Dot—ELISA检测抗原与IHA,COPT检测抗体诊断血吸虫病的比较

本文比较了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测循环抗原，间接血凝试验（ＩＨＡ），环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）检测抗体诊断血吸虫病的效果，１２例急性血吸虫病患者血清３种方法检测均为阳性，２７７例慢性血吸虫病患者血清３种方法检测阳性率分别为７９．４２％，６４．６２％和６３．１８％，１４例华支睾吸虫病患者血清和８９例健康人血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测均为阴性，１０例急性血吸虫病患者，在离开流行区经吡     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值…

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体Ⅲ Ｄ１０建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血虫循环抗原（ＣＡｇ），以ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出率间差异有显著性（Ｐ〈０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

Dot-ELISA的囊虫病免疫诊断价值

本文用纯化糖蛋白抗原对１１６ 例囊虫病人血清进行Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ检测,阳性率为９６．８％ （１１２／１１６）,３６ 例健康人血清皆为阴性,２７ 例肝吸虫病与包虫病人血清除２例外均为阴性,并以ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ作对照,结果表明Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 在３种方法中敏感性和特异性较高     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

斑点免疫金银染色用于弓形虫病血清学诊断的研究

采用斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和斑眯酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＩ．ＩＳＡ），以弓形速殡子可溶性蛋白抗原作为靶抗原检测６５例弓形虫感染者血清抗弓 虫ＩｇＧ，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＳＩＳＡ检测阳性率分别不９８．４６％和９２．４６％。血清平均滴度在Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为１：３９４，在Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为１：２１８。两法均一的有５９例，其中在两法中抗体滴度相同者２８例，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测滴     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值的研究

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体ⅢＤ１０建立的Ｄｅｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原（ＣＡｇ），ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出车间差异有显著性（Ｐ＜０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别为６．８５％和１０．５１％，两者联合检测能提高检出率。     

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。因此Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原不适宜于作为日本血吸虫感染度的判断方法     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。     

吡喹酮治疗日本血吸虫病19年远期随访研究

本文报道了吡喹酮治疗血吸虫病后19年远期随访研究结果，165例血吸虫病患者曾于治后12个月粪检全部转阴，本次复查环卵沉淀试验、间接血凝试验、循环抗原测定均为阴性，酶联免疫吸附试验尚有6．7％的阳性。有27例脾脏较治前有不同程度的增大，99．4％患者体力恢复。19年间患者共生育子女91胎，未发现畸胎及其他异常情况。     

快速检测血吸虫循环抗原EIA-kit的应用研究

应用快速检测血吸虫C_(Ag)的EIA-kit检测各期血吸虫病人血清,对急性血吸虫病的阳性率为100.0%(45/45);对慢性血吸虫病的阳性率为94.8%(530/559);但对晚期病人的检出率仅52.4%(66/126).该试剂盒与Kato-Katz法、粪孵法平行检测112例血吸虫病人,Kato-Katz法1次仅能查出54.5%(61/112);孵化法1次查出75.9%(85/112);EIA-kitl次即能查出96.4%(108/112).与常用查抗体的方法平行检测109例血吸虫病人血清,C_(Ag)阳性率为92.9%、IHA为96.9%、COPT为83.7%、ELISA为98.5%.对血吸虫病人治疗效果考核表明,治后3月C_(Ag)转阴率为79.7%、6月为86.1%、1年为91.3%.经实验室和现场应用表明该试剂盒检测C_(Ag)有较高的敏感性和特异性.     

隐匿性血吸虫感染的研究

在已达到消灭血吸虫病标准的泰兴市和已达到基本消灭标准的昆山市各为8000余人的2个社区,分别发现隐匿性血吸虫感染111例和74例,预期人群感染检出率分别为2.4％及1.69％。患者检出率为0.04％及0.37％。用COPT、IHA、ELISA和IESA 4种方法检测血清特异性抗体,2项及2项以上同时阳性者达40.0％,吡喹酮抗虫治疗后1年,COPT呈下降趋势。     

McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原

目的 应用McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原并观察其与现场粪孵结果的符合情况。方法 用辣根过氧化物酶标记日本血吸虫单抗SSJ14；应用McAb-Dot-ELISA检测现场和实验室感染牛日本血吸虫血清循环抗原。结果 检验酶标单抗的特异性和敏感性显示该株单抗有较高的特异性和敏感性，用实验室感染血吸虫病的阳性牛血清及阴性血清检测有100％的符合率，检测现场采集血清的循环抗原的结果和粪孵结果对比，总符合率达到82．91％。结论 SSJ14单抗和由此研制的McAb-Dot-ELISA方法能应用于牛日本血吸虫病血清循环抗原的检测。     

