雌激素及人重组生长激素对去势大鼠颌骨及股骨骨密度的影响

目的 观察雌激素及人重组生长激素对去势大鼠剩余牙槽骨骨密度的影响. 方法 4月龄未交配雌性SPF级大鼠65只,随机分为2组:去势组(ovariectomized,OVX)48只、假手术组(sham-ovariectomized rats,sham-OVX)17只.OVX组切除卵巢建立绝经后骨质疏松模型;sham-OVX组切除卵巢周围脂肪组织;饲养8周后,拔除左侧上颌磨牙建立剩余牙槽骨模型.根据治疗方案将OVX大鼠分为4组:OVX组、雌激素治疗组(estrogen replacement therapy,ERT)、生长激素治疗组(rhGH therapy,rhGHT)、联合治疗组(estrogen and rhGH therapy,ErhGHT).拔牙术后3d,背部皮下注射给药.组织学观察各组大鼠骨组织计量学变化;双能X线法测定大鼠剩余牙槽骨和四肢骨骨密度(bone mineral density,BMD). 结果 给药4周时,rhGHT 组、ERT组和ErhGHT组BMD升高,与OVX组相比差异存在显著性;但其均低于sham-OVX组.而给药8周时,rhGHT组、ERT组、ErbGHT组与sham-OVX组BMD相似,差异均无显著性.相关性分析显示剩余牙槽骨与股骨和腰椎的骨量变化呈正相关. 结论 剩余牙槽骨骨质丧失、上颌骨骨质丧失与全身骨骼骨质丢失之间有相关性.rhGHT、ERT和ErhGHT都能有效提高上颌剩余牙槽骨、上颌骨、腰椎和股骨骨量至正常水平,骨量的提高受治疗时间的影响,疗程不应少于8周.     

咬合力丧失对老年骨质疏松大鼠牙槽骨吸收的影响

目的〓〖HTK〗通过手术建立动物模型，观察咬合力丧失对老年骨质疏松大鼠牙槽骨吸收的影响。〖HTW〗方法〓〖HTK〗40只3月龄雌性Wistar大鼠随机分为：假手术组（SO组）、应力缺失组（LS组）、去势组（OVX组）、去势+应力缺失组（OVX+LS组）。手术制备实验大鼠卵巢切除及一侧磨牙缺失动物模型。术后8周、12周测定大鼠血清中ALP、Ca、P含量及子宫重量系数变化；用双能X线吸收法(DEXA)测定颌骨密度。〖HTW〗结果〓〖HTK〗12周后，OVX组大鼠血清中ALP升高，牙槽骨密度降低，OVX+LS组牙槽骨骨密度降低明显。〖HTW〗结论〓〖HTK〗咬合力丧失明显加重老年骨质疏松大鼠的牙槽骨吸收。     

雌激素及人重组生长激素对去势大鼠剩余牙槽骨OPG、RANKL和血清中ALP表达的影响

目的 观察雌激素及人重组生长激素对去势大鼠剩余牙槽骨骨保护素、破骨细胞分化因子(OPG和RANKL)和碱性磷酸酶(ALP)含量的影响。方法 4月龄未交配雌性SPF级去势骨质疏松大鼠65只,拔除左侧上颌磨牙建立联合剩余牙槽骨模型。建模成功后根据治疗方案分为5组:去势组(ovariectomized,OVX)、雌激素治疗组(estrogen replacement therapy,ERT)、生长激素治疗组(rh GH therapy,rh GHT)、联合治疗组(estrogen+rh GH therapy,Erh GHT)、假手术组(sham-ovariectomized rats,sham-OVX)。采用免疫组化的方法观察不同治疗组对剩余牙槽骨OPG、RANKL和ALP含量的影响。结果 与shamOVX组相比,OVX组大鼠上颌剩余牙槽骨RANKL降低显著(P<0.05),而OPG表达略微增加,破骨细胞(OC)活性增强,剩余牙槽骨骨量减少。ERT、rh GHT和Erh GHT组均可升高OPG,降低RANKL,减弱OC活性,增加上颌剩余牙槽骨骨量(P<0.05)。去势后骨转换增强,血清ALP活性增强;ERT对血清ALP含量影响不大;rh GHT、Erh GHT可能通过增加成骨细胞活性,从而增强血清ALP活性。结论 一定量的雌激素及人重组生长激素可保护去势大鼠剩余牙槽骨并增加成骨。     

