缬沙坦对大鼠缺血-再灌注心肌caspase-3活性及凋亡相关基因表达的影响

目的:观察缬沙坦对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)时心肌细胞天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:以SD大鼠建立I/R模型,设立I/R组、缬沙坦组和假手术组.用分光光度法检测caspase-3活性,免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察心肌超微结构的变化.结果:同I/R组相比,缬沙坦组心肌组织caspase-3活性明显降低(P＜0.05),Bax蛋白表达显著降低(P＜0.01),而Bcl-2蛋白表达显著增高(P＜0.01),Bax/Bcl-2显著降低(P＜0.01),心肌细胞超微结构损伤明显减轻.结论:缬沙坦通过抑制caspase-3活性、调控Bax/Bcl-2表达而抑制心肌I/R所致细胞凋亡.     

吡那地尔缺血后处理对心脏再灌注损伤细胞凋亡的作用

目的:研究缺血/再灌注(I/R)对大鼠心肌细胞凋亡蛋白表达的影响以及ATP敏感钾通道(KATP)开放剂（吡那地尔）缺血后处理(IPO)的作用。方法: 24只Wistar雄性大鼠,随机分为对照组、I/R组、吡那地尔IPO组及吡那地尔+格列本脲IPO组,每组6只动物(n=6)。在大鼠I/R过程中给予吡那地尔IPO后,对心肌细胞中Bax、Bcl-2和纤维连接蛋白(FN)凋亡蛋白的早期变化以及表达采用免疫组化染色法和图像分析技术进行定量分析。结果: 心肌I/R后,心肌细胞中Bax、FN蛋白的表达上调、Bcl-2蛋白的表达下调;吡那地尔IPO组Bax、FN蛋白的表达下调、Bcl-2蛋白的表达上调,各组平均吸光度(A)值有显著性差异(P<0.05)。结论: 吡那地尔本身具有抗细胞凋亡的作用,以其进行IPO具有减轻I/R损伤的作用。     

大鼠肢体缺血/再灌注后心肌细胞凋亡及氧化应激的调节作用

目的观察大鼠肢体缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的变化和氧化应激的调节作用。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分成对照组、肢体I/R 2 h组(I/R 2 h组)和4 h组(I/R 4 h组)。免疫组化法检测心肌组织Bcl-2/Bax蛋白表达;原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记(TUNEL)技术检测心肌凋亡细胞;生化法检测血浆心肌酶含量;比色法测定心肌组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化。结果肢体I/R后与对照组比较,血浆心肌酶含量升高;心肌组织ROS和MDA含量增加,SOD活性降低(P0.05);心肌凋亡细胞明显增加(P0.01);心肌组织Bcl-2与Bax表达增强,但Bax表达较Bcl-2明显上调,Bcl-2/Bax比值降低(P0.01);相关分析显示,ROS含量与Bax蛋白表达平均吸光度值和凋亡指数(AI)之间呈显著正相关(P0.01)。结论大鼠肢体I/R后可致心肌细胞凋亡;心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达比值降低和心肌氧化应激增强有关。     

三羟异黄酮对家兔缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的研究三羟异黄酮(genistein,GST)对家兔缺血/再灌注损伤(I/R)心肌细胞凋亡的影响.方法阻断家兔心脏左冠状动脉前降支45 min,再灌注180 min引起心肌I/R损伤,在心肌缺血后5 min耳缘静脉注射GST(1.0 mg/kg),应用DNA片段原位末端标记法(TUNEL染色),DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)观测心肌细胞凋亡.结果琼脂糖凝胶电泳显示I/R组心肌DNA呈云梯状改变,而GST I/R组无此改变.与I/R组比较,GST I/R组缺血心肌凋亡细胞明显减少(TUNEL染色).流式细胞仪测定I/R组及GST I/R组缺血心肌凋亡率分别为(19.36±1.85)%和(5.46±1.12)%.I/R组的缺血心肌Fas和Bax蛋白表达较非缺血心肌高(P＜0.01),Bcl-2/Bax比例较非缺血心肌低(P＜0.01);而在GST I/R组,Fas和Bax蛋白表达较I/R组的低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比例较I/R组高(P＜0.01).结论 GST可减少家兔心肌细胞凋亡,其机制与调控凋亡相关基因Fas、Bax和Bcl-2的蛋白表达有关.     

