乳腺癌中MTS1基因外显子2及蛋白表达的初步研究

目的 :初步探测 MTS1 基因外显子 2缺失及其表达的 P16蛋白阴性在乳腺癌发生发展中的作用。方法 :采用多重PCR扩增 MTS1 基因外显子 2 ,免疫组化染色 (SP法 )检测 P16蛋白表达。结果 :本组乳腺癌中 MTS1 基因外显子 2的纯合子缺失频率为 35 .8% (19/ 5 3)。蛋白阴性占 19.4% (7/ 36 )。三种类型的乳腺癌中 MTS1 基因变异及 P16蛋白阴性频率有明显差异 ,淋巴转移组的基因变异及蛋白阴性频率极显著高于未转移组 (P <0 .0 1)。结论 :MTS1 基因外显子 2变异及 P16蛋白阴性与乳腺癌的病理组织分型相关 ,与乳腺癌的恶性进程密切相关。     

胃癌组织中p16基因突变分析

目的 :探讨胃癌组织p16基因纯合缺失与突变的发生率及其临床意义。方法 :PCR方法扩增p16基因外显子 1(E1)及外显子 2 (E2 ) ,检测等位基因纯合子缺失 ;应用单链构象多态性 (SSCP)方法分析基因突变情况。结果 :2 0例胃癌组织中E1、E2纯合性缺失分别为 4例 (2 0 % )及 2例 (10 % ) ;SSCP未检出E1突变 ,E2有 2例出现泳动易位的异常单链 ,其中 1例 (Ⅲa期 ,低分化腺癌 )癌与癌旁组织均出现异常 ,2例异常标本均为进展期 ,LOH(+)胃癌。结论 :p16基因异常是胃癌发生发展中一重要事件 ,突变多见于外显子 2 ,可能与癌肿进展有关     

P53、P16、Bcl-2基因及产物在原发性肺癌中的表达及其临床病理意义

目的 :探讨原发性肺癌 Mtp5 3、p16、Bcl- 2的异常表达与肺癌发生、发展的关系 ,以及它们之间的调控关系。 方法 :用免疫组化技术检测 (L SAB) 114例原发性肺癌组织中 p5 3、p16、Bcl- 2的表达。并用 PCR技术对 6 2例 p16蛋白丢失的肺癌组织中 p16外显子 2 (p16 E2 )的缺失进行分析。 结果:p5 3蛋白异常表达与肺癌组织学类型、分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ,但与淋巴结转移情况有关 (P >0 .0 5 )。 p16蛋白阳性表达率与肺癌的组织学类型无关 ,但是其表达水平与非小细胞肺癌 (NSCL C)的细胞分化程度和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。 NSCL C中 p16E2的缺失率为 45 .2 %,其缺失水平随淋巴结转移和组织学分级的升高而升高 (P <0 .0 5 )。 SCL C(小细胞肺癌 )和正常肺组织中无 p16 E2的缺失。 Bcl- 2在小细胞肺癌中阳性率 6 2 .2 %显著高于 Sq Ca(鳞癌 )的 2 5 %和 Ad Ca(腺癌 )的 9.1%(P <0 .0 5 ) ,与细胞分化程度和淋巴结转移情况无关。另外 ,p5 3与 p16蛋白之间存在调控关系。 结论 :(1) p16、p5 3、Bcl- 2的异常参与肺癌的发生、发展过程。 (2 ) p16基因及产物的异常表达与 NSCL C的组织学分级和淋巴结转移相关 ,可能参与 NSCL C的发生、发展和转移过程。 (3) Bcl- 2反映 SCL C的分之生物学行为和临床     

乳腺癌中P73、P21的表达及其意义

目的 :通过检测 P73蛋白、P2 1蛋白在乳腺癌中的表达及其与临床病理指标的关系 ,探讨乳腺癌的生物学特性 ,分析它们在乳腺癌的发生、转移中所起的作用。方法 :应用免疫组化 S-P法检测 68例乳腺癌石蜡包埋标本中 P73、P2 1的表达情况。结果 :a.在乳腺癌 - 级与 级之间 P73蛋白阳性率分别为 1 8.75 % ( 9/48)和 60 .0 0 % ( 1 2 /2 0 ) ,差异有显著性 ( P <0 .0 5 )。随着 P73阳性表达率增高 ,乳腺癌的恶性程度增高。b.淋巴结转移组 p2 1的阳性表达率 2 3 .3 3 % ( 7/3 0 )明显低于无淋巴结转移组的阳性率 5 2 .63 % ( 2 0 /3 8) ,差异有显著性( P <0 .0 5 )。c.P73、P2 1之间无相关。结论 :P73、P2 1与乳腺癌的发生、发展有关     

