培养及PCR两种方法检测淋球菌结果分析

性病在我州每年呈上升趋势,而淋病又是该地区主要流行病病种,为了寻求一种快速、准确、经济的实验诊断方法,指导、推进全州性病监测工作,本实验采集了男女生殖道感染患者128例标本,应用培养法和多聚酶链反应(ＰＧＲ)法检测,结果分析报告于下。1　材料与方法11　研究对象　来我站性病艾滋病监测门诊就诊的尿路感染、前列腺炎、宫颈炎、阴道炎患者128例。12　检测方法　常规男性取泌尿生殖道分泌物试子。女性取阴道或宫颈试子。对每份标本同时进行2种方法检测。①淋球菌培养法:含标本的棉试子尽快反复滚动接种在经37℃预热的桂敏培养皿内,立即…     

肠道病毒感染的快速诊断技术

肠道病毒（ＥＶ）感染的临床表现多样，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＥＶ具有快速、敏感和特异的优点，因此适用于ＥＶ感染的早期诊断。本文介绍的逆转录ＰＣＲ、套式ＰＣＲ、竞争性ＰＣＲ等方法在检测ＥＶ中各有特点，而且ＰＣＲ结合特异性ＥＶ引物、抗原捕获、限制性片断长度多态性分析及基因测序等方法还可进行ＥＶ分型。     

太原地区城乡妇女儿童骨质量和骨代谢调查

山西省妇幼保健院于2002年对太原地区部分农村与城市妇女儿童的骨质量和骨代谢情况进行了调查，旨在了解农村和城市妇女儿童的骨质量现状，为针对性地开展预防提供依据，现将结果报告如下。     

肠道病毒感染的快速诊断技术

肠道病毒(EV)感染的临床表现多样,用聚合酶链反应(PCR)检测EV具有快速、敏感和特异的优点,因此适用于EV感染的早期诊断。本文介绍的逆转录PCR、套式PCR、竞争性PCR等方法在检测EV中各有特点,而且PCR结合特异性EV引物、抗原捕获、限制性片断长度多态性分析及基因测序等方法还可进行EV分型。     

结核性脑膜炎实验室诊断若干进展

本文综述了近年来结核性脑膜炎（ＴＢＭ）的细菌学诊断、免疫学诊断及基因诊断技术的应用进展。全面探讨基因诊断尤其聚合酶链反应（ＰＣＲ）对ＴＢＭ诊断的价值。     

前列腺按摩液PCR检测对慢性淋病的诊断意义初探

我院1992年11月引进美国P.E公司DNA热循环仪,目前主要开展对淋病菌(NGHDNA—PCR)聚合酶链反应扩增技术检测,一些男性淋病患者有少量病原体,尤其是耐多种抗生素的淋病双球菌,主要潜伏在后尿道皱襞内、前列腺内等。这些病人以前尿道分泌物检查淋菌、培养、SPA协同凝集试验,都不易查出阳性结果,前列腺按摩液作淋病菌培养也难于培养成功。而前列腺按摩液淋菌PCR扩     

肠道病毒感染的实验室诊断研究进展

肠道病毒有７０多个血清型，可通过血循环在多个器官中繁殖，引起一系列人类疾病。临床上对这些疾病的确诊比较困难，往往求助于实验室的方法。本文就肠道感染的实验室诊断进展情况加以总结。     

儿童社区获得性肺炎肺炎支原体感染的快速诊断

目的:探讨儿童社区获得性肺炎(CAP)肺炎支原体(MP)感染的快速诊断方法,以帮助临床正确选择抗生素。方法:将159例经逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)证实为MP感染的住院患儿随机分为A、B、C三组,分别进行血清特异性IgM、IgG及双份血清补体结合实验,同时设立健康对照组。结果:A组53例中MP特异性IgM阳性48例(90·57%);B组53例检出MP特异性IgG阳性35例(66·4%);C组53例患儿分别于入院第1d及至少10d后收集双份血清进行补体结合实验,共采集标本50人份,证实为MP阳性的46例(92·00%);MP-IgM检测结果还具有年龄差异,3岁以下组的阳性率低于3岁以上组(P<0·05);50例健康儿童MP-IgM阳性1例(2·00%),MP-IgG阳性7例(14·00%),双份血清实验检测未见阳性。结论:MP血清特异性IgM检测是早期快速诊断儿童MP感染的有效手段,但其结果具有年龄组的差异,婴幼儿MP感染的诊断还需结合PCR及双份血清实验。     

肠道病毒感染的实验室诊断研究进展

肠道病毒有70多个血清型,可通过血循环在多个器官中繁殖,引起一系列人类疾病。临床上对这些疾病的确诊比较困难,往往求助于实验室的方法。本文就肠道病毒感染的实验室诊断进展情况加以总结。     

应用PCR法检测沙门菌

目的 研究沙门菌的PCR检测方法.方法 引物选择沙门菌的hilA基因,应用PCR法检测沙门菌.结果 PCR能检测经选择性增菌液培养的沙门菌,扩增片段在497 bp.结论 应用PCR检测沙门菌,具有快速、特异、灵敏和简便的特点.     

实时荧光定量聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌

目的建立一种快速、准确、特异定量检测金黄色葡萄球菌的方法. 方法 以金黄色葡萄球菌FemB基因为靶序列,设计并合成引物和Taqman探针,优化引物与探针比例,调整镁离子浓度,对金黄色葡萄球菌进行荧光定量检测. 结果引物与Taqman探针比例为1∶4,镁离子为2.5mmol/L时本底最低,荧光信号最强;该法的灵敏度为1.0×103拷贝,能特异区分金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌. 结论使用Taqman探针技术的荧光定量聚合酶链反应能够对金黄色葡萄球菌准确快速定量检测.     

