粉防己碱抑制大鼠肺动脉高压过程中PDGF-A、B表达的研究

目的：探讨血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）在粉防己碱（Ｔｅｔ）抑制野百合碱（ＭＣＴ）诱导的大鼠肺动脉高压肺血管构形重建中的作用。方法：建立（ＭＣＴ）诱导的大鼠肺动脉高压模型,同进以两个实验组加不同剂量的Ｔｅｔ抑制肺动脉高压,用免疫组化方法检测Ｔｅｔ对ＭＣＴ致肺动脉高压在 肺小动脉中膜平滑肌细胞ＰＤＧＦ－Ａ、Ｂ表达的影响。结果：Ｔｅｔ能抑制肺小动脉中膜平滑肌细胞增殖时的ＰＤＧＦ－Ｂ的表达增强（Ｐ〈０．０     

粉防己碱对肺动脉高压大鼠的肺小动脉平滑肌细胞PDGFR-α、β表达的影响

本实验用免疫组织化学方法检测粉防己碱 (Tet)对肺动脉高压大鼠肺小动脉中膜平滑肌细胞血小板源生长因子受体α、β(PDGFR α ,PDGFR β)表达的影响。结果表明 ,Tet能抑制肺小动脉中膜平滑肌细胞增殖时的PDGFR α、β的表达增强 ( P <0 0 1 )。实验结果提示 ,Tet抑制PDGFR α、β的表达是其抗血管平滑肌细胞增殖、抑制肺动脉高压血管构形重建的分子机制之一。     

缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF─A、─B链及其受体α、β亚基基因表达的影响

为了研究缺氧性肺动脉高压形成的机理，采用核酸分子杂交技术观察缺氧对肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链、－Ｂ链及其受体α、β亚基基因表达的影响。结果表明低氧和无氧（２．５％Ｏ２和０％Ｏ２）１．５、３ｈＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达显著增加（Ｐ＜０．０１，ｖｓ常氧组），而６～４８ｈＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。低氧和无氧１．５～４８ｈ均能显著地增加ＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲ－ＮＡ表达（Ｐ＜０．０５）。常氧条件下ＰＡＥＣ均能低水平地表达ＰＤＧＦ－α亚基受体和β亚基受体，低氧和无氧则上调此两受体ｍＲＮＡ表达水平（Ｐ＜０．０５）。由此说明缺氧不仅能使ＰＡＥＣ“旁分泌”ＰＤＧＦ参与肺动脉平滑肌细胞增殖调节，也使ＰＡＥＣ通过“自分泌”ＰＤＧＤ及上调其膜上的ＰＤＧＦ受体基因表达，参与缺氧肺动脉内皮细胞自身功能调节，从而在缺氧性肺动脉高压肺血管收缩反应增强及肺血管结构改建中发挥重要作用。     

IGF—1R mRNA在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达

目的：探讨胰岛素样生长因子－１受体（ＩＧＦ－１Ｒ）ｍＲＮＡ在低氧大鼠肺小动脉壁的变化。方法：采用原位杂交方法检测低氧性肺动脉高压大鼠和正常大鼠肺小动脉壁ＩＧＦ－１Ｒ ｍＲＮＡ的表达,用图像分析技术检测肺小动脉的形态改变和半定量技术检测ＩＧＦ－１Ｒ ｍＲＮＡ的表达强度。结果：低氧性肺动脉高压在鼠肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄,反映管壁增厚的两个指标ＭＴ％和ＭＡ％均显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）。正常     

PDGF在缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机理初探

目的：研究缺氧性肺动脉高压肺血管结构改建中肺血管平滑肌细胞增殖的机理。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和核酸分杂交技术观察了缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）增殖及血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链，－Ｂ链，α，β亚基受体基因表达的影响，结果：低氧６ｈ使ＰＡＳＭ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入减少（Ｐ〈０．０５），无氧６ｈＰＡＳＭ的＾３Ｈ－ＴｄＲ参入均较常氧对照组明显增多Ｐ〈０．００１，而缺氧１２ｈ则促进参入，至     