Hybridoma antibody-based competitive ELISA in Schistosoma japonicum infection

A competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has been developed and compared with the circumoval precipitin test (COPT) for diagnosis of schistosomiasis japonica using Philippine sera. The assay is based on the inhibition, by sera, of the binding of a penicillinase-conjugated hybridoma-derived antibody, I. 134, to a crude Schistosoma japonicum adult worm extract. A change in pH subsequent to addition of the substrate is used as the indicator system. Development of the color change in this assay is relatively slow, a fact which presumably facilitates detection of inhibition by serum. Relative to the COPT, no false positive reactions were obtained and the false negative rate was less than 10%. A wide range of inhibitory titers was obtained using sera in the competitive ELISA similar to that found in a competitive radioimmunoassay using 125I-labeled I. 134. The competitive ELISA will be of more general application for diagnosis of schistosomiasis japonica than the competitive RIA using hybridoma antibodies, and will provide more precise quantitative information than is obtainable in the COPT.     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅱ

制备血吸虫病单克隆抗体诊断试剂盒,将其用于Dot—ELISA,分别检测江苏、安徽流行区急性血吸虫病患者及四川、江西、安徽流行区慢性血吸虫病患者血清中循环抗原。结果不同流行区Dot—ELISA反应的平均“+”值、阳性率和抗原滴度的几何均数不同,循环抗原水平可以反映流行区的疫情。另将Dot—ELISA、ELISA检测四川慢性血吸虫病人治前及治后半年、1年的血清循环抗原及抗体,结果循环抗原在病人治疗后很快下降,治后1年77.8％(35/45)病人的循环抗原转为阴性。循环抗体在病人治疗后也逐渐下降,但速度甚为缓慢。治疗后1年,仅21.7％(10/46)病人转为阴性。上述结果表明,循环抗原能更直接、更真实地反映防治效果。     

Dot-IGSS检测日本血吸虫病人血清抗体的研究

运用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)检测了日本血吸虫病人血清抗体,并与斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)作了比较。检测了急性血吸虫病人血清38份,两法结果全部阳性;慢性血吸虫病人血清70份,Dot-IGSS阳性69份(98.6％),Dot-ELISA阳性65份(92.9％);治疗后血吸虫病人血清40份,Dot-IGSS阳性15份(37.5％),Dot-ELlSA阳性11份(27.5％)。用两法检测华枝睾吸虫病人血清20份,均有1份为阳性;检测正常人血清40份,均未出现阳性反应。将8份阳性血清作倍比稀释(1:20～1:61440)后分别用该两法检测,Dot-IGSS的敏感性明显高于Dot-ELISA(P<0.05)。对120例过去无血吸虫病史、接触疫水且皮试阳性者血清检测结果表明,Dot-IGSS的阳性检出率明显高于Dot-ELISA、COPT及循环抗原测定法(P<0.01)。     

多价McAb-RIHA检测血吸虫循环抗原的应用研究

采用多价ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ检测５０６例不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清ＣＡｇ，累计阳性率为９０．３％，比用单价ＭＣＡｂ－ＲＩＨＡ提高了敏感性。３７５例正常人的假阳性率为２．１３％，与２２例肺吸虫病人和６６例肝吸虫病人的交叉反应率分别为４．５％和０％。血吸虫病人经吡喹治疗后半年和１年，ＣＡｇ转阴率分别为７９．０％和９２．３％。结果表明该方法有较高的敏感性和特异性，可用于确诊病人和１年内考核疗效，操作简便快速．经济，基层适用性好。     

建立BSAS—ELISA检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的建立BSAS－ELISA技术以提高检测日本血吸虫循环抗原的敏感性。方法在夹心ELISA的基础上，引入高度放大的生物素一链霉亲和素系统（BSAS），建立BSAS－ELISA基本检测技术及其改良的二步法。结果应用单抗3D10以该技术的基本法与二步法检测感染兔血清，检出率可达90．00％；用单抗MG2以二步法经盲法检测，慢性血吸虫病患者的检出率达86．00％，3D10对正常人的假阳性率为4．76％，MGZ为33．33％。结论BSAS－ELISA检测日本血吸虫循环抗原可提高其敏感性。本实验所用二种单抗的特异性不甚理想，进一步提高敏感性及改进特异性的关键在于筛选出更理想的单抗。     

简易的Dot—ELISA法诊断耕牛和家兔日本血吸虫病

本实验用硝酸纤维膜为载体,水溶性日本血吸虫虫卵抗原为抗原,先后检测了18份实验感染黄、水牛血清、66份自然感染牛血清、84份阴性牛血清、40份实验感染兔血清和18份阴性兔血清,结果表明实验感染牛血清和兔血清都呈阳性反应,检出率达100％。自然感染牛血清的阳性检出率为93.9％(62/66),阴性牛血清的检出符合率为95.24％(80/84)。阴性兔血清都呈阴性反应。检测了4份肝片吸虫阳性兔血清和31份锥虫阳性牛血清,都不出现交叉反应。