内源性甲状旁腺激素对体外诱导培养破骨细胞的影响

目的:研究内源性甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)对于体外诱导培养破骨细胞的影响?方法:取8周龄PTH+/+和PTH-/- 小鼠各16只,分离培养小鼠股骨全骨髓细胞,在含有10 ng/ml 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的培养皿中培养24 h,收集未贴壁细胞,即得破骨细胞前体,利用M-CSF和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)刺激形成破骨细胞?根据加入不同RANKL浓度分为低浓度(50 ng/ml)和高浓度(100 ng/ml)组?于诱导第6天?第9天进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞形态并计数40或100倍视野内TRAP阳性细胞数量?结果:M-CSF和RANKL能够在体外诱导小鼠全骨髓细胞形成TRAP阳性的破骨细胞?诱导第9天进行TRAP染色,同一个视野中形成的TRAP阳性破骨细胞数量较诱导第6天减少,但是破骨细胞体积和细胞核数量增多?相同浓度RANKL刺激下,PTH+/+与PTH-/-组破骨细胞数量未见明显统计学差异?不同浓度RANKL刺激下,高浓度组破骨细胞数量明显多于低浓度组细胞数量?结论:内源性PTH对于体外M-CSF和RANKL诱导骨髓培养的破骨细胞数量没有影响,与低浓度组相比,高浓度RANKL能够进一步促进破骨细胞数量增加?     

甲状旁腺素对大鼠正畸牙根吸收后修复期破骨细胞的影响

目的探讨皮下间断注射少量甲状旁腺素(PTH)(1-34)对大鼠正畸牙根吸收后修复期破骨细胞的影响。方法 63只雄性6~8周SD大鼠建立正畸牙根吸收动物模型后,随机分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组大鼠不注射任何药物,阴性对照组间断注射6μg/kg生理盐水,实验组皮下间断注射6μg/kg PTH(1-34)(PTH:1μg/mL)。分别在中断加力0、7、10、14、17、21、25d处死大鼠取材,免疫组织化学测定牙根修复期压力侧牙周组织中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察实验区破骨细胞变化。结果中断加力后修复早期仍可见破骨细胞,实验组相对于其他两组破骨细胞数目差异无统计学意义(P>0.05);实验组相对于其他两组破骨细胞分化因子表达早期增强,晚期减弱(P<0.05)。结论皮下间断注射少量PTH(1-34)对牙根修复期仍持续的牙根吸收不会产生抑制作用。     

雌激素缺乏对牙周炎大鼠牙槽骨骨保护素表达的影响

目的 研究雌激素缺乏对牙周炎大鼠牙槽骨中骨保护素(OPG)表达的影响,探讨雌激素调节牙槽骨改建的机制.方法 采用切除双侧卵巢及牙周结扎的方法建立雌激素缺乏的大鼠牙周炎动物模型,观察大鼠牙周组织病理改变,应用免疫组织化学技术观察OPG在牙槽骨的表达,比较卵巢切除(OVX,n=18)、假手术(Sham,n=17)及雌二醇治疗(OVX+E2,n=18)3组大鼠牙槽骨OPG表达吸光度(A)值的差异.结果 各组大鼠组织学观察均显示牙槽骨骨小梁稀疏,牙槽骨表面可见破骨细胞及骨吸收陷窝,OVX组更为显著.Sham组、OVX组及OVX+E2组的牙槽骨OPG阳性表达A值分别为38 799±6228、27 854±5246和37 146±6394,OVX组吸光度低于Sham组和OVX+E2组(均P＜0.05),而Sham组和OVX+E2组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 雌激素缺乏降低牙槽骨中骨保护素的表达,促进实验性牙周炎大鼠牙槽骨的吸收.     

