ABC法检测人IgG的灵敏度

抗生物素蛋白—生物素系统(Avidin—Biotin system,ABS)可广泛应用于酶联免疫、放射免疫和荧光免疫等检测技术中。因为生物素标记抗体和酶的克分子比值很高,又不影响抗体和酶的活性,加之抗生物素蛋白有四个生物素结合位点,可以与生物素—酶结合物形成晶格状巨分子复合物。所以,酶联免疫、放射免疫和荧光免疫等方法,均可借ABS而大大提高方法的灵敏度,为微量杭原和抗体的检测开辟了新的途径,日益为国内外免疫工作者所重视。ABC(Avidin—Biotin—Engyme Complex)方法,是在试管中先形成抗生物素蛋白—生物素酶复合     

链霉菌亲生物素蛋白—生物素酶标免疫组化染色法的初步研究

自从Guesdon于1979年报道使用亲生物素蛋白(Avidin,简称A)—生物素(Biotin,简称B)系统(ABC系统)酶标免疫技术后,Warnke与Levy以及HSu等相继报道了ABC免疫组化染色法较通常使用的PAP酶标方法更为敏感。1982年以来,     

生物素-抗生物素在酶免疫技术中的应用

酶免疫技术作为三大免疫标记技术之一,以其敏感性高、特异性强、快速易行的特点在生物学、医学基础研究及临床诊断上得到了广泛地应用,并正在不断改进和发展。70年代初,有人在非标记抗体技术的基础上,将过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)复合物用于免疫酶技术,使该技术的敏感性得到了提高,并使试剂更加通用。70年代末、80年代初不少学者利用生物素(Biotin)与抗生物素(Avidin)高度亲和的特点,把生     

生物素-亲和素系统试剂及其应用的研究 Ⅴ·用ABC-ELISA检测细胞表面抗原的抗体

生物素-亲和素系统(BAS)与 ELISA 技术结合,产生了一种新型 ELISA 测试法,即 ABC—ELISAE。我们采用自制全套BAS 试剂进行 ABC—ELISA 试验,检测可溶性抗原的抗体,其灵敏度可达常规 ELISA     

ABC-ELISA在检测HBeAg中的应用

ABC—ELISA是ELISA与BAS(生物素—亲合素系统)相结合的新技术。为提高HBeAg检出率和乙型肝炎正确诊断率, 现将生物素—亲和素与HRP结合成ABC—ELISA,对HBeAg进行检测,获得效果较满意,报告如下。     

两种生物素衍生物标记HBsAg的效果比较

<正> 生物素-亲和素系统(Biotin-AvidinSystem,BAS)检测抗HBs的方法最早见于Kendall报道,他采用BAS的ELISA间接法来检测免疫后小鼠的抗HBs滴度。由于人血清中抗HBs滴度低,ELISA间接法往往出现很高的阴性显色,所以检测人血清抗HBs一般不用间接法而用双抗原夹心法。在BAS技术中,我国现用的生物素标记试剂几乎都是生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(Biotin N-Hydroxy Succinimide ester,BNHS),我们体会用BNHS直接标记HBsAg,实验结果并不理想,为了提高检测抗HBs的灵敏度,我们建立了生物素酰肼(Biotin Hydrazide.BHZ)标记HBsAg     

BSA-ELISA在检测抗HBs中的应用

本文采用自制的生物素-链霉亲和素系统(BSA)试剂建立测定抗HBs的双抗原夹心BSA-ELISA,并与生物素-亲和素系统(BA)ELISA进行比较,对两法不一致的标本用相应Abbott试剂作最终考核。结果表明,BSA-ELISA本底极低,且具有较高的敏感性和特异性。     

BAS试剂的研制

<正> 生物素亲和素系统(Biotin-Avidin System,BAS)是七十年代后期发展起来的一种新型生物反应放大系统。我们从1983年以来,陆续研制成功亲和素、活化生物素BNHS、生物素化羊抗兔(b-SARG)和生物素化兔抗鼠(b-RAMG)以及生物素化辣根过氧化物酶(b-HRP),组成了一套完整的BAS试剂系统。 亲和素是用CMC柱吸附-解离法,从鸡蛋清中分离获得,每ml蛋白含12活性单位。BNHS由生物素     

检测日本血吸虫抗体的SPA-ABC系统

<正> 采用比 N-羟基琥珀酰亚胺更为通用的方法活化生物素,制备了生物素标记的金黄色葡萄球菌 A 蛋白和生物素标记的辣根过氧化物酶。并利用海军医学研究所生产的亲和素,建立了完整的 ABC 系统。检测了35例日本血吸虫病人血清和50例非病人的血清,检出率约90%,非特异反应为2%,与应用卫生部上海生物制品研究所抗人 IgG 的 ABC 试剂所获结果相同.     

