实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其意义。方法 应用立体定向技术于大鼠尾壳核注射自体尾动脉血建立大鼠脑出血模型，动态观察组织病理学改变，动态观察脑组织含水量。免疫组织化学染色显示脑出血后VEGF在脑组织内的表达。结果 大鼠脑出血后脑含水量于24h开始明显升高。48h达高峰并持续到72h，与病灶对侧及假手术组比较有统计学意义；脑出血后脑内VEGF阳性细胞数随时间逐渐增多。以24h，48h，72h最为显著，7d时呈现血管样结构。结论 脑出血后脑内VEGF的表达与脑水肿相关，且VEGF可促进血肿周围组织的血管增生，可能对脑出血后的组织修复起促进作用。     

胃癌组织血管内皮生长因子的表达及临床意义

用抗VEGF单抗SLAB免疫组化法研究胃癌手术标本血管由皮生长因子（VEGF）的表达。结果41例中，总阳性率56．1％。淋巴转移阳性组高于阴性组（P＜0．05），浆膜侵犯组高于未侵犯组（P＜0．05），且按TNM分期，VEGF阳性率有逐级增高的趋势。说明VEGF可能与胃癌浸润与转移密切相关。术后抗血管形成治疗对患者有益。     

鼻息肉组织中肝细胞生长因子及血管内皮生长因子的表达

目的:检测鼻息肉组织中肝细胞生长因子(HGF)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法:采用免疫组织化学方法分别检测30例鼻息肉标本和20例正常下鼻甲黏膜标本中HGF与VEGF的表达.结果:鼻息肉组织中可见大量嗜酸性粒细胞浸润.鼻息肉组织中HGF和VEGF蛋白的阳性表达率分别为83.3%和76.7%,均高于正常对照组(30.0%和10.0%,P<0.05),且在鼻息肉血管内皮细胞及间质浸润的炎症细胞中2者的表达呈正相关(r=0.630,P<0.05;r=0.514,P<0.05).结论:鼻息肉组织中HGF和VEGF的表达增强,提示2者可能协同参与鼻息肉的形成.     

卵巢癌组织血管内皮生长因子蛋白质和mRNA的表达

目的 :探讨血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白质和核酸在卵巢肿瘤组织中的表达与其病理特性和肿瘤转移的关系 ,寻找预后指标和基因治疗的组织细胞 .方法 :恶性卵巢肿瘤 38例、良性卵巢肿瘤 2 7例及正常卵巢组织 2 0例 ,采用SABC免疫组织化学技术检测组织VEGF的蛋白质表达位置及水平 ,原位杂交技术 ,显示组织VEGFmRNA的基因表达和丰度 .结果 :恶性卵巢肿瘤组织VEGF和VEGFmRNA阳性表达率分别显著高于良性肿瘤(P <0 .0 1) ,其二者阳性表达率分别是 89.5 % (34/ 38)和86 .8 % (33/38) ,卵巢癌转移组中二者的表达显著高于未转移组 ,腺癌细胞及周围基质中二者的表达不同步 .结论 :VEGF和VEGFmRNA可以作为卵巢癌侵袭的表型 ,是评估预后的指标 .     

siRNA沉默脑组织血管内皮生长因子表达对高原大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 观察siRNA沉默脑组织血管内皮生长因子(VEGF)表达后对高原大鼠血脑屏障通透性的影响,探讨高原脑水肿的病理机制和预防方法.方法 50只Wistar大鼠随机分入正常对照组(NC)、高原对照组(HC)、脑室生理盐水对照组(SC)、siRNA静脉干预组(IVI)和siRNA脑室干预组(CVI).建立高原大鼠模型;NC组大鼠正常饲养;HC组大鼠造模前给予尾静脉内注射生理盐水;SC组在造模前给予脑室注射生理盐水;IVI组在造模前给予尾静脉注射VEGF特异性siRNA,CVI组给予脑室内注射VEGF特异性siRNA.造模24 h后迅速断头取前脑,干湿重法测定脑组织含水百分率及应用荧光素钠透过率测定血脑屏障通透性;实时荧光定量RT-PCR检测VEGF-mRNA表达,Western印迹法测定大鼠脑组织VEGF表达.结果 HC组脑组织VEGF-mRNA、VEGF表达及NaFl含量均显著高于NC组[VEGF-mRNA从(21.6±3.5)Kcopies/μg上升到(36.3 ±3.9)Kcopies/μg,VEGF从0.48±0.09增加到0.77±0.12,NaFl含量从(548±48)rfu/mg增加到(674±32)rfu/mg,均P＜0.01].与HC组相比,IVI组脑组织VEGF mRNA、VEGF表达及NaFl含量差异无统计学意义(均P＞0.05).CVI组腩组织VEGF-mRNA、VEGF表达及NaFl显著低于HC组[VEGF-mRNA从(36.3±3.9)Kcopies/μg降低到(19.9 ±4.3)Kcopies/μg,P＜0.01;VEGF从0.77±0.12降低到0.44 ±0.13,P＜0.01;NaFl含量从(674±32)rfu/mg下降到(542±77)rfu/mg,P＜0.05].各组间脑组织含水率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高原低氧诱发的VEGF表达增高是高原脑水肿的重要病理环节,脑室内应用特异性沉默VEGF的siRNA可阻断VEGF的表达,抑制毛细血管通透性增高,可成为预防高原脑水肿的新途径.     

