建立巴马长寿老人经EBV转染永生细胞株的方法

目的：建立用EBV转化长寿人群外周血淋巴细胞永生细胞株（LCL）的方法。方法：用EBV份百岁以上健康老人，20份89-99岁健康老人及8份66岁以下健康人的血样共36份。采用20％FBS RPM11640培养液，配合环孢菌素A、植物血凝素(PHA)，置37℃5％CO2培养箱内培养。结果：成功地获得24份永生细胞株（其中，百岁老人6份，89-99岁老人12份，66岁以下6份）。结论：采血后24-48h之间接种，转化成功率高。转染后2-3周，大部分标本出现细胞分裂、变形，标志着转化成功。超过5周仍无细胞分裂者即发生细胞凋亡。PHA有缓解细胞凋亡的作用，但不能使细胞分裂。污染是引起转染细胞株凋亡的主要因素。严格的无菌操作、保持培养细胞的适当密度、适时换液、打散较大的细胞克隆团是培养LCL的关键。     

新疆和田维吾尔族长寿老人永生细胞株的建立

目的通过用EB病毒转化外周血B淋巴细胞使之成为永生细胞株的方法,建立新疆和田维吾尔族长寿老人永生细胞株,为永久保存新疆长寿老人的基因遗传资源及后续研究奠定基础。方法常规制备EB病毒上清,用环孢素法和冻存全血法转化外周血B淋巴细胞。结果以环孢素法成功建立了5株新疆和田维吾尔族长寿老人永生细胞,其中百岁2人,90～99岁3人,建系成功率为100%(5/5),以冻存全血法建系成功1例(1/5)。HLA基因分型结果在建系前后完全一致。结论与冻存全血法相比,环孢素法能更有效地转化长寿老人永生细胞株,可为长寿的分子遗传机制研究以及某些细胞生物学性状的检测提供充足的实验材料。     

广西巴马地区长寿老人ApoE基因多态性分析

目的：研究广西巴马地区长寿老人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与巴马长寿现象的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术．对129名年龄90～113岁的广西巴马地区长寿老人和307名作为相应年龄对照的长寿家庭成员．并以当地非长寿自然人群153人作为对照组．进行ApoE基因分型。分别比较长寿老人与各组人群的基因型、基因频率的分布特征。结果：①广西巴马地区长寿老人ApoE基因型频率中以ε3／3最高．其次是ε2／3和ε3／4．而ε2／4和ε4／4频率最少。长寿老人组与其亲属年龄对照的ApoE基因型和基因频率相比之间均无显著性差别；②长寿组与当地自然人群对照相比呈显著性阳性关联(P=0．001，P=0．04)的为ε2／ε2(5．34％；0％)和ε3/ε3(79．39％；68．63％)基因型。这两种基因型携带者在长寿人群中占85％以上。结论：ApoE基因多态性与广西巴马长寿现象有关联。巴马地区长寿相关基因为ApoE ε2／ε2、ε3／ε3基因型。其中ε3／ε3纯合子是最主要的长寿关联基因。     

海南省黎族永生细胞库的建立

采用ＥＢ病毒转化外周血Ｂ淋巴细胞同时加环孢菌素Ａ法,建立了海南黎族永生细胞库。该库共含有５４株“润黎”永生细胞株,供血者均身体健康,且三代无与不同民族或不同支系通婚史。其中男性占５６％,女性占４４％,有亲缘关系者仅占１３％     

ACE基因多态性与巴马壮族人长寿的相关性

目的 探讨血管紧张素转换酶(angiotensin coverting enzyme,ACE)基因插/缺失(I/D)多态性与广西巴马长寿的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)与直接测序技术,研究百岁组(≥100岁)27例、90岁组(90～99岁)56例、老年组(60～89岁)114例老人的ACE基因I/D多态性,以79例60～70岁自然死亡人群为对照组.结果 在ACE基因I/D多态基因型中,百岁组L/I、L/D、D/D型频率分别为37.04%、33.33%和29.63%,I、D等位基因频率分别为53.70和46.30%.百岁组D/D基因型频率和D型等位基因频率高于老年组(P<0.05)且明显高于对照组(P<0.01),但与90岁组比较,无论是I/I、I/D或D/D基因型,所占百分率均比较接近,差异无显著性(P>O.05).D/D基因型经SSCP证实全部相同,无差别.直接测序结果再次验证ACE(I/D)多态性判断准确.结论 ACE基因I/D多态性与长寿密切相关.长寿受多种因素影响.     