ABS技术及其在组织病理学的应用

近20年来,免疫酶技术发展很快,在组织病理研究的应用中,大体上经历了酶标法。PAP法(Peroxidase Antiperoxidase)和ABS技术(Avidin Biotin System,生物素一抗生物素系统)三个阶段。1970年Sternberger建立的PAP法敏感性较荧光法高1,000倍左右。1981年许世明建立的ABC法(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex Method,ABS技术之一种)敏感性较PAP法又高4～40倍。由于免疫酶技术方法不断改进,敏感性不断提高,再加上操作简单,国外用该法进行医学科研和外科病理诊断已越来越普遍。免疫酶技术,尤其是ABS技术国内开展尚不多,本文综合文献并我们的工作,对该技术作一介绍。     

一种新型的酶免疫技术—TNP/抗TNP免疫组化法

目前广泛应用的酶免疫技术有过氧化酶—抗过氧化酶(PAP)法和生物素—亲和素(ABC)法。我们以牛血清白蛋白为载体,联结三硝基苯(TNP)半抗原,以此免疫新西兰兔,产生了抗TNP的特异性高效价抗体,再以三硝基苯磺酸(TNBS)修饰铁传     

免疫组化法检测解脲脲原体的研究

目的　建立检测解脲脲原体 (UU)的实验方法。方法　应用亲和素 生物素 酶复合物技术 (ABC法 )观察UU感染者 ,并与培养法和PCR法相比较。结果　ABC法对 75例临床标本的检出率为 5 2 % ,与培养法和PCR法比较 ,在统计学上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　ABC法可作为诊断UU感染的快速检测方法 ,在临床应用中有一定实用价值。     

抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

亲和素,生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时,敏感性依然不够。为此,作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗,通过选择性扩大ABC复合物,增加底物信号,增强亲和素-生物素免疫测定法的敏感性。     

抗生物素蛋白——生物素系统在免疫学中的应用

抗生物素蛋白(Avidin)是与生物素(Biotin)有极强亲和性的一种糖蛋白。自七十年代末起,抗生物素蛋白—生物素系统(ABS)开始引入酶联免疫、放射免疫和荧光免疫等检测技术中,改善了这些方法的稳定性和特异性,大大提高了方法的灵敏度,为微量抗原和抗体的检测开辟了新途径,日益受到国内外免疫学工作者的普遍重视。抗生物素蛋白是由鸡、鸟、蜥蜴等动物输卵管中分泌的一种硷性糖蛋白,鸡蛋中含量比较丰富,占总蛋白的0.05%。早在1927年,Boas用生鸡蛋清饲养大白鼠,结果引起了大鼠皮炎。1936年,Kogl从鸡蛋黄中分离出一种小分子物质,因能促进培养液中酵母菌的生长,故取名为酵母菌生长因子。1939年,Gyngy证明这种因子能治疗喂饲蛋清引起的大鼠皮炎,又将其改名为     

ABC-ELISA检测抗班氏丝虫抗体的初步观察

<正> 国内外学者报道,将生物素-亲和素系统(BAS)引入免疫学的各种标记检测技术能提高灵敏度,改善稳定性和特异性。本文报道用ABC-ELISA(简称ABC法)检测抗丝虫抗体,并和常规ELISA(简称常规法)进行比较。     

生物素-抗生物素系统及其在免疫学研究中的应用(文献综述)

<正> 从七十年代末起,生物素和抗生物素系统(Avidin-Biotin System)开始在免疫化学领域中逐渐得到广泛应用。特别是由于生物素和抗生物素间亲和力大、特异性强、试剂有商品供应,可分别结合各种类型大小分子,故在相当大的范围内,为免疫标记技术提供了极为方便有用的工具,成为被大家所喜爱采用的方法。 一、生物素和抗生物素发现的历史:生物素(Biotin)首先于1936年由Kogl和     

生物素—亲和素系统在免疫学检测中的应用

<正> 早些年前,学者们发现给动物喂食大量卵白蛋白可引起维生素 H(即生物素,biotin)缺乏症,此后证明其原因是卵白蛋白中存在一种对生物素有异常强亲和力的碱性糖蛋白,称之为 avidin,译名有抗生物素蛋白、卵白素和亲和素等。前二者易与抗体或卵白蛋白混淆,本文采用亲和素。自七十年代中期起,亲和素与生物素之     

国产抗生物素及其在免疫学性能研究

<正> 抗生物素(Avidin)是从蛋清中提取的一种糖蛋白,对生物素有极大亲和力,利用抗生物素——生物素系统作为免疫学检测工具,是最近发展起来的一种灵敏度极高的酶标方法。为了在国内尽快发展这种免疫工具,作者贯彻科研和生产相结合方针共同研制抗生物素,经几批试制,国产抗生物素与Sigma同类产品比较,其含量和免疫活性都能达到或超过。如经多次CM-纤维素亲和提纯,在每ml含1.56μg抗生物素即可检得     

用免疫组化ABC法的漂片法做好脑片实验的体会

ABC法是将亲和素作为桥，把生物素化的抗体与生物素结合的酶连接起来。首先，以Ⅰ抗与组织切片共孵育，使特异性Ⅰ抗与组织中的相应抗原结合，之后加上生物素标记的Ⅱ抗，Ⅱ抗与Ⅰ抗通过抗原一抗体反应结合，最后加人ABC复合物，Ⅱ抗上的生物素则与ABC复合物中的亲和素上空下的位点结合。用ABC法中的漂片法做脊髓冰冻切片的染色比较容易做出结果，但如果是用此法做大鼠脑的冰冻切片染色则较难做出结果，特别是做出漂亮的脑片更难。作在用ABC漂片法做脑组织冰冻切片的免疫组织化学实验的过程中，通过改变常规的操作步骤环节，使做出的脑片质量大为提高。以下实验技术介绍的是将免疫组化ABC法的漂片法用于脑组织冰冻切片中的几点体会。     

ABC-ELISA筛选抗LSP单克隆抗体(摘要)

亲和素,生物素复合剂-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)是近年开展起来的免疫学新技术,用于单克隆抗体筛选具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简便、快速、经济等特点。本文ABC试剂由上海生物制品所提供,LSP参照Mcfarlane等方法由我室自行制备。LSP包被浓度为15μg/ml,每孔100μl,抗原包被后置4℃过夜,用PBS-T洗4次,加待测