补肾活血泄浊汤治疗微小病变肾病的实验研究

目的:探讨中药补肾活血泄浊汤对大鼠微小病变肾病的治疗作用及其机制。方法：采用一次性尾静脉注射阿霉素法复制大鼠的微小病变肾病模型，分为补肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。动态观察中药补肾活血泄浊汤对肾功能、血液流变学、肾组织β1型转化生长因子（TGF－β1）表达及肾小球基底膜阴离子位点的影响。结果：治疗组各项指标与模型组比较，差异均有显著性，形态学观察也显示治疗组损害轻于模型组。结论：补肾活血泄浊汤具有改善肾功能、缓解血液高凝、高粘状态，保护肾小球阴电荷屏障及延迟肾小球硬化发生的作用。     

炎症因子及益肾活血泄浊汤对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨部分炎症因子及益肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球系膜细胞生长的影响。方法：应用脂多糖（ＬＰＳ）及白细胞介素６（ＩＬ－６）作为刺激因子，观察其促系膜细胞增殖的作用；并采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于一述受刺激的系膜细胞，观察益肾活血泄浊汤对系膜细胞增殖的影响。结果：ＬＰＳ和ＩＬ－６具有明显促进系膜细胞增殖作用。结论：系膜细胞是益肾活泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防     

槲皮素对高糖诱导肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的:研究槲皮素在高糖环境下对大鼠肾小球系膜细胞增殖槲皮素对照组及TGF-β1表达的影响。方法:将体外培养的大鼠系膜细胞分为正常组、高糖组、槲皮素对照组及槲皮素低、中、高剂量组6组,MTT法检测槲皮素对肾小球系膜细胞增殖的影响,Western-blot法检测肾小球系膜细胞TGF-β1、P-Smad2、FN的表达。结果:槲皮素能够显著抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1、P-Smad2、FN表达。结论:槲皮素可通过降低TGF-β1水平抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖,并通过抑制Smad2磷酸化部分影响TGF-β1/Smads信号通路的激活,降低FN的表达,对肾脏起到保护作用。     

宣痹汤对实验性IgA肾病大鼠肾脏病理变化及TGF-β1表达的影响

目的:观察宣痹汤对实验性IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾脏病理变化及肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:采用BSA加SEB诱导建立IgAN大鼠模型,随机分成正常对照组、模型组、雷公藤多甙组、宣痹汤低剂量组、宣痹汤中剂量组、宣痹汤高剂量组,分别给予相应处理12周,光镜观察各组大鼠肾组织病理变化,用免疫组化和RT-PCR方法分别检测肾组织TGF-β1蛋白和基因的表达。结果:与模型组相比,各用药组肾小球轻度增大,系膜细胞和系膜基质增生的程度较模型组均减轻,系膜细胞数较模型组减少;宣痹汤能够有效抑制TGF-β1在肾组织的基因和蛋白表达(P<0.05)。结论:宣痹汤能改善大鼠肾脏病理损伤,下调TGF-β1在肾脏的表达可能是宣痹汤治疗IgA肾病的作用机制之一。     

灵芝多糖对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1和CO-Ⅳ表达的影响

目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)及Ⅳ型胶原(CO-Ⅳ)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝多糖干预后的影响.方法 腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠造成糖尿病模型,分组予不同剂量灵芝多糖(GLP)进行治疗性灌胃.8周后,用免疫组化方法 和RT-PCR方法 检测各组大鼠肾皮质TGF-β1、CO-Ⅳ的蛋白和mRNA表达.结果 糖尿病组大鼠肾小球TGF-β1、CO-Ⅳ蛋白和mRNA表达较正常对照组明显升高(P＜0.01);灵芝多糖各组较糖尿病组表达降低(P＜0.01).结论 灵芝多糖可能通过下调糖尿病大鼠肾脏中TGF-β1和CO-Ⅳ的表达,减少细胞外基质积聚,起到对糖尿病大鼠肾脏保护作用.     

