他汀类药物与血管内皮功能

他汀类药物是一类可有效降低低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)的药物 ,近年来 ,一些研究显示他汀类药物还具有不依赖于调脂作用的有益功效 ,明显降低了心血管病事件发病率和病死率。血管内皮细胞的功能损害已被认为是动脉粥样硬化发生、发展过程中一个重要的指标 ,故他汀类药物对血管内皮细胞功能的影响尤为人们所重视。本文就近年来血管内皮功能本身的研究进展及他汀类药物对内皮功能影响的研究近况作一综述。     

硫化氢与血管内皮细胞的功能

血管内皮细胞参与血管内多种生理活动,内皮功能障碍将导致各种心血管疾病的发生.近几年来,研究发现新型气体信号分子硫化氢具有抗动脉粥样硬化等心血管疾病的效应:硫化氢促进内皮细胞增殖迁移诱导血管新生;抑制黏附分子分泌;通过打开平滑肌上ATP依赖性K+通道调节血管紧张度;抵抗氧化应激对内皮细胞的损伤等.随着其保护机制的不断发现与证实,硫化氢将有望逐渐应用于临床治疗,其.对内皮的保护作用仍需要做进一步的研究.     

血管内皮细胞损伤与高血压

近年来很多研究表明内皮细胞损伤导致的功能障碍与多种心血管疾病的发生发展有着密切相关,包括高血压、冠状动脉性心脏病、糖尿病等。深入探讨血管内皮细胞损伤的机制、评估,保护和修复内皮细胞功能,对改善心血管疾病的预后有积极的意义。现就血管内皮细胞损伤引起的内皮功能障碍和高血压发病机制之间的关系进行综述。     

脂联素与血管内皮细胞功能障碍的相关性

代谢综合征的组成成份致冠状动脉粥样硬化性心脏病发生发展的内在机制尚待进一步研究。脂联素作为一种脂肪细胞因子,与内皮依赖性血管舒张功能呈独立正相关,并且是后者的独立决定因素;通过多重信号传导途径上调内皮细胞一氧化氮合成酶活性、增加一氧化氮生成,抑制内皮细胞氧化应激反应、降低细胞损伤程度,阻断内皮细胞炎症信号传导、减轻血管炎症反应。因此,脂联素可能是联系代谢综合征与心血管疾病的枢纽,可以考虑利用脂联素改善代谢综合征患者的血管内皮功能,进而预防或延缓心血管疾病的发生发展。     

哇巴因对体外培养血管内皮细胞的作用

目的 阐明哇巴因在原发性高血压血管重塑中的作用。方法 通过肿法、台盼蓝染色及乳酸脱氢酶活性测定，确定不同浓度的哇巴因对ECV-304细胞株的效应。并通过PCNA和NF-κB免疫组化染色加以验证。结果 生理浓度(0.3～0．9mol／L)的哇巴因能刺激细胞增殖，病理浓度(0．9～1．8nmol／L)的哇巴因抑制内皮细胞的增殖，引起细胞凋亡。结论 生理浓度的哇巴因参与维持正常血管内皮细胞的增殖，其信号转导通路与NF--κB有关。病理浓度的哇巴因影响血管内皮的结构及功能，可能参与高血压引起的血管重塑。     

哇巴因对体外培养血管内皮细胞的作用

目的阐明哇巴因在原发性高血压血管重塑中的作用.方法通过 MTT法、台盼蓝染色及乳酸脱氢酶活性测定,确定不同浓度的哇巴因对ECV-304细胞株的效应.并通过PCNA和NF-κB免疫组化染色加以验证.结果生理浓度(0.3～0.9 nmol/L)的哇巴因能刺激细胞增殖,病理浓度(0.9～1.8 nmol/L)的哇巴因抑制内皮细胞的增殖,引起细胞凋亡.结论生理浓度的哇巴因参与维持正常血管内皮细胞的增殖,其信号转导通路与NF-κB有关.病理浓度的哇巴因影响血管内皮的结构及功能,可能参与高血压引起的血管重塑.     

