冻融卵巢自体移植和体外培养的研究进展

卵巢组织冻融后移植或进行体外培养,在一定程度上可恢复卵巢内分泌功能和生育能力.冻融卵巢皮质切片自体原位和异位移植的研究有一定的进展,并开始应用于临床.移植前对冻融卵巢活力须进行评估,以保证移植的卵巢有一定数量的存活卵泡.对于带蒂卵巢移植来说,关键是改进血管灌注冷冻、复苏的方法.冻融卵巢自体移植如何尽快建立血供,减少缺血、缺氧对卵巢组织的损伤,提高卵泡存活率,以及冻融卵巢组织体外培养获得可供受精的卵母细胞的方法有待进一步研究.     

年轻肿瘤患者冻融卵巢皮质自体移植安全性研究进展

直接冷冻卵巢皮质能保存大量原始卵泡,肿瘤缓解后冻融卵巢皮质自体移植,可以恢复年轻女性患者的生殖功能和内分泌功能,是目前解决癌症患者生育能力最有希望的方法.但是,癌症患者冷冻保存的卵巢组织中可能残留恶性肿瘤细胞,移植后可能导致肿瘤复发.该文综述近年来冻融卵巢皮质自体移植后安全性方面的研究进展.     

人卵巢组织冷冻及体外培养的进展

人卵巢组织冷冻对于生育力的保存有重要的作用,可以将多个原始卵泡保存起来,解冻后卵巢组织体外培养对生命科学的研究具有重要意义.建立完善的长期冻融人卵巢组织体外培养体系,仍然需要进一步的研究.该文对于卵巢组织冷冻的方法、影响冷冻的因素、冷冻后卵巢组织活力评估及卵巢组织体外培养方法、培养液的组成及国内外研究现状进行综述.     

人卵巢组织冷冻保存及应用研究进展

卵巢组织冷冻保存可保留年轻的恶性肿瘤和卵巢早衰患者的生殖内分泌功能。目前常用的冷冻方案包括程序化慢速冷冻和玻璃化冷冻。程序化慢速冷冻技术较成熟,已在多领域广泛应用;玻璃化冷冻是近十多年新发展起来的冷冻技术,有研究报道,其冷冻效果优于前者。冻融后卵巢组织主要用于移植和体外培养。卵巢组织自体移植已用于临床,并有成功分娩的报道;体外培养技术尚不成熟,仍处于研究阶段。文献综述人卵巢组织冷冻保存及其应用的研究进展。     

冷冻卵巢组织应用的研究进展

癌症治疗过程中放、化疗所造成的医源性月经不规律、卵巢早衰及相关不孕等日益影响到年轻但治愈率高的女性癌症患者的生活质量。卵巢组织的冷冻和移植作为一种新的恢复女性生殖和内分泌功能的手段．越来越受到重视。目前卵巢组织的冷冻方法主要有慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻；冻融后卵巢组织的应用途径主要为自体移植、异体移植及未成熟人卵母细胞的体外培养。就卵巢组织的各种冷冻方法和应用途径进行综述，对其目前的研究进展和优缺点进行分析，提出存在的问题。     

人卵巢组织冷冻保存及应用研究进展

卵巢组织冷冻保存可保留年轻的恶性肿瘤和卵巢早衰患者的生殖内分泌功能.目前常用的冷冻方案包括程序化慢速冷冻和玻璃化冷冻.程序化慢速冷冻技术较成熟,已在多领域广泛应用;玻璃化冷冻是近十多年新发展起来的冷冻技术,有研究报道,其冷冻效果优于前者.冻融后卵巢组织主要用于移植和体外培养.卵巢组织自体移植已用于临床,并有成功分娩的报道;体外培养技术尚不成熟,仍处于研究阶段.文献人卵巢组织冷冻保存及其应用的研究进展.     

造血干细胞移植术后的重度β地中海贫血患者自体移植冻融卵巢组织诱导青春期发育成功病例1例并文献复习

目的探索自体移植冻融卵巢组织诱导青少年女性青春期发育的可行性。方法重度β地中海贫血患儿造血干细胞移植术前于2019年在中山大学附属第六医院生殖医学中心冷冻卵巢组织11片。患儿造血干细胞移植术后复诊出现卵巢早衰, 无青春期发育征象, 仍无月经初潮。2022年1月20日通过腹腔镜为患者行原位卵巢组织移植术, 共移植卵巢组织5片。术后随访患者性激素水平、生长发育情况及月经是否来潮。结果患者卵巢移植术后5个月现月经初潮。性激素水平表现为卵泡刺激素与黄体生成素明显下降, 雌二醇水平明显升高, 提示卵巢组织移植成功, 卵泡已开始募集及发育。患者彩色超声提示子宫明显增大, 子宫内膜增厚, 盆腔左侧移植部位探及窦卵泡声像。结论青春期前儿童通过卵巢组织冷冻保存生育力的临床价值。对已经出现卵巢功能衰竭、青春期发育延迟甚至停滞的患儿通过自体冻融卵巢组织移植可诱导自然的青春期发育, 恢复患者的生殖内分泌功能。     

