Perthes病早期骨核素显像的变化

目的：探讨Perthers病早期骨核素显像的变化。方法：30只幼兔采取自身对照的方法，建立Parthes病早期动物模型，分别于实验第6周、第12周进行骨核素显像检查和病理学检查。结果：实验第6周时实验侧股骨头局部静脉回流障碍，但双侧股骨头局部动脉灌流量相同；第12周时实验侧股骨头局部动脉灌注量较对照侧减少，实验侧股骨头局部仍存在静脉回流障碍。实验侧出现骨坏死。结论：Perthes病的发生首先与局部静脉回流障碍有关。而不是动脉血流量减少。     

旋髂深动静脉髂骨瓣植骨治疗Perthes病

我院从1983-1989年采用旋髂深动静脉骼骨瓣植骨治疗Perthes病32例(34髋），效果满意，现总结分析如下。     

Chiari截骨术治疗大龄童Perthes病的远期疗效观察

目的 通过对大龄Perthes病患儿术后的长期随访，分析其手术治疗效果及预后。方法 复习1990～1995年6月间应用内移截骨术治疗的大龄Perthes病患儿40例，其中14例(15髋)获得长期随访，资料完整。结果 术后平均随访6年11个月。临床随访发现10例患者无疼痛，4例偶有轻度疼痛，均无明显跛行。结论 对大龄Perthes病患儿Chiari截骨术疗效优于转子内翻截骨术，但不能避免骺板早闭、大转子上移等并发症。     

自体骨髓基质干细胞治疗骨缺损的初步实验研究

目的 探讨自体骨髓基质干细胞修复兔桡骨远端骨缺损的可行性。方法 取兔髂骨骨髓，体外分离培养扩增骨髓基质干细胞，与生物材料混合后植入体内修复兔桡骨远端骨缺损。结果 12周后X片、大体标本、组织切片均显示缺损处有新骨形成。结论 自体骨髓基质干细胞移植是修复兔桡骨远端骨缺损的理想方法。     

川崎病冠脉损伤与MMP-2 MMP-9关系的实验研究

目的 测定川崎病（KD）小鼠基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的浓度和冠脉损伤（CAL）的程度,探讨其之间的相关性。方法 制备干酪乳杆菌细胞壁提取物LCWE （2.5 mg/mL）。4~6周龄BALB/C雄性小鼠80只,分为实验组与对照组,每组40只。实验组单次腹腔注射LCWE 1 mg,对照组予以等量磷酸缓冲盐溶液（PBS）注射。观察并记录小鼠实验过程中的一般情况及体质量变化;分别于注射后第1、3、7、28天取小鼠血清测定MMP-2、MMP-9浓度,并观察心脏、肝脏切片病理变化。结果 腹腔注射LCWE后,第3、7天实验组小鼠体质量、心脏重量、心脏重量/体质量均较对照组降低,差异有统计学意义（P<0.05）。实验组小鼠MMP-2、MMP-9浓度在实验前期均有逐渐上升趋势,而至第28天浓度降低,与对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 LCWE可导致小鼠CAL,MMP-2、MMP-9是能较好反映KD冠脉损伤的指标,或能为KD患儿的早期诊断提供依据。     

瘦素对绝经后骨质疏松大鼠骨髓基质细胞生物学活性影响的实验研究

目的 观察人瘦素(hLEP)对去卵巢大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)生物学活性的影响.方法 将3月龄雌性SD大鼠双侧卵巢去除后构建绝经后骨质疏松模型.术后12周检测大鼠股骨骨密度以确定建模成功.以全骨髓法培养BMSCs,添加hELP (100 ng/mL)予以刺激,并与对照组比较.观察体外hLEP对去卵巢大鼠BMSCs细胞形态、生长情况以及碱性磷酸酶(ALP)变化的影响.结果 成功构建SD大鼠骨质疏松模型.成功分离培养了去卵巢大鼠BMSCs.经hLEP刺激7d后的BMSCs形态无明显改变,相对于对照组,实验组细胞保持较好的增殖能力,其ALP活性的表达有显著提高(P＜0.05).结论 去卵巢大鼠BMSCs经hLEP刺激后其成骨分化能力有显著增强.     

人骨髓基质干细胞向神经元分化的实验方法改进

目的 改进人骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化的方法,使诱导分化后的神经元样细胞存活时间延长,为其将来可能的临床应用提供理论基础。方法 采用Percoll液分离成人骨髓基质干细胞(hBMSCs),体外扩增,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达．应用丁羟茴醚(BHA)和二甲基亚砜(DMSO),NT-3和PDGF定向诱导hBMSCs分化为神经元样细胞。结果 hBMSCs在体外扩增后,流式细胞检测结果显示CD29、CD44表达阳性,CD11b、CD45表达阴性;加入诱导剂一定时间后,细胞形态发生改变,同时神经丝蛋白表达阳性,胶质纤维酸性蛋白表达阳性。结论 成人骨髓基质干细胞在体外可分化为神经元样细胞和神经胶质样细胞,而且较单独使用BHA DMSO诱导的方法延长了诱导后的细胞存活时间。     