动力性肺动脉高压犬肺动脉PCNA及α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的 探讨平滑肌细胞增殖在动力性肺动脉高压形成中的作用。方法 利用降主动脉－左下肺动脉分流建立的幼犬动力性肺动脉高压模型,取90d肺组织病理切片,应用鼠抗人增殖细胞核抗原（PCNA）抗体、α－平滑肌细胞肌动蛋白抗体（α－actin)、及Dako二抗免疫组化检测,图像分析仪对所得结果进行分析,计算细胞增殖指数。结果 分流犬左下肺动脉中膜α-actin免疫组化染色呈强阳性表达,右下肺动脉弱阳性,而对照组均呈阴性;分流犬左下肺动脉PCNA阳性信号表达明显多于右肺动脉,而右肺动脉及左上肺动脉仅有少量表达;增殖指数左下肺动脉内膜为33％,中膜11％,外膜7％,右下肺动脉仅为少量。结论 平滑肌细胞增殖参与实验犬动力性肺动脉高压形成过程并与肺动脉压力高程度和肺血管重构改变一致。     

DDPH对肺动脉高压大鼠肺血管构形重建的影响

用测右心室收缩压（ＲＶＳＰ），右心室肥大指数（ＲＶＨＩ），Ｆｅｕｇｅｎ与弹力纤维复染，图像分析等方法，观测１－（２，６－二甲苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对野百合碱（Ｍ）诱发大鼠肺动脉高压和肺血管构形重建的影响，结果：（１）ＤＤＰＨ对Ｍ引起大鼠ＲＶＳＰ升高的抑制作用达３８．９５％，（２）ＲＶＨＩ和肺小动脉中膜厚度，Ｍ加ＤＤＰＨ（ＭＤ）组较Ｍ组分别低３３．４９％和４７     

血小板激活因子致鼠肺循环和血小板生长因分布变化的实验研究

本文观察正常鼠和注射血小板激活因子（ＰＡＦ）后鼠肺动脉压和血小板生长因子（ＰＤＧＦ）－Ｂ链样物质分布的变化发现，注射ＰＡＦ三周鼠肺动脉压较正常对照组显著升高（Ｐ〈０．００１）；同时，注射ＰＡＦ后在鼠肺动脉压升高的同时肺小动脉血管内皮和大动脉及支气管周围间质有正常鼠所没有的ＰＤＧＦ－Ｂ链样物质分布。上述结果表明，在ＰＡＦ致肺动脉压升高的同时伴随着肺内皮和间质细胞ＰＤＧＦ的合成增加，提示ＰＤＧＦ参与Ｐ     

低氧对肺血管周细胞转化生长因子TGF—β1 mRNA及蛋白表达的影响

应用细胞培养、核酸分子原位杂交、免疫细胞化学、图像分析技术研究低氧对肺血管周细胞转化生长因子ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ及蛋白表达的影响,探讨低氧条件下肺血中细胞增殖、向平滑肌样细胞分化的机制。结果发现低氧（Ｈ）组周细胞内ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ及蛋白表达量分别是常氧（Ｎ）组的１．３５倍和１．２３倍,差异均有显著意义（均为Ｐ〈０．０１）。研究表明,低氧可促进肺血管周细胞ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ及蛋白表达增高     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠血清碱性成纤维细胞生长因子含量的变化

为探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建中的作用及机理，采用慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型，用酶联免疫吸附法测定其血清ｂＦＧＦ含量，并用原位杂交法观察肺、心、脑、肾等器官ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达的变化。结果显示：低氧组血清ｂＦＧＦ含量（３５．９±２３．５ｐｇ．ｍｌ－１）明显高于对照组（６．３０±０．９７ｐｇ．ｍｌ－１，Ｐ＜０．００５）；低氧组肺小动脉ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达明显增强，而心、脑、肾ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达无变化。提示ｂＦＧＦ参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小动脉重建的调控。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内血管内皮生长因子表达的变化

