EB病毒与霍奇金淋巴瘤关系的研究进展

Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ病毒 (ＥＢＶ )最初是由Ｅｐｓｔｅｉｎ和Ｂａｒｒ从非洲Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤培养细胞中发现的 1种独特的疱疹病毒。它广泛存在于人群中 ,血清学、流行病学及分子生物学的研究表明ＥＢＶ与人类的多种疾病密切相关 ,包括传染性单核细胞增多症、部分类型的淋巴瘤、鼻咽癌等疾病。近年来 ,人们逐渐认识到ＥＢＶ与霍奇金淋巴瘤 (ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓｌｙｍｐｈｏｍａ ,ＨＬ )关系非常密切[1] ,在这方面做了不少研究工作。我们就ＥＢＶ与ＨＬ研究的最新进展作一综述。1　ＥＢＶ的结构与功能ＥＢＶ属疱疹病毒γ亚科嗜淋巴…     

EB病毒潜伏膜蛋白1基因C末端30 bp缺失与非霍奇金淋巴瘤的关系

背景与目的EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)与多种肿瘤包括非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin'slymphoma,NHL)的发生有着密切关系,其中潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)基因被认为是EBV的致癌基因。近年的研究发现,LMP1基因的多态性尤其C末端30bp的缺失(del-LMP1)与其致瘤性密切相关,可能在肿瘤的发生发展中起着重要作用。本研究观察del-LMP1基因在非霍奇金淋巴瘤患者和健康人中的表达情况,以探讨缺失型LMP1基因是否与NHL的发生及临床预后相关。方法应用特异性引物,采用聚合酶链反应扩增NHL和健康人中LMP1基因片段(产物包括30bp缺失部分),根据扩增产物的大小判断其是否存在30bp的缺失,并随机抽取PCR产物进行测序。观察缺失型LMP1基因在两者之间的构成比,并分析缺失型LMP1基因与NHL临床预后的关系。结果(1)48例NHL中有23例LMP1基因片段扩增阳性,其中携带缺失型者18例(78%),原型5例(22%);60例健康人有32例LMP1基因片段扩增阳性,其中携带缺失型者13例(41%),原型19例(59%);NHL患者和健康人中30bp缺失型LMP1基因的表达有显著性差异(P<0.05)。(2)LMP1基因片断扩增阳性的NHL中,IPI≥3者为15例,其中缺失型14例(93%),原型1例(7%);IPI<3者为8例,其中缺失型4例(50%),原型4例(50%),缺失型LMP1在不同IPI值的NHL     

EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌形成中的作用

EB病毒潜伏感染在鼻咽癌的形成中起着重要的作用.现综述近年来研究EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌形成作用中的进展情况,并着重介绍其对细胞信号传导通路、血管生成及转移等的影响.     

EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌形成中的作用

EB病毒潜伏感染在鼻咽癌的形成中起着重要的作用。现综述近年来研究EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌形成作用中的进展情况，并着重介绍其对细胞信号传导通路、血管生成及转移等的影响。     

EB病毒潜伏膜蛋白1基因多态性与NK/T细胞淋巴瘤的相关性

目的: 探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)基因变异与山东地区结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)的相关性。方法:采用巢式PCR和DNA测序检测山东地区EBV阳性ENKTL组织(47例)和健康成年人咽漱液(70例)中LMP1全长序列,与EBV标准株及相关序列进行比对,绘制系统进化树,根据其特征性突变对基因变异进行分类,比较LMP1各变异类型在ENKTL和健康人群中分布的差异。结果:117例标本完成测序,共发现3种主要变异类型:China 1、China 2和Med-,其在ENKTL中的检出率分别为85.1%、8.5%和4.3%,在健康人群中的检出率分别为65.7%、5.7%和21.4%,另有1例(2.1%)ENKTL和5例(7.2%)健康人群为不同亚型的重组病毒株,LMP1亚型在2种人群中的分布差异具有统计学意义(P=0.022)。LMP1 N端XhoI 位点缺失变异即XhoI (-)和C端30 bp缺失即del-LMP1在ENKTL中的检出率(95.7%和85.1%)高于健康人群(74.3%和67.1%),差异均有统计学意义(P=0.003和P=0.029)。结论:山东地区ENKTL中LMP1以China 1亚型、XhoI (-)和del-LMP1为主,带有3种变异型的EBV毒株可能与ENKTL的发生相关。     