组织胞浆菌病1例

从骨髓涂片诊断组织胞浆菌病(Histoplas—miosis)在国内尚属少见，1970年陈孟君、江志生等报导3例，我们与其同期发现1例，现报道如下。     

烧伤小鼠血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响

目的　研究小鼠烧伤血清对离体培养的骨髓基质细胞的影响。方法　利用流式细胞仪、HE染色等技术观察小鼠烧伤后不同时间的血清对小鼠骨髓基质细胞 (BMSC)贴壁率和基质祖细胞 (CFU F)集落形成的作用及对不同剂量的6 0 Coγ射线体外照射后的BMSC的影响。结果　小鼠烧伤后 1～ 11d的血清对基质细胞贴壁率和CFU F的形成主要表现为抑制作用 ,13～ 15d的血清主要表现为刺激作用。小鼠烧伤后 15d的血清可明显减少 5 0、70Gy照射后BMSC的凋亡和坏死。 结论　小鼠烧伤后不同时间的血清对BMSC的作用不同 ,可能与血清内细胞因子的变化有关。     

骨髓间充质干细胞移植治疗兔深静脉血栓的实验研究

目的 研究骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）移植对兔深静脉血栓的治疗作用.方法 取新西兰大白兔40只,其中8只作为干细胞供体,余32只建立血栓模型,随机均分为4组.A、C组分别于建模3、10 d后,将含有107个BMSCs的DMEM悬液移植于股静脉中;B、D组分别于建模3、10 d后,将0.9%氯化钠注射液注入股静脉内.移植后14、28 d对病变段下腔静脉行HE染色及血管性血友病因子（vWF）免疫组化染色观察新生毛细血管数;移植后14 d采用Western blot法检测血栓组织中血管内皮细胞生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）蛋白的表达.结果移植后14、28 d计算每5个高倍视野新生毛细血管数,A、C组多于B、D组（P＜0.05）,C组多于A组（P＜0.05）,B组与D组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.各组VEGF、bFGF蛋白均有表达,A组VEGF、bFGF蛋白水平高于B组（P＜0.05）,C组高于D组（P＜0.05）,B、D组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 BMSCs移植能明显增加兔下腔深静脉血栓段中新生毛细血管数,改善血栓机化再通情况,同时能明显增加VEGF、bFGF的分泌,两者的正反馈作用能更好地促进血栓的机化和再通.     

应用密度梯度离心法分离扩增兔骨髓基质细胞的体会

目的探讨密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞(BMSc)的条件,为组织工程学选择合适的种子细胞奠定基础。方法采用密度梯度离心法将兔BMSc自小量骨髓中分离并培养,观察其增殖和生长特性,绘制生长曲线,测定分裂指数和贴壁率。结果兔．BMSc在第7代前性状稳定,生长曲线相似;第4天分裂指数最高为15％;传代后10h贴壁率高达90％。结论密度梯度离心法是分离兔BMSc的理想方法,BMSc能为未来组织工程提供足量种子细胞。     

组织工程化骨修复兔桡骨缺损的实验研究

目的 探讨骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)离体培养后与生物衍生骨(bio-derivcd bone,BDB)复合修复兔桡骨的节段性骨缺损的可行性.方法 将25只健康成年新西兰大白兔双侧桡骨制备成中段15mm的骨缺损,其中20只,将MSCs与生物衍生骨于体外复合培养后,通过手术将其植入右侧桡骨缺损处作为实验组;以单纯生物衍生骨植入左侧桡骨缺损处作为对照组:另5只为空白组不植入任何材料,在2、4、、8、12周各时间点分别行大体标本X线放射学检查、组织学观察,比较3组骨缺损修复的能力.结果 术后2、4、8、12周实验组与实验对照组放射学检查评价新骨生成,有显著性差异(P＜0.05).术后组织学检查新骨生成速度、生成量均有显著性差异(P＜0.05).空白对照组各时点均无新骨形成,最后缺损由纤维组织充填.结论 生物衍生骨能够与兔骨髓间充质干细胞体外复合培养,移植入异体新西兰大白兔后未见明显免疫排斥反应,是可以选择的细胞载体.MSCs/BDB复合物植入修复兔桡骨缺损能够加速新骨形成,修复能力明显优于单纯生物衍生骨植入.     

Macrophage inflammatory protein-3alpha influences growth of K562 leukemia cells in co-culture with anticancer drug-pretreated HS-5 stromal cells