为了解低氧对肺内血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因表达的影响及ＶＥＧＦ在肺动脉高压发生中的作用，以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型，采用Ｅｌｉｓａ法检测大鼠肺动脉血血清ＶＥＧＦ的含量改变，以体外转录并用ＤＩＧ－ＵＴＰ标记的ＶＥＧＦｃＲＮＡ探针进行肺组织原位杂交，检测大鼠肺内ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达的变化。结果发现：低氧３周后，大鼠形成明显的肺动脉高压；大鼠肺动脉血血清中ＶＥＧＦ含量在低氧３周组为４２０．３±７３．１ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组的３２２．２±５８．１ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）；原位杂交显示，低氧大鼠肺小动脉管壁出现明显的ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达，说明低氧在引起肺动脉高压的同时可刺激肺小动脉管壁，使ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达增强，导致ＶＥＧＦ的合成和分泌增加，后者可能在低氧性肺动脉高压发生过程中起一定的作用。     

RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞DNA含量及增？…

为研究酷氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４对血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ含量及增殖细胞核抗原表达的影响,应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果表明：与对照组相比,ＲＧ５０８６４处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数（〉     

血管舒缓素对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨了血管舒缓素对血小板趋化生长因子（ＰＤＧＦ）诱导培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 取ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行培养,传至５代后,分组观察ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素组、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素＋缓激肽受体拮抗剂组等。干预因素作用于血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）,对＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）的掺入及原癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ的表达的影响。结果 １．ＰＤＧＦ可促进ＶＳＭＣ     

汉防己甲素对血小板衍生生长因子促细胞增殖效应的阻断作用

目的研究血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖活性和胶原合成的影响及汉防己甲素（Ｔｅｔ）对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应的阻断作用。方法采用胶原酶灌流、密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞，并以Ｈ－ＴｄＲ、Ｈ－Ｌ－脯氨酸掺入法观察细胞增殖效应。结果在１％血清存在下，ＰＤＧＦ对ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的促进ＤＮＡ合成和细胞增殖的作用，并随ＰＤＧＦ浓度的升高而作用增强；对无血清培养的ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞并无明显的促进增殖作用，但与胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）等联合应用时，则可促进细胞的增殖，并证实ＰＤＧＦ具有促进ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞胶原合成的作用。Ｔｅｔ在不抑制细胞ＤＮＡ合成的剂量范围内，即可拮抗ＰＤＧＦ的促细胞增殖及胶原合成作用。结论ＰＤＧＦ对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖活性及胶原合成具有促进作用，Ｔｅｔ对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应具有阻断作用。     

bFGF mRNA在慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及分布

为探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建中的作用及机理,通过建立慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型,测定其肺血流动力学。并用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定肺组织匀浆ｂＦＧＦ含量,以及用原位杂交观察ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达及分布变化。结果：①缺氧组肺组织匀浆ｂＦＧＦ含量为１８．６±２．９７Ｐｇ／ｍｌ,明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）;②缺氧组肺小动脉ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达明显增强。结果显示ｂＦＧＦ参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小动脉重建的调控,其主要作用机理可能是自分泌或旁分泌形式     

