恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区乙酰胆碱代谢的影响

目的：观察恐伤孕鼠对其仔鼠脑发育关键期大脑海马区乙酰胆碱代谢相关酶的影响。方法：采用恐伤孕鼠的方法造模,造模时间为整个妊娠期间。雌鼠分娩后,在仔鼠出生后14d取右侧大脑海马组织匀浆,检测乙酰胆碱代谢相关酶的活力。结果：模型组仔鼠海马区脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）和乙酰胆碱转移酶（CHAT）的活力均明显升高,与正常组和补肾组样本比较,有极显著性差异（P〈0.01）。结论：恐伤孕鼠可以影响仔鼠脑发育关键期大脑海马区乙酰胆碱代谢。     

恐伤孕鼠对其仔鼠脑发育的影响及其机制研究

目的:观察恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区组织形态学和血清甲状腺激素含量的影响,以探求肾虚对脑发育的影响及其机制.方法:采用恐伤孕鼠的方法造模,造模时间为整个妊娠期间.孕鼠分娩后,在仔鼠生后14天观察大脑海马区的组织结构;另断头取血,采用化学发光法检测血清FT3、FT4、TSH的含量.结果:光学显微镜下可见模型纽仔鼠大脑皮质包括海马区脑组织有散在片状水肿,水肿区域神经细胞数目减少,细胞较松散,部分组织结构模糊,神经细胞树突减少.另外,模型组与正常组和补肾组比较,血清丌4的含量显著降低(P＜0.05).结论:恐伤孕鼠可以导致仔鼠肾虚,脑组织结构的异常,引起脑发育障碍,其可能机制为血清甲状腺激素含量下降.     

恐伤孕鼠对其仔鼠生长发育的影响

目的:观察恐伤孕鼠对其仔鼠生长发育的影响。方法:受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常对照组、模型组、补肾组。采用猫恐吓孕鼠的方法造模,造模时间为整个妊娠期间。孕鼠妊娠20天时每组随机抽取1只,取出胎鼠2只断头取脑固定,行光镜观察;仔鼠出生当天每组随机抽取10只测其平均体重,在饲养期间,观察其出牙、开眼、张耳、被毛生长的情况,生后14天再测其平均体重后灌流固定仔鼠脑组织,行光镜观察。结果:出生当天,模型组仔鼠平均体重与正常对照组和补肾组比较,有显著性差异(P<0.05);生后14天,模型组仔鼠平均体重与正常对照组和补肾组比较,有极显著性差异(P<0.01)。模型组仔鼠出牙时间略晚于正常对照组及补肾组(P<0.05),其被毛生长时间明显晚于正常对照组及补肾组(P<0.01)。胎鼠和生后14天仔鼠脑组织光镜观察可见散在片状水肿,神经细胞减少,部分切片可见海马组织层次结构模糊。结论:恐伤孕鼠可造成其仔鼠生长发育迟缓,脑发育障碍,补肾治疗可阻断此损伤的发生。     

恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达影响

目的观察恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质组织形态学影响及对大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2的mRNA表达影响。方法将受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常组、模型组、补肾组,每组各10只。运用恐吓为主的复合应激法刺激模型组和补肾组孕鼠,正常组不予刺激。同时补肾组每日以中药左归丸浓缩剂2ml/100g体重灌胃,正常组及模型组则根据雌鼠体重予以等量生理盐水灌胃,造模时间为自分组第1天直至产下仔鼠。雌鼠分娩后,仔鼠出生当天每窝随机取1~2只仔鼠断头取全脑,固定,染色,切片,在光镜和电镜观察其组织结构和超微病理改变。另每窝随机取1~2只仔鼠断头取全脑匀浆做定量PCR,观察各组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达变化。结果模型组仔鼠大脑皮质区光镜下可见细胞较松散,组织结构较模糊,存在散在片状水肿,水肿区域神经细胞数目减少;电镜下可见到多数神经细胞出现细胞器结构异常,如线粒体肿胀,高尔基复合体肥大,部分伴有细胞核固缩。补肾组与正常组比较,仔鼠大脑皮质在形态学上无明显改变。补肾组和模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达均低于正常组(P0.01),模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达低于补肾组(P0.01)。结论恐伤孕鼠可以引起仔鼠大脑皮质发育异常,而左归丸通过补肾填精法调节Reelin信号通路从而阻断或降低仔鼠大脑皮质发育障碍损伤的发生。     