巴马地区120名长寿老人的心电图分析

目的了解巴马地区长寿老人心电图的特点,提高长寿老人心脏疾病的诊治水平。方法采用6511型单导心电图机对120例（共157例次）90—113岁老年人进行床边常规12导联描记。结果发现异常心电图78例,占总数65．00％,其中两项异常38例,占总数31．66％。结论长寿老人中以ST-T改变位居第一,其余依次为房性早搏、左室高电压、室性早搏。     

广西巴马地区长寿人群5-羟色胺转运体基因启动子区多态性研究

目的：探讨广西巴马地区长寿群体与5-羟色胺转运体启动子区基因多态性（5-HTTLPR/rs25531）的关系.方法：选取379例广西巴马地区90岁以上壮族长寿老人作为长寿组和284例同地区60岁以上普通健康壮族老人作为对照组,采用PCR-RFLP技术检测多态性,分析基因型在长寿中的作用.结果：①长寿组5-HTTLPR基因型频率分别为SS 55.67％、SL34.83％、LL 9.50％,等位基因S和L频率分别为73.09％和26.91％（LA =20.45％,LG=6.46％）,与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜o.01）.3个等位基因（S,LA,LG）的频率分布与对照组比较差异明显（P=0.001）.②单因素Logistic回归分析显示LL分别和SS、SL存在统计学联系（P=0.001,OR=2.226,95％CI 1.374～3.608;P=0.039,OR=1.695,95％CI1.028～2.796）.结论：5-HTTLPR多态在广西巴马地区的分布,可能是该流域长寿的遗传学基础之一.     

广西巴马长寿地区80岁以上农村老人成功老龄检出率及影响因素

目的 调查广西巴马长寿地区农村老人成功老龄的检出率及其影响因素。方法 （1）以广西巴马长寿地区80岁以上人口构成为基准,以乡为单位进行整群抽样;以上海市精神卫生中心2000年对上海市静安区社区老人调查资料为对照。（2）应用《长寿地区老人心理健康调查表》调查,主要包括一般项目、简易智能状态检查（MMSE）、日常生活能力量表（ADL）、流调用抑郁自评量表（CES-D）等国际通用的标准化工具。（3）根据数据分布特点,对原始数据进行编码,应用SPSS10.0统计软件包,运用描述性统计分析、卡方检验、多元逐步回归分析等方法进行统计。结果 成功老龄检出率研究组为44.2%、对照组为19.6%,2组差异有显著性（P〈0.01）。研究组Logistic回归分析提示少饮酒、少抽烟、经常锻炼身体和参加社会活动与成功老龄呈正相关。结论 巴马长寿地区农村老人由于有科学的行为方式、良好的自然与社会环境以及优良的遗传因子,其成功老龄检出率高,认知功能好。 33.33%、25%;女性PTSD的发生率（46%）与SAS、SDS的评分显著高于男性（16.7%）;而市民中无一人符合DSM-IV的ASD或PTSD诊断标准;女性的PTSD总分及SAS、SDS的评分显著高于男性（P〈0.05,P〈0.05,P〈0.01）;烧伤的面积和深度与PTSD过度唤起评分正相关（r=0.589,P=0.016）;受害者的应付方式与PTSD总分负相关（r=-0.523,P〈0.05）;受害者的SAS、SDS、SRQ评分与PTSD总分显著相关（r=0.853,0.787,0.745,P〈0.01）;年龄、受教育程度与PTSD总分无显著相关。结论在公交系统受恐怖袭击的爆炸事件对受害者及其家属的心理状态造成显著的影响,女性受影响的比率、程度比男性更为显著;与PTSD高相关的因素为预防和减轻PTSD提示了可能的途径。     

