涎腺腺样囊性癌转移的研究进展

涎腺腺样囊性癌 (salivaryadenoidcysticcarcino ma ,SACC)是最常见的涎腺恶性肿瘤之一 ,自 185 6年由Billroth首先描述并命名为“圆柱瘤”(cylindro ma)以来 ,就一直受到重视。其独特的生物学特征吸引众多的肿瘤学工作者围绕着SACC进行了大量研究。人们试图通过破译SACC某一特性的机制 ,得到关于肿瘤生物学行为尤其是侵袭性强和远处转移的规律性认识。免疫组化和分子生物学技术的应用促进了这方面研究的深入开展 ,现做一综述。1　临床特征　　SACC较易发生远处转移 ,瘤体较大者、局部有淋巴结转移者更易发生远处转移 ,且易沿着血管…     

涎腺腺样囊性癌40例临床病例分析

[目的]通过分析40例涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）临床病例,了解其发病情况,探讨影响SACC的预后因素。[方法]选择1986年8月～2002年6月在大连医科大学附属第一医院口腔颌面外科诊治的涎腺恶性肿瘤手术患者108例,均经病理科确诊,其中腺样囊性癌40例。肿瘤分期按UICC（2002年）TNM分类进行;肿瘤病理参考WHO（1991年）的涎腺肿瘤组织学新分类法。[结果]SACC占涎腺恶性肿瘤的37.04%,腮腺和颌下腺多发,平均患病年龄51.83岁,男女比为1∶1;腺样囊性癌的死亡原因主要是局部复发和远处转移,发生在颌下腺和腭部及其他小涎腺的SACC复发率和转移率高,Ⅲ和Ⅳ期相对于Ⅰ和Ⅱ期的复发率高,实性型比腺样-管状型SACC的复发率和转移率高,神经受侵者比非神经受侵者SACC的复发率和转移率高。[结论]SACC是最常见的涎腺恶性肿瘤;SACC术后复发率和转移率较高,这与肿瘤的发病部位、临床分期、病理分型及有无神经侵袭情况具有相关性。     

涎腺腺样囊性癌嗜神经性的相关临床病理学研究

目的：探讨涎腺腺样囊性癌嗜神经性的相关临床病理因素。方法：对５０例濞生癌进行组织分型,嗜神经性观察,同时应用免疫组织化学方法对Ｓ－１００、神经特异性烯酶及细胞粘附分子的表达与该肿瘤嗜神经性关系进行研究。结果：涎腺腺样囊性癌嗜神经性与组织分型,Ｓ－１００蛋白,神经特异性烯醇酶的表达及二者的共同表达无明显关系,而与神经细胞粘附分子的表达密切相关。结论：涎腺腺样囊性癌嗜神经性与神经细胞粘分子的表达密切相     

涎腺腺样囊性癌热点问题研究

本文在回顾国内外涎腺腺样囊性癌研究的基础上,提出了腺样囊性癌研究中的几个热点问题:(1)腺样囊性癌的嗜神经侵袭特性;(2)腺样囊性癌的远处转移;(3)腺样囊性癌治疗的展望.     

涎腺腺样囊性癌的血行转移(附6例报告)

涎腺腺样囊性癌约占涎腺恶性肿瘤的１０％，是涎腺常见的恶性肿瘤之一，该瘤具有特殊的生物学行为，在治疗后容易复发，其血行转移的问题，也越来越受到人们的重视〔１～５〕。我科１９６７～１９９７年间共收治３５例涎腺腺样囊性癌，在随访过程中发现６例血行转移，现报...     

