维持治疗组(处理组,26例)和未处理组(30例);对各组患者的临床特征及治疗转归进行回顾性研究,应用Kaplan-Meier法进行生存分析,COX回归模型进行多因素预后分析。结果自体移植组总体与异基因移植组比较,两组1、3、5年预期无白血病生存率(LFS)差异无显著性;自体移植处理组、自体移植未处理组与异基因移植组3组比较,3、5年LFS差异具有显著性(P<0·05),分别为:[(73·0±8·7)%、(69·2±9·0)%],[(42·2±10·1)%、(35·1±10·0)%]和[(50·9±8·2)%、(50·9±8·2)%]。结论自体移植组(总体)与异基因移植组长期LFS相近;自体移植组给予移植物体外净化和移植后维持治疗可显著降低复发率,改善患者长生存。     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征8例疗效分析

目的 观察异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效及安全性.方法 对8例MDS患者进行异基因造血干细胞移植,其中同胞全相合供者4例,亲缘间单倍型供者4例.预处理方案为改良BU/CY 4例,地西他滨桥接BU/CY 2例,FLU-IDA/FLU-BU 1例,FLU-BU/CY 1例,同胞全相合移植采集供者外周血造血干细胞,移植物抗宿主病(GVHD)预防给予环孢素A(CSA)加短程甲氨蝶呤(MTX);血缘单倍型移植采集骨髓和外周血造血干细胞,GVHD预防采用CSA、短程MTX及吗替麦考酚酯(MMF),预处理期间加用抗胸腺细胞球蛋白(ATG).随访时间1～13个月.结果 8例患者全部完成造血重建,顺利出仓.粒系植入时间为11.2 d,巨系植入时间为15.8 d,经STR-PCR检测均为完全供者型.Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)3例,因自行停用抗排异药物导致Ⅳ度aGVHD并于移植后4个月死亡1例.慢性移植物抗宿主病(cGVHD)2例;移植后复发1例,死亡1例,存活6例.结论 allo-HSCT治疗MDS安全有效,对中高危MDS可能是唯一有效的治疗方法,并宜尽早进行.     

HLA-mismatched/haploidentical hematopoietic stem cell transplantation: a field in which Chinese doctors are making great contributions

Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation .（allo-HSCT） is one of the best, or even the only,option for the cure of leukemia, especially for patients with high risk factors . However, it is limited by the shortage of suitable donors, because only 25%-30% patients can find a human leukocyte antigen （HLA）-identical sibling donor. Although much progress has been made in finding a suitable unrelated donor or unrelated cord blood （uCB） due to the expansion of the worldwide unrelated donor program,     

Expressions of tissue factor and tissue factor pathway inhibitor in patients with acute graft-versus-host disease after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation

This study examined the expressions of human serum tissue factor （TF） and tissue factor pathway inhibitor （TFPI） in patients with acute graft-versus-host disease （aGVHD） after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation （allo-HSCT） and their clinical significance. The serum TF and TFPI levels were detected by ELISA in 28 allo-HSCT recipients before and after the transplanta-tion and the changes of TF and TFPI levels were dynamically monitored at different phases of the disease. No significant differences in the serum TF and TFPI levels were found in allo-HSCT recipi-ents in the absence of aGVHD or with gradeⅠaGVHD before and after the transplantation. The lev-els of serum TF and TFPI were substantially increased in the patients with gradeⅡ aGVHD at the peak of aGVHD （P〈0.05） and they were even higher in the patients with grade Ⅲ–Ⅳ aGVHD （P〈0.01）. When the conditions became stable after treatment with immunosuppressive agents, the serum TFPI level was decreased to the baseline level （P〉0.05） and the TF level was lowered but still higher than the baseline level （P〈0.05）. It was concluded that the levels of serum TF and TFPI were increased significantly in the patients with grade Ⅱ–Ⅳ aGVHD after allo-HSCT and decreased markedly after the treatment. Monitoring the levels of serum TF and TFPI in the patients with allo-HSCT is important to predict the occurrence, outcome and prognosis of aGVHD.