莱菔硫烷对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:H9C2心肌细胞随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)和SFN预处理组(10μmol/L SFN预处理细胞12 h后,进行缺氧/复氧处理)。采用倒置显微镜观察各组细胞形态及凋亡程度,CCK8法检测各组H9C2心肌细胞存活率,Western blot法检测血红素氧化酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,H/R组和SFN预处理组心肌细胞存活率均降低(P均0.01),HO-1、NQO1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平及Bcl-2/Bax均升高(P均0.01)。与H/R组相比,SFN预处理组的细胞生长状态较好,细胞存活率明显提高[(76.00±0.52)%对(55.73±0.43)%,P0.01],HO-1(3.24±0.01对1.86±0.01,P0.01)、NQO1(1.67±0.01对0.95±0.01,P0.01)和Bcl-2(0.70±0.00对0.48±0.01,P0.01)蛋白表达水平及Bcl-2/Bax(1.22±0.01对0.56±0.00,P0.01)均明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(0.57±0.00对0.85±0.01,P0.01)。结论:SFN对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,可能与促进HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达有关。     

热休克蛋白70对供心细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠供心心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠18只,分为两组:对照组(C,n=9),腹腔注射生理盐水0.5ml,24h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),腹腔注射24h后取离体心脏,处理方法同C组。运用免疫组化SP法测定心肌HSP70含量、Bcl-2、Bax蛋白的含量以及相关生化指标并进行统计学处理。结果HSP70含量E组(17.78±1.82)较C组(5.22±1.05)明显增高(P<0.01),Bcl-2的表达E组(41.88±5.09)较C组(31.36±3.27)明显增多(P<0.01),Bax的表达E组(22.61±3.49)较C组(40.52±4.17)明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值E组(1.86±0.11)较C组(0.77±0.01)明显增高。生化指标E组明显优于C组。结论心肌HSP70高表达对供心具有明显的保护效应,其促进心肌抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2/Bax比率,以此抑制心肌细胞凋亡,从而发挥其对供心心肌细胞保护作用。     

缬沙坦对大鼠缺血-再灌注心肌caspase-3活性及凋亡相关基因表达的影响

目的：观察缬沙坦对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)时心肌细胞天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：以SD大鼠建立I/R模型,设立I/R组、缬沙坦组和假手术组。用分光光度法检测caspase-3活性,免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果：同I/R组相比,缬沙坦组心肌组织caspase-3活性明显降低(P＜0．05),Bax蛋白表达显著降低(P＜0．01),而Bcl-2蛋白表达显著增高(P＜0．01),Bax/Bcl-2显著降低(P＜0．01),心肌细胞超微结构损伤明显减轻。结论：缬沙坦通过抑制caspase-3活性、调控Bax/Bcl-2表达而抑制心肌I/R所致细胞凋亡。     

藏红花酸预处理对心肌缺血大鼠凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax表达的影响

目的:研究藏红花酸预处理对心肌缺血大鼠凋亡相关蛋白bcl-2与bax表达的影响。方法:将30只Wistar雄性大鼠采用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心肌缺血模型,缺血45min后,再灌注3h。后随机分为3组,每组10只。假手术组(Sham组)只穿线不结扎;缺血再灌注组(I/R组)0.5%CMC-Na按10ml/kg灌胃1周;藏红花酸组(CRO组)藏红花酸(50mg/kg)灌胃1周。实验结束后用TTC染色测定心肌的梗死面积;免疫组织化学方法检测心肌组织Bax、Bcl-2蛋白的表达;荧光定量PCR方法检测Bax、Bcl-2的mRNA表达。结果:与I/R组比较,CRO组梗死面积、Bax蛋白表达明显降低(P0.01),Bax mRNA表达降低(P0.05);Bcl-2蛋白表达、Bcl-2mRNA表达及Bcl-2/Bax的比值明显升高(P0.01)。结论:藏红花酸预处理对缺血再灌注损伤心肌细胞有保护作用,其机制可能与上调凋亡抑制蛋白Bcl-2、下调促凋亡蛋白Bax的表达有关。     