孕期恐应激对孕鼠及其子代近远期海马NMDAR1、NR2B表达的影响

目的观察孕期恐应激对孕鼠自身及其子代近远期海马NMDAR1、NR2B表达的影响。方法方法受孕雌鼠随机分为模型组和空白组,每组15只,模型组采用旁观电击法制备孕期恐惧应激动物模型。孕鼠产仔后仔鼠延续孕鼠的分组,每窝随机选择5只饲养至80日龄。以仔鼠21日龄代表幼儿期,80日龄代表成年期,采用免疫组化法检测孕鼠及仔鼠海马NMDAR1、NR2B的表达。结果①与空白组比较,模型组孕鼠海马区NMDAR1、NR2B蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P0.01);②与同日龄空白组相比,模型组21日和80日龄仔鼠海马区NMDAR1、NR2B蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P0.01)。结论恐伤孕鼠可导致其自身及子代近远期海马NMDAR1、NR2B蛋白表达下调,这可能是孕期恐刺激后孕鼠及子代学习记忆能力下降的部分机制。     

补肾活血丹对脑梗塞大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：研究脑梗塞模型大鼠海马、皮质凋亡相关基因bcl-2、hax及Bax、Bel-2蛋白表达，探讨补肾活血丹对上述基因及蛋白表达的影响。方法：应用流式细胞仪测定模型小鼠细胞群中细胞凋亡基因bcl-2、bax的比例和Bax、Bel-2蛋白含量。结果：补肾活血丹高、中、低3个剂量组和尼莫地平组均可见海马区及皮层区bel-2免疫表达增强明显，而bax的免疫表达则与用药剂量及区域有关，其高剂量组可显著降低海马区和皮层区bax的表达，中剂量组和尼莫地平组仅降低皮层区bax的表达。模型组小鼠海马、皮质Bax、Bcl-2蛋白含量较正常对照组明显升高；Bcl-2蛋白水平在补肾活血丹高、中、低3个剂量组和尼莫地平组均有显著下调；Bax蛋白水平除补肾活血丹低剂量组外，其余组都有显著下调。结论：脑梗塞与神经细胞凋亡有关，补肾活血丹可能有一定的治疗作用。     

滋补肾精方对“恐伤孕鼠”孕仔数及红细胞免疫功能影响的研究

目的：观察滋补肾精方对恐伤孕鼠孕仔数及红细胞免疫功能的响。方法：采用猫恐吓孕鼠的方法建立肾精不足模型,观察孕鼠每胎孕仔数、仔鼠体重、翻身能力及红细胞免疫功能。结果：滋补肾精方能显著提高恐伤肾孕鼠的孕仔数（P〈0.01）,增加仔鼠平均体重,提高仔鼠翻身能力（P〈0.01）,增加母子两代红细胞免疫功能（P〈0.05～0.01）。结论：中药滋补肾精方具有预防恐伤孕鼠肾精不足的功效。     

基于胸腺微环境变化的补肾填精法对先天肾虚仔鼠T细胞发育的影响

目的通过构建先天肾虚仔鼠模型并给予左归丸干预来探讨先天肾虚对胸腺微环境和T细胞发育的影响,并论证补肾填精法的作用。方法孕鼠分为正常组、模型组和补肾组。正常组孕鼠不做任何处理;模型组孕鼠采用复合应激法刺激造模;补肾组孕鼠造模的同时给予左归丸灌胃处理。正常组孕鼠和模型组孕鼠给予生理盐水灌胃处理。仔鼠出生后,对比分析各组仔鼠的情况并观察胸腺形态和超微结构。进一步检测仔鼠胸腺中Caspase-8、IL-2、IL-7、IL-15及CD_3~+T细胞和CD_4~+T细胞的表达情况。结果模型组仔鼠胸腺形态和超微结构发生改变,Caspase-8、IL-2和IL-15的表达增加,IL-7的表达减少,CD_3~+T细胞和CD_4~+T细胞数量减少。左归丸干预能够有效逆转上述变化。结论先天肾虚会破坏仔鼠的胸腺微环境,进而影响T细胞的发育,而左归丸通过补肾填精法调节Caspase-8、IL-2、IL-15和IL-7的变化,可以改善其胸腺微环境和促进其T细胞的发育。     