涎腺腺样囊性癌淋巴结转移影响因素及与预后关系分析

目的探讨涎腺腺样囊性癌（ACC）颈部淋巴结转移的影响因素及其对预后的影响,为选择合理治疗策略提供参考。方法回顾性分析129例涎腺ACC患者的临床和随访资料,均行原发灶根治性切除手术。观察患者淋巴结转移情况,分析淋巴结转移的影响因素及其对预后的影响。结果本组患者淋巴结转移率为11.6%,其中口咽部的患者淋巴结转移率最高,达60.0%。性别、年龄、肿瘤病理分级、有无周围神经侵犯、有无脉管瘤栓对涎腺ACC淋巴结转移无影响（均P＞0.05）。大涎腺ACC与小涎腺ACC淋巴结转移率比较无统计学差异（P＞0.05）。原发灶位于口咽、鼻腔鼻窦以及肿瘤T分期3~4期是涎腺ACC淋巴结转移的影响因素（均P＜0.05）。有淋巴结转移涎腺ACC患者5、10年总生存率为46.7%、15.6%,无淋巴结转移患者5、10年总生存率为81.8%和58.2%,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;有淋巴结转移患者5、10年无复发转移生存率分别为14.4%、7.2%,无淋巴结转移患者5、10年无复发转移生存率分别为63.6%、42.1%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论淋巴结转移是涎腺ACC患者重要的不良预后因素,较晚T分期和淋巴结引流丰富部位的ACC较易发生淋巴结转移,对于这部分ACC应行颈淋巴结清扫。     

涎腺腺样囊性癌中相关抑癌基因的研究进展

涎腺腺样囊性癌（ACC）是一种发病率较高的涎腺恶性肿瘤,具有嗜神经侵袭和肺转移特性,其发生和发展是多个基因及产物共同作用的结果.传统治疗的效果并不理想,大量的临床研究已初步证实,ACC的癌细胞中存在多个抑癌基因启动子区的高甲基化,从而使细胞失去调控呈无限增殖.目前所研究的基因大多涉及癌细胞的发生、黏附、周期调控和信号转导等方面,对这些基因的研究关系到肿瘤的诊断、治疗及预后评价.     

WAVE3基因表达与涎腺腺样囊性癌远处转移的关系

目的 探讨WAVE3基因表达与涎腺腺样囊性癌（ACC）远处转移特性的相关关系。方法 回顾性分析2004年6月至2010年6月头颈外科收治的47例头颈部涎腺ACC患者肿瘤标本,采用免疫组织化学方法检测WAVE3基因在肿瘤中的表达情况,观察WAVE3基因表达水平与肿瘤远处转移及总生存率的关系。结果WAVE3基因的表达阳性与阴性,在性别、年龄、T分期、淋巴结转移、临床分期等方面差异均无统计学意义（均P＞0.05）,在远处转移方面差异有统计学意义（P＜0.01）,与总生存的关系不确切（P＞0.05）。结论WAVE3基因表达阳性与阴性在涎腺ACC远处转移率上差异有统计学意义,对于总生存无明显影响。     

涎腺腺样囊性癌的临床特征及预后分析

目的 分析涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)患者的临床特征,探究其与预后的相关性。方法 回顾性分析收集2016年1月~2021年1月就诊于笔者医院口腔科腺样囊性癌患者的病例资料38例,采用统计学方法分析研究其临床特征和预后。结果 SACC好发生于腭部、口底等部位,平均年龄为56.7岁,易转移至肺部、骨组织及肝脏等部位,其中T₃和T₄分期的患者有17例(44.7%),22例(57.9%)有神经侵袭(perineural invasion, PNI),17例(44.7%)侵犯淋巴结,术后复发13例(34.2%),PNI与术后复发有一定的相关性(P<0.05),淋巴结侵犯与生存率无相关性(P>0.05),手术切缘阳性和术后复发对预后生存率相关(P<0.05),5年生存率为73.7%。结论 SACC是一种常见的涎腺恶性肿瘤,SACC手术切缘阳性、术后复发与预后生存率差异有统计学意义,淋巴结侵犯与预后生存率无显著相关性。     

用抑制性消减杂交方法筛选人肾癌相关基因

目的 应用抑制性消减杂交技术构建人肾癌差异表达基因文库并进行差异表达基因筛选.方法 以肾癌细胞株RLC-310和肾近曲小管细胞株HK-2互为实验组和对照组,提取mRNA,应用抑制性消减杂交技术进行正反两向消减杂交,获得人肾癌细胞差异表达基因文库,结合反向Northern斑点印迹杂交,筛选差异基因克隆,并进行测序分析.结果 正向和反向文库共包含1200多个阳性克隆,经斑点杂交筛选后,对213个差异克隆进行测序并经BLAST分析,得到144个差异表达基因,与肾癌相关的高表达基因67个,低表达基因77个,其中新EST 14个,未知功能基因21个;对测序基因进行聚类分析发现与细胞生长、黏附、凋亡等肿瘤细胞生物学行为相关.结论 该文库质量可靠,所筛选出的差异基因和新的基因为进一步筛选肾癌特异性相关基因,绘制肾癌差异基因表达谱,最终阐明肾癌发生、发展、转移机制提供了实验材料和研究靶点.     