P16,P15基因与血液系统恶性肿瘤

P16（MTS1）和P15（MTS2）基因是近几年发现的另一类肿瘤抑制基因，在多种人类恶性肿瘤中频发缺失［1］，是继P53之后在多种肿瘤中异常率均较高的另一抑癌基因，推测与肿瘤的发生和发展有关，在恶性血液病中也有较明显的改变。1P16、P15基因的分子生物学特征P16、P15基因均定位于9p21，两者相距约25kb，由于距离较近，在肿瘤中常同时缺失。P16基因的4个外显子1α、1β、2和3有两种表达类型，即P16α和P16β。P16α包括外显子1α、2及3，分别由126、307和11个碱基组成，共同编码一个约16kd的蛋白质。P15基因由2个外显子组成，无论基…     

CDKN2/p16基因在四种原发恶性肿瘤中存在状态的研究

目的 :研究CDKN2 /p16基因缺失和蛋白丢失在非小细胞肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌 4种原发恶性肿瘤中的作用。方法 :采用免疫组织化学法和多重PCR技术对 68例 (非小细胞肺癌 3 1例 ,食管癌 15例 ,胃癌 13例 ,乳腺癌 9例 )原发肿瘤组织标本进行CDKN2 /p16基因第一、第二外显子纯合缺失和p16蛋白表达丢失分析研究。结果 :第一或 (和 )第二外显子总缺失率为 13 .2 % ( 9/68) ,蛋白丢失率为 44% ( 3 0 /68) ,不同肿瘤组织标本的p16基因缺失率和蛋白丢失率差别很大。结论 :CDKN2 /p16基因是重要的多肿瘤抑制基因 ,在不同肿瘤组织中其失活方式不完全相同。     

膀胱癌尿脱落细胞P16、cyclin D_1、P53、mdm2蛋白表达及其意义

目的 :检测P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白在膀胱移行细胞癌 (TCC)尿脱落细胞中的表达 ,以探讨其临床意义。方法 :用免疫组织化学S -P法检测 2 1例膀胱TCC尿脱落细胞及组织中P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白的表达。结果 :膀胱TCC尿脱落细胞中 ,P16蛋白阳性表达率为 71.4 % (15 / 2 1) ;cyclinD1蛋白阳性表达率为 2 8.6 % (6 / 2 1) ;P5 3蛋白阳性表达率为 33.3% (7/ 2 1) ;mdm2蛋白阳性表达率为 2 3.8% (5 / 2 1)。对照组P16蛋白表达均为阳性 ,cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白表达均为阴性。P16、cyclinD1、P5 3、mdm2基因在尿脱落细胞中异常表达均与相应的组织中表达相吻合。多基因蛋白联合表达肿瘤检出率为 81% (17/ 2 1) ,常规尿细胞学检查肿瘤检出率为19.1% (4/ 2 1)。两种方法比较差异有显著性意义 (χ2 =18.0 8,P <0 .0 0 5 )。结论 :尿脱落细胞的P16、cyclinD1、P5 3、mdm2多基因蛋白联合检测可作为膀胱TCC诊断有意义的参考指标。     

妊娠高血压综合征患者载脂蛋白J基因的筛查

目的 :探讨载脂蛋白J(apoJ)基因在妊娠高血压综合征 (妊高征 )遗传背景中的地位。方法 :运用聚合酶链反应 变性梯度凝胶电泳 (PCR DGGE)技术对 5 0例妊高征患者和 5 0例正常孕妇的apoJ基因外显子进行了多态变异筛查。结果 :对apoJ基因 5号外显子筛查 ,共检出 38例杂合子和 1例纯合子 ,其中正常孕妇组有 2 5例杂合子和 1例纯合子 ;妊高征组有 1 3例杂合子 ,有 1例的 7号外显子也为杂合子。 5号外显子的杂合子多态变异基因型频率在妊高征组为 2 6 % ,显著低于对照组的 5 2 % (P <0 0 1 )。其余外显子DGGE未检出异常电泳条带。结论 :apoJ基因 5号外显子变异可能与妊高征的发病有关     