中国人精神分裂症患者永生细胞库的建立

目的 保存精神分裂症特有的基因组资源,方法 采用Epstein Barr(EB)病毒转化技术,把患者外周血B淋巴细胞转化成永生类淋巴母细胞系。结果 建系150个,包括精神分裂症各型、同胞对、双胞胎、核心家庭、三代及三代以旧家系构成永生细胞库。结论 精神分裂症患者基因组保存永生细胞库的建立,为我国精神分裂症分子水平发病机理的研究提供用之不竭的DNA资源。     

广西巴马壮族长寿老人雌激素受体β基因RsaI和AluI多态性研究

[摘要] 目的 探讨雌激素受体β基因RsaI和AluI多态性与人类长寿的关系。方法 应用PCR-RFLP技术对广西巴马156例（年龄90～105岁,平均93.2岁,长寿组）健康壮族长寿老人和142例（年龄20～72岁,平均34.8岁,对照组）健康壮族成年人的ERβ基因RsaI和AluI多态性进行分型,分析各种基因型频率在长寿组和对照组之间的差异及其与长寿的关系。结果 ERβ基因RsaI多态性在长寿组和对照组间差异明显,长寿人群中该基因突变型明显的偏低（25.6%:43.0%,p＜0.05）;ERβ基因AluI多态性在长寿组和对照组间无差异（p＞0.05）。结论 ERβ基因RsaI位点多态性与人类长寿有着较为密切的联系,其具体作用机制有待进一步研究。     

广西壮族系统性红斑狼疮自身抗体与HLA-DQA1等位基因的相关性

目的:探讨广西壮族系统性红斑狼疮(SLE)自身抗体与HLA-DQA1等位基因的相关性.方法:应用酚/氯仿抽提法提取51例广西壮族SLE患者外周血基因组DNA,通过聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对51例患者HLA-DQA1基因进行研究.同时采用免疫印迹技术测定患者自身抗体谱.结果:HLA-DQA1·0101与抗dsDNA呈正相关 (χ2=4.488,r=0.297,P＜0.05),DQA1·0301与抗dsDNA呈负相关 (χ2=10.082,r=-0.491,P＜0.01).结论:广西壮族SLE易感基因 DQA1·0101的易感性可能通过诱导抗dsDNA抗体产生实现.DQA1·0301可能通过抑制自身抗体的产生为保护基因.     

广西巴马长寿区与非长寿区人群血脂水平及其影响因素

目的:了解广西巴马县长寿区与非长寿区老年人群的血脂水平及其危险因素。方法:采用分层随机抽样方法在广西巴马县长寿区和非长寿区分别抽取337名和189名60岁以上健康居民进行身高、体重、体重指数、腰围、血压、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)测定,对血脂异常检出率危险因素进行非条件Logistic回归分析。结果:巴马长寿区老年人群血清TC、HDL-C水平明显高于非长寿区老年人群(P<0.01),而TG、LDL-C水平与非长寿区人群比较,差异无统计学意义(P>0.05)。长寿区老年人群血脂异常检出率明显高于非长寿区人群(P<0.01)。性别、血压和腰围是巴马长寿区老年人群血脂异常的危险因素,每周食用玉米次数与长寿区人群血脂异常检出率呈负相关。而性别、体重指数是巴马非长寿区老年人群血脂异常的危险因素。结论:巴马长寿区和非长寿区老年人群的血脂谱、血脂异常检出率及其危险因素存在明显差异,可能与他们的饮食习惯、生活方式不同有关。     

正常广西壮族成人颅颌面结构的X线头影测量研究

用Ｘ线头影测量分析法对４３名广西正常壮族成人的颅颌面软硬组织结构进行研究。结果，男性平面比女性更陡，软组织侧貌相对女比男直。与北京汉族人比较，广西壮族人侧貌轮廓比北京人凸。     