甲状旁腺素片段与阿仑膦酸钠对骨质疏松大鼠骨转换和骨密度的影响

目的　观察人甲状旁腺素氨基端 1- 34片段 (hPTH1 -34,简称PTH)与阿仑膦酸钠(Alen)对去卵巢骨质疏松大鼠骨转换和骨密度 (BMD)的影响。方法　70只 6月龄Wistar大鼠被随机分为 7组: (1)基线组;余 6组行去卵巢(OVX)或假手术(Sham); (2) (OVX6)周处死组; (3)假手术对照组; (4)OVX14周处死组; (5)PTH组:OVX后再给予 40μg·kg 1·d 1; (6)Alen组:OVX后再给予 100μg·kg 1·d 1; (7)A+P组:OVX后再给予Alen100μg·kg 1·d 1和PTH40μg·kg 1·d 1, (3)~(7)组均于OVX6周后开始皮下注射不同药物, 5d/周,疗程 8周。采用双能X线骨密度仪测量腰椎和股骨BMD,测量血碱性磷酸酶 (ALP)、钙、磷、肌酐水平,采用酶联免疫吸附法测量尿脱氧吡啶啉 /肌酐比值(UDpd/Cr)。结果　大鼠去卵巢后 6周组,ALP及UDpd/Cr明显高于基线组 (ALP: 101U/L±59U/L, 58U/L±10U/LP<0 01),腰椎BMD明显低于基线组 (P<0 01)。ALP及UDpd/Cr水平在Alen组明显降低(ALP: 61U/L±28U/L),PTH组显著升高(120U/L±36U/L),A+P组介于Alen和PTH组之间。PTH、Alen及A+P组腰椎和股骨BMD显著高于骨质疏松对照组 (分别P<0. 01或P<0. 001),达到或超过假手术组。PTH和Alen组各部位BMD无明显差别。A+P组腰椎BMD高于PTH组(P<0. 05),股骨BMD明显高于PTH及Alen组(均     

雌激素替代疗法对骨质疏松实验性牙周炎大鼠牙槽骨吸收的影响

目的:通过建立大鼠骨质疏松模型,研究雌激素替代治疗对实验性牙周炎大鼠牙槽骨高度的影响。方法:26只雌性SD大鼠随机分为3组,Sham组(n=9):假手术;OVX组(n=9):卵巢切除;OVX E2组(n=8):卵巢切除加雌激素治疗。大鼠适应性喂养7 d后行假手术或双侧卵巢切除术,OVX E2组于术后第2天起皮下注射苯甲酸雌二醇,剂量为每次20μg/kg体重,3 d 1次。卵巢切除术或假手术后28 d结扎丝结扎上颌第一磨牙牙颈部诱导牙周炎,第63天处死动物,常规取材,测量上颌第一磨牙PBL,摄上颌骨X线片,测量上颌第一磨牙PBS。结果:Sham组、OVX组和OVX E2组的PBL值分别为0.276±0.011,0.472±0.014和0.286±0.010;PBS值分别为44.040±1.966,38.009±7.062和45.626±2.231。采用完全随机设计单因素方差分析,上颌第一磨牙OVX组PBL高于Sham组和OVX E2组,OVX组PBS低于Sham组和OVX E2组,均P<0.05。Sham组和OVX E2组的PBL、PBS间差异无统计学意义,P>0.05。结论:雌激素缺乏促进实验性牙周炎大鼠牙槽骨吸收,雌激素替代治疗可有效预防因此产生的牙槽骨高度降低,降低失牙风险。     