细胞分裂周期蛋白42在大鼠乳鼠心肌细胞缺血再灌注中的作用

目的:研究细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle42,Cdc42)在大鼠乳鼠心肌细胞缺血/再灌注(I/R)中的作用及其可能的作用机制。方法:分离培养SD大鼠心肌细胞,建立I/R模型。实验分组:①正常对照组;②I/R组;③Oligofectamine脂质体组(脂质体组);④脂质体+反义寡脱氧核苷酸组(As组);⑤脂质体+错义寡脱氧核苷酸组(Ms组);⑥C-Jun氨基末端激酶(JNK)阻断剂(SP600125)+脂质体+As组(SP600125+As组);⑦SP600125+脂质体+Ms组(SP600125+Ms组)。用流式细胞仪测定细胞凋亡率,Westernblot测定Cdc42、JNK、p-JNK、Bax、Bcl-2的蛋白含量。结果:I/R组与正常对照组相比较,Cdc42的表达、心肌细胞凋亡率和JNK的磷酸化程度增高,Bcl-2/Bax降低;As组Cdc42的表达、心肌细胞凋亡率和JNK磷酸化程度低于I/R组、脂质体组和Ms组,且Bcl-2/Bax的比值在这4组中是最高的,Cdc42的表达、心肌细胞凋亡率、JNK磷酸化程度和Bcl-2/Bax的比值在I/R组、脂质体组和Ms组之间差异无统计学意义;SP600125+As组较As组、SP600125+Ms组较Ms组JNK的磷酸化程度降低,SP600125+As组与SP600125+Ms组JNK磷酸化程度比较差异无统计学意义。结论:Cdc42在I/R中可促进心肌细胞凋亡,而As可降低I/R中心肌细胞凋亡率,Cdc42在I/R中促进细胞凋亡通过JNK、Bcl-2和Bax信号通路起作用。     

脂质胞壁酸诱导的预适应对自发性高血压大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨脂质胞壁酸(LTA)诱导的延迟预适应对自发性高血压大鼠(SHR)心脏缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与其作用。方法:采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注复制大鼠心肌I/R模型,结扎前24h注射LTA,检测心肌再灌注60min后血清心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH),并用dUTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,用Western Blot方法检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达。同时采用实时RT-PCR技术和Western Blot方法分别检测心肌再灌注末iNOS mRNA和蛋白的表达。结果:与I/R组比较,LTA预适应组能显著减少室性心律失常(VA)评分值(P<0.01);LTA预适应还能明显减少I/R后血清CK-MB和LDH的漏出(P<0.01,P<0.05),减少心肌细胞凋亡(P<0.01),凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显上调(P<0.01),而Bax蛋白表达则下调(P<0.01)。再灌注末,预适应组iNOS mRNA的平均相对表达量较I/R组增加了0.71倍(P<0.01),LTA预适应组iNOS蛋白的表达量较I/R组增加了0.96倍(P<0.05)。不论在LTA预适应前或缺血前期给予iNOS抑制剂氨基胍或是单独给予氨基胍,上述观测指标均与I/R组比较差异无统计学意义。结论:LTA预适应能显著减轻SHRI/R导致肥厚心肌的坏死和细胞凋亡,iNOS/NO作为触发和效应环节在介导LTA预适应中发挥关键作用。     

缺血预处理对在体家兔房室结细胞凋亡的影响

目的在家兔急性心肌梗死模型中观察缺血预处理（IP）对在体房室结细胞缺血/再灌注（I/R）的作用及Bc l-2和Bax蛋白表达的影响。方法健康家兔40只,随机分5组,假手术组,缺血/再灌注A组和B组,预缺血A组和B组。通过结扎右冠状动脉建立家兔房室结缺血/再灌注模型,观察经过IP后,以不同的再灌注时间30 m in,180m in为实验终点,检测心脏内血液心肌酶学变化,电镜观察超微结构,原位细胞凋亡检测法检测房室结细胞凋亡的变化,免疫组化方法检测Bc l-2和Bax蛋白的表达情况。结果IP组较I/R组,房室结细胞凋亡显著减少（P<0.05）,且显著提高了Bc l-2蛋白的表达（P<0.05）,降低了Bax蛋白的表达（P<0.05）。结论I/R损伤可诱导房室结细胞凋亡,IP可通过上调Bc l-2蛋白的表达而同时下调Bax蛋白表达,从而减少房室结细胞的凋亡。     