冷冻卵巢组织应用的研究进展

癌症治疗过程中放、化疗所造成的医源性月经不规律、卵巢早衰及相关不孕等日益影响到年轻但治愈率高的女性癌症患者的生活质量.卵巢组织的冷冻和移植作为一种新的恢复女性生殖和内分泌功能的手段,越来越受到重视.目前卵巢组织的冷冻方法主要有慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻;冻融后卵巢组织的应用途径主要为自体移植、异体移植及未成熟人卵母细胞的体外培养.就卵巢组织的各种冷冻方法和应用途径进行综述,对其目前的研究进展和优缺点进行分析,提出存在的问题.     

冻融卵巢组织移植后促血管生成研究进展

卵巢组织冷冻和移植技术对于保存女性生育力具有重要作用。但冻融卵巢组织移植后的缺血损伤,是移植卵巢组织存活和生殖内分泌功能恢复的关键问题。适宜的卵巢组织冷冻和移植技术,及添加促血管生成因子、激素、抗氧化剂、中药等能有效促进冻融卵巢组织移植后的血管生成,提高卵巢组织移植后卵泡成活率和生殖功能恢复效果。本文就冻融卵巢组织移植...     

卵巢组织玻璃化冷冻移植效果及体外受精结局的动物实验研究

目的探讨玻璃化冷冻和组织移植对小鼠卵巢组织的影响。方法将雌性ICR小鼠分为3组:正常对照组(卵母细胞体外培养及受精, n=9)、新鲜移植组(卵巢组织移植后卵母细胞体外培养及受精, n=9)、冷冻移植组(卵巢组织玻璃化冷冻复苏-移植、卵母细胞体外培养及受精, n=9)。同时, 为了更为直接地说明玻璃化冷冻对于卵泡数量的影响和卵巢移植后内分泌功能的改变情况, 本研究还设置了冷冻复苏组(卵巢组织玻璃化冷冻复苏, n=6)和卵巢去势组(卵巢组织切除, n=6)。卵巢组织移植3周后, 通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色计算各组小鼠的卵泡数量、CD31免疫组织化学染色观察卵巢组织新生血管形成、Masson染色观察卵巢组织纤维化、酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清性激素水平, 并统计获卵数、体外受精数量和形成囊胚数量。结果新鲜移植组和冷冻移植组小鼠的卵巢组织中总卵泡数量均较正常对照组明显减少(均P<0.001), 且都明显少于冷冻复苏组(均P<0.001);新鲜移植组小鼠卵巢组织CD3...     

卵巢组织冷冻和体外培养的现状及展望

卵巢组织冷冻对于生育力的保存有重要的作用，可以将多个原始卵泡保存起来，对于人类也可以避免伦理方面的难题。将原始卵泡培养成熟并发育成胚胎也是研究的热点之一，但是由于冷冻及体外培养系统的不完善，对于原始卵泡的体外成熟，尤其是人类的卵泡体外成熟仍然需要进一步的研究。对于卵巢组织冷冻的影响因素、冷冻方法、冷冻后的分析及卵泡体外成熟的培养液、培养方法及研究现状进行综述。     

异种移植后人卵巢组织的病理学变化

目的了解异种移植人卵巢组织病理学的变化。方法无菌条件下,随机将冻融后的人卵巢组织细片移植到不同性别的小鼠皮下,按移植后1周、4周、8周、10周的时间分别处死小鼠,收集移植后人卵巢组织,以解冻后移植前的人卵巢组织作对照,所有组织常规脱水包埋制片,HE染色,镜下观察,比较移植后的人卵巢组织片的卵泡存活、生长、凋亡以及间质重构等情况。结果移植1周后,有大量的新生血管满布于人卵巢组织间质并穿插蔓延,无规律性,与人卵巢组织自然生理血管分布有明显的差别;小鼠性别对移植1周的人卵巢组织中原始卵泡无影响。随着移植时间的推移,卵巢组织间质中的血管逐渐减少,与人卵巢组织正常生理血管分布相似;生长卵泡明显增加。结论人卵巢组织可以移植在不同性别小鼠身上并成活;移植后人卵巢组织的闭锁卵泡及生长卵泡都增加,能产生窦卵泡。     

卵巢组织冷冻和体外培养的现状及展望

卵巢组织冷冻对于生育力的保存有重要的作用,可以将多个原始卵泡保存起来,对于人类也可以避免伦理方面的难题.将原始卵泡培养成熟并发育成胚胎也是研究的热点之一,但是由于冷冻及体外培养系统的不完善,对于原始卵泡的体外成熟,尤其是人类的卵泡体外成熟仍然需要进一步的研究.对于卵巢组织冷冻的影响因素、冷冻方法、冷冻后的分析及卵泡体外成熟的培养液、培养方法及研究现状进行综述.     