EB病毒潜伏膜蛋白LMP-1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的观察EB病毒（EBV）潜伏膜蛋白1（LMP-1）在鼻咽癌（NPC）鼻咽拭子中的表达,探讨LMP-1表达与NPC临床病理特征的关系。方法纳入2007年～2008年福建省肿瘤医院放疗科收治的经病理检查确诊为NPC且同意参加该试验的初治患者129例,均在治疗前应用鼻咽拭子法取鼻咽部黏膜脱落细胞,提取DNA,采用PCR法检测LMP-1基因的表达。结果 129例患者中有114例患者LMP-1呈阳性表达,另15例呈阴性表达,阳性率为88.37%（114/129）;对照组中无1例呈阳性表达。LMP-1阳性表达率有颈部淋巴结转移组明显高于无颈部淋巴结转移组。LMP-1表达与患者年龄、性别、临床分期、T分期及M分期无相关性。结论 PCR法检测鼻咽拭子中LMP-1的检出率高于免疫组化法,LMP-1表达与鼻咽癌患者颈部淋巴结转移密切相关,临床中可预测鼻咽癌患者的转移潜能,LMP-1可能做为抗肿瘤转移靶向治疗的潜在靶点。     

EB病毒潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型研究

  目的   建立EBV潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型,为淋巴瘤预防与治疗的研究奠定基础。   方法   利用新霉素耐性的重组遗传基因EBV（NeoR EBV）和B95-8 EBV对套细胞淋巴瘤细胞株SP49、SP53和Jeko-1进行感染,选出EBV阳性的MCL细胞株,采用免疫荧光法和Southern blot进行鉴定,采用Western blot和流式细胞仪检测EBV阳性的MCL细胞株的免疫表型及生物学活性。   结果   成功获得SP49/EBV、SP53/EBV细胞株,均表达EBER1、EBNA2和LMP1,其免疫表型只有CD38表达增强,两细胞株均具有低增殖功能,凋亡抵抗性,成瘤能力下降等特点。   结论  本研究建立的SP49/EBV和SP53/EBV细胞株,具有体内EBV潜伏感染的静息B细胞低增殖活性的特征,可成为研究体内EBV潜伏感染的良好模型。      

EB 病毒与非霍奇金淋巴瘤——附180 例报道

 目的　探讨 NHL与 EBV感染的相关性。方法　用 ISH方法检测 1 80例 NHL中EBV编码的 RNA( EBER1 /2 )。结果　 ( 1 ) EBER1 /2感染率为 42 .8% ( 77/1 80 ) ,感染率依次为TCL64.8%、NK/T46.2 %、BCL9.5 %。其中 TCL、NK/T与 BCL相比 ,P≤ 0 .0 0 5 ;( 2 )结内、结外EBV感染率依次为 2 2 .2 %、5 3.8% ,有显著差异 ,P<0 .0 0 5 ;( 3)面中线 (鼻腔 /口咽环 ) EBER1 /2感染率 72 .4% ( 5 5 /76) ,多形细胞性 EBER1 /2感染率 70 .1 % ( 5 4 /77)。结论　本地区 NHL与 EBV感染关系密切 ,TCL、NK/T淋巴瘤感染率明显高于 BCL,而且有部位限制性和亚型倾向性.     