乳腺癌组织中血管内皮生长因子C、血管内皮生长因子受体3的表达及相关性研究

目的观察乳腺癌组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测76例乳腺癌组织、62例癌旁乳腺组织中VEGF-C及VEGFR-3的表达情况,并比较在不同组织中的表达。分析不同临床因素的乳腺癌患者VEGF-C及VEGFR-3的表达情况。结果乳腺癌组织标本中有57例出现VEGF-C阳性表达(75.0%,57/76),而癌旁组织中5例VEGF-C阳性(8.1%,5/62),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。46例淋巴结转移的标本中有41例VEGF-C阳性(89.1%,41/46),30例淋巴结未转移标本中16例VEGF-C阳性(53.3%),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌组织VEGF-C阳性表达情况与年龄、肿瘤直径、临床分期均无关(P均>0.05)。乳腺癌组织标本中有52例出现VEGFR-3阳性(68.4%,52/76),而癌旁组织中4例VEGFR-3阳性(6.5%,4/62),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。46例淋巴结转移的标本中有38例VEGFR-3阳性(82.6%,38/46),而30例淋巴结未转移标本中仅13例VEGFR-3阳性(43.3%,13/30),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌组织VEGFR-3阳性表达情况与年龄、肿瘤直径、临床分期均无关(P均>0.05)。乳腺癌组织中VEGF-C与VEGFR-3呈正相关(r=0.758,P<0.05)。结论乳腺癌组织VEGF-C和VEGFR-3的表达明显增强,并与淋巴结转移密切相关,通过对VEGF-C及VEGFR-3的联合检测可能更有利于准确评估预后,且该信号系统可能成为抗某些肿瘤淋巴道转移的特异性靶标。     

血管内皮生长因子与急性硬膜外血肿严重程度的关系

目的 检测血管内皮生长因子(VEGF)在急性硬膜外血肿(EDH)患者血液中的表达情况,并探讨与其严重程度的关系。方法 选取我院急诊科收入院的CT确诊为EDH并入院时检测VEGF的342例成人患者为研究对象,根据入院时检测的VEGF表达高低分为VEGF表达低、正常和高三组,入院时记录新的损伤严重程度评分(NISS),格拉斯哥昏迷量表(GCS),血肿体积和中线移位大小;出院时记录早期神经功能下降(END),手术方式,死亡人数和重症监护病房(ICU)及总住院时间。应用Pearson法分析不同VEGF分组之间VEGF水平与各指标之间的关系,方差分析计算VEGF水平与病死率的关系,非条件logistic回归分析病死的危险因素。结果 342例EDH患者入院时VEGF平均值为(74.585±37.686)pg/mL。147例(43.0%)行手术治疗,出院时16例(4.7%)患者死亡。Pearson法显示VEGF与各指标无相关性,方差分析示VEGF降低与病死率有统计学意义的相关性(P＜0.05),logistic回归分析示入院时NISS升高、GCS下降及VEGF降低是与病死率相关的危险因素。结论 在入院早期,多数EDH患者血清VEGF值有所升高,少数降低。入院时NISS升高、GCS下降和VEGF降低是与病死率相关的危险因素。     