Identification of differentially expressed genes in anagen dermal papilla by suppression subtractive hybridization

Background We constructed a cDNA subtractive library of dermal papilla cells (DPCs) in anagen with suppression subtractive hybridization (SSH) technique and clone differentially expressed genes related to DPCs in anagen. Methods Total mRNA was isolated from DPCs of anagen and telogen follicles. Moreover, singlestrand (ss) and double-strand (ds) cDNAs were synthesized in turn using SMART PCR cDNA synthesis technology, ds cDNAs then were digested with Rsa I and divided into two groups, and ligated to the specific adaptor 1 and adaptor 2R, respectively. After cDNAs were hybridized with each other twice and underwent two rounds of nested PCR. PCR products were ligated with arms of T/A plasmid vectors to set up the subtractive library. Selected clones were demonstrated by reverse Northern blot and sequenced. The acquired sequence data were aligned against the Genbank nucleotide database. Results cDNA subtractive library of DPCs in anagen follicles was set up successfully with high subtractive efficiency, Thirty-five genes were identified in this study with 22 known functional genesand 13 unknown functional genes. Conclusions All results confirm the effectiveness and sensitivity of SSH in detecting differentially expressed genes from a small amount of clinical samples. Information about such alterations in gene expression could be useful for elucidating the genetic events in hair follicle growth regulation.     

抑制性消减杂交技术检测骨髓CD34+细胞基因差异表达

目的 检测、比较骨髓和动员外周血2种来源不同的CD34+细胞基因表达的差异。方法 从一健康供者分别获取骨髓和动员外周血,分离出CD34+细胞,利用抑制性消减杂交技术检测、比较该2种来源不同的CD34+细胞的基因表达差异。结果在骨髓CD34+细胞中共有21个基因高表达,主要涉及2类:（1）与细胞周期S期、G2期和M期转化相关的基因;（2）C/EBP（CCAAT/增强子结合蛋白）转录因子家族。结论骨髓和外周血CD34+细胞在基因表达上具有明显的不同,大部分骨髓CD34+细胞处于S期、G2期和M明,提示骨髓CD34+细胞比外周血CD34+增殖活跃。     

食管癌消减cDNA文库的构建

目的 :采用消减抑制杂交技术 ,研究正常食管粘膜和食管癌组织之间的基因表达差异状况 ,分离食管癌相关基因片段 ,构建食管癌的消减cDNA文库。方法 :以食管癌癌组织为测试子 (tester) ,以正常食管粘膜组织为驱赶子 (driver) ,用消减抑制杂交方法分离食管癌差异表达片段。将该差异表达片段克隆至T载体 ,经蓝白斑筛选后 ,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒 ,构建食管癌消减cDNA文库。结果 :用消减抑制杂交技术分离食管癌差异表达片段 ,经蓝白斑筛选 ,得到 2 2 0个白色克隆 ;再用PCR方法快速筛选出 10 0个两端分别含连接子Adaptor1及Adaptor2R的阳性重组质粒 10 0个 ,从而成功地构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库。结论 :构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库。消减抑制杂交技术能快速有效地分离差异表达基因 ,方法简便、灵敏度高。使用PCR法快速筛选阳性克隆 ,对于消减文库的构建具有重要意义     

应用抑制消减杂交克隆支气管哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因

目的 探讨嗜酸细胞在支气管哮喘发病中的分子机制。方法 提取1名哮喘发作病人嗜酸细胞总RNA为实验子,治疗后作为对照的嗜酸细胞的RNA为驱动子。检测子、驱动子的总RNA由SMART cDNA合成方法合成双链cDNA,进而由抑制消减杂交方法获得消减杂交产物。消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库,对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取400个克隆进行PCR扩增,阳性率约为80%。部分阳性克隆经2轮杂交筛选及序列对比后获得6个差异片段,涉及与编码炎症介质、细胞信号传导、能量代谢和细胞凋亡相关的基因。结论 抑制消减杂交技术有效地克隆了支气管哮喘发作期和缓解期嗜酸细胞差异表达的基因,为阐明嗜酸细胞在支气管哮喘发病中的分子机制奠定了良好的基础,并为临床防治支气管哮喘、寻找新的药物和方法提供了依据。     