六味地黄汤对宫内发育迟缓胎鼠脑发育的影响

目的：观察补肾方六味地黄汤对宫内发育迟缓胎鼠脑发育的影响,反证中医“肾”与“脑”的关系。方法：采用怀孕小鼠被动吸烟复制宫内发育迟缓模型,动物随机分为3组,分别给予蒸馏水、黄芪和六味地黄汤,于孕19天处死母鼠,计数总胚胎数、活胎数、吸收胎数、死胎数,称量活胎体质量和脑质量,观察胎鼠大脑显微结构和细胞凋亡情况。结果：被动吸烟可使孕鼠死胎数、吸收胎数增加,仔鼠脑发育迟缓,脑内细胞凋亡较正常仔鼠增加;黄芪、六味地黄汤能减少死胎、吸收胎数,增加仔鼠体质量与脑质量,一定程度改善脑发育,减少凋亡细胞数,与模型组差异有显著性（P〈0.05）,且黄芪与六味地黄汤比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：六味地黄汤能显著促进宫内发育迟缓仔鼠脑的发育,提示“肾”通于“脑”理论的合理性。     

六味地黄汤对发育迟缓仔鼠认知功能及脑组织NGF、EGF、bFGF表达的影响

目的:观察六味地黄汤对发育迟缓仔鼠认知功能及脑组织NGF、EGF、b FGF表达影响,阐述六味地黄汤补肾健脑的机制。方法:采用孕鼠被动吸烟复制仔鼠发育迟缓模型,于自然分娩后喂养仔鼠1个月,进行学习记忆能力的检测,采用免疫组化法及RT-q PCR检测仔鼠脑内NGF、EGF、b FGF的表达水平。结果:1造模后,与正常组相比,动物逃逸潜伏期延长,垮台次数减少(P0.05),药物治疗后,与模型组相比,逃逸潜伏期缩短,垮台次数增多,差异具有统计学意义(P0.05)。2正常仔鼠脑内NGF、EGF、b FGF基因和蛋白表达大致相同,造模后,NGF、EGF、b FGF表达减少,与正常组相比,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05),药物治疗后,NGF、EGF、b FGF表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:孕期被动吸烟可以导致仔鼠学习记忆能力降低以及脑组织NGF、EGF、b FGF表达下降,六味地黄汤能显著提高脑组织内NGF、EGF、b FGF表达水平,从而提高仔鼠的学习记忆能力可能是其补肾健脑的机制。     

善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为四组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃黏膜中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组（P〈0.05）均降低,较正常对照组明显增高（P（0.05）,善胃Ⅰ号方组Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组明显增高（P（0.05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2蛋白的表达并促进Bax蛋白的表达,从而促进胃癌前病变细胞凋亡对胃癌前病变的发展进行干预的。     

参芪益心方对CHF大鼠心肌细胞凋亡指数及Bax、Bcl-2表达的影响

目的:研究参芪益心方对阿霉素所致慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡指数及Bax、Bcl-2表达的影响及其作用机制。方法:将90只雄性大鼠随机平均分为6组:正常对照组、模型组、依那普利对照组、芪苈强心胶囊对照组、参芪益心方低剂量组、参芪益心方高剂量组。利用阿霉素复制CHF大鼠模型,Tunel法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法测定心肌细胞凋亡基因Bax、Bcl-2的表达。结果:各治疗组CHF大鼠心肌凋亡指数均有所降低,且与模型组比较具有统计学意义(P0.05)。各治疗组均能抑制CHF大鼠心肌细胞Bax基因的表达;同时各治疗组能够促进大鼠心肌细胞Bcl-2基因的表达,且与模型组比较具有显著性差异(P0.05),其中以参芪益心方高剂量组为优。结论:参芪益心方可能调控凋亡基因从而抑制心肌细胞凋亡,进而延缓心室重塑的发生、发展或部分逆转心室重塑,从而起到治疗CHF的效果。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经细胞凋亡与 Bax Bcl-2蛋白表达的作用研究