EB病毒潜伏膜蛋白对鼻咽癌细胞体内外增殖力的影响

 目的:研究EBVLMP对人高分化鼻咽癌细胞株CNE1体内外增殖能力的影响。方法:以人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBVLMP表达质粒转染CNE1细胞。以载体质粒转染及CNE1细胞为对照,用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞术、PCNA检测和裸鼠成瘤实验,观察细胞增殖能力的变化。结果:结晶紫染色法检测体外细胞增殖,结果表明,A比值实验组高于空白组及阴性对照组(P<0.01);实验组细胞软琼脂克隆形成率显著高于空白组及阴性对照组(P<0.01);FCM法测定细胞周期,实验组S期细胞比空白组及阴性对照组显著增高,S期细胞达349%;PCNA免疫组化染色,实验组细胞PCNA阳性率明显高于空白组及阴性对照组(P<0.01)。CNE1及转染细胞系裸小鼠移植结果表明,LMP表达细胞系移植瘤潜伏期、体内倍增时间明显缩短(P<0.01),成瘤率、瘤重显著增高(P<0.01/0.05)。结论:EBVLMP对CNE1细胞体内外增殖能力有明显的促进作用,提示LMP在NPC细胞演进过程中可能起重要作用,为进一步深入研究提供了依据。     

EB病毒与霍奇金淋巴瘤相关性的研究进展

EB病毒（EBV）与霍奇金淋巴瘤（HL）的发生密切相关,其相关性受年龄,性别,民族／种族,地理环境以及社会经济状况的影响。在经典型HL的肿瘤细胞中,EBV的检出率为20％-80％,尤其是在西方国家。病毒有两种不同的生活方式：潜伏期,只表达有限的基因;裂解周期,多数病毒基因被表达并产生病毒颗粒。EBV潜伏基因的表达产物在HL的发生中具有重要作用,肿瘤EB病毒的状态与HL的临床预后和治疗均有关联。     

P T TG和bFGF 在非霍奇金淋巴瘤中的表达

 目的　研究垂体肿瘤转化基因( PTTG) 和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 在非霍奇金淋巴瘤 中的表达及其意义。方法　应用原位杂交法和免疫组化法分别检测50 例NHL 患者和20 例良性淋巴 结炎中PTTG mRNA 及其蛋白、bFGF 蛋白的表达。结果　PTTG mRNA 及其蛋白在N HL 中的阳性 表达率分别为54. 0 %(27/ 50) 和50. 0 %(25/ 50) ,均高于对照组; bFGF 蛋白在N HL 中的阳性表达率为 50. 0 %(25/ 50) ,高于对照组;PTTG mRNA 及其蛋白、bFGF 蛋白均与N HL 的恶性程度及临床分期呈 正相关关系;PTTG mRNA 与其蛋白表达,与bFGF 蛋白表达均呈等级正相关;与近期疗效呈负相关关 系。结论　PTTG或bFGF 可能与N HL 生物学行为有关,PTTG可能通过直接或间接方式促进bFGF 表达,参与NHL 的发生、发展。     

非霍奇金淋巴瘤细胞DNA含量测定的临床意义

研究非霍奇金淋巴瘤(NHL)中DNA含量和S期细胞比例(SPF)在非霍奇金淋巴瘤诊断和治疗中的意义。方法:35例NHL患者(NHL组)和10例淋巴结反应性增生患者(对照组)的新鲜淋巴组织,应用流式细胞技术检测其中DNA含量,并计算SPF。结果:35例NHL中异倍体出现率为37.10%(13/35)。10例反应性增生淋巴结组织中无异倍体出现。NHL组SPF均值为22.39%,对照组为9.88%(P<0.01)。NHL患者中低度恶性、中度恶性及高度恶性的SPF均值分别为9.10%、23.48%及29.16%。化疗有效者(完全缓解加部分缓解)SPF为25.63%,无效者为14.23%(P<0.05)。结果表明NHL中SPF的表达有随着恶性程度的增高而增加的趋势。肿瘤表现异倍体或高SPF者近期疗效好。结论:异倍体或高SPF有助于NHL的诊断并与疗效有关。     

EBV LMP-1 negatively regulates expression and pro-apoptotic activity of Par-4 in nasopharyngeal carcinoma cells