兔甲亢性心肌病不同左室构型心肌细胞的凋亡

目的:观察兔甲亢性心肌病不同左室构型心肌细胞的凋亡情况及相关bcl 2、bax蛋白表达的变化。方法: 将30只新西兰纯种白兔分为实验组(n=20)和对照组(n=10),实验组兔每日腹腔注射左旋甲状腺素(45 μg/kg体质量)共4周建立甲亢动物模型,对照组兔每日腹腔注射同等剂量的生理盐水共4周。4周后,对两组兔行常规超声心动图参数测定。实验组依据超声参数又分为向心性肥厚亚组(CH亚组)和离心性肥厚亚组(EH亚组)。第4周末处死所有兔,取心肌组织,在透射电镜下观察心肌细胞,应用原位末端标记法标记凋亡的心肌细胞,应用免疫组织化学染色法检测bcl 2、bax蛋白的表达。结果: ①透射电镜观察CH亚组和EH亚组均有大量的凋亡细胞,且凋亡指数(AI)显著高于对照组(均P<001),EH亚组的AI又显著高于CH亚组(P<001)。②CH亚组和EH亚组bcl 2蛋白的表达显著低于对照组(均P<001),EH亚组又显著低于CH亚组(P<001);CH亚组和EH亚组bax蛋白的表达显著高于对照组(均P<001),EH亚组又显著高于CH亚组(P<001)。CH亚组和EH亚组bcl 2/bax的比值显著低于对照组(均P<001)。结论: 兔甲亢性心肌病不同左室构型具有不同程度的心肌细胞凋亡,说明细胞凋亡机制参与了该病的病理过程,其作用与下调bcl 2蛋白的表达、上调bax蛋白的表达有关。     

黄芩苷对肺动脉高压大鼠模型的治疗作用及可能的机制

目的:观察黄芩苷对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压模型的治疗作用和肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法:将48只大鼠随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀阳性对照组（辛伐他汀组）、3个黄芩苷剂量组（20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg,简称低、中、高黄岑苷组）,每组8只。通过皮下注射野百合碱诱导建立大鼠肺动脉高压模型,辛伐他汀组给予2 mg/kg灌胃,药物治疗组分别给予黄芩苷20、40、80 mg/kg灌胃。观察黄芩苷对肺动脉压、右室肥大指数的影响。将肺组织切片HE染色后,观察肺动脉的形态学变化。用免疫组化染色法检测肺血管平滑肌细胞中Bcl-2、Bax表达的变化。结果:与模型组比较,高、中黄芩苷可显著降低野百合碱所致大鼠的平均肺动脉压(P<0.01),高黄芩苷可降低其右室肥大指数(P<005);高、中黄岑苷可显著降低模型大鼠肺动脉中膜厚度比（P<0.01）和中膜面积比（P<0.01）;高、中黄芩苷可增加Bax的表达率（P<0.01）,降低Bcl-2的表达率（P<0.01）。结论:一定剂量的黄芩苷可有效降低野百合碱诱导的模型大鼠的肺动脉压,逆转肺动脉重构。黄芩苷可能是通过抑制肺动脉中膜平滑肌细胞增殖、促进其凋亡而发挥作用的。     

蛋白酶激活受体-2对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨蛋白酶激活受体2(PAR-2)对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(sham组),缺血再灌注组(I/R组)和丝-亮-异亮-甘-精-亮-酰胺(SLIGRL-NH2)低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(1 mg/kg)、高剂茸组(3 mg/kg),每组8只,建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型.采用末端标记法(TUNEL)和DNA琼脂糖凝胶电泳的方法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,实时荧光定量PCR检测心肌细胞PAR-2mRNA的表达情况.结果 (1)SLIGRL-NH2中、高剂量组凋亡指数明显低于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为23.36%±3.77%、15.56%±1.24%比I/R组35.19%±4.50%,P<0.05～0.01);凋亡相关蛋白Bcl-2高于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为0.983±0.103、1.197±0.119比I/R组0.761±0.043,P<0.05～0.01);凋亡相关蛋白Bax的表达显著低于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为0.646±0.041,0.578±0.029比I/R组0.759±0.035,P均<0.01);PAR-2mRNA的表达明显高于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为3.73±0.45,7.62±0.81比I/R组1.42±0.41,P均<0.01).(2)DNA凝胶电泳结果显示,I/R组、SLIGRL-NH2低剂量组可见到DNA梯带,假手术组和SLIGRL-NH2中、高剂量组则无明显DNA梯带.结论 PAR-2激动剂SLIGRL-NH2可上调并激活PAR-2,并通过增加Bcl-2/Bax的比值抑制大鼠缺血再灌注心肌细胞的凋亡而发挥心肌保护效应,且该作用具有一定的剂量依赖效应.     