雌激素对大鼠牙槽骨骨代谢的影响

目的 探讨雌激素防治大鼠牙槽骨骨质疏松的机制,为开发药物提供依据.方法 24只SD大鼠随机分为3组:对照组、去卵巢组和雌激素治疗组,每组8只.除对照组外,其余行双侧卵巢切除术.雌激素组给予炔雌醇100μg/(kg·d)灌胃,对照组和去卵巢组给予生理盐水对照灌胃,实验90 d后取大鼠牙槽骨,检测牙槽骨骨量、牙槽骨组织中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)活性.结果 与对照组相比,去卵巢组牙槽骨骨量明显减少;牙槽骨组织中TRAP阳性的破骨细胞数增加57.14%(p＜0.05);IGF-I表达变少、变弱(P＜0.05).与去卵巢组相比,雌激素组牙槽骨骨量明显增多;牙槽骨组织中TRAP阳性的破骨细胞数减少31.82%(P＞0.05);牙槽骨IGF-I表达变多、变强(P＜0.05).结论 雌激素能促进牙槽骨骨形成和抑制骨吸收,防治牙槽骨骨质疏松.     

甲状旁腺激素1-34和雷奈酸锶联合使用对去势大鼠骨质疏松症影响的研究

目的 研究联合使用甲状旁腺激素1-34(PTH)和雷奈酸锶(SR)对去势大鼠骨质疏松症的影响.方法 50只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=5)及双侧去卵巢手术组(OVX组,n=45),正常情况下饲养12周后,随机取5只OVX组大鼠和5只Sham组大鼠处死,取胫骨检查骨质疏松模型的建立情况.随后剩下的40只OVX组大鼠随机平均分成4组(10只/组):OVX对照组、SR组、PTH组和PTH+ SR组;SR组、PTH组和PTH+ SR组分别给予SR灌胃(625 mg/kg,每周5次)、PTH皮下注射(20 μg/kg,每天1次)和相同剂量的SR灌胃及PTH皮下注射.药物治疗8周后将所有大鼠处死取胫骨行骨密度及微观参数检测,最大载荷及弹性模量的测定和血清P1NP、CTX-1含量的测定.结果 骨质疏松大鼠模型建立成功.与OVX对照组相比,SR组、PTH组和PTH+ SR组各组大鼠胫骨骨密度显著增加,骨小梁数量增加,差异均有显著性意义,P＜0.05.与OVX对照组比较,SR、PTH及PTH+ SR组的Tb.N、Tb.Th、BV/TV及conn.D明显增加,Tb.Sp明显降低,差异有显著性意义,P＜0.05.SR组、PTH组和PTH+ SR组的胫骨最大栽荷及刚度值均高于OVX对照组;与OVX对照组比较,SR、PTH及PTH+ SR组大鼠血清中P1NP表达量增加,而CTX-1表达降低,差异有显著性意义,P ＜0.05.结论 联合使用PTH和SR可以明显增强去势大鼠成骨活性,增加其骨密度,增强骨强度,对去势大鼠骨质疏松症的治疗有叠加作用.     

成骨细胞刺激因子对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗效果

目的 观察人成骨细胞刺激因子(OSF-1)对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗效果。方法 健康4月龄SD雌性大鼠12只, 随机分为假手术组(SHAM组)、去势组(OVX组)、甲状旁腺激素组(PTH组)和OSF-1组, 每组3只。SHAM组切除卵巢附近脂肪组织, 其他各组切除双侧卵巢。术后10周, SHAM组和OVX组皮下注射生理盐水, 0.2 mL/d, PTH组皮下注射PTH, 20 μg/(kg·d), OSF-1组皮下注射OSF-1, 80 μg/(kg·d)。术后21周, 处死大鼠, 分离子宫并称重, 分离股骨, 显微CT扫描干骺端。结果 OVX组子宫重和骨量较SHAM组显著降低(P<0.01), 骨小梁微结构明显破坏。与OVX组相比, PTH组和OSF-1组的骨密度、骨体积分数、骨小梁数量显著增加(P<0.01), 骨小梁分离度和模式因子显著下降(P<0.01, P<0.05), 骨小梁微结构更紧密。PTH组较OSF-1组骨密度、骨体积分数、骨小梁数量显著增加(P<0.01), 骨小梁模式因子显著下降(P<0.01)。结论 皮下注射OSF-1[80 μg/(kg·d)]可有效增加去卵巢大鼠的骨量, 改善骨小梁微结构。     