Latent membrane protein-1 (LMP-1) of the Epstein-Barr virus (EBV) is closely associated with nasopharyngeal carcinoma (NPC), and in this study we sought to determine whether the pro-apoptotic activity of prostate apoptosis response-4 (Par-4) is modulated by LMP-1 in NPC cells. We found that LMP-1 diminished the pro-apoptotic activity of Par-4 and negatively regulated Par-4 protein by de novo synthesis; moreover, although LMP-1 accelerated a Par-4 activator, PKA, we demonstrated that LMP-1 also activated the PI3 K/Akt pathway and increased Bcl-2 expression to suppress the activity of Par-4. Consequently, our results revealed a novel negative action of LMP-1 on the pro-apoptosis protein Par-4 by the coordination of multiple signaling pathways.     

Interferon regulatory factor 7: a key cellular mediator of LMP-1 in EBV latency and transformation

Interferon regulatory factor 7 (IRF-7) was cloned within the biological context of Epstein-Barr virus (EBV) latency, and has an intimate relation with EBV. EBV latent membrane protein 1 (LMP-1) regulates IRF-7 both by inducing the expression of IRF-7 and by activating IRF-7 protein through phosphorylation and nuclear translocation in a post-translational manner. The activated IRF-7 then functions to regulate both EBV and cellular target genes involved in latency, transformation and immune regulation. IRF-7 appears to be a key cellular latency protein involved in both the pathogenesis and persistence of EBV infection.     

鼻咽癌组织中EB病毒感染与癌基因表达的关系

目的 观察EB病毒（epstein-barr virus,EBV)RNA、潜伏膜蛋白（LMP－1）、细胞周期素D1（cyclin D1)及c-fos在鼻咽癌组织中的表达，并分析其相互关系。方法 采用原位分子杂交技术检测36例鼻咽癌组织中EBV编码的小分子RAN（encoded small RNAs,EBERs)，采用免疫组化技术检测LMP－1及cyclin D1、c-fos的表达。结果 36例鼻咽癌组织中EBV RNAs阳性率为100．0％（36／36），LMP－1阳性率为44．4％（16／36），cyclin D1阳性率为52．8％（19／36），c-fos阳性率为61．1％（22／36）。LMP－1表达与cyclin D1、c-fos表达有明显的关系。结论 鼻咽癌发生是多步骤、多基因改变的过程。鼻咽活检组织中有EBERs及LMP－1的检出，对鼻咽癌的诊断具有一定的价值。     

鼻型NKT淋巴瘤患者血清生存素和P53表达及其临床意义研究

目的 探讨鼻型NKT淋巴瘤患者血清生存素(survivin)和P53表达及与其临床病理因素的相关性.方法 收集鼻型NK/T淋巴瘤患者45例,同期纳入体检健康者50例作为对照组;比较两组血清survivin和P53水平.分析鼻型NKT淋巴瘤患者血清survivin和P53的水平与患者性别、年龄以及TNM分期、全身B症状、Ann Arbor分期、IPI评分等临床病理因素的相关性.所有患者均随访2年,记录死亡病例,比较死亡患者和存活患者在入院时的survivin和P53水平.结果 与对照组比较,NK/T淋巴瘤组患者血清survivin和P53水平均明显升高(P＜0.01).血清survivin和P53的水平与NK/T淋巴瘤患者年龄、性别无显著相关性(P＞0.05),而与TNM分期、全身B症状、Ann Arbor分期、IPI评分呈显著性相关,(P＜0.01).随访2年:10例死亡,35例存活;死亡患者在入院时血清survivin和P53水平均明显高于存活者(P＜0.01).结论 鼻型NKT淋巴瘤患者血清survivin和P53水平均显著升高,与其恶性程度密切相关,也可能是临床评价该病患者预后的重要标志物.     