Suppression subtractive hybridization for identifying differentially expressed genes in renal cell carcinoma

Objective To construct a renal cell carcinoma (RCC) cDNA subtractive library using suppres sion subtractive hybridization.Methods Polyadenylated RNA ［Poly (A)(+) RNA］ was isolated from tissues of RCC and norm al kidney, and single- strand cDNAs and double-strand cDNAs were synthesized in turn. RCC cDNAs were divided into two groups and ligated to the specific adaptors l and 2, and then h ybridized with normal kidney cDNA twice with two rounds of suppression PCR. Sec ond round PCR products were cloned to T/A plasmid vectors to set up the subtract ive library. One hundred clones were randomly picked to perform enzyme digest a nalysis, and some underwent sequence analysis and Northern blot to identify RCC specifically expressed genes. SMART RACE procedure was operated to clone full l ength novel RCC specifically expressed genes.Results A human RCC subtractive library with high subtractive efficiency was successfull y set up. The amplified library contains 350 positive clones. Random analysis of 100 clones with enzyme restriction showed that 85 plasmids in the clones cont ained 50-400 bp inserts. Sequence analysis was performed for 10 clones. All t he 10 sequences were unknown before and derived from 6 unique, novel genes among which the cDNA insert RCC18 had five copies. Northern blot analysis showed tha t RCC18 cDNA was highly expressed in RCC, but no signal could be detected in nor mal kidney. Using SMART RACE technique, we obtained the full length of the nove l gene RCC18.Conclusions The constructed cDNA subtractive library of human RCC is a highly efficient one and lays a solid foundation for large scale screening and cloning new and speci fic oncogenes or tumor suppressor genes of RCC. The novel specifically expresse d genes provided an important clue for studying the mechanisms of occurrence and development of RCC.     

应用抑制性消减杂交筛选失血性休克所致大鼠心肌差异表达基因

目的：失血性休克可导致大鼠心肌的缺血,缺氧,进而对心肌细胞造成严重损伤,本实验将利用抑制性消减杂交技术（Suppression subtractive hybridization SSH)研究失血性休克大鼠心肌的差异表达基因,以期通过基因线索寻找其损伤机制,方法：建立失血性休克大鼠模型,选其心肌,提取总RNA,构建cDNA文库,应用抑制性消减杂交技术筛选其差异表达基因,通过反向Northern杂交验证差异表达基因阳性克隆,并进行测序分析,登陆Genbank寻找同源性基因。结果：获得42个阳性结果,25个为高表达基因,17个为低表达基因,其中发现5个新的cDNA片段,结论：SSH技术是一种高效的筛选差异基因的方法,本实验发现失血性休克可导致大鼠45S rDNA基因转录起始区域,鼠半胱氨酸富含蛋白61及鼠血清诱导激酶等基因的差异表达,今后的工作中我们将进一步研究它们与失血性休克所致损伤的关系。     

化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析

目的构建化脓性链球菌高毒力株特异基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交技术(SSH),以从患者体内所分离链球菌为毒力菌株,分离特异表达基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选消减文库后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析。结果酶切产物为100～2 000bp,连接效率大于50%,消减组与非消减组差异明显,成功构建了化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性。结论用SSH及T/A克隆技术成功构建了人源化脓性链球菌高毒力株基因文库,5个未知的新序列有待于进一步的研究。     

神经营养因子与腺样囊性癌肿瘤生物学特性的关系

目的　研究神经营养因子 (NTFs)与涎腺腺样囊性癌(ACC)侵袭和转移的关系 .方法　用免疫组织化学及图像分析法观察 4 7例ACC组织中神经生长因子 (NGF)、胶质源性神经生长因子 (GDNF)及神经营养因子 3(NT 3)的表达与分布 ,统计学分析表达变化与肿瘤分类、神经侵袭的关系 .结果　在正常涎腺中 ,神经营养因子也有表达 ,其平均灰度值NT 3>NGF >GDNF ,在ACC肿瘤主要分布于细胞胞浆和间质 ,平均灰度值GDNF >NGF >NT 3.经统计学检验发现神经营养因子的表达变化与病理分型和神经侵袭有关而与肿瘤的转移无密切联系 .结论　神经营养因子在ACC肿瘤表达与正常涎腺相比并不相同 ,其高低与ACC肿瘤分类、神经侵袭均有密切关系 ,可能参与了肿瘤生物学特性的改变