糖肾汤对高糖下肾小球系膜细胞TGF-β1表达影响的实验研究

目的：观察高糖对肾小球系膜细胞TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响，以及糖肾汤的干预作用。方法：分别用低糖、高糖以及高糖下糖肾汤不同剂量培养肾小球系膜细胞，采用ELISA法测定TGF-β1蛋白含量，逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)法测定TGF-β1ImRNA表达，并以开博通作为阳性药对照。结果：高糖可刺激肾小球系膜细胞TGF-β1蛋白及mRNA的表达，糖肾汤具有对抗高糖刺激作用，且呈现一定的量效关系。结论：糖肾汤对高糖对肾小球系膜细胞的影响具有干预作用。     

痰瘀同治对肾小球硬化大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2的影响

目的：探讨痰瘀同治对肾小球硬化大鼠肾组织TGF-B1、MMP．2的影响。方法：将大鼠分为正常组、模型对照组、治疗组，给药12周，采集并固定肾组织。PAS染色，观察肾小球系膜区面积，并用免疫组化及免疫荧光细胞化学技术观察肾脏TGF-β1、MMP-2的表达。结果：模型大鼠肾小球系膜区面积增大，TGF-β1强阳性表达，MMP-2表达微弱，药物治疗大鼠肾小球系膜区面积显著减小，TGF-β1表达减弱，MMP2表达增强，差异显著。结论：痰瘀同治可减少肾小球系膜区面积，显示抗肾小球硬化作用，其作用机制与抑制TGF-βI表达、促进MMP-2表达有关。     

茶多酚对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞TGF-β1mRNA表达的影响

目的：观察茶多酚对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1mRNA表达的影响。方法：以ox-LDL刺激体外培养的大鼠系膜细胞，不同浓度的茶多酚干预后，检查系膜细胞内总胆固醇(TC)含量，用原位杂交法测TGF-β1mRNA的表达。结果：ox-LDL与系膜细胞共同孵育后细胞内TC含量、TGF-β1mRNA表达与细胞对照比较，均明显增高；茶多酚干预后系膜细胞中TC含量下降，TGF-β1mRNA的表达下降。结论：茶多酚可抑制系膜细胞摄取氧化低密度脂蛋白和TGF-β1mRNA的表达。     

补肾活血汤对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能及JNK/p38 MAPK 信号通路的影响

目的：探讨补肾活血汤对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的肾功能及c-Jun氨基末端激酶（JNK）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路的影响。方法：建立系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型,56只成功造模大鼠按随机数字表法分成4组：模型组、缬沙坦组（10.3 mg/kg）、补肾活血汤低剂量组（5 g/kg）、补肾活血汤高剂量组（10 g/kg）,每组14只;另取14只大鼠不做任何处理设为对照组;各药物组大鼠灌胃相应药物,模型组和对照组大鼠灌胃蒸馏水。给药4周后,检测大鼠24 h尿蛋白、血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、肾组织JNK、p38 MAPK信使核糖核酸（mRNA）和蛋白表达水平,苏木素伊红染色观察肾组织病理结构。结果：对照组肾小球结构正常;模型组可见明显弥漫性系膜细胞增生,伴大量中性粒细胞浸润,可见明显轻度纤维化;缬沙坦组及补肾活血汤高剂量组系膜细胞增生减少,内皮细胞轻度增生,中性粒细胞浸润减少;补肾活血汤低剂量组仍然可见肾小球肿胀增生。与对照组比较,模型组24 h尿蛋白、血清SCr、BUN、肾组织JNK、p38 MAPK mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05...     

