心肌缺血再灌注损伤时细胞核被膜钙泵活性特征的研究

目的　研究心肌缺血再灌注损伤时Ca2 + 、ATP、ADP和AMP对细胞核被膜钙泵 (Ca2 + ATPase)活性的调节。方法　采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,密度梯度分离纯化细胞核 ,定磷法测定Ca2 + ATPase活性。结果　与正常大鼠相比 ,缺血再灌注损伤动物血浆MDA和FFA显著升高 (P <0 0 1) ;细胞核Ca2 + ATPase活性下降 ,对Ca2 + 亲和力降低 ;ADP、AMP对核Ca2 + ATPase活性的影响明显减弱 ;ATP对Ca2 + ATPase的作用在 [ATP]小于 1 0mmol L时 ,与正常细胞Ca2 + AT Pase活性无显著差异 ,浓度增至 2 0mmol L时 ,活性低于正常细胞 ,ATP浓度继续增加 ,核Ca2 + ATPase活性快速增加。结论　心肌缺血再灌注损伤时Ca2 + 、ATP、ADP、AMP对心肌细胞核Ca2 + ATPase活性的影响发生了明显改变 ,其病理生理意义值得进一步探讨。     

缺血预处理对大鼠心肌离子泵、离子及氧自由墓的影响

目的：探讨心肌缺血预处理（Ischemicpreconditioning，IPC）的心肌保护作用机制。方法：通过大鼠在体心肌缺血预处理模型，观察预处理（PC）对缺血再灌注心肌钠泵（Na+-K+-ATP酶）、钙泵（Ca(2+)-ATP酶）活性、Na+、Ca(2+)浓度及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响。结果：与单纯缺血再灌注组相比，PC组缺血再灌注心肌钠泵、钙泵的活性降低幅度小（P＜0．01），心肌钠钙离子浓度降幅较大（P＜0．01），且SOD活性升高，MDA含量下降。结论：心肌缺血预处理通过提高缺血再灌注区心肌钠泵、钙泵的活性，减少心肌钠钙超载及氧自由基的产生而达到保护心肌的作用。     

高血压心肌肥大大鼠心肌丝裂素活化蛋白激酶的活性

目的：探讨高血压心肌肥大的细胞内信息传递途径。方法：选用１２０～１４０ｇ雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，随机分成两组（ｎ＝６）：（１）高血压组：制作腹主动脉狭窄和高盐摄入性高血压模型；（２）对照组：除不结扎腹主动脉和常规喂养外，其余操作同高血压组。饲养３０ｄ后，采用胶内髓磷脂硷性蛋白原位磷酸化法测定心肌丝裂素活化蛋白激酶（Ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）活性，以３２Ｐ放射活性表示，采用ｔ检验和直线相关回归作统计学处理。结果：高血压大鼠心肌ＭＡＰＫ活性较对照组升高约１倍（Ｐ＜０．０１），与血压呈正相关（ｒ＝０．６６，Ｐ＜０．０５），与左心室肥大程度呈正相关（ｒ＝０．９２，Ｐ＜０．０１）。结论：高血压心肌肥大的细胞内信息传递途径可能涉及ＭＡＰＫ系统。     

TNF-α的心肌负性肌力作用机制研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对心肌的负性肌力作用机制。方法 :采用离体大鼠乳头肌张力测定 ,细胞内双波长钙荧光检测和 ATP酶分析方法。结果 :1TNF-α抑制大鼠右心室乳头肌的收缩力 ,2 0 U/ ml和 2 0 0U/ ml TNF-α灌流 10 min后 ,乳头肌收缩力分别减小到对照的 91%和 76 % (P均 <0 .0 1) ;2 TNF-α处理后对心肌细胞钙瞬态变化幅度无明显影响 (0 .97± 0 .0 5 vs0 .95± 0 .0 7,P>0 .0 5 ) ;3TNF- α明显抑制肌浆网 Ca2 + - ATPase活性 ,平均抑制率达到 2 0 % ;4 TNF- α拮抗肌浆网 Ca2 + - ATPase对底物中不同水平的 Ca2 +和 ATP的正反应性 ;5TNF- α对肌膜 Ca2 + - ATP酶和 Na+ / K+ - ATP酶活性无明显抑制作用。结论 :TNF- α抑制心肌收缩力的负性肌力作用机制可能部分与心室肌浆网 Ca2 + - ATP酶活性下降有关 ,而与膜上的 Ca2 + - ATP酶和 Na+ / K+ - ATP酶活性无关。     

病毒性心肌炎心肌组织腺苷酸酶活性和钙,钠含量变化

本文报告病毒性心肌炎小鼠心肌组织腺苷酸酶（ATPase）活性和钙、钠含量变化的实验研究结果。和对照组比较,结果显示：CVB3感染后第3天、14天及30天,心肌组织Na ,K －ATPase、Ca2 -ATPase活性显著下降（P＜0．01）,钙、钠及合水量明显升高（P＜0．01）,早于心肌组织形态学改变。提示病毒感染后心肌ATPase活性下降,反常性Ca2 超载可能是造成继发性心肌细胞损伤、心功能不全的重要原因之一。     