大鼠切除卵巢骨质疏松模型的实验研究

目的 研究雌性大鼠在生长期、成年期及切除卵巢后早、中、晚期的骨骼变化，探讨骨质疏松模型形成的最佳条件及评价方法。方法 SD雌性大鼠随机分为正常组、去卵巢(OVX)后1，2，3月和相应的假手术组(SHAM)。用双能X线吸收法(DEXA)测定骨密度(BMD)和骨矿含量(BMC)，处死后取胫骨近端进行骨组织计量学测量，即骨小梁面积百分率(Tb．Ar％)、骨小梁数目(Tb．N)、骨小梁厚度(Tb．Th)和骨小梁分离度(Tb．Sp)。结果 正常组BMC和Tb．Th随月龄持续增加，BMD和Tb．Ar％、Tb．N在成年期达到峰值，以后逐渐下降；OVX组下降显著，BMD和Tb．Ar％在手术1月后差异有显著性，Tb．N在术后2月差异有显著性；正常组Tb．Sp在生长期逐渐下降，成年后增加，OVX组术后增加显著，术后2月差异有显著性。BMD和Tb.Ar%存在正相关关系。结论 正常雌性大鼠在成年期6月龄达到峰值骨量，为建造骨质疏松模型的最佳时间，去卵巢后短时间(1月)模型即成功。骨组织计量学与BMD均为评价骨胳状况的较好方法。     

何首乌水提液对去卵巢大鼠骨组织的动态影响

目的：观察何首乌水提液对去卵巢大鼠骨组织的动态影响。方法：把64只6月龄SD雌性大鼠随机分为4组，即假手术组、卵巢切除组、何首乌组、尼尔雌醇（E2）组，每组16只。各组大鼠分别于开始给药后第15日、第30日将各组的半数动物处死，测定骨羟脯氨酸（HOP）、骨钙、骨磷、血清及骨碱性磷酸酶（ALP）、血清及骨抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）并做了骨组织的病理HE染色。结果：在两个阶段的治疗中，何首乌组与卵巢切除组比较，骨有机质和骨矿物质均有显著性升高；骨组织病理形态改善；TRAP活性变化没有出现明显改变（P〉0．05），而ALP活性出现明显的变化。骨组织ALP比血清ALP的统计学差异更大，并且以上指标在第二阶段较第一阶段的统计学差异更为显著。结论：何首乌水提液可能主要通过增强ALP活性，抑制骨胶原、骨钙、骨磷的丢失，从而抑制去卵巢大鼠的骨质疏松。     

甲状旁腺激素对去卵巢大鼠骨折愈合的影响

目的探讨局部应用甲状旁腺激素（PTH）对去卵巢大鼠股骨骨折愈合的影响。方法将30只SD大鼠随机分成3组：假手术组＋骨折＋生理盐水组（Sham＋F＋NS）;卵巢切除＋骨折＋生理盐水组（OVX＋F＋NS）;卵巢切除＋骨折＋甲状旁腺激素组（OVX＋F＋PTH）,每组10只。实验组切除双侧卵巢,术后4周选取股骨中段制备开放性骨折模型,髓内钉固定,于骨折部位给予PTH（20μg/kg）,3次/周,间断骨折局部皮下注射4周后,处死动物并收集样本,采用X线摄片、骨密度检测、组织形态学及免疫组织化学方法评估骨折愈合情况。结果给予PTH干预后,骨痂骨量较OVX＋F＋NS明组显升高（P〈0.05）;X线观察显示OVX＋F＋PTH组得分明显高于OVX＋F＋NS组（P〈0.05）;HE染色可见OVX＋F＋PTH组骨小梁数量增多,板层骨排列整齐有序;同时,OVX＋F＋PTH组骨形态发生蛋白-2（BMP-2）免疫组化表达明显升高（P〈0.05）。结论 PTH能够刺激成骨细胞活性,有效改善骨质疏松性骨折大鼠骨痂愈合质量。     