肾血管性高血压大鼠血管内皮细胞功能的变化

目的观察肾血管性高血压(RVH)大鼠血管内皮细胞功能的变化并探讨其机制.方法体重为160～180 g健康雄性Wistar大鼠随机分成2组:高血压模型(RVH)组及对照(C)组.术后4周,用颈动脉直接插管法测定大鼠血压,应用生物测定法观察大鼠离体主动脉舒缩反应及美蓝(MB)、L-NAME、硝普钠(SNP)、左旋精氨酸(L-Arg)对其的影响.结果 RVH大鼠离体胸主动脉环对苯肾上腺素(PHE)引起的收缩反应比对照组明显增高,去除内皮后可消除两组差异.鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝及NO合成酶抑制剂L-NAME可使对照组收缩反应增加较RVH组明显.RVH大鼠胸主动脉环由乙酰胆碱(Ach)引起的内皮依赖性舒张反应较对照组明显减弱,而对非内皮依赖性松弛剂硝普钠(SNP)的舒张反应两组间无显著差异.NO合成底物L-Arg能显著提高RVH大鼠内皮依赖性舒张反应.结论肾血管性高血压血管内皮依赖的收缩反应增强,舒张反应减弱.其机制是血管内皮产生和释放EDRF(NO)功能受损和(或)EDRF作用减弱,合成NO的底物L-Arg不足.     

肾血管性高血压大鼠血管内皮细胞功能的变化

目的观察肾血管性高血压(RVH)大鼠血管内皮细胞功能的变化并探讨其机制。方法体重为160~180g健康雄性Wistar大鼠随机分成2组高血压模型(RVH)组及对照(C)组。术后4周,用颈动脉直接插管法测定大鼠血压,应用生物测定法观察大鼠离体主动脉舒缩反应及美蓝(MB)、L-NAME、硝普钠(SNP)、左旋精氨酸(L-Arg)对其的影响。结果RVH大鼠离体胸主动脉环对苯肾上腺素(PHE)引起的收缩反应比对照组明显增高,去除内皮后可消除两组差异。鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝及NO合成酶抑制剂L-NAME可使对照组收缩反应增加较RVH组明显。RVH大鼠胸主动脉环由乙酰胆碱(Ach)引起的内皮依赖性舒张反应较对照组明显减弱,而对非内皮依赖性松弛剂硝普钠(SNP)的舒张反应两组间无显著差异。NO合成底物L-Arg能显著提高RVH大鼠内皮依赖性舒张反应。结论肾血管性高血压血管内皮依赖的收缩反应增强,舒张反应减弱。其机制是血管内皮产生和释放EDRF(NO)功能受损和(或)EDRF作用减弱,合成NO的底物L-Arg不足。     

葡萄糖对血管内皮细胞小凹蛋白1和血管内皮生长因子表达的影响

为了探讨高浓度葡萄糖损伤血管内皮细胞及其对小凹蛋白-1和血管内皮生长因子表达的影响。将人脐静脉内皮细胞株ECV304．分别培养在对照组和含5.5mmol／L、11.1mmol／L、22.0mmol／L、33.0mmol／L葡萄糖的培养基中。经葡萄糖培养24h后，噻唑蓝法测定细胞增殖活性，硝酸还原酶法测定培养上清液中一氧化氮浓度，免疫组织化学和免疫印迹方法检测细胞中小凹蛋白-1和血管内皮生长因子的表达。结果发现，随着葡萄糖浓度的增加，内皮细胞增殖活性呈浓度依赖性抑制(r=-0.776，P=0.000)；一氧化氮浓度呈浓度依赖性增加(r=0.698，P=0.000)；小凹蛋白-1和血管内皮生长因子为棕黄色颗粒，主要分布于胞浆中；血管内皮生长因子的表达呈浓度依赖性增加(r=0.645，P=0.009)；小凹蛋白-1的表达也呈浓度依赖性增加(r=0.808，P=0.000)。提示高糖可诱导血管内皮细胞的血管内皮生长因子和小凹蛋白-1的表达，此变化可能与糖尿病患者高糖致血管病变有关。     

内皮细胞功能异常与动脉粥样硬化的研究进展

血管内皮细胞参与构成人体的生理屏障和维持人体内环境稳态,并且为适应内环境的动态变化及满足人体不同组织新陈代谢的需要,不同组织的内皮细胞具有功能差异性和组织特异性.心脏血管内皮细胞参与维持心脏内环境的稳定,当内皮细胞因高脂血症、高血糖、氧化应激、炎症反应及其他代谢因素发生功能障碍,会参与心血管疾病的病理生理过程,例如动脉...     