Stromal cell monolayers have been an important means of studying the regulation of hematopoiesis, because they produce cytokines. Cytosine arabinoside, vincristine, daunorubicin, and doxorubicin are common drugs for hematological cancer therapy, and they may have some effects on bone marrow stroma during chemotherapy. The aim of this study was to elucidate interactions between the bone marrow stromal microenvironment and leukemic cells after drug treatment. We tested the hypothesis that human HS-5 stromal cells, pretreated with anticancer drugs, affected the growth of leukemic K562 cells by changing the cytokines in the culture microenvironment. Thereafter, proliferation of K562 cells increased nearly 2.5-fold compared the co-cultivation with drugs-pretreated HS-5 stromal cells and drugs-untreated HS-5 stromal cells. The results indicated that co-cultivation with HS-5 stromal cells pretreated with drugs caused significant K562 cell proliferation. Cytokines in the microenvironment were detected via the RayBio((R))Human Cytokine Antibody Array Membrane. The levels of the cytokines CKbeta, IL-12, IL-13, IGFBP-2, MCP-1, MCP-3, MCP-4, MDC, MIP-1beta and MIP-1delta were decreased, with a particularly marked decrease in MIP-3alpha. In co-culture medium, there was a 20-fold decrease in MIP-3alpha in daunorubicin-pretreated HS-5 cells and at least a 3-fold decrease in Ara-C-pretreated cells. This indicated a significant effect of anticancer drugs on the stromal cell line. Using phosphorylated Erk and pRb proteins as cell proliferation markers, we found that phosphorylation of these markers in K562 cells was inhibited during co-cultivation with drug-pretreated stromal cells in MIP-3alpha-supplemented medium and restored by MIP-3alpha antibody supplement. In conclusion, anticancer drug pretreatment suppresses the negative control exerted by HS-5 cells on leukemic cell proliferation, via modulation of cytokines in the microenvironment, especially at the level of MIP-3alpha.     

经冠脉移植自体骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究

目的　观察骨髓间充质干细胞 (MSC)植入急性心肌梗死 (AMI)区的转归及治疗作用。方法　通过冠脉转运的方法将幼猪自体骨髓MSC移植至AMI区 ,8周后观察MSC的分化、促血管生长情况 ,用核素门控心肌灌注显像观察心肌灌注的改善及心脏功能变化。结果　移植的细胞表达β肌球蛋白重链 (β MHC)和连接蛋白Connexin4 3,8周后 ,治疗组心肌灌注显像明显改善 ,毛细血管密度、左室射血分数均明显高于对照组 (P <0 0 0 1)。结论　骨髓MSC经冠脉转运在心肌微环境下可向心肌细胞分化 ,并能促血管生成及改善心功能     

线栓法制备Wistar大鼠局灶性脑缺血模型的实验研究

目的:建立一种简便可靠,创伤较小的Wistar大鼠局灶性脑缺血模型。方法:参照Zealonga及Koizum的线栓法,加以改进,制作Wistar大鼠局灶性脑缺血模型,随后行神经病学检查,测定脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并进行病理组织学检查,以观察模型的可靠性。结果:大鼠大脑中动脉阻断2小时(MCAO2h)后,出现神经功能障碍,缺血脑组织含水量及MDA含量增加,SOD活性下降,HE染色显示明显脑水肿。结论:该改良法制备的模型简便易行,结果可靠,创伤小,稳定性好,是用于研究局灶性脑缺血较为理想的实验动物模型。     

杜仲叶总提取物治疗去势大鼠骨质疏松症的实验研究

目的：研究杜仲叶总提取物对去势大鼠骨质疏松（osteoporosis,OP）模型的骨代谢调节作用机制。方法4月龄雌性SD大鼠32只,随机分成正常对照组（Control组,生理盐水灌胃）、去卵巢对照组（OP组,生理盐水灌胃）、雌二醇组（Estrogen组,雌二醇水溶液灌胃）、杜仲叶总提取物组（DZ组,杜仲叶总提物水溶液灌胃）。各组治疗3个月后,通过眼眶采血,测定血清中Ca2＋、P3＋和ALPase活力。并取大鼠的股骨和胫骨,用双能X线骨密度仪测定骨密度。结果血清中Ca2＋、P3＋和ALPase活力,DZ组与OP组比较,均有显著差异（P〈0.05）;股骨和胫骨BMD,DZ组与OP组比较,有显著差异（P〈0.05）。结论杜仲叶总提取物可以改善OP模型动物骨代谢,增加骨质疏松模型动物的骨密度,减少骨破坏,加强骨稳定,有效防治骨质疏松症。     

祛瘀消瘿颗粒治疗桥本氏甲状腺炎的实验研究

目的 观察袪瘀消瘿颗粒对桥本氏甲状腺炎动物模型的治疗作用.方法 通过实验性自身免疫性甲状腺炎动物模型实验,小鼠耳郭肿胀实验,大鼠棉球肉芽肿实验和小鼠迟发型超敏反应实验,考察祛瘀消瘿颗粒对桥本氏甲状腺炎的药理作用.结果 在袪瘀消瘿颗粒能够降低甲状腺球蛋白抗体(Tg-Ab)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)值(P<0.001或P<0.01或P<0.05),升高促甲状腺素(TSH)值(P>0.05),病理组织学检查表明,袪瘀消瘿颗粒能够改善腺上皮细胞增生和炎细胞浸润程度;袪瘀消瘿颗粒能够减轻小鼠耳肿胀程度,降低大鼠棉球肉芽肿程度;能够减轻小鼠迟发型超敏反应导致的小鼠耳肿胀程度.结论 袪瘀消瘿颗粒对桥本氏甲状腺炎具有良好的治疗作用.