螺内酯对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对心肌缺血再灌注损伤(I/R)时细胞凋亡的影响。方法:30只新西兰家兔随机分为3组:假手术(SHAM)组、缺血再灌注(I/R)组和制备I/R模型前应用螺内酯组(SPI)。测量左心室功能、光镜及电镜观察标本病理形态改变,免疫组化观察Bcl-2和Bax表达,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡程度。结果:1.I/R组心功能较SHAM组明显下降,SPI组较I/R组改善;2.SHAM组心肌结构完整,I/R组心肌结构损害严重,SPI组心肌结构损害较轻;3.SPI组Bcl-2表达阳性率高于SHAM组与I/R组,I/R组Bax阳性表达率高于SHAM与SPI组;4.TUNEL结果显示,I/R组细胞凋亡程度高于SHAM与SPI组。结论:螺内酯减轻I/R中心肌细胞凋亡程度。     

兴奋β3受体对快速心房起搏家兔心房肌细胞ICa,L的影响

目的:观察兴奋β3肾上腺素能受体（β3受体）对快速心房起搏(rapid atrial pacing,RAP)家兔心房肌细胞L型钙电流（ICa,L）的影响,为探索心房颤动（AF）的发病机制及治疗提供新的思路。方法: 35只20~25 kg家兔随机分组:1.离体部分:①假手术组（Sham组,n=7）:单纯开胸、安装起搏器不予起搏,1周后分离心房肌细胞,记录ICa,L（Sham组）。②手术组(n=7):以600次/min RAP 1周后,分离心房肌细胞,记录ICa,L（RAP组）;向细胞中加入β1、β2受体阻滞剂Nadolol及β3受体激动剂BRL 37344（BRL）,记录ICa,L（RAP+BRL组）;再加入β3受体特异性阻滞剂SR 59230A（SR）,记录ICa,L（RAP+BRL+SR组）。2.在体部分:①RAP组（n=7）:单纯RAP 1周;②RAP+BRL组（n=7）:RAP后给予Nadolol及BRL 1周;③RAP+BRL+SR组（n=7）:RAP后给予Nadolol、BRL及SR 1周。测定各组心房肌一氧化氮（NO）、环-磷酸鸟苷（cGMP）的含量及cGMP依赖性蛋白激酶（PKG）蛋白的表达。结果: ①与Sham组相比,RAP组ICa,L明显减小（P<001）;②与RAP组相比,RAP+BRL组ICa,L明显减小（P<001）,NO、cGMP的含量及PKG蛋白的表达明显增加（均为P<005）。③与RAP+BRL组相比,RAP+BRL+SR组ICa,L明显增大（P<001）,NO、cGMP的含量及PKG蛋白的表达明显减少（P<001,P<001,P<005）。结论: 兴奋β3受体可激活NO cGMP PKG通路并同时减小RAP家兔心房肌细胞ICa,L。     

缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤过程中内质网应激的影响研究

目的 探讨缺血后处理(IPostC)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中细胞凋亡的影响,以及特异性内质网应激(ERS)损伤相关蛋白Grp78(葡萄糖调节蛋白78)和Caspase 12(半胱氨酸蛋白酶12)的蛋白表达水平的变化和意义。方法 Wistar 大鼠24只随机分为假手术组、I/R组(缺血再灌注组)、IPostC组(缺血后处理组)3组,每组8只。分别测定各组心肌缺血和梗死面积、细胞凋亡指数和Caspase12、 Grp78蛋白表达检测。结果 假手术组未见梗死心肌和缺血心肌,IPostC组心肌缺血区面积(46.46±2.13)%和梗死区面积(41.02±2.93)%均明显小于I/R组(53.31±3.87, 52.19±3.44)%,P值均<0.01。假手术组心肌细胞凋亡指数(6.70±2.25)%明显低于I/R组(26.92±1.91)% 、IPostC组(20.54±3.05)%,P值均<0.001。心肌组织Caspase12蛋白表达水平在假手术组(0.11±0.01)明显低于I/R组(0.41±0.06)和IPostC组(0.35±0.06),并且IPostC组低于I/R组,P值均<0.01;心肌组织Grp78蛋白水平在假手术组(0.13±0.03)亦明显低于I/R组(1.04±0.16)和IPostC组(1.17±0.14),并且IPostC组高于I/R组,P值均<0.01。结论 本研究从动物实验证实IPostC能减轻心肌细胞凋亡,而ERS激活参与了大鼠MIRI过程,推测IPostC在大鼠MIRI过程中可能通过调节ERS途径抑制细胞凋亡,改善MIRI。     

大鼠脑缺血半暗带神经元蛋白表达和凋亡的动态变化研究

目的观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗带神经元蛋白表达和凋亡的动态变化。方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组8只和模型组40只,模型组又根据缺血再灌注时间分为6、24、48 h和3、5 d 5个时间点,各时间点8只。免疫组织化学法观察各组大鼠脑缺血半暗带神经元Bcl-2及Bax蛋白表达,TUNEL法观察相应区域神经元凋亡的动态变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠缺血再灌注6 h Bcl-2、Bax阳性细胞明显增加,随时间延长,Bcl-2阳性细胞逐渐下降,48 h最低;而Bax阳性细胞则逐渐增加,于48 h达到高峰;Bcl- 2/Bax比值变化趋势与Bcl-2阳性细胞相一致;各时间点均可见神经元凋亡,48 h达高峰(P<0.01)。相关分析显示,神经元凋亡与Bax蛋白表达呈正相关(r=0.352,P<0.05),与Bcl -2和Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.517,r=-0.529,P<0.01)。结论大鼠脑缺血半暗带存在大量神经元凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值失衡有关。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡诱导因子的表达及其与神经细胞凋亡的关系

目的观察大鼠脑缺血再灌注(I/R)后凋亡诱导因子(AIF)的表达,探讨I/R脑区AIF变化与神经细胞凋亡的关系。方法应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,TTC染色观察梗死灶的形成,应用原位末端标记(TUNEL)和免疫组化技术分别观察大鼠假手术组、MCAO90min再灌注0、3、6、12、24、48、72h时额顶叶皮层缺血脑区AIF表达及神经细胞凋亡程度的变化。结果脑I/R24h,TTC染色见明显的梗死灶形成。除缺血90min凋亡细胞数量与假手术组比较无统计学意义外,其余各指标与假手术组相比均有统计学意义(P<0.01),除6与12h以及24与48hAIF含量的差异无统计学意义,24与48h凋亡细胞数量的差异无统计学意义外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论I/R可诱导AIF阳性细胞表达增加,并引起神经细胞凋亡。     

通心络胶囊减轻再灌注诱导的家兔心肌细胞凋亡效应的研究

目的观察通心络胶囊的抗心肌细胞凋亡效应,并探讨凋亡相关基因蛋白Bcl-2和Bax在其中的作用.方法制备在体兔心肌缺血/再灌注模型,并随机分成3组,观察各组心肌梗死范围、心肌细胞凋亡以及Bcl-2和Bax的表达.用氯化三苯基四氮唑(TTC)确定心肌梗死范围.心肌细胞凋亡采用末端标记法(TUNEL)和DNA琼脂糖凝胶电泳(DNA Laddering)检测,Bcl-2和Bax的表达用原位免疫组化检测.结果通心络组能明显缩小心肌梗死范围,凋亡细胞较生理盐水组稀疏,生理盐水组梗死周边心肌组织DNA呈云梯状条带,通心络组则较为整齐.结论通心络可抑制再灌注诱导的心肌细胞凋亡,抑制Bcl-2、Bax的表达.