血管内皮细胞对平滑肌细胞表型转化的影响

目的分析共培养时大鼠血管内皮细胞(VECs)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响。方法 VSMCs直接种植于培养板表面,VECs则种植于与VSMCs相对的浮胶底面。免疫荧光方法观察和鉴定VECs和VSMCs,RT-PCR和共聚焦显微镜分析表型相关基因的表达。结果原代培养的大鼠VECs呈铺路石样形态,vWF染色阳性。原代培养的大鼠VSMCs免疫荧光染色α-SMA呈阳性。RT-PCR检测结果表明,48h共培养组VSMCs的合成表型相关基因CRBP-1、Smemb的表达水平显著高于单独培养组,分别为1.4倍、1.5倍;72h达到峰值,分别为1.7倍、2.1倍,96h开始下降;共培养组中收缩表型标记物Smoothelin-B和SM-MHC的基因表达水平在48h、72h显著低于单独培养组,96hSmoothelin-B却高于单独培养组。单独培养组上述各基因的变化趋势不变或保持稳定。免疫荧光结果显示SM-MHC蛋白表达在共培养组中96h后从下降转为升高(P<0.05)。结论在共培养体系中,血管内皮细胞对血管平滑肌细胞表型转化的作用表现为先促进向合成型转化,96h后促进向收缩型转化。     

Human Vascular Endothelial Cells: A Model System for Studying Vascular Inflammation in Diabetes and Atherosclerosis

The vascular endothelium is the inner lining of blood vessels serving as autocrine and paracrine organ that regulates vascular wall function. Endothelial dysfunction is recognized as initial step in the atherosclerotic process and is well advanced in diabetes, even before the manifestation of end-organ damage. Strategies capable of assessing changes in vascular endothelium at the preclinical stage hold potential to refine cardiovascular risk. In vitro cell culture is useful in understanding the interaction of endothelial cells with various mediators; however, it is often criticized due to the uncertain relevance of results to humans. Although circulating endothelial cells, endothelial microparticles, and progenitor cells opened the way for ex vivo studies, a recently described method for obtaining primary endothelial cells through endovascular biopsy allows direct characterization of endothelial phenotype in humans. In this article, we appraise the use of endothelial cell-based methodologies to study vascular inflammation in diabetes and atherosclerosis.     

罗格列酮对高糖诱导的血管内皮细胞炎症的抑制作用

目的 阐明罗格列酮对糖尿病血管并发症保护作用的分子机制.方法 用凝胶迁移分析和免疫荧光法测定不同浓度罗格列酮干预前后高糖诱导的血管内皮细胞核因子κB激活和血管细胞黏附分子1表达的改变.结果 25 mmol/L D-葡萄糖刺激30 min可诱导细胞核因子κB向核内迁移(与基础水平相比,P<0.001);5、25 μmol/L罗格列酮以剂量依赖的方式抑制了D-葡萄糖诱导这种效应,抑制率分别为25.17%(P=0.001)和51.79%(P<0.001).罗格列酮还抑制了D-葡萄糖诱导的血管细胞黏附分子1高表达.结论 罗格列酮通过抑制血管内皮细胞炎症起到直接保护血管作用,可能是其延缓和改善糖尿病血管并发症的机制之一.     

内皮祖细胞与糖尿病血管并发症的研究进展

糖尿病的血管并发症是糖尿病致残致死的主要原因,其病理基础为血管内皮功能失调,而内皮祖细胞是血管内皮修复的重要物质,且与糖尿病以及血管疾病密切相关,被认为是心血管疾病的预测因子。现就内皮祖细胞与糖尿病及其血管并发症之间的关系以及研究进展进行综述。     

Coculture of Vascular Endothelial Cells and Smooth Muscle Cells from Spontaneously Hypertensive Rats

The effect of endothelium‐released vasoactive factors on vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation was studied in a coculture system. Isolated aortic endothelial cells and smooth muscle cells from 4‐week‐old spontaneously hypertensive rats (SHR) and age‐matched Wistar–Kyoto (WKY) rats were cocultured. After coculture, the VSMC proliferation rate was examined by ³H‐thymidine incorporation assay and the levels of the vasoactive factors in medium were determined by enzyme immunoassay (EIA). The results indicate that the proliferation rate of VSMCs in SHR was significantly higher than in WKY rats when VSMCs were cultured alone. When SHR vascular endothelial cells (VECs) were cocultured with VSMCs, the proliferation rate of SHR VSMCs was enhanced; however, there was no growth promoting effect in WKY VSMCs. When WKY VECs were cocultured with VSMCs, no VSMC proliferation effect was observed. When VSMCs were cultured alone, the endothelin‐1 (ET‐1) secretion in SHR was significantly higher than in WKY rats. When VECs and VSMCs were cocultured, the ET‐1 concentration increased in both SHR VEC and WKY VEC coculture groups in a similar manner; but the SHR VECs tended to release more thromboxaneA₂ (TXA₂) and less PGI₂ than WKY VECs. These results suggest that some kind of interaction between SHR VSMCs and SHR VECs is responsible for the high proliferation of SHR VSMCs but not the effects of SHR VECs per se.     