补肾活血中药对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织基质金属蛋白酶及组织抑制剂表达的影响

目的:研究补肾活血中药对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织基质金属蛋白酶及组织抑制剂表达的影响。方法:取雄性SD大鼠54只,实验设正常对照组、模型组、补肾活血法药物干预组,每组分2周、4周、8周时间点,每个时间点6只大鼠。肾组织切片分别行HE和PAS染色,进行常规病理学检查。免疫组化检测肾组织基质金属蛋白酶(MMP-2)、TIMP-2、MT1-MMP、TGF-β1的表达。流式细胞术检测肾皮质MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP和TGF-β1蛋白表达。结果:模型组大鼠随病程进展肾小球逐渐增大,系膜基质增多,肾小球基底膜增厚。免疫组化染色显示模型组较对照组MMP-2、MT1-MMP表达减少,而药物干预组较模型组表达减少程度轻;模型组较对照组TIMP-2、TGF-β1表达增多,而药物干预组较模型组表达增多程度轻。流式细胞仪检测显示,4周和8周模型组MMP-2的相对值较对照组降低,在统计学上差异具有显著性(P<0.05或P<0.01),而各期模型组TIMP-2和TGF-β1的相对值较对照组升高,MT1-MMP的相对值较对照组降低,差异具有显著性(P<0.01)。结论:系膜增生性肾小球肾炎肾组织MMP-2表达降低、活性...     

大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及IL-6的影响

目的:观察大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及系膜细胞分泌IL-6的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞的增殖及ELISA法检测系膜细胞中IL-6的含量,观察大黄素对其的影响。结果:大黄素可明显抑制大鼠系膜细胞的增殖及降低系膜细胞对IL-6的分泌,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:提示大黄素可明显抑制肾小球系膜细胞增生,减少细胞外基质的生成,从而减轻与延缓肾小球硬化,其机制可能与减少肾小球系膜细胞分泌IL-6有关。     

褐藻多糖硫酸酯对阿霉素肾硬化大鼠肾组织FN、TGF-β、MMP-9的影响

目的 观察褐藻多糖硫酸酯(FPS)对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用.方法 将40其SD大鼠分成正常组、模型组、海昆肾喜组(褐藻多糖硫酸酯组)、盐酸贝那普利组.建立阿霉素肾硬化大鼠模型,分别采用相应药物干预;8周后观察各组大鼠肾脏病理改变,PAS观察肾小球系膜基质,免疫组化观察肾脏组织纤连蛋白(FN),Western blot观察转化生长因子β(TGF-β)和金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 FPS能减轻肾小球系膜基质增生,且能减少TGF-β、FN表达,上调肾皮质MMP-9的表达.相关性分析研究显示,TGF-β值与FN、系膜基质指数呈正相关;MMP-9值与FN、系膜基质指数呈负相关.结论 FPS可能通过调控TGF-β及MMP-9表达,减轻FN沉积,从而抑制肾小球硬化.     

扶正泄浊保肾汤对腺嘌呤致CRF大鼠肾功能的影响

目的:研究扶正泄浊保肾汤对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠的治疗作用及机制。方法:雄性SD大鼠50只随机抽取10只为正常对照组(N),其余40只大鼠采用腺嘌呤ig的方法建立CRF大鼠模型;造模后再将模型大鼠随机分为模型组(M)、氯沙坦钾组(LP,5 mg·kg-1)、扶正泄浊保肾汤低、高剂量组(18.8,37.6 g·kg-1),每组10只;药物治疗30 d后处死大鼠,取标本送检。观察大鼠体重、肾重指数、血生化,并作肾脏病理学检查,检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:扶正泄浊保肾汤2个剂量组大鼠Scr,BUN低于模型组(P<0.01),高剂量组BUN显著低于氯沙坦钾组(P<0.05);扶正泄浊保肾汤2个剂量组肾重指数显著低于模型组(P<0.01)及氯沙坦钾组(P<0.05),高剂量组肾组织TGF-β1的表达明显低于模型组及氯沙坦钾组(P<0.01)。结论:扶正泄浊保肾汤能改善CRF大鼠肾功能,其机制与减少TGF-β1在肾组织的阳性表达,抑制肾小球硬化和肾间质纤维化进展关系密切。     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的: 探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.     