大鼠卵巢组织冷冻保存和自体移植后形态与功能的研究

目的:探讨大鼠卵巢组织冷冻、解冻和自体皮下移植后甾体激素分泌和卵泡生长发育的恢复情况。方法:将大鼠卵巢组织在程序性降温设备中缓慢冷冻,在液氮中保存14天后快速解冻。将新鲜和冻融后的大鼠卵巢组织分别自体异位移植于去势成年雌鼠的腹股沟皮下。术后每日行阴道细胞涂片检查,观察动情周期恢复情况,并分别于移植后4周和8周取移植卵巢进行组织学检查并测定血清雌孕激素水平。结果:新鲜组和冷冻组分别有80.6%和48.5%的大鼠恢复了动情周期,差异有统计学意义(P<0.01)。新鲜组和冷冻组首次恢复动情周期的天数分别为(8.72±1.69)天和(18.15±2.48)天,差异有统计学意义(P<0.01)。移植术后4周时冷冻组的E2和P水平与假手术组及新鲜组相比差异有统计学意义(P<0.05),而移植术后8周时3组激素水平差异已无统计学意义(P>0.05)。新鲜组和冷冻组移植术后4周和8周时移植物内均可见丰富的血管及不同发育阶段的卵泡和黄体。结论:大鼠的卵巢组织可以较好的耐受冷冻损伤,适宜条件下可以复苏恢复甾体激素的分泌,并且有卵泡的生长和发育。非血管吻合自体异位移植卵巢组织的方法简便易行且具有较高的成活率,是冻存卵巢组织较为安全有效的方法。     

辛伐他丁改善小鼠卵巢组织自体移植的效果

目的：探索辛伐他汀在小鼠卵巢组织自体移植中的效果和机制。方法：选择6～8周雌性ICR小鼠80只。10只小鼠制备新鲜卵巢组织（新鲜卵巢组），另取10只小鼠切除双侧卵巢组织，玻璃化冷冻（冷冻-解冻卵巢组）。余下的60只小鼠切除双侧卵巢玻璃化冷冻-解冻后自体移植至背部肌肉，随机分成2组（各30只），移植后第1天开始分别以生理盐水（生理盐水组）和辛伐他汀（5 mg/kg，辛伐他汀组）灌胃至移植后第7天。2组分别在移植后第3，7，21天，每组每时间点各处死5只鼠（共处死30只），回收卵巢组织和血清。光学显微镜下观察HE染色的卵巢组织，免疫组织化学检测细胞核增殖性抗原ki67和CD34，原位末端标记法（Tunel法）计数Tunel阳性细胞数，血清雌二醇（E2）和卵泡刺激素（FSH）浓度，2组分别在移植后第3，7天，每组每个时间点各处死5只鼠（共处死20只）测定卵巢组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。本实验中移植术后小鼠死亡4只，灌胃死亡2只，最终剩余4只脱颈处死按动物伦理处理尸体。结果：冷冻-解冻卵巢组比新鲜卵巢组的窦卵泡数减少，Tunel阳性细胞数增加（均P＜0.05）。新鲜卵巢组织和冷冻-解冻卵巢组织均可见ki67表达。移植后第3，7天辛伐他汀处理组比生理盐水组原始卵泡数多、凋亡细胞数少（均P＜0.05）。移植后第21天卵巢组织生长良好，2组都可见窦卵泡，辛伐他汀组原始卵泡数和窦卵泡数比生理盐水组多（均P＜0.05）。移植后第3，7天，辛伐他汀组卵巢组织血管数比生理盐水组多（均P＜0.05）。辛伐他汀组在移植后第21天血清E2高于生理盐水组（P＜0.05）；血清FSH水平在第21天比生理盐水组低（P＜0.05）。移植后第3，7天，辛伐他汀组卵巢组织MDA低于生理盐水组，SOD高于生理盐水组（均P＜0.05）。结论：辛伐他汀通过抗氧化、促血管再生改善小鼠卵巢组织自体移植的效果。     