序贯使用降钙素和甲状旁腺激素对骨重建过程作用的实验研究

目的试图通过序贯使用降钙素和甲状旁腺激素分别干预骨重建的吸收期和形成期,达到通过干预骨重建全过程来实现骨重建正平衡。方法将12只雄性大鼠平均分为对照组和干预组。干预组于实验第1、2日每日肌肉注射益钙宁1U/100g,于实验的第4、5天肌肉注射重组大鼠甲状旁腺激素（rrPTH）30μg/100g;对照组同期肌注生理盐水和溶媒。于实验第6天取腰椎椎体,采用骨组织形态计量学的方法定量观察腰椎椎体松质骨骨组织学静态参数的变化,采用电镜定性观察各种骨重建表面上细胞的超微形态变化。结果实验组序贯应用降钙素和甲状旁腺激素后,骨小梁成骨细胞表面积相对百分比、类骨质平均厚度、单位成骨细胞骨形成表面的成骨细胞数、骨小梁类骨质相对体积分别为19.9%±6.2%、3.4μm±0.4μm、37.6个/mm±4.6个/mm、1.8%±0.6%,均大于对照组,P<0.05;活性骨形成表面中骨构建形成部位的增加超过骨重建部位;电镜结果序贯应用降钙素和甲状旁腺激素后成骨细胞成骨功能增加。结论序贯应用降钙素和甲状旁腺激素明显刺激骨形成,骨构建形成部位的增加大于骨重建形成部位。     

米索前列醇对去势后大鼠骨保护素的影响

目的:通过给予去势后大鼠米索前列醇,了解米索前列醇对骨密度及成骨细胞分泌骨保护素 (Osteo protegerin, OPG)的影响。方法:鼠龄90 d的Wistar雌性大鼠共 30 只,分为正常对照组(A组)、去势组(B组)、去势给米索前列醇组(C组),C组去势后第2 d予以2 mg·kg-1·d-1剂量的米索前列醇灌胃,于术后28 d对各组的骨密度进行检测,同时取左侧胫骨干骺端观察骨保护素 mRNA水平的变化。结果: 骨密度检测结果显示 A组最高,C组次之,而B组最低,A组、B组、C组之间差异有显著性(P<0.05);骨保护素3组之间差别有显著性,C组最高,B组次之,A组最低(P<0.05)。结论: 米索前列醇可能通过刺激骨保护素的表达及分泌,来抑制去势后雌性大鼠骨量的丢失。     

雌、孕激素对去卵巢大鼠骨代谢及肾脏1,25-(OH)2D3受体mRNA表达的影响

目的:观察雌孕激素替代治疗对去卵巢大鼠骨组织计量学参数变化及大鼠肾脏1,25-(OH)2D3受体(VDR)mRNA 表达的影响,并探讨其可能的机制.方法:25只成年SD雌性大鼠,随机分为为5组,假手术组、单纯去势组以及去势 补充雌激素组、去势 补充孕激素组、去势 补充雌、孕激素组,每组5只.喂养3个半月后处死,取出肾脏,RT-PCR方法检测VDR mRNA的表达;取胫骨上段不脱钙骨制片,应用半自动图像数字化分析仪检测各组大鼠骨组织计量学参数.结果:与假手术组、雌激素及雌孕激素组相比,去卵巢大鼠松质骨骨量明显减少,伴有骨结构变差,骨形成和骨吸收的参数值增加(P<0.05);与去卵巢组相比,孕激素组大鼠无显著改变.去卵巢组大鼠肾脏VDR mRNA的相对表达量显著低于假手术组、雌激素组及雌孕激素组(P<0.05);而与孕激素组无显著差异.结论:雌激素能有效地抑制去卵巢大鼠的骨吸收和骨形成,降低骨转换,可能与促进去卵巢大鼠肾脏VDR mRNA的表达有关.