目的：通过观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡与Bax、Bcl-2蛋白表达的动态变化及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用。探讨蛭龙活血通瘀胶囊可能的脑保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型。采用TUNEL法测定凋亡细胞的表达,免疫组化法测定Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果：与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组的Bax蛋白及凋亡细胞表达明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。与低剂量组比较,中、高剂量组各时间点的Bax蛋白及凋亡细胞表达均明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：蛭龙活血通瘀胶囊能明显促进Bcl-2表达,抑带】Bax表达,减少细胞凋亡,对脑出血大鼠具有明显的脑保护作用,且存在一定量效关系。     

中药补脑止痫散对癫痫大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响

目的 通过观察中药补脑止痫散对戊四氮化学点燃癫痫模型大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响,探讨补脑止痫散治疗癫痫的相关机制.方法 从78只正常Wistar大鼠中随机选取10只列为正常组,剩余68只大鼠腹腔注射戊四氮制作癫痫点燃模型,再随机选取50只造模成功大鼠随机分为5组:模型组、丙戊酸钠组、补脑止痫散高剂量组、补脑止痫散中剂量组和补脑止痫散低剂量组,每组10只.用免疫组化法检测药物治疗各组大鼠与正常组和模型组比较海马中神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 各治疗组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值与模型组相比分别出现明显降低和升高(P<0.05),而补脑止痫散低剂量组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变不明显(P>0.05),并且补脑止痫散高剂量组和中剂量组比较,以及此二组与丙戊酸钠组相比大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变均无明显差异(P>0.05).结论 中药补脑止痫散高、中剂量能调整癫痫患者海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白的表达,从而抑制癫痫发作.     

心气虚证模型大鼠脑内细胞凋亡相关基因的变化研究

目的：建立心气虚证大鼠模型,研究模型大鼠脑神经元细胞凋亡情况。方法：75只SD大鼠随机分为5组：正常对照组、疲劳对照组、小剂量心得安＋疲劳组、中剂量心得安＋疲劳组和大剂量心得安＋疲劳组,采用强迫跑步加灌服心得安的方法建立心气虚证大鼠模型,观察其脑内凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspase-3 mR-NA的表达情况。结果：中剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层和海马Bcl-2 mRNA表达明显降低;大剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层Bcl-2 mRNA表达明显降低、海马Caspase-3 mRNA表达明显升高。结论：心气虚证模型大鼠脑内存在神经元细胞的凋亡。     

寿胎丸对大鼠卵巢移植术后凋亡基因Bcl-2、Bax的影响

目的：探讨寿胎丸对大鼠卵巢移植术后凋亡基因Bcl-2、Bax的影响。方法：210只Wistar雌性大鼠随机分为7组,即自体移植模型组、自体移植＋寿胎丸组、异体移植模型组、异体移植＋寿胎丸组、异体移植＋CsA组、异体移植＋CsA＋寿胎丸组和正常对照组。各组大鼠于移植术后第7天,第14天,第21天,第28天,第35天分批处死,每次6只。取左侧卵巢,石蜡包埋切片,免疫组化测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。结果：移植术后与异体移植模型组相比较,异体移植＋寿胎丸组、异体移植＋CsA组、异体移植＋CsA＋寿胎丸组大鼠的Bcl-2水平均升高（P〈0．05）,Bax水平均降低（P〈0．05）。结论：寿胎丸能升调Bcl．2表达,降调Bax表达,升调Bcl-2／Bax的比值,从而发挥抑制卵巢细胞凋亡、抗卵巢移植急性排斥反应的作用。     