内皮源性舒张因子对肺血管张力的调节及其与血小板激活因子引起肺动脉压升高的关系

本实验采用一氧化氮（ＮＯ）合成酶抑制剂Ｎｗ－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）、ＮＯ前体Ｌ－精氨酸和ＮＯ直接供体硝普钠研究内皮源性舒张因子（ＥＤＲＦ）对离体灌注豚鼠肺基础血管张力的调节作用及其与血小板激活因子（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）所致肺动脉压增高的关系。结果表明：Ｌ－ＮＡＭＥ可以明显增高肺动脉压、肺微血管压和肺动脉阻力，精氨酸对基础血管张力没有明显影响，但可阻断Ｌ－ＮＡＭＥ引起的变化。ＰＡＦ可明显增高肺动脉压、肺微血管压和肺动脉阻力，与Ｌ－ＮＡＭＥ合用有叠加效应，不被Ｌ－精氨酸和硝普钠阻断，说明基础状态下肺血管内皮释放一定量的ＥＤＲＦ维持肺循环的低压、低阻状态。ＰＡＦ增高肺血管压力和阻力的机制不是通过抑制ＥＤＲＦ合成的途径，ＥＤＲＦ不能阻断ＰＡＦ引起的肺血管张力升高。     

血小板源性生长因子和转化生长因子-β_1对大鼠肺成纤维细胞整合素α_5β_1表达的影响

目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞化学方法。结果经ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＴＧＦ－β１作用２ｈ，α５、β１、ＦＮｍＲＮＡ的表达即强于对照组，以后继续增强，其间仅于１８或１２ｈ短暂回落，但仍明显强于对照组。免疫细胞化学显示肺成纤维细胞α５β１和ＦＮ蛋白的表达也明显增强。结论ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β１可以促进ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮ的合成增加，其调控机制之一可能是在转录水平上增强ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮｍＲＮＡ的表达。     

RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞DNA含量及增殖细胞核抗原表达的影响

为研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４ 对血小板衍生生长因子 （ＰＤＧＦ） 诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ） ＤＮＡ 含量及增殖细胞核抗原表达的影响, 应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞, 用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４ 对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果表明： 与对照组相比, ＲＧ５０８６４ 处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数 （Ｐ＜ ０．０１）, 增加ＰＡＳＭＣ生长周期中的Ｇ０／Ｇ１ 期的ＤＮＡ百分含量, 抑制Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期的ＤＮＡ 百分含量 （Ｐ＜ ０．０１）。ＲＧ５０８６４ 可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达,抑制ＰＡＳＭＣ周期Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期ＤＮＡ 百分含量,阻止ＰＡＳＭＣ周期由Ｇ０／Ｇ１ 期向ＤＮＡ合成的Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期转化     

人肾癌组织EGFR和TGF—α的分布及其意义

对肾癌组织的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和转化生长因子α（ＴＧＦ－α）的表达及ＥＧＦＲ基因的转录进行研究,方法采用ＬＳＡＢ免疫组化和Ｄｉｇｏｘｉｎ标记原位杂交法,结果显示：４６例肾癌组织ＥＧＦＲ和ＴＧＦ－α的表在阳性率明显高于３８例癌旁对照正常肾脏组织,ＥＧＦＲ为５４．３％和２１．０％,ＴＧＦ－α为３９．１％和１３．２％,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）;部分癌组织ＥＧＦＲ和ＴＧＦ－α同时表达;ＥＧＦ     

三种血管活性物质对大鼠肺动脉收缩功能的影响及其相互作用的 …

近年的研究表明,内皮素(ＥＴ1)、血小板生长因子(ＰＤＧＦ)、碱性成纤维细胞生长因子(ｂＦＧＦ)等在肺血管结构重建(ＰＶＲ)中扮演重要角色,由于这些物质同时具有较强的血管活性,故它们在缺氧性肺动脉高压(ＨＰＨ)发病中的作用受到广泛重视[1]。本实验比较了ＥＴ1、ＰＤＧＦ及ｂＦＧＦ的肺血管活性强度,同时观察它们之间的互相影响,旨在进一步阐述它们在缺氧性肺血管收缩反应(ＨＰＶ)及ＨＰＨ中的作用。一、材料与方法实验用300～350ｇ雄性ＳＤ大鼠(中山医科大学动物中心提供)按文献报道方法制备实验标本[2]准备实验。1ＥＴ1,ｂＦＧＦ和ＰＤ…