黄芪苷Ⅳ对心律不齐大鼠的作用及相关机制

目的：研究黄芪苷Ⅳ对心律不齐大鼠的作用及初步机制。方法建立心律不齐大鼠模型，实验随机分为假手术组、模型组、低剂量组（黄芪苷Ⅳ20 mg／kg）和高剂量组（黄芪苷Ⅳ40 mg／kg），观察给药前和给药后30 min、60 min、120 min和240 min的心电图；Ca2＋－Mg2＋－ATP酶试剂盒检测心肌细胞膜中Ca2＋－Mg2＋－ATP酶的活性。结果与模型组相比，黄芪苷Ⅳ在30～240 min内显著减少心律不齐大鼠的室性早搏和室性心动过速次数，并增加心肌细胞膜中Ca2＋－Mg2＋－ATP酶的活性。结论黄芪苷Ⅳ通过增加心肌细胞膜中Ca2＋－Mg2＋－ATP酶的活性降低心律不齐发生的概率。     

左旋硝基精氨酸诱导的高血压大鼠心肌肌浆膜Na-Ca交换功能的变化

目的：探讨高血压大鼠心肌肥大时心肌浆膜Na－Ca交换功能的变化。方法：采用同位素标记法。结果：心肌浆膜囊泡（SLV）对Na~+依赖的Ca~(2+)摄取与Ca2+浓度呈正相关。左旋硝基精氨酸（L－NNA）组大鼠明显低于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。两组间Km值无明显变化，但最大摄取速率（Vmax）L－NNA组为对照组的74％。结论：L－NNA诱导的高血压动物心肌Na－Ca交换功能明显低于正常大鼠。     

PKC激活对离体心肌缺血再灌注自由基损伤和钙超载的影响

目的：探讨缺血预处理（IPC）保护机制中蛋白激酶C（PKC）的激活对心有缺血再灌注后的自由基损伤和钙离子（Ca^2 ）代谢的影响。方法：采用大鼠离体心脏Langendorff灌流模型，以心肌组织丙二醛（MDA）含量，线粒体中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）活性以及线粒体Ca^2 含量，细胞肌浆网钙泵（Ca^2 －ATPase）活性作为反映心肌自由基代谢及Ca^2 代谢指标，观察IPC对上述指标的影响及PKC的可能作用。结果：与对照组比较，心肌单纯的缺血再灌注（I／R）可造成心肌明显的自由基及Ca^2 代谢的异常，经过IPC可使再灌注心肌这种代谢异常明显减轻，表现为IPC组心肌组织MDA含量、线粒体Ca^2 含量显著低于单纯I／R组（P均＜0．01），线粒体中GSH－PX活性，肌浆网Ca^2 －ATPase活性明显高于I／R组（P＜0．05），而在预处理过程中应用多粘菌素B抑制PKC的激活，则预处理的上述有益作用可被阻断。结论：PKC活化通过减轻心肌缺血再灌注后自由基损伤及Ca^2 超载而参与心肌缺血预处理保护。     

大鼠胸主动脉球囊成形术后血管壁丝裂素活化蛋白激酶活性的变化

目的；丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）与大鼠胸主动脉内皮剥脱术后平滑肌细胞（SMC）增殖的关系。方法：将剥脱术后的Wistar大鼠随机分为两组（n＝6），分别于术后7天和14天时处死取材，其血管条分别做3H－TdR参入和MAPK活性测定，并与假手术组相比较。结果：剥脱术后7天和 14天与假手术组相比，3H－TdR参入分别是后者的 2.6倍和 2． 0倍（P＜0. 01），MAPK活性分别为 7.6倍和 2. 4倍（P＜0．01）。结论：大鼠胸主动脉球囊内皮剥脱术后血管SMC发生增殖，同时MAPK活性明显升高，说明MAPK与内皮损伤后的血管壁SMC增殖有关。     

牛磺酸对心肌细胞核钙转运功能异常的保护

目的：为观察异丙肾上腺素（ISO）致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能的异常变化及牛磺酸对其影响。方法：给Wistar大鼠皮下注射5mg/kgISO液,造成心肌缺血损伤模型。超速离心分离纯化心肌细胞核。酶学方法鉴定核纯度和测定核膜Ca^2 -ATP酶活性,同位素法观测核钙的摄取。结果：与正常对照组比较,心肌缺血组（实验组）心肌细胞核膜Ca^2 依赖性ATP酶活性降低18．1％（P＜0．05）,^45Ca^2 摄取效率也显著降低,其最反应速度（Vmax)降低56.4％,细胞核心Ca^2 依赖性ATP酶的最大反应速度（Vmax)降低33．0％（P＜0．05）。平衡常数（Km)降低42．8％（P＜0．01）。牛磺酸保护组心肌细胞核Ca^2 －ATP酶活性及核^45Ca^2 摄取与正常对照组比较均未见显著性改变。结论：牛磺酸对ISO致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞钙转运功能降低有保护作用。     

