草苁蓉对D-半乳糖致衰老大鼠琥珀酸脱氢酶的影响

目的 探讨草苁蓉对D-半乳糖致衰老大鼠玻珀酸脱氢酶(succlnate dehydrogenase，SDH)的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分正常组、模型组(ScD-半乳糖48mg／kg／d)、人参皂甙组(100mg／kg．jg，D-半乳糖48mg／kg／d)、草苁蓉组(100mg／kg．k，ScD-半乳糖48mg／kg／d)，连续40天。用组织化学方法观察SDH的组织学变化，用比色分析法对大脑皮质SDH进行定量分析。结果 草苁蓉可升高因D-半乳糖所致SDH的降低，对线粒体等细胞器的变性具有改善作用。结论 草苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老大鼠具有保护作用。     

D-半乳糖致雄性大鼠的骨丢失

背景:骨质疏松虽主要受成骨细胞和破骨细胞功能的影响,但D-半乳糖也可导致雄性大鼠骨质丢失.目的:观察D-半乳糖对大鼠骨组织的影响,并观察其对体外大鼠成骨细胞的影响.方法:将雄性SD大鼠分成对照组和D-半乳糖组,对照组每天皮下注射生理盐水,D-半乳糖组皮下注5%的D-半乳糖 (100 mg/kg),连续给药3个月后,取左侧胫骨上端和第四腰椎,塑料包埋切片后,用图像分析仪测量骨动、静态参数.体外培养Wistar大鼠成骨细胞,加入不同浓度的D-半乳糖和阳性药物前列腺素,MTT法测定各组成骨细胞增殖情况,PNPP法测定各组成骨细胞碱性磷酸酶活性.结果与结论:D-半乳糖组胫骨上端和第四腰椎与对照组相比,骨小梁面积、骨小梁厚度及骨小梁数目降低,骨小梁分离度升高,说明大鼠骨量明显降低,单荧光周长,骨钙化沉积率和骨形成率也降低,说明骨转换率降低.D-半乳糖对体外培养的大鼠成骨细胞数量没有明显影响,但能提高碱性磷酸酶的活性.实验结果说明D-半乳糖可导致低转换型骨丢失,骨丢失不是因为成骨细胞受D-半乳糖抑制直接引起,而是通过其他的间接机制引起.     

D-半乳糖致雄性大鼠的骨丢失

背景：骨质疏松虽主要受成骨细胞和破骨细胞功能的影响,但D-半乳糖也可导致雄性大鼠骨质丢失。目的：观察D-半乳糖对大鼠骨组织的影响,并观察其对体外大鼠成骨细胞的影响。方法：将雄性SD大鼠分成对照组和D-半乳糖组,对照组每天皮下注射生理盐水,D-半乳糖组皮下注5%的D-半乳糖（100mg/kg）,连续给药3个月后,取左侧胫骨上端和第四腰椎,塑料包埋切片后,用图像分析仪测量骨动、静态参数。体外培养Wistar大鼠成骨细胞,加入不同浓度的D-半乳糖和阳性药物前列腺素,MTT法测定各组成骨细胞增殖情况,PNPP法测定各组成骨细胞碱性磷酸酶活性。结果与结论：D-半乳糖组胫骨上端和第四腰椎与对照组相比,骨小梁面积、骨小梁厚度及骨小梁数目降低,骨小梁分离度升高,说明大鼠骨量明显降低,单荧光周长,骨钙化沉积率和骨形成率也降低,说明骨转换率降低。D-半乳糖对体外培养的大鼠成骨细胞数量没有明显影响,但能提高碱性磷酸酶的活性。实验结果说明D-半乳糖可导致低转换型骨丢失,骨丢失不是因为成骨细胞受D-半乳糖抑制直接引起,而是通过其他的间接机制引起。     