P16蛋白在胆囊癌组织中的表达

目的　探讨P16基因在胆囊癌的表达。方法　采用免疫组织化学方法对 2 7例胆囊癌标本P16基因表达进行检测。结果　胆囊癌P16蛋白阳性表达明显低于胆囊良性病变 (χ2 =15 . 372 5 ,P <0 . 0 1;χ2 =6 .. 0 6 6 7,P<0 . 0 5 ) ;P16蛋白阳性表达与病理类型差异无显著性意义 (χ2 =0 0 189,P >0. 0 5 ) ;P16蛋白阳性表达与Nevin临床分期差异有显著性意义 (χ2 =9 1881,P <0 . 0 5 ) ,S1-2 P16蛋白阳性表达明显高于S3 、S4-5。结论　P16基因的突变与缺失在胆囊癌有重要意义。     

CTLA-4 gene A/G polymorphism associated with diabetes mellitus in Han Chinese

目的　探讨细胞毒T细胞相关抗原 4 (CTLA 4 )基因A/G多态性与汉族人糖尿病易感性的关系。方法　采用PCR RFLP技术对 1、2型糖尿病患者各 31例及健康对照 36例进行CTLA 4基因A/G多态性检测。结果　 1型糖尿病患者较健康对照等位基因G频率明显增加 (6 6 1%vs 34 7% ;P <0 0 0 0 5 ;OR =3 6 70 ) ,表现为GG纯合子增多 (48 4 %vs 2 2 2 % ;P =0 0 2 5 ;OR =3 2 81) ,AA纯合子减少 (16 1%vs 5 2 8% ;P =0 0 0 2 )。 2型糖尿病患者等位基因A/G的频率虽与健康人相似 (5 0 0 / 5 0 0 %vs 6 5 3/ 34 7% ;P =n s ) ,但基因型频率却不同 :AG杂合子增多 (5 4 8%vs 2 5 0 % ;P =0 0 12 ;OR =3 6 43) ,AA纯合子减少 (2 2 6 %vs 5 2 8% ;P =0 0 11结论　CTLA 4 49位点AA纯合子对糖尿病具有一定保护性。而编码Ala的等位基因G(无论是GG纯合子还是AG杂合子 )增加了糖尿病的易感性     

P16基因缺失与各型白血病关系

Ｐ１６基因缺失在人类不同组织来源的细胞株和原发肿瘤中频繁发生，为探讨Ｐ１６基因缺失与各型白血病的关系，采用ＰＣＲ扩增技术检测了３０例白血病，结果显示：１７例ＡＬＬ中有６例Ｐ１６基因缺失，其中８例Ｔ－ＡＬＬ中有５例、９例Ｂ－ＡＬＬ中有１例Ｐ１６基因缺失，而在５例ＣＭＬ、８例ＡＭＬ中Ｐ１６基因存在。结果表明：Ｐ１６基因缺失与ＡＬＬ尤其是Ｔ－ＡＬＬ有关。Ｐ１６基因检测对ＡＬＬ发病机制的探讨以及诊断都有一定的指导意义     

P16蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 :探讨P16蛋自在乳腺癌中的表达情况及其临床价值。方法 :应用SP免疫组织化学方法对 75例乳腺癌组织中CDKNI抑癌基因P16蛋白表达进行检测。结果 :P16蛋白阳性表达与淋巴结转移呈负相关 (P <0 0 5 ) ,与乳腺癌的术后生存期呈正相关 (P <0 0 5 ) ,与乳腺癌的组织学分级 ,以及肿瘤的大小无相关性。结论 :P16蛋白表达水平 ,可作为估计乳腺癌预后的重要指标。     

25例原发性肝细胞性肝癌中P16基因失活的研究

目的 调查Ｐ１６基因是否与原发性肝细胞性肝癌（ＰＨＣＣ）的发生有关。方法 采用多重ＰＣＲ分析法、单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）分析法及以ＰＣＲ为基础的甲基化分析法对２５例原发性细胞性肝癌（ＰＨＣＣ）标本及其相应的非肿瘤肝细胞标本中Ｐ１６基因的缺失、点突变及甲基化情况进行检测。用免疫组织化学法对３５例（包括前述已作基因检测的     