Frequent Presence of Latent Epstein-Barr Virus Infection in Peripheral T Cell Lymphomas. A Review

Two-hundred and four cases of peripheral T cell lymphoma (PTCL) occuring in Europeans without any sign of HIV-infection were investigated for their association with an Epstein-Ban virus (EBV) infection. Polymerase chain reaction (PCR) was applied for EBV-DNA detection, in situ hybridisation (ISH) for the cellular localization of EBV-encoded small nuclear RNA (EBER) and immediate early gene expression (BHLF) ad immunohistology (IH) for the detection of EBV-encoded latent membrane protein 1 (LMPI) and EBV nuclear antigen 2 (EBNA2) expression. PCR and EBER-ISH produced congruent results in almost all cases with amplifiable DNA, leading to the finding of an overall frequency of EBV presence in 87/204 (42.6%) of the PTCL cases. Through EBER-ISH, the virus was identified to be exclusively present in small and blastic bystander lymphocytes in 29 cases, whilst an additional infection of neoplastic T cells was observed in the remaining 58 EBV-positive cases. The entity presenting with the most frequent EBV infection of tumour cells was that of angioimmunoblastic type PTCL, whilst the primary cutaneous PTCLs only seldom harbored the virus. Forty-eight of the EBV-positive TCLs showed an infection of a small proportion (1-20%) of the tumour cell population. whilst another ten cases, belonging to the pleomorphic TCL (PMTCL) group, displayed an infection of several to almost all neoplastic T cells (20-100%). Additional lytic EBV-infected cells could be detected in four cases by BHLF-ISH. LMPI expression was present in a small proportion of the neoplastic T cells in 24 of the 58 cases with tumour cell infection, whilst an EBNA2 expression was detectable only in one case. Some non-malignant EBV-infected B-immunoblasts and Hodgkin/Reed Stemberg-like cells also expressed LMPI in several cases. Our data imply a role of EBV in the pathogenesis of only a few PMTCL caw with predominant tumour cell infection, whilst the pathogenic significance of an EBV infection in the other PTCLs remains unclear due to the usually partial infection of the neoplastic cell component.     

鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型、EBV感染及TCRγ基因重排的检测

 目的 检测鼻NK/T细胞淋巴瘤（NK/TCL）的免疫表型、EBV感染及TCRγ基因重排,为诊断和鉴别诊断提供依据。方法 收集诊断鼻NK/TCL48例患者石蜡包埋标本,用免疫组化SP法标记LCA、CD79α、CD20、CD56、CD3、CD45RO及EBV抗体研究其免疫表型;EBER探针原位杂交方法检测EBV编码的小分子RNA（EBER）;聚合酶链式反应扩增方法检测TCRγ基因重排。结果 48例鼻NK/TCL均表达LCA,CD3、CD45RO、CD56和EBV阳性率分别为44%、52%、73%和19%,CD79α和CD20均阴性;EBER阳性率为81%;TCRγ基因重排阳性率为19%。结论 鼻NK/TCL免疫表型不一致,并非所有病例CD56阳性,石蜡切片中CD3阳性定位于细胞质;EBER在肿瘤细胞中高表达,提示它们可能为NK细胞来源;部分TCRγ基因重排阳性病例应为鼻NK样T细胞淋巴瘤。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在T与NK细胞淋巴瘤中的表达

目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在T与NK细胞淋巴瘤中的表达.方法:采用免疫组织化学LSAB(SP法)检测鼻NK/T细胞淋巴瘤30例,外周T细胞淋巴瘤20例,血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤10例,前体T细胞急性淋巴母细胞白血病10例共70例T与NK细胞淋巴瘤SHP-1蛋白的表达;同时检测淋巴结反应性增生10例,B小淋巴细胞性淋巴瘤10例以及浆细胞瘤10例共30例对照样本SHP-1蛋白的表达.结果:实验组70例T与NK细胞淋巴瘤均未检测出SHP-1蛋白,而对照组所有反应性增生淋巴结,5/10例B小淋巴细胞性淋巴瘤和5/10例浆细胞瘤检测出SHP-1蛋白的表达,实验组与对照组比较有统计学意义(X2检验,P＜0.01).结论:SHP-1在T与NK细胞淋巴瘤中缺乏表达,可能是一个潜在的抑癌基因.