D-半乳糖诱导衰老小鼠模型的建立与评价

背景:目前构建衰老动物模型的方法主要有注射D-半乳糖,臭氧损伤,去胸腺,采用老龄动物等.因D-半乳糖造模简单、试验周期相对较短,故目前广泛应用于衰老试验研究.目的:使用D-半乳糖建立亚急性衰老小鼠模型,并对其进行行为学、生化以及免疫等方面的评价.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/08在南通大学医学院完成.材料:ICR小鼠35只,体质量(18±2)g,雌雄兼用.随机分为正常对照组15只,衰老模型组20只.方法:衰老模型组小鼠用D-半乳糖按120 mg/kg背部皮下注射6周,1次/d,造成亚急性衰老模型:正常对照组不予药物.主要观察指标:使用Y型电迷宫检测小鼠的学习、记忆功能;使用相关试剂盒测定血清中丙二醛浓度、超氧化物歧化酶活力和脑中脂褐质含量、单胺氧化酶-B活性以及肝中谷胱廿肽过氧化物酶活性等生化指标;单向琼脂扩散法测定血清中IgG含量;四甲基偶氮唑盐法测定小鼠脾淋巴细胞转化刺激指数;ELISA检测血清中细胞因子白细胞介素2,γ干扰素的浓度.结果:与正常对照组相比,γ迷宫显示衰老模型组小鼠记忆功能明显下降,表现为不同时间的正确反应率降低,潜伏期延长;生化指标显示模型小鼠血清中丙二醛及脑中脂褐质含量增加、血清中超氧化物歧化酶与肝中谷胱甘肽过氧化物酶活力下降,而脑中单胺氧化酶B活力没有明显改变:免疫相关指标显示模型小鼠血清IgG水平下降、脾淋巴细胞转化刺激指数降低、血清中细胞因子γ干扰素的浓度减少,白细胞介素2变化不明显.结论:D-半乳糖建立亚急性衰老模型小鼠记忆功能下降、氧自由基产物增加和抗氧化能力下降、免疫功能降低,可用于行为学、抗氧化、以及免疫等方面的抗衰老药效研究.     

李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构及胰岛素受体底物表达的影响

目的：观察李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构和磷脂酰肌醇酯3激酶(phosphatidyl inoditide-3’OH kinase，PI3K)、胰岛素受体底物-1[insulin-receptor substrate-1，IRS-1)、胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2，IRS-2)表达的影响。方法：将132只小鼠随机分为6组，正常对照(C)组、D-半乳糖模型(D)组、李氏5号大剂量(L)组、中剂量(M)组、小剂量(S)组、多奈哌齐(A)组。D，L，M，S，A5组每日皮下注射半乳糖100mg／kg.L，M，S3个治疗组分别灌胃李氏5号方1．2，0．6，0．3g／(kg&;#183;d)，A组多奈哌齐0．75mg／(kg&;#183;d)灌胃。4个月后，取小鼠海马CAl区组织进行电镜观察，行脑冷冻切片，用PI3K，IRS-1，IRS-2抗体进行免疫组化染色。结果：①电镜结构显示，D-半乳糖老化小鼠海马CA1区神经元核固缩，线粒体、高尔基体等细胞器肿胀，血管足突细胞肿胀，管腔变窄；李氏5号中药保护可以明显改善这种现象。②免疫组织化学染色结果显示3种抗体C组深染的阳性细胞在海马广泛分布，D组海马阳性反应细胞着色浅，少有突起，细胞数目少，分别为C组的48．8％，57．0％和60．8％。李氏5号方组染色结果与C组相似，A组亦有相同结果。结论：D-半乳糖老化小鼠海马CA1区出现明显超微结构病理改变，海马PI3K，IRS-1，IRS-2的表达明显下降；李氏5号中药保护能明显改善CA1区超微结构病理改变，上调以上3项指标的表达。     

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马神经元凋亡的影响

目的 研究APP17肽对D-半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响，为进一步探讨APP17肽对脑老化的临床治疗意义提供理论依据。方法 雄性昆明小鼠66只，按随机数字表法分为3组：正常对照组(C组)、D-半乳糖对照组(D组)、APP17肽治疗组(P组)，每组动物22只。用D-半乳糖制备脑老化模型，并皮下注射APE，17肽对D-半乳糖脑老化小鼠进行治疗，3个月后取脑组织做Bcl-2，Bax，CREB，Akt，AIF免疫组织化学染色。结果 D-半乳糖脑病小鼠海马内Bax，AIF阳性反应神经元细胞数目多，细胞计数与C组及P组有显著性差异；胞质与突起深染，而正常小鼠及APt，17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少，染色淡；D-半乳糖小鼠海马内Bct-2，CREB(cAMP反应结合蛋白)，AKt阳性细胞数目少，染色淡，细胞计数与C组及P组有显著性差异；而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元细胞数目多，胞质与突起深染。结论 促进凋亡的Bax，AIF(凋亡诱导因子)在D-半乳糖小鼠海马表达增加；与凋亡呈负相关的Bct-2，CREB，Akt在D-半乳糖小鼠海马表达降低APP17肽能影响D-半乳糖脑病小鼠脑内Bcl-2，Bax．CREB，Akt，AIF的表达，使之接近正常。     

苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影响的实验研究

目的研究苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠丙二醛(MDA)和单胺氧化酶(MAO)的影响,探讨苦荞茶的抗氧化作用。方法将60只小鼠按体质量随机分为5组(正常对照组,模型对照组,苦荞茶低、中、高剂量组)。正常对照组注射生理盐水,其余组注射D-半乳糖;正常对照组和模型对照组每日用凉白开水灌胃(5 g/kg),苦荞茶低、中和高剂量组分别按照苦荞茶2.5 g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg的量进行灌胃。实验结束后测定各组MDA和MAO含量。结果模型对照组小鼠MDA均高于正常对照组和苦荞茶各剂量组(P0.05);正常对照组的MAO低于衰老模型组(P0.05)。结论苦荞茶可对D-半乳糖造成衰老小鼠的MDA和MAO含量升高有一定抑制作用,具有抗氧化功能。     

D-半乳糖致脑老化动物模型及其机理

D 半乳糖是一种生理性营养成分 ,在正常机体代谢中可转变为葡萄糖 ,参与葡萄糖代谢[1] ,但过量供给会导致代谢紊乱。国外最早将D 半乳糖动物模型用于白内障的研究[2 ] ,我国学者近年来发展并逐步完善了该模型。利用小剂量D 半乳糖建立衰老和脑老化动物模型 ,并逐步由浅入深、从整体水平到分子水平探讨模型发生发展的机制 ,从而对药物在抗衰老和脑老化方面进行药效学评价及阐明其作用机理。目前 ,D 半乳糖模型已成为国内公认的衰老和脑老化动物模型。1D 半乳糖致脑老化动物模型1985年 ,徐黻本等首次在延缓衰老药物疗效实验中使用D 半乳糖…     

偏钒酸钠对雄性小鼠生殖功能影响的研究

雄性小鼠分别经腹腔注射每公斤体重0．33，1．00和3.00mg偏钒酸钠（NaVO3）。染毒后第2，4，6周末每组随机取5只小鼠观察精子数量、精子形态、精子存活率及精子活动能力的变化，结果：染毒后第2周末，Ⅳ（3．00mg/kg）组精子存活率和精子活动能力明显降低（P＜0．05），其它指标无明显改变；第4周末，精子畸形率增高（P＜0．05），精子活动能力进一步降低（P＜0．01），而Ⅲ（1．00mg／kg）组的精子活动能力也见下降（P＜0．05）；第6周末，Ⅳ组精子畸形率进一步增高（P＜0．01），精子计数量显著降低（P＜0．01），Ⅲ组的精子计数也下降（P＜0．05）。提示NaVO3可影响雄性小鼠精子的发生，其中精子存活率和精子活动能力的改变是NaVO3生殖毒性最敏感的指标，其次是精子畸形率的变化，而精子计数仅见于长期接触高浓度钒方可出现改变。     

非甾体消炎药抑制小鼠胃癌转移潜能的研究

目的:观察非甾体消炎药(nonsteroidal antiinflammatory drugs,NSAIDs)抑制小鼠胃癌转移潜能的效应,探讨其作用机制。方法:建立人胃癌细胞SGC7901裸鼠种植瘤模型,将30只小鼠随机分为3组:对照组、观察1组、观察2组,每组10只。对照组给予阿拉伯树胶,观察1组给予舒林酸,观察2组给予塞来昔布。采用免疫组化两步法和Western Blot检测CD44v6、ICAM-1、E-cadherin、FGF-1和VEGF的蛋白表达水平,用RT-PCR检测VEGF的mRNA水平。结果:观察1、2组CD44v6、ICAM-1、FGF-1和VEGF蛋白表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),观察1、2组E-cadherin蛋白表达水平与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。观察1、2组和对照组VEGF的mRNA水平分别为(30.9±14.4)%、(25.6±16.2)%、(46.5±28.7)%,观察1、2组VEGF的mRNA水平均明显低于对照组(P均<0.05)。结论:NSAIDs在体内具有显著抗胃癌效应,并可能通过调节某些肿瘤转移相关因子表达来抑制胃癌转移。     