肿瘤脱落细胞中端粒酶活性检测的意义

寻求一种检测微量肿瘤细胞的方法。方法采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ法检测宫颈，尿液，腹水中脱落细胞的端粒酶活性。结果宫颈癌患者宫颈脱落细胞中端粒酶活性表达阳性率为９５．２４％；尿路上皮性癌尿液脱落细胞者为８８．１％，卵巢癌性腹水中脱细胞者为１４．３％。     

大肠癌组织和正常黏膜中端粒酶活性表达及临床意义

目的:探讨端粒酶活性检测作为一种新的肿瘤临床诊断的生物学标志的可行性.方法:应用端粒重复扩增实验(telomerase repeat amplification protocol,TRAP法)结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法测定35例大肠癌标本及正常黏膜端粒酶活性.结果:35例大肠癌标本中,29例为端粒酶阳性,阳性率为82.86%;而相邻正常黏膜中全部为阴性.两者之间差异有显著性,经统计学分析,端粒酶活性与大肠肿瘤Dukes'分期有关.结论:端粒酶表达具有很高的肿瘤特异性,对大肠肿瘤的临床诊断有应用价值,并且有判断预后和指导临床治疗的潜在意义.     

HeLa细胞中端区与端粒酶的实验研究

目的：测定ＨｅＬａ细胞中端粒酶活性。方法：采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法。结果：人外周血白细胞无端粒酶活性，ＨｅＬａ细胞中有端粒酶的活性。结论：ＨｅＬａ细胞中因有端粒酶活性，故其端区长度不随细胞增殖而缩短，这有别于体细胞。     

肌酸激酶同工酶的提取纯化和重组

目的 对肌酸激酶（ＣＫ）同工酶进行纯化和重组。方法 酶的制备和分子重组技术。结果 纯化及重组后的ＣＫ－ＭＭ、ＣＫ－ＭＢ、ＣＲ－ＢＢ比活性分别为９３００００，６９２０００，４８１０００Ｕ．ｇ＾－１（３７℃）；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＣＫ－ＭＭ，ＣＫ－ＭＢ均呈现单带，而ＣＫ－ＢＢ为双带。结论 实验为进一步进行ＣＫ－ＭＢ单抗制作及建立其免疫化学检测奠定了基础     

白血病患者血清酶活性初探

探讨不同类型白血病和不同病期白血病的血清酶活性变化，以及酶活性与外周血白细胞总数、白血病细胞数的关系。方法：采用酶联法测定75例白血病患者血清乳酸脱氢酶（LDH）、谷丙转氨酶（GPT）、碱性磷酸酶（AKP）活性，并与正常人组38例比较。结果：白血病组LDH、AKP活性明显高于正常人组，且急性淋巴细胞白血病（ALL）者的LDH活性与外周血白血病细胞数呈正相关（P＜0．01）；白血病完全缓解期（CR）患者LDH活性明显低于初发患者（P＜0．01），血清GPT活性与正常人无显著性差异（P＞0．05）。结论：动态观察血清LDH活性有助于白血病疗效的判断。     

检测端粒酶活性的PCR—ELISA方法的建立

建立一种更为敏感，特异的端粒酶检测方法。方法将分子生物学和免疫学方法有机地结合起来，建立ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法并检测多种肿瘤细胞株和部分组织中端粒酶活性。结论ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测端粒酶活性是一种简便，快速，无放射性污染的方法，适用于肿瘤早期诊断和普查。     

龈沟液天门冬氨酸氨基转换酶定性与定量试验的对比研究

目的：评价牙周组织监测试剂盒（PTM）对龈沟液天门冬氨酸氨基转换酶（GCF-AST）定性检测的临床应用价值。方法：用PTM试剂盒进行定性检测，用天门冬氨酸氨基转换酶的常规方法进行定量检测。结果：牙周健康者全为阴性，牙龈炎者63．75％为阳性；定性对定量试验的灵敏度为72．03％，特异度为64．71％，调整一致率为66．08％。结论：PTM为一种简便、快速的过筛试验，可用来反映牙周组织的破坏状况。     

8-氯腺苷对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的：观察比较大鼠心室与左心房 α_１肾上腺素受体（α_１－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ, α_１－ＡＲ）３种亚型的分布。方法：放射配体结合实验。结果：大鼠心室与左心房每毫克蛋白中α_１－ＡＮ含量分别为（８１±１３） ｆｍｏｌ和（８６±１５） ｆｍｏｌ;在心室和左心房α_１－ＡＮ的 ３种亚型。α_１Ａ、α_１Ｂ－和α_１Ｄ－ＡＲ分别约占受体总密度的 ２５％,４５％和 ３０％。结论：α_１－ＡＲ ３种亚型在心室肌与左心房分布基本一致。