宫颈鳞癌组织中血管内皮生长因子表达的临床意义

目的探讨子宫颈鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的临床意义。方法对1994年1月-1998年7月就诊、放疗、手术根治并能建立随访关系的官颈癌患者103例,采取免疫组化S-P法检测官颈鳞状细胞癌组织中VEGF的表达水平,分析官颈鳞癌患者复发、转移、生存期以及癌的分化程度、生长方式的关系。结果官颈癌组织中VEGF表达的阳性率为55．3％（75／103）,在高分化鳞状细胞癌中VEGF阳性表达率为31．5％（10／32）．低分化鳞状细胞癌阳性表达率为60．4％（26／43）,未分化鳞状细胞癌阳性表达率为75％（21／28）,分化程度越低,阳性率越高（P〈0．01）。生长方式中外生浸润型阳性表达率为45．1％（35／51）,内生浸润型阳性表达率为65．4％（34／52）,VEGF阳性随生长方式不同而有显著性差异（P〈0．05）。手术根治患者中有淋巴结转移的VEGF阳性表达率为76．2％（16／21）,无淋巴结转移VEGF阳性表达率为33．3％（3／9）（P〈0．05）。VEGF阳性表达者5年内复发率为61．4％（35／57）,VEGF阴性表达者5年内复发率为34．8％（16／46）（P〈0．05）。VEGF阳性患者5年生存率为43．8％（25／57）。VEGF阴性患者5年内生存率为69．7％（32／46）,两者有显著性差异（P〈0．05）。结论官颈鳞状组织中VEGF表达与分化程度、生长方式、复发、淋巴结转移及生存期密切相关,VEGF阳性表达者预后较差。检测官颈癌组织中VEGF表达水平是判断官颈癌预后的重要指标。     

卵巢癌组织中血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨卵巢癌病变组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平与临床分期的关系。方法选取33例卵巢癌患者作为试验组,子宫内膜正常者9例作为对照组,应用免疫组化检测两者VEGF的表达水平。结果对照组VEGF平均表达水平为(4.3±2.2)ng/L,试验组为(12.1±2.3)ng/L,两组比较差异有统计学意义(t=9.0959,P<0.01)。在高、中、低分化腺癌中,VEGF表达水平分别为(10.1±2.3)、(11.4±2.1)、(12.6±2.3)ng/L,三组比较差异有统计学意义(F=10.32,P<0.01),且两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 VEGF在卵巢癌病变组织中的表达升高,与肿瘤的发生发展及转移密切相关,可作为反映卵巢癌生物学行为的指标之一。     

胃腺癌组织中血管内皮生长因子的表达

目的探讨胃腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法应用免疫组织化学SP方法,对56例胃腺癌组织,其中男32例,女24例,年龄31～75(56.38±12.1)岁;组织学分级为Ⅰ级15例,Ⅱ级29例,Ⅲ级12例;TNM分期Ⅰ期4例,Ⅱ期16例,Ⅲ期24例,Ⅳ期12例;高分化腺癌11例,中等分化腺癌25例,低分化腺癌20例;浸润至黏膜下层以内15例,肌层27例,浆膜层14例;有淋巴结转移者34例,无淋巴结转移者22例;40例癌旁不典型增生组织和56例正常胃组织中VEGF的表达情况进行检测,并分析其与临床病理特征的关系.结果胃腺癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中VEGF的阳性表达率分别为69.64%、45.00%和23.21%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);VEGF与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、组织学分级、临床病理分期有关(P＜0.05或0.01),与患者年龄、性别及胃腺癌的分化程度无关(P＞0.05).结论VEGF与胃腺癌的发生发展及浸润转移有关.     

Study on the relationship of cytochrome C expression and cerebral edema in perihematomal brain tissue in patients with hypertensive cerebral hemorrhage

Objective To investigate the expression of cytochrome C in perihematomal brain tissue and its relationship with the histopathological change and formation of cerebral edema in patients with hypertensive cerebral hemorrhage.Methods Thirty four patients(23 male,11 female) of hypertensive cerebral hemorrhage in hospital from Sep.2001 to Sep.2002 were selected with a mean age 55.6± 10.2 years(from 35 to 75 years).The mean volume of hemorrhagic blood was 50.4±11.6 ml(from 25 to 85 ml).The perihematomal brain tissue was obtained from the minimally invasive surgery.Histopathological change and expressions of cytochrome C in perihematomal brain tissue was detected by histopathological and immunohistochemical techniques.The volume of perihematomal cerebral edema was determined by computed tomographic scan before operation.The results of staining and the volume of perihematomal cerebral edema were analyzed with double blind fashion.Results Perihematomal cerebral edema were found 12-72h after cerebral hemorrhage.Myelin sheath degeneration,condensation of nucleus and typical apopototic body were observed in perihematomal brain tissue.Expression of cytochrome C in perihematomal brain tissue was observed at 4 h and reached peak around 48-72 h after cerebral hemorrhage.Cytochrome C expressed higher positively in 16 patients and lower positively in 13 patients.Cytochrome C expression was not detected only in 5 patints.There were significant differences in volume of perihematomal cerebral edema with different expression of cytochrome C in perihematomal brain tissue(P<0.01).Conclusions Cytochrome C expression was upregulated in perihematomal brain tissue in patients with hypertensive cerebral hemorrhage.Cytochrome C might involve in the histopathological change and the formation of perihematomal cerebral edema     