宫颈癌组织中P53基因5～6外显子的检测及分析

应用ＧＰ ＰＣＲ 技术对４０ 例宫颈癌活检组织进行ＨＰＶ 感染的检测，发现有３５ 例为阳性（ 阳性率为８７％ ），同时利用ＰＣＲ ＳＳＣＰ（单纯ＤＮＡ构象多态性）分析技术，对３５ 例ＨＰＶ 阳性的宫颈癌组织进行Ｐ５３ 基因５ ～６外显子的检测，其突变率仅为２－８５ ％（１／３５），而在５ 例ＨＰＶ 阴性的宫颈癌组织中未检测到Ｐ５３ 基因突变，结果表明：Ｐ５３ 基因的突变在宫颈癌的发生过程中不起主要作用，并且与ＨＰＶ的感染无相关性。     

P_(16)基因缺失与子宫内膜癌发生机理初探

目的：探讨Ｐ１６基因与子宫内膜癌发生的关系。方法：采用ＰＣＲ方法，对２０份子宫内膜癌组织标本和１０份子宫肌瘤组织标本的核酸进行扩增。结果：２５％的子宫内膜癌标本（５／２０）有Ｐ１６基因纯合子缺失，而子宫肌瘤组织中无Ｐ１６基因纯合子缺失。结论：Ｐ１６基因缺失与子宫内膜癌有关     

多重PCR法检测喉癌组织中P16基因纯合缺失及异常甲基化

目的：采用多重ＰＣＲ法检测喉癌及癌旁组织中Ｐ１６ 基因纯合缺失和异常甲基化。方法：选用二对引物分别扩增Ｐ１６ 基因外显子１ 和２,分析有无纯合缺失,对未检出缺失的样品用甲基化敏感内切酶Ｓｍ ａＩ消化后,再扩增外显子１,分析有无Ｐ１６ 基因异常甲基化。结果：３９ 例喉癌组织标本中９ 例标本有Ｐ１６ 基因纯合缺失,缺失率为２３．０８％ （９／３９）。３０ 例未检测到Ｐ１６ 基因缺失的喉癌组织标本,有４ 例检出异常甲基化,检出率为１３．３３％ （４／３０）。３９ 例癌旁组织标本均未检测到Ｐ１６基因缺失或异常甲基化。结论：采用多重ＰＣＲ法可检测出Ｐ１６ 基因常见的纯合缺失和异常甲基化失活。研究表明,Ｐ１６ 基因失活可能在喉癌的发生发展中起重要作用     

乳腺癌中P16蛋白表达的临床意义

目的：研究P16蛋白在乳腺癌的表达及与临床分期的相关性。方法：应用免疫组化方法检测30例乳腺癌、20例乳腺纤维腺瘤、20例正常乳腺组织中P16蛋白的表达情况。结果：P16蛋白在乳腺癌组织表达阳性串为46．6％，在乳腺纤维腺瘤组为80％，在正常乳腺组织组为85％，乳腺癌组织组P16蛋白的表达与乳腺纤维腺瘤组和正常乳腺组织组比较有显著差异(P＜0．05)。结论：P16蛋白表达异常在乳腺癌的发生中起重要作用，P16蛋白表达异常与乳腺癌临床分期有关。     

卵巢癌p16基因的纯合性缺失、突变及表达异常的研究

目的：研究p16基因的纯合性缺失，突变及表达异常与卵巢癌的发生是否存在相关关系。方法：采用PCR-SSCP检测卵巢癌p16基因的纯合性缺失和突变；采用RP-PCR定性及半定量分析p16基因；采用免疫组化技术检测p16蛋白。结果：32例卵巢癌中检测到1例外显子1突变，未检测到p16基因的纯合性缺失；RT-PCR分析卵巢癌中p16基因mRNA均有表达，半定量分析卵巢癌与正常卵巢组织中p16基因mRNA表达水平无差别；免疫组化检测9例卵巢癌中的p16蛋白为阴性（28.2%)。结论：卵巢癌的发生与p16基因的纯合性缺失和突变无相关关系，与p16基因异常表达有相关关系。     

P16和P15蛋白表达与胃癌的关系

目的：研究P16、P15蛋白在胃癌中的表达，探讨两者在胃癌发展中的作用。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连接法（SP法），检测46件胃癌组织及69件转移淋巴结标本中P16、P15蛋白的表达。结果：P16表达与胃癌临床分期呈负相关。在胃癌及其转换淋巴结中P16和P15的表达呈正相关。结论：P16和P15蛋白的联合检测可作为临床上胃癌发生和转移预测的一个参考指标。