醛固酮对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的醛固酮对人脐静脉内皮细胞增殖的影响及其机制。方法应用MTT法测试细胞的生长曲线,检测不同浓度的醛固酮对人脐静脉内皮细胞的增殖,流式细胞仪检测醛固酮对人脐静脉内皮细胞的凋亡,半定量RT-PCR及Western印迹分别检测人脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子mRNA水平及蛋白水平的表达。结果①MTT比色法显示,醛固酮对人脐静脉内皮细胞增殖具有抑制作用且呈浓度依赖性;②当醛固酮浓度增加到800μg/L后,其增殖抑制率不再升高,而此浓度时人脐静脉内皮细胞的凋亡率达到峰值的26.5%±3.3%;③经过醛固酮处理,人脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子mRNA及蛋白水平的表达量均显著下降。结论醛固酮通过降低人脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子表达抑制人脐静脉内皮细胞增殖并促进人脐静脉内皮细胞凋亡。     

剪应力和血管内皮生长因子诱导骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化

目的 研究血管内皮生长因子与剪应力对骨髓间充质干细胞分化的作用.方法 分离成人骨髓单个核细胞,经贴壁法获取骨髓间充质干细胞.所获细胞用血管内皮生长因子、剪应力(8和15 dyn/cm2)、血管内皮生长因子联合剪应力分别作用7天、24 h、24 h,观察细胞形态变化,并进行内皮细胞标记物假性血友病因子定性间接免疫荧光染色,进行Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白摄取实验以鉴定内皮细胞功能.结果 在剪应力(8 dyn/cm2)、血管内皮生长因子分别作用24 h、7天后,骨髓间充质干细胞形态变得偏圆、呈多角形,血管内皮生长因子联合剪应力诱导组细胞平行于流体方向排列,假性血友病因子染色阳性,提示内皮细胞表型特征,同时Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白摄取实验阳性,提示具有内皮细胞功能.血管内皮生长因子诱导组、15 dyn/cm2剪应力组作用24 h的骨髓间充质干细胞,假性血友病因子染色与Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白摄取实验均阴性,提示未出现向内皮细胞分化.血管内皮生长因子和15 dyn/cm2剪应力共同作用24 h后,骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化.结论 剪应力可诱导骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化,且与力的大小有关.血管内皮生长因子可联合剪应力诱导骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化.且诱导效果优于单独使用剪应力.     

尿酸减轻氧化应激诱导的血管内皮细胞损伤

目的　探讨尿酸对氧化应激情况下的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）有无保护作用以及其可能的机制。方法　将人脐静脉内皮细胞分为四组：不做任何处理的对照组、单纯叔丁基过氧化氢（t-BHP）组、单纯尿酸组和尿酸+t-BHP组。MTT试验计算各组细胞存活率。DCFH-DA探针检测各组细胞内活性氧（ROS）水平。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。荧光定量PCR技术检测各组细胞核转录相关因子2（Nrf2）mRNA表达变化。Western　blot　技术检测各组细胞胞浆与胞核中Nrf2蛋白表达水平。结果　MTT试验发现,尿酸+t-BHP组细胞存活率（78.5%±7.6%）显著高于单纯t-BHP组（P<0.05）。尿酸+t-BHP组细胞内ROS水平以及细胞凋亡率都明显低于单纯t-BHP组（P<0.05）。各组Nrf2的mRNA表达水平差异均无显著性（P>0.05）,但单纯尿酸组与尿酸+t-BHP组细胞核内Nrf2明显增多。结论　尿酸对氧化应激下的血管内皮细胞具有保护作用,其机制可能为尿酸增加了血管内皮细胞中Nrf2的核内转移。     

脂质过氧化对血管内皮细胞促增殖活性的影响

为探讨脂质过氧化对血管内皮细胞源生长因子的影响，以氢过氧化枯烯作用于培养的牛主动脉内皮细胞后，收集内皮细胞条件培养基，并用肝素亲和层析法处理，分组测定其对3T3细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入率的影响，并用放射免疫法测定各脂质过氧化作用组内皮细胞培养基中内皮素的含量。结果发现．氢过氧化枯烯使培养的内皮细胞的脂过氧化物蓄积增加，且内皮细胞条件培养基对3T3细胞的DNA合成有促进作用．对Swiss3T3细胞的促增殖活性主要存在于非肝素结合部分。氢过氧化枯烯作用后的内皮细胞的内皮素分泌水平比对照组增加。由此推测脂质过氧化作用引起的内皮细胞对平滑肌细胞的促增殖活性可能与内皮素等非肝素结合的分子有关。