聚合酶链反应诊断小儿支原体肺炎及其意义

笔者用聚合酶链反应技术对７０例小儿支原体肺炎鼻咽分泌物中肺炎支原体ＤＮＡ进行检测，采用快速制备ＤＮＡ模板的方法，简化了ＰＣＲ实验过程，结果５３例阳性，阳性率７５．７％，而用支原体培养方法，阳性率仅５３．８％（Ｐ〈０．０５），差异有显著性，对其中１３例ＰＣＲ阳性患者经红霉素静脉滴注治疗１０～１４天后，复测ＰＣＲ，８例转阴性，５例仍为阳性，该方法既保持了ＰＣＲ的酶感性和特异必，又简化过程，能够检测到相     

聚合酶链反应直接检测粪便中脊髓灰质炎病毒RNA的研究

用聚合酶链反应技术检测１９分急性弛缓性麻痹患者的粪便中脊髓灰质炎病毒，其中１１份阳性，与中和试验鉴定及单克隆抗体鉴定结果符合率为９０．９０％￣１００％。该法不仅简便，敏感，特异分型，而且可作型内鉴别，为环境样品中脊灰病毒污染提供了检测手术。     

聚合酶链反应检测人胃螺杆菌

人胃螺杆菌（Ｈｈ）是慢性胃炎的又一病原菌，体外尚不能培养。作者用对应于细菌１６ＳｒＲＮＡ的螺杆菌属特异引物和细菌通用引物配对，建立了一套ＰＣＲ直接检测人胃粘膜活检标本中Ｈｈ的方法。１２例形态学检查证实为Ｈｈ感染者，１１例ＰＣＲ结果阳性，而大肠杆菌、空肠弯曲菌、双歧杆菌等８种常见肠道菌均阴性；普通ＰＣＲ灵敏度达０．１ｎｇＤＮＡ水平，巢式ＰＣＲ则可检测出０．０１ｎｇＤＮＡ。     

聚合酶链反应在检测脑脊液病原菌中的应用

目的 应用聚合酶链反应(PCR)建立快速检查方法来检测脑脊液中是否含有病原菌.方法 对138例脑脊液标本,以病原菌16S rRNA基因为靶序列,采用1对通用引物对其进行PCR扩增检测,并同时作细菌培养.结果 138例脑脊液标本中,PCR方法检测出55例,阳性率为39.86%,培养法检出24例,阳性率为17.39%,PCR方法检出率明显高于培养法(P<0.01).结论 该方法具有快速、敏感、特异、准确等优点,是一种可靠的实验手段.     

PCR快速检测临床标本中肺支原体的应用研究

肺炎支原体（ＭＰ）是引起呼吸道严重感染和造成地方性流行的常见传染病。该菌临床培养时间长，易受污染。我们用自行合成的引物，建立了ＰＣＲ直接检测临床标本中ＭＰ的方法，通过标本前处理，６８例病人标本ＰＣＲ直接检测的阳性率可达到３８．２％，并可在半天内报告结果，为人类原发性非典型肺炎的临床快速诊断提供了简便快速和特异敏感的检测手段，具有重要的临床应用价值。     

军团菌rcp毒力基因的聚合酶链反应检测方法研究

目的 建立军团菌rcp毒力基因聚合酶链反应(PCR)检测方法.方法 根据GenBanK公布的嗜肺军团菌核苷酸序列合成军团菌rcp毒力基因的特异引物,采用PCR方法对2005年-2007年天津市中央空调冷却塔分离的16株嗜肺军团菌、杜氏军团菌(Legionella dumoffii,L.dum)、博氏军团菌(Legionella bozemanii,L.boz)、长滩军团菌(Legionellafeeleii,L.fee)等菌株进行了军团菌毒力基因rcp的检测.结果 3株嗜肺军团菌扩增出了900 bp的rcp基因片段,其余菌株未扩增出该基因片段.结论 本研究建立的军团菌毒力基因rcp的PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,适于军团菌毒力基因的深入研究.

Abstract：

Objective To establish a polymerase chain reaction method for the detection of the rcp virulence gene of L. pneumophila. Methods Sixteen strains of Legionella pneumophila, L. dumiffii, L. bozemanii and L. Longbeachae isolated from the cooling towers of the centralized air-conditioning systems in Tianjin form 2005 to 2007 were detected by polymerase chain reaction method using L. pneumophila rcp virulence gene-specific primer according to GenBank published nucleotide sequence. Results The 900 bp rcp genetic fragment was amplified in three strains of L. pneumophila, while others not. Conclusion The rcp virulence gene-based polymerase chain reaction method for the detection of L. pneumophila has been successfully established and is the foundation for the studies of Legionella virulence.     

聚合酶链反应检测梅毒螺旋体

利用PCR法对临床梅毒病人皮疹渗出液、全血、血清样本中的梅毒螺旋体进行检测。结果表明：皮疹渗出液检出率最高(30／30)，全血样本检出率较低(8／20)。血清样本26例仅检出1例。在12例早期梅毒病人中。PCR检测全部阳性。结果提出PCR法特异性强。敏感性高，有利于早期诊断。及时治疗。     

聚合酶链反应和平板计数检测土拉弗氏菌气溶胶稳定性的比较

为了提高检测生物气溶胶的特异性和敏感性，分别用平板计数和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对土拉弗氏菌气溶胶的稳定性进行了研究。结果表明ＰＣＲ对细菌数目的估计高于平板计数结果，并且ＰＣＲ在采样后的３ｈ就可以得出定性结果，而土拉弗氏菌平板计数则需要３～７天。