骨折预处理对兔骨髓来源间充质干细胞的影响

目的探讨骨折预处理对兔骨髓来源间充质干细胞（MSC）的影响。方法将10只兔按随机数字表法分为2组,每组5只。骨折预处理组截断兔股骨骨干后采用克氏针内固定,7 d后从另一侧股骨无菌抽取骨髓1～2 mL;对照组未进行任何处理。采用全骨髓贴壁法对2组兔进行骨髓来源的间充质干细胞的原代培养、酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察、细胞周期测定及MTT实验,研究骨折预处理对MSC的影响。结果骨折预处理后可较快地获得纯化的MSC,且MSC的增殖能力在P2、P3代时均高于对照组（均P〈0.05）;随着时间的延长,P4代时2组MSC增殖能力比较差异无统计学意义（P〉0.05）。对P4代进行细胞周期测定,骨折预处理组MSC中G0/G1期细胞为70.65%,对照组MSC中G0/G1期细胞为72.40%,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论骨折预处理全骨髓贴壁法可在更短的时间内成功地培养出稳定的MSC,并且该细胞具有更强的增殖能力。     

川芎嗪干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的探讨川芎嗪(LH)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSC)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSC增殖的作用。方法①LH5、10、20、40μg/mL,以及VCR2.5、5、10、15μg/mL分别与BMC共同培养14d,测定细胞增殖。②LH5、10、20、40μg/mL与BMC预培养1h后再分别加入终浓度为5μg/mLVCR继续培养     

糖尿病对骨髓干细胞血管新生潜能的影响

目的研究糖尿病对骨髓干细胞产生血管生长因子的能力以及向内皮细胞分化能力的影响。方法从糖尿病肥胖大鼠（实验组）和非糖尿病健康大鼠（对照组）各20只分离采集骨髓干细胞进行培养,并检测培养后骨髓干细胞的生存率、培养液中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的浓度、以及骨髓干细胞向内皮细胞的分化率。结果实验组经培养3d后骨髓干细胞的生成率为（30.1±2.4）%,与对照组（31.9±3.8）%相比,无显著性差异（P〉0.05）;实验组经培养7d后骨髓干细胞的生成率为（18.5±3.1）%,与对照组（20.4±1.9）%相比,无显著性差异（P〉0.05）。实验组经培养3d后培养基上清液中VEGF的浓度（134.8±27.5）ng.mL^-1显著低于对照组（189.1±25.6）ng.mL^-1（P〈0.01）;实验组经培养7d后培养基上清液中VEGF的浓度为（282.7±25.2）ng.mL^-1,显著低于对照组（370.2±40.1）ng.mL^-1（P〈0.01）。实验组经培养7d后骨髓干细胞的内皮细胞分化率为（14.7±4.5）%,显著低于对照组（32.8±5.6）%（P〈0.01）。结论糖尿病可以导致骨髓干细胞产生血管生长因子的能力下降以及向内皮细胞分化的能力受损,这将可能导致用自身骨髓干细胞诱导血管新生的能力降低。     

可调性Cem-OsteticTM人工骨浆和自体富血小板血浆复合物修复骨不连的实验研究

目的探讨复合富血小板血浆(PRP)和可调性Cem-OsteticTM人工骨浆对管状骨骨不连的修复作用。方法新西兰大白兔28只,在双侧前臂桡骨中上段截除1.5 cm骨段(包括骨膜),骨断端用骨蜡封闭髓腔,制成骨不连模型。取其中24只,一侧桡骨作实验侧,骨不连处填入复合PRP的人工骨浆;另一侧为对     