脑血管病与VEGF关系的研究

目的测定脑血管病人血浆血管内皮生长因子(VEGF)水平及其与病情轻重的关系,探讨VEGF对脑缺血再灌注损伤的作用.方法用ELISA法测定脑血管病人的血浆VEGF水平,采用线栓法做鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,比较缺血对照组和VEGF处理组梗死体积和脑组织含水量的差异.结果脑梗死及脑出血患者急性期血浆VEGF水平明显升高(P＜0.05),脑梗死患者在患病3周后VEGF较急性期还高(P＜0.05),而脑出血患者则较急性期下降(P＜0.05),VEGF水平与病情轻重成正比(P＜0.05),应用VEGF组脑梗死的体积和脑细胞含水量较对照组明显降低(P＜0.05).结论脑缺血诱导VEGF的产生,而VEGF能减小梗死体积,减轻脑水肿.     

脑外伤合并骨折患者骨折愈合过程中血管内皮生长因子在血清和骨痂中的表达

目的研究脑外伤合并骨折患者血清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量的变化与骨折局部肉芽组织中VEGF表达变化,探讨体液因素中VEGF与脑外伤后骨折愈合加速的关系。方法以首都医科大学附属北京天坛医院收住的57例患者为研究对象(患者骨折部位与类型基本相同,均为四肢长管状骨骨折),行酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组织化学染色。1)ELISA:将57例患者分成2组:单纯骨折组(A组)31例和脑外伤合并骨折组(B组)26例,所有病例均在伤后1、2、3、4周时取空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行血清中VEGF含量的测定。2)免疫组织化学染色:根据手术距受伤时间3～7 d、8～14 d、15～21 d 3个时间段,分别将31例单纯骨折组(A组)和26例骨折合并脑外伤组(B组)分为A1(10例)、A2(11例)、A3(10例)组和B1(8例)、B2(8例)、B3(10例)组,每个研究对象于术中取骨折局部肉芽组织为标本,采用免疫组化染色,进行VEGF阳性细胞表达率及灰度值测算。结果 1)ELISA:A组(单纯骨折组)患者血清VEGF含量在伤后1周含量较少,2周出现峰值,4周时有明显下降;B组(脑外伤合并骨折组)患者血清VEGF含量在伤后1周即出现高峰,以后虽有所下降但仍维持较高水平,持续时间长,在4周时有明显下降。B组(脑外伤合并骨折组)血清VEGF含量在1～3周时均显著高于同一时间点的A组(单纯骨折组)(P<0.05),4周时2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2)免疫组织化学染色:A组(单纯骨折组)3～7 d时VEGF有少量表达,在14 d左右达高峰,在15～21 d时略下降。B组(脑外伤合并骨折组)在受伤后3 d时VEGF即有大量表达,7 d达高峰,在15～21d时仍维持在较高水平。B组(脑外伤合并骨折组)在各时间段VEGF表达阳性细胞率及灰度值均显著高于A组(单纯骨折组)(P<0.05)。结论脑外伤合并骨折患者骨折愈合过程中VEGF在血清含量和骨折局部位点表达高于单纯骨折患者,脑外伤可能主要是通过促进体液因素中VEGF等生长因子的表达来加速骨折愈合过程。     

急性脑梗塞患者血清VEGF动态变化及其意义

为探讨血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在急性脑梗塞发病中的作用及与脑梗塞体积、病情的关系 ,采用酶联免疫法动态测定了 42例急性脑梗塞患者起病后第 1,3,7及 14天血清VEGF含量。结果显示 :脑梗塞患者血清VEGF含量在各时间点均显著高于对照组 ,第 7天达峰值 ,峰值水平与梗塞灶大小及临床神经功能缺损评分密切相关。提示VEGF与脑梗塞病理生理过程密切相关 ,血清VEGF水平测定对判断脑梗塞病变严重程度及指导临床有重要价值     

血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体,为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体,构建原核表达质粒,转染大肠杆菌ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导表达,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定表达产物。在此基础上构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ ／ｈＶＥＧＦ１６５,脂质体介导转染ＣＨＯ－Ｋ１细胞,Ｇ－４１８筛选,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ,Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ分别检测其在细胞内的转录和表达情况,３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测表达蛋白的活性。结果：实验组的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ出现特异性条带,而对照组在相应部位未出现条带。实验组的大鼠心肌血管内皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组（Ｐ＜ ０．００１）。结论：本实验所构建的ＶＥＧＦ真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达,其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性。     