骨刺消巴布剂对大鼠急性软组织损伤细胞凋亡的影响

目的：观察骨刺消巴布剂对大鼠急性软组织损伤细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨骨刺消巴布剂对急性软组织损伤细胞的保护作用是否与抑制细胞凋亡及调节Bcl-2、Bax的表达有关。方法：选用SPF级SD大鼠40只,随机分成4组：骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组、空白对照组、正常组。骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组、空白对照组,通过局部打击来制备大鼠急性软组织损伤模型,骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组外敷相应药物,空白对照组、正常组不做任何处理,给药3周后处死动物,TUNEL法检测软组织损伤细胞的凋亡指数,免疫组化法检测组织细胞中Bcl-2、Bax水平。结果：骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组细胞凋亡率明显低于空白对照组护〈0．05）,Bcl-2在骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组中的表达高于空白对照组（P〈0．05）,Bax的表达低于空白对照组（P〈0．05）,骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组比较无统计学意义。结论：Bcl-2、Bax是细胞凋亡的2个调控基因,骨刺消巴布剂对损伤的软组织细胞的影响机制可能是通过上调Bcl-2的表达,下调Bax的表达来抑制细胞的过度凋亡,这可能是该药治疗急性软组织损伤的机制之一。     

沿皮浅刺内关公孙穴对脑梗塞大鼠Bcl-2 Bax的影响

目的:研究浅刺针法对脑缺血大鼠细胞凋亡调控基因Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia-2)、Bax(Bcl-2Associated X protein)的影响。方法:将240只Wistar大鼠随机分造模组和空白组,采用血栓栓塞法建立脑梗塞大鼠模型,后将造模成功的180只大鼠随机将为浅刺针法组(Ⅰ组)、常规针刺组(Ⅱ组)、模型对照组(Ⅲ组),空白组为正常对照组(Ⅳ组)。通过神经体征评分、脑组织Bcl-2和Bax蛋白的表达等几个指标,观察经过治疗后的Ⅰ、Ⅱ组大鼠和相应时间未经治疗的III、IV组大鼠的大脑细胞凋亡情况。结果:3个时间点的浅刺针法组大鼠脑组织Bax蛋白表达明显低于模型组和常规组针刺组,而Bcl-2则明显高于模型组和常规组针刺组(P<0.01),说明浅刺针法可有效改善脑梗塞大鼠的神经缺损体征。结论:浅刺内关、公孙穴位通过下调Bax蛋白表达和上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡,发挥神经保护作用。并在分子水平证实经络在体表有其物质基础,浅刺可取得有效的刺激作用,使浅部组织的经络特异性能充分显示出来。     

红景天对血管性痴呆大鼠行为学及海马CA1区Bcl-2及Bax表达的影响

目的观察红景天对血管性痴呆大鼠认知功能及海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响，探讨红景天的神经保护作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备前脑缺血致血管性痴呆模型，以MorriS水迷宫检测大鼠学习记忆能力；以免疫组化检测大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达。结果造模组与对照组相比，认知能力明显下降（P〈0．01），Bcl—2、Bax蛋白表达增加（P〈0．01）；治疗组与模型组相比，认知能力明显改善（P〈0．01），Bcl-2蛋白表达明显增加（P〈0．01），Bax蛋白表达明显减少（P〈0．01）。结论血管性痴呆大鼠给予红景天后，可以通过调节海马Bcl-2及Bax蛋白表达，抑制神经细胞凋亡，保护神经细胞，促进脑功能的恢复，从而改善大鼠学习记忆能力。     

强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2及Bax蛋白表达影响研究

目的:研究强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2、Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax比值的影响。方法:80只成年健康雄性小鼠随机分成正常组、模型组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各20只。除正常组外,其余3组采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠生精障碍模型,造模结束后第1天开始正常组和模型组灌胃给蒸馏水,其余两组分别给强精煎冲剂、黄精赞育胶囊混悬液,连续30天。结果:与模型组相比,正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸生殖细胞凋亡基因Bax蛋白表达率较低(P0.01)、Bcl-2蛋白表达率较高(P0.01)、细胞内Bcl-2/Bax比值较高(P0.01),正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各组间比较睾丸生殖细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值相近(P0.05)。结论:强精煎治疗小鼠睾丸生精障碍的疗效与Bcl-2、Bax蛋白表达率及Bcl-2/Bax比值密切相关。