肾疏宁调节肾小球硬化细胞因子网络平衡的研究

目的：探讨肾疏宁对肾小球硬化模型大鼠肾组织细胞外基质及其主要调控细胞因子的作用。方法：采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射建立大鼠肾小球硬化模型,分组观测肾组织细胞外基质成分collagenⅣ、FN、LN表达及含量,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法测定HGF和TGF-β1的基因表达。结果：模型组HGF基因表达明显下降,TGF-β1表达上升。细胞外基质成分显著增多。肾疏宁治疗组HGF基因表达上升,TGF-β1基因表达降低。结论：肾疏宁能调节HGF和TGF-β1基因表达的平衡,减少细胞外基质增多,防治肾小球硬化进展有效。     

补肾活血汤对D-半乳糖致腰椎间盘退变大鼠模型IL-1β、TGF-β1表达的影响

目的:观察补肾活血汤对D-半乳糖致腰椎间盘退变大鼠模型IL-1β、TGF-β1表达的影响。方法:将72只健康SD大鼠随机分为空白组、模型对照组、模型组、中药组,每组18只,采用皮下注射D-半乳糖方法将模型组和中药组建立衰老大鼠椎间盘退变模型,模型对照组皮下注射等量生理盐水,在验证造模成功后,中药组灌服补肾活血汤药液,其余各组灌服等量生理盐水,灌胃4周后处死。观察比较各组腰椎间盘形态组织学和IL-1β、TGF-β1含量的变化。结果:模型组腰椎间盘组织退变程度评分、IL-1β、TGF-β1表达均高于空白组,差异均有统计学意义(P0.05);中药组腰椎间盘组织退变程度评分、IL-1β、TGF-β1表达均低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:补肾活血汤可降低D-半乳糖致腰椎间盘退变大鼠模型IL-1β、TGF-β1表达,延缓大鼠椎间盘的退变。     

小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌TGF-β1的影响

目的 探讨小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌TGF-β1的影响.方法 分离培养糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞,用MTT法检测系膜细胞的增殖能力,ELISA法测定系膜细胞分泌的TGF-β1,放射免疫法测定系膜细胞产生cAMP水平.结果 间接免疫荧光鉴定结果显示所培养的细胞为系膜细胞.小檗碱(15、30、60、120 μmol/L)能有效的抑制糖尿病肾病大鼠系膜细胞的增殖和TGF-β1的分泌,并显著升高糖尿病肾病大鼠系膜细胞的cAMP水平.结论 升高糖尿病肾病大鼠系膜细胞cAMP水平可能是小檗碱发挥抑制系膜细胞过度增殖和分泌的机制之一.     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用及对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MCs)及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验(ELAIS)检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN、ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.     

益肾方对糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原、转化生长因子-β_1基因表达的影响

肾小球系膜区扩张、细胞外基质(ECM)积聚是糖尿病肾病(DN)的主要病理特征,人与动物发生高血糖后肾小球Ⅳ型胶原、转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达增强,Ⅳ型胶原增加与肾小球细胞外基质(ECM)积聚相关,TGF-β_1则可促使Ⅳ型胶原表达增加,参与 DN 病理形成过程,而抑制 TGF-β_1、Ⅳ型胶原的过度表达可延缓 DN 的进展。我们以往研究表明益肾方具有降低糖尿病(DM)大鼠血糖,减少尿微量蛋白排出,减轻肾脏病理变化的作用。本实验将进一步观察益肾方对糖尿病大鼠早期肾脏Ⅳ型胶原、TGF-β_1基因表达的影响,旨在探讨益肾方对 DN发生、发展的防治作用。     

宽叶缬草对高胆固醇血症大鼠肾组织内TGF-β1表达的影响

目的:探讨宽叶缬草对高胆固醇血症大鼠肾组织内转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及其意义.方法:用含4%胆固醇和1%胆酸钠的高脂饲料饲喂大鼠建立高脂模型,观察宽叶缬草对大鼠血脂、尿蛋白和肾功能的影响,以及对肾小球细胞外基质增生、TGF-β1和Ⅳ型胶原表达的影响.结果:宽叶缬草有降低总胆固醇、低密度脂蛋白、尿蛋白和血肌酐的作用,肾病理和免疫组化证实宽叶缬草在降脂同时,能减轻肾小球系膜病变和细胞外基质产生,降低肾组织内TGF-β1和Ⅳ型胶原表达.结论:宽叶缬草对高脂血症肾脏有保护作用,此作用可能与其降低肾组织内TGF-β1表达有关.