血管内皮生长因子在异位和在位子宫内膜中的表达

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在子宫内膜异位症（endometrio-sis,EM）患者的异位和在位内膜中的表达及其在EM发病机制中的作用。方法应用ELISA法检测有或无EM的妇女的血管内皮生长因子（VEGF）水平、采用免疫组织化学S-P法测定VEGF在EM患者异位与在位内膜及对照组增殖期和分泌期子宫内膜组织中的表达,并以抗第八因子相关抗原（F8-RA）抗体标记间质微血管并进行微血管计数（MVD）。结果在整个月经周期中,研究组异位和在位内膜中VEGF表达均持续高于对照组（P〈0.01）。EMs患者异位内膜和在位内膜的微血管密度（MVD）明显高于对照组内膜（P〈0.05）。结论VEGF在EMs患者的高表达,说明其通过促血管生成在该病发生发展中起着重要作用。     

食管鳞癌组织中血管内皮生长因子mRNA的表达

目的:探讨食管癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:应用实时荧光定量RT-PCR及基因芯片技术对15例食管鳞癌组织和相应正常食管黏膜组织进行VEGFmRNA检测。结果:15例食管鳞癌组织中有8例VEGFmRNA上调表达,其平均表达水平,cDNA微阵列和实时荧光定量RT-PCR检测结果分别为(3.82±0.75)和(4.11±0.89);VEGFmRNA的表达与食管癌患者的年龄、性别、肿瘤的部位、大小、形状、病理分化程度等临床病理特征无关,与临床分期、远处转移有关。结论:VEGF在食管癌浸润和转移过程中发挥重要作用,检测肿瘤组织中VEGFmRNA水平对预测食管癌的侵袭和转移具有重要的临床意义。     

人脑转移瘤中VEGF及PCNA的表达

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在脑转移瘤发生和发展中的作用。方法 :采用Northern印迹杂交和免疫组化方法检测 30例人脑转移瘤中VEGF基因及蛋白表达 ,同时进行细胞增殖核抗原 (PCNA)检测 ,以内减压术取得的 8例正常脑组织为对照。结果 :30例转移瘤与正常脑组织相比 ,均有PCNA、VEGF基因及蛋白高表达 ,其表达水平在不同肿瘤类型中无明显差异。结论 :VEGF基因在人脑转移瘤的发生发展过程中起重要作用。     

老龄大鼠脑组织不同部位VEGF的表达与微血管密度

目的：观察幼龄大鼠和老龄大鼠脑组织内不同部位VEGF 的表达及微血管密度(MVD)，探讨其在神 经系统衰老过程中的作用。方法：应用免疫组织化学对比观察3 月龄组和30 月龄组大鼠脑组织不同部位VEGF 的表达及MVD。结果：30 月龄组大鼠运动皮质区、海马CA1 区、海马CA3 区及第1 小脑小叶区VEGF 阳性细 胞个数及MVD 较3 月龄组对应区域明显减少，差异有统计学意义(P<0.01)；同组大鼠不同部位阳性细胞个数 均有明显变化(P<0.01)，其中运动皮质区表达最强，其次是海马CA3 区、海马CA1 区及第1 小脑小叶区。结论： 老龄大鼠脑组织各部位VEGF 及MVD 较幼龄大鼠明显减少，且不同部位VEGF 的表达及MVD 差异明显，其中 运动皮质区表达最强，提示补充外源性VEGF，可能可以促进脑组织内微血管的生成，延缓神经系统衰老。     

脑星形细胞瘤组织中血管内皮生长因子和微血管密度检测

目的:检测脑星形细胞瘤组织中血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和微血管密度 (MVD)。方法:脑星形细胞瘤手术切除标本 65例,Ⅰ级 24例,Ⅱ级 18例,Ⅲ ~Ⅳ及 24例; 正常脑组织标本 8例。采用免疫组织化学SABC法检测上述组织中VEGF及MVD。结果:星形细胞瘤VEGF阳性率(63. 1% )及MVD值(46. 70±24. 02)均高于正常组(P<0. 05)。随瘤组织病理分级的升高,VEGF阳性率及MVD均增高 (P<0. 05)。结论:VEGF对肿瘤血管形成起重要作用,检测VEGF的表达对判断脑星形细胞瘤的生物学特性有一定意义。