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郝怡鑫 《中华医学杂志(英文版)》2011,124(20)
目的 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)对肾癌细胞多药耐药基因(MDRl)表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对化疗药物敏感性的变化。方法 根据MDRl基因设计3条小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列,在质粒的介导下转染肾癌A498细胞,RT-PCR法分析转染前后MDR1 mRNA表达水平,筛选出干扰效率最高的siRNA序列;进而利用慢病毒包装siRNA重组质粒,感染A498细胞,RT-PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆,Western bolt法检测MDR1蛋白表达水平,MTT法对比干扰前后多种化疗药物对细胞半抑制浓度(IC50)的变化;相关数据统计通过SPSS10.0软件进行。结果 3条siRNA序列均能不同程度地抑制细胞MDR1基因的表达,其中siRNA-1序列能更有效地封闭MDRl基因,使MDRl mRNA表达水平下降;筛选出的稳转细胞株与未干扰细胞株相比,MDR1蛋白表达量明显下降,并使多种化疗药物对细胞的IC50明显降低。结论 RNAi技术可有效抑制肾癌A498细胞MDRl基因的表达,并可显著增加其对多种化疗药物的敏感性,从而使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能。 相似文献
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外源性或内源性双链RNA(Double—stranded RNA,dsRNA)在细胞导致与其同源的mRNA分子发生特异性降解,从而干扰相应基因的表达,这种现象被称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).RNAi主要由长dsRNA分子裂解形成的小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)分子介导,是在RNA水平调节基因表达的一种方式, 相似文献
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目的:通过阻断肝癌细胞中NF—kappaB(NF—κB)信号通路,研究它与肿瘤细胞增殖、耐药的关系。方法:利用RNA干扰(RNAi)技术阻断NF—κB亚单位p65的表达,RT—PCR和Westernblotring法检测p65的mRNA及蛋白表达,MTT法检测细胞的增殖情况,以及联合应用不同浓度化疗药5-Fu对肿瘤细胞增殖的影响。结果:NF—κB的亚单位p65在肝癌细胞质中高表达,p65siRNA可有效地阻断蛋白表达。结论:应用RNAi技术可以有效地干扰p65表达,抑制肝癌细胞增殖,增强对化疗药5-Fu的敏感性。 相似文献
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RNA干扰(RNAi)主要通过内源性或外源性小分子双联RNA诱发的特异性降解相应序列的mRNA,致转录后水平基因沉默,从而恢复正常基因的功能。妇科恶性肿瘤的发生是多个基因相互作用的结果,具有无限生长的特性。通过RNAi技术可以敲除妇科恶性肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为妇科恶性肿瘤的治疗提供了新的方法。本文就RNAi发现、分子机制、特性及RNAi技术在妇科恶性肿瘤基因治疗领域的应用作一综述。 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指一种双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)分子在mRNA(messenger RNA)水平关闭相应序列基因的表达后,使其沉默或表达下调,从而达到抑制某种特定基因表达的目的,是一种序列特异性的转录后基因沉默。RNA干扰主要通过双链RNA被核酸酶切成21~23个小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),这种siRNA与细胞源性的某些酶和蛋白质形成RNA诊导的沉默复合体,由此复合体介导使与双链RNA同源序列的信使RNA被降解,抑制基因表达; 相似文献
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表皮生长因子受体(EGFR)在许多恶性肿瘤中有过度表达或突变的现象,它借助信号转导使细胞的生长失控和恶化,与肿瘤的发生、发展、转移及预后等密切相关。因此,抑制内源性EGFR及其突变体的表达,是有效治疗恶性肿瘤的途径之一。RNAi是一种发展迅速且极有应用前景的基因治疗技术,细胞内存在一个完整的可引发RNA干扰结构,可将EGFR外源性双链RNA裂解成21~23个核苷酸短干扰RNA(SiRNA),后者可自动杂交同源EGFR的mRNA上并使之降解,从而达到抑制EGFR表达和治疗恶性肿瘤的目的。 相似文献
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RNA干扰及其在医学研究中应用的进展 总被引:1,自引:0,他引:1
RNA干扰(RNAi)是由双链RNA介导的,序列特异的基因沉默现象。小干扰RNA(siRNA)是RNAi作用中的效应分子。RNAi技术作为新兴的基因阻断技术具有明显优势,已经广泛地应用于基因功能研究、抗病毒感染和抗肿瘤等热门领域。现就RNAi作用机制、siRNA的制备、设计及RNAi技术在医学研究中应用做一综述。 相似文献
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RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因静默机制。RNAi具有高效、稳定、特异性强等特点。RNAi为基因和蛋白质学等的研究提供了新的技术和方法,RNAi被发现10年来,在基础研究和临床研究领域已经得到了长足的发展,并且已经初步显示出其巨大的潜力。现主要对介导siRNA方法及RNAi技术在抗肿瘤、抗病毒、功能基因组学、药物筛选和遗传疾病研究等领域中的最新研究进展综述。 相似文献
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RNA干扰(RNAi)是利用同源性双链RNA诱发序列特异的转录后基因沉默现象,是研究基因功能的重要工具。表皮生长因子受体在皮肤鳞状细胞癌中过度表达,且EGFR信号通路的启动后可促进细胞增殖、转移、血管生成及阻断细胞凋亡,因此被作为开发肿瘤治疗方法的新靶点。现将对RNA干扰表皮生长因子受体在皮肤鳞状细胞癌中的治疗作用予以综述。 相似文献
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朱斌 《复旦学报(医学版)》2011,38(1):84-88
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发展起来的一种新兴的基因沉默技术,它是由双链RNA介导的靶向基因序列特异性转录后的沉默机制.RNA干扰序列特异性的抑制效应较反义DNA、抗体封闭技术等传统基因调节方法 有着明显的优势.在哺乳动物细胞中,RNAi可由21~25个核苷酸长度的小干扰RNA(sm... 相似文献
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某些小的双链RNA可以高效特异地阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAi).RNAi同时也是体内抵御外在感染的一种重要保护机制.作为一种简单有效的代替基因敲除的遗传工具,RNAi将大大加速功能基因组学的研究进展,被Science评为2002年最重要的科研成果之一.RNAi导致的基因沉默发生在转录后,所以被称为转录后基因沉默(PTGS). 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是基因表达调控机制之一。近年来,在利用RNAi降血脂的研究中发现,与胆固醇合成、代谢及血脂转运与吸收相关的基因都可能作为潜在的药物靶标。因此,RNAi有望用于治疗脂代谢紊乱相关疾病。文中针对实验研究提供的各种脂代谢新靶点及RNAi治疗血脂异常的进展做一综述。 相似文献
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RNA干扰(RNAi)是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。随着对RNAi研究的不断深入,其作用机制的逐步阐明,RNAi技术也日趋完善和成熟,作为一种新型研究工具已广泛应用于医学领域中,尤其在恶性肿瘤的研究中作用显著,有望成为攻克肿瘤、病毒性疾病及遗传性疾病的新手段。现就RNAi技术应用于妇科肿瘤的研究与治疗进行综述。 相似文献
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