诊断级超声对胎鼠生长发育影响的研究

本实验研究了在固定频率、固定辐照时间的条件下，诊断级超声辐照孕鼠的次数与其产仔率、仔鼠身长、体重、脏体比（即脏器重量与体重比值）及与胎鼠生长发育有密切关系的微量元素含量的关系。结果显示：在母鼠孕期内超声辐照２次和４次组、母鼠产仔率、仔鼠雌雄比例及活胎数与对照组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而仔鼠身长、体重、脏体比及肾体比随辐照次数的增加而减小，与对照组有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。但脑体比变化不大。仔鼠肝肾脑中微量元素铜、锌测定结果表明：脑肾中铜、锌元素及肝中铜元素含量实验组明显高于对照组、仅肝中锌元素与对照组无差别。提示诊断超声对小鼠铜、锌元素代谢有一定影响。     

不同氧浓度培养对小鼠骨髓造血干细胞生物活性的影响

本研究模拟人外周血造血干细胞(HSC)移植中HSC所经历的氧环境,研究不同氧浓度对小鼠骨髓HSC生物功能的影响及可能机制。采用体外扩增实验、定向分化实验、细胞周期分析、活性氧测定及亚致死量射线照射小鼠骨髓原始Lin-c-kit+Sca-1+HSC移植等方法,分别检测了Lin-c-kit+Sca-1+HSC的扩增能力,细胞周期,活性氧水平及造血重建能力。结果表明:低于常氧浓度,特别是乏氧的氧环境能降低活性氧的产生,增强原始骨髓HSC体外扩增能力,增加红系集落(BFU-E)、粒单集落(CFU-GM)、红系粒单系巨核系集落(CFU-GEMM)的数量,维持较多的HSC处于G0/G1期,进而明显促进移植后小鼠的脾集落(CFU-S)生长及提高移植小鼠存活数量。而暴露于常氧、不恒定且氧浓度变化剧烈的氧环境中的骨髓HSC能产生较高水平的活性氧,上述功能指标都较低。结论:骨髓HSC的活性氧水平与周围氧环境中氧浓度水平及稳定性密切相关,高水平的活性氧损害骨髓HSC的功能。在恒定的较低浓度的氧环境下培养及应用抗氧化剂对于骨髓HSC移植可能更有益。     

跑台训练结合高钙对去势小鼠骨代谢和结构的影响

目的：研究高钙饮食结合跑台训练对去势小鼠骨骼代谢和微结构的影响。方法：20只雄性C57/B6小鼠随机分为对照组和实验组各10只,采用睾丸切除法制造成年小鼠骨质疏松模型,对照组给予常规饲料喂养,实验组给予高钙饲料喂养及跑台训练。8周后2组小鼠处死取材,测定血清碱性磷酸酶（ALP）活性,并运用micro-CT方法分析动物胫骨微结构定量参数。结果：与对照组比较,实验组小鼠血清ALP活性明显升高,胫骨平台松质骨骨小梁数目、厚度及联结密度明显增强,骨小梁结构类似年轻的板状结构;胫骨中段骨皮质横截面积增大,骨皮质增厚,骨髓腔面积变化不明显。结论：高钙饮食结合跑台训练能显著改善实验动物骨骼微结构参数,提高血清ALP活性,对于延缓骨质流失,防治骨质疏松性骨折具有参考意义。     

移植GM—CSF基因修饰的骨髓细胞对小鼠造血恢复的影响

探索粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因修饰的骨髓细胞促进照射鼠骨髓移植后造血功能恢复的可行性。通过基因转移造血细胞进行骨髓移植的小鼠模型动态观察移植鼠外周血细胞数量、肝脾及骨髓形态学,CFU-S,CFU-GM及血清GM-CSF活性的变化。结果表明,实验组小鼠外周血白细胞与中性粒细胞计数,CFU-S及脾脏CFU-GM明显高于对照组(P<0.05),而各组间骨髓CFU-GM计数无显著性差异(P>0.05);组织学显示实验小鼠肝脾造血组织明显增多,而各组间骨髓象改变不大,并且血清GM-CSF活性也较对照组明显升高(P<0.01)。结论提示,给γ射线照射小鼠移植GM-CSF基因修饰的骨髓造血细胞能显著加快造血恢复的过程。