人类卵巢组织冷冻保存及其评价的研究进展

恶性肿瘤及其治疗过程可能导致女性患者的卵巢功能衰竭,而卵巢组织冷冻保存使这些患者的生育储备以及生殖、内分泌功能的保存成为可能,具有重要的现实意义和广阔的应用前景.目前,卵巢组织冷冻保存技术包括慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻法.卵巢组织冻融后主要通过组织学光镜观察卵母细胞和颗粒细胞形态;电镜下观察卵母细胞和间质细胞的线粒体、内质网、核膜和核染色质等超微结构改变评价冻融的影响;冻融组织培养后主要通过观察各卵泡,包括卵泡的直径大小、颗粒细胞的形态和层数、以及卵泡腔和透明带的形成和培养液中激素的含量等评价组织生长发育潜能;通过组织移植技术,检测移植宿主内分泌功能或生殖和内分泌功能的恢复是评价冻存复苏成败的重要指标和目标.     

人类卵巢冷冻保存及移植的发展前景

尽管多种动物应用冷冻保存的卵巢组织进行移植后成功地恢复了生殖能力，但冷冻保存的卵巢组织对人体的作用尚不明确。自体卵巢移植被认为是最可行的，但也存在着患肿瘤的女性发生肿瘤细胞转移的可能。异体移植的始基卵泡的成熟发育令人振奋，但其有效性和安全性尚需进一步观察，此外宿主体内卵母细胞成熟的质量也未可知。卵巢移植技术在充分应用于临床之前还有许多问题亟待解决，其中最主要的是优化冷冻程序和找到保护移植组织免受再灌注时缺血损伤的方法。相信在不久的将来，卵巢移植将会对卵巢早衰妇女发挥重要的临床作用。     

家兔卵巢组织异体皮下移植的形态与功能研究

目的:研究家兔卵巢组织玻璃化冷冻、异体皮下移植后激素水平和卵泡的生长发育情况。方法:将36只裸鼠随机分为4组,分别为正常对照组、新鲜移植组、冻存移植组、去势组。将新鲜和冻融卵巢组织分别异体异位移植到裸鼠颈部皮下,于移植术后第5天开始观察裸鼠的动情周期,术后35天左右动情期测鼠血清雌激素水平,并对各组子宫进行湿重及组织形态学观察比较。结果:新鲜及冻存卵巢组织移植后均可观察到存活组织块,移植卵巢内可见不同阶段的发育卵泡,并可见间质腺和黄体。两种移植组于动情期雌激素水平与正常对照组差异无统计学意义(P0.05),均明显高于去势组。结论:玻璃化法冷冻可以有效保存卵巢组织的结构和功能。冻存复苏后与新鲜卵巢皮质组织具有相同的生理活性。冻存卵巢皮质异体异位无血管皮下移植后能够存活、生长发育,并维持生殖内分泌功能。     

子宫内膜癌卵巢组织冻存自体移植1例报道

目的:通过卵巢组织冻存及自体移植手术保护子宫内膜癌患者生育力与卵巢内分泌功能。方法:对1例33岁子宫内膜癌I期患者在癌症手术过程中进行卵巢组织取材、冻存,待其癌症完全缓解后进行冻存卵巢组织自体移植手术,随访监测患者的激素水平、卵泡发育情况以及绝经相关症状。结果:卵巢组织移植1个月后,改良Kupperman 评分由12分...     

不同玻璃液冻存人卵巢组织的近期异种移植效果的比较

目的通过研究不同的玻璃液对人卵巢组织冻存后的近期异种移植效果, 以筛选出较优的玻璃化冷冻方案。方法收集2018年3月至2019年12月期间在北京大学深圳医院因妇科疾病行手术治疗的4例患者卵巢组织, 将卵巢组织分割成5～10 mm×10 mm×1 mm的小块, 分为新鲜对照组和4个处理组, 4个处理组分别放入G1、G2、G3、G4不同的玻璃液中, 经过4组玻璃液预平衡和平衡后冻存4周后复苏, 复苏后的组织移植到胚龄10 d的鸡卵绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane, CAM)上培养, 培养5 d后取出移植于CAM的卵巢组织, HE染色比较移植后4组卵巢组织的正常原始卵泡率, 免疫组织化学法检测CD105标记的4组卵巢组织的新生血管并比较其微血管密度;Western blotting法检测并比较4组卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果经过G1、G2、G3、G4玻璃液冻融并移植于鸡胚5 d后的卵巢组织, 正常原始卵泡率分别为63.2%(24/38)、68.3%(28/41)、61.9%(26/42)、69.6%(32/46), 新鲜对照组的正常卵泡率为82.8%...