广西东兰县壮族长寿老人HLA-DRB1基因的多态性研究

目的：探讨人类白细胞抗原-DRB1（HLA-DRB1）基因与长寿的相关性。方法：应用聚合酶链式反应-序列特异引物（PCR—SSP）对东兰县150名90岁以上长寿老人（90～105岁）和143名当地健康、无血缘关系、随机抽样的成年人（20～76岁）进行HLA-DRB1基因分型并进行相应等位基因频率的比较。结果：长寿组HLA—DRB1＊1201-1202等位基因频率（10．56％）明显高于对照组（5．39％）（P=0．0239,OR=1．9067）;其余各相应等位基因频率之间的比较差异无统计学意义（均P〉0．05）。另外,在HLA—DRB1座位各等位基因中,长寿组和对照组均以HLA-DRB1＊1501等位基因的频率最高,分别为29．76％、24．74％;其次为HLA—DRB1＊1601-1602等位基因,分别为17．94％、20．23％。结论：在东兰县壮族人群中,HLA—DRB1＊1201—1202与长寿高度关联,可能通过某种未知的机制影响人类的衰老及寿命。     

中国海南岛3个黎族主要支系永生细胞系的建立与保存

目的:建立侾黎、杞黎、本地黎3个黎族主要支系的永生细胞库。方法:采用EB病毒转化外周血B淋巴细胞并加环胞霉素A抑制T淋巴细胞建立永生细胞系。结果:成功地对侾黎、杞黎、本地黎的部分个体建立了永生细胞系。其中侾黎66株,杞黎76株,本地黎54株,共196株。结论:侾黎、杞黎、本地黎永生细胞库的建立使特有的黎族基因组得到系统地、永久地保存,并为分析其遗传学差异奠定了基础。     

广西巴马长寿地区壮族老人幽门螺杆菌感染状况

目的：探讨我区长秦之乡巴马县农村壮族老人幽门螺杆菌（Hp)的感染状况。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测171例老人血清抗Hp-IgG及CagA-HpIgG。结果：171例老人Hp感染率为53.8%;CagA-HpIgG阳性率为14.6%。90岁以上年龄组Hp感染率显著高珩60-69及70-79岁两组（P<0.05);Hp感染与年龄显著相关（P<0.05);女性感染率高于男性（P<0.05);饮用河水者感染率高于饮用山泉水者（P<0.0001)。结论：Hp在壮族老年人群中有较高的感染率,感染率随年龄的增大而增加;以长寿老年人感染率最高;粪一口传播可能是老年人感染Hp的主要途径。     

广西南宁市汉族青少年的Heath-Carter法体型研究

目的:探讨广西南宁市汉族青少年体型特征.方法:应用Heath-Carter法对1204名广西南宁市汉族青少年进行体型测量与分析.结果:①男青少年体型分布以外胚型为主,女青少年以内胚型为主;②女青少年内因子值均高于同龄男青少年;男、女青少年的中因子值随年龄变化不明显;男青少年外因子值随年龄缓慢上升;③男、女同龄组体型之间存在显著差异.结论:广西南宁市汉族男青少年体型与山东汉族男青少年的体型最为接近,女青少年的体型变化与芜湖市女青少年的变化最为接近.     

广西眼镜蛇毒细胞毒素对人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞的抑制作用研究

目的：研究广西眼镜蛇毒细胞毒不对体外培养的人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的抑制作用。方法：通过SephadexG-50,GM-Sepharose,CL-6B柱层析从广西眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素,应用四素氮唑蓝（MTT）法测定其对人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的体外细胞毒作用及其最效关系,并与粗毒的抑瘤作用进行比较,结果：从广西眼镜蛇毒中分离到一种细胞毒素（CTX CM－5）,其对体外培养的人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的抑制作用呈明显的剂量依赖关系。抑制率随剂是增加而呈迅速上升培养的人卵巢 细胞和宫颈癌细胞株具有较强的抑制作用。