抗加特纳杆菌卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

目的 观察鸡卵黄中抗加特纳杆菌抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法 用阴道加特纳杆菌作为抗原免疫Leghorn鸡。通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY。双紫外光波长测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度。Westernblot免疫印迹法测定该抗体来源。ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果 抗体含量12．8mg／mL蛋黄液,抗体纯度达95％。免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgC具有相同的分子量和抗原性。IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力。结论 WD水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY,而且有良好的生物学活性。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌作用的实验研究

目的:研究苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。方法:采用液体稀释法测定苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的最小抑菌浓度(MIC)。结果:苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为31.6g/L,对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为22.5g/L。结论:苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌均具有一定的抑菌作用,且敏感性无差异。     

MRSA-PBP2a蛋白的体外诱导、抗体制备及鉴定

目的：探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA-PBP2a(pencillin binding protein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定．方法：采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以β-内酰胺抗生素作为诱导剂,进行体外诱导产生PBP2a蛋白．免疫家兔后产生抗MRSA-PBP2a蛋白抗体,采全血分离血清,用改良双向免疫扩散法进行抗体滴度测定．结果：11株临床分离的金葡菌采用二种方法均检测出2株MRSA,SDS-PAGE和Western blot结果均显示从MRSA菌株中均能诱导出了PBP2a蛋白;免疫后均能产生较高的效价抗体,分别为1：32和1：64．结论：成功诱导出产生耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白菌株,并制备获得PBP2a蛋白,以及制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白抗体,为研究MRSA-PBP2a蛋白活性、MRSA的免疫治疗和MRSA快速鉴定方法学的建立奠定基础．     

6种广西药用红树植物的体外抑菌作用研究

[目的]研究广西产6种药用红树植物的提取物对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抑菌作用。[方法]采取纸片扩散法检测药物敏感性;采用琼脂稀释法检测最低抑菌浓度(MIC);采用试管稀释法检测最低杀菌浓度(MBC)。[结果]6种药用红树植物提取物对金黄色葡萄球菌及MRSA的抑菌圈直径均大于10 mm,表现出不同强度的抑制活性。MIC及MBC值显示:白骨壤水提物、红海榄水提物及醇提物的活性最强。[结论]榄李、白骨壤、桐花树、秋茄、红海榄和木榄具有抗金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用,值得进一步深入研究。     

6种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价

目的 对6种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法进行应用评价.方法 分别采用6种方法检测134株临床分离的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的情况:聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、琼脂稀释法检测苯唑西林最小抑菌浓度、琼脂稀释法检测头孢西丁最小抑菌浓度、显色培养基法.结果 以PCR检测mecA基因为“金标准”,65.7％的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林 ;苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的敏感性和特异性分别为95.5％和97.8％ ;头孢西丁纸片扩散法敏感性和特异性分别为97.7％和97.8％;苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100％,特异性分别为97.8％和91.3％ ;显色培养基法敏感性和特异性分别为98.9％和97.8％.结论 6种检测方法具有较好的一致性.头孢西丁纸片扩散法简便、可靠,可作为临床实验室常规检测MRSA的方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌的监测与药敏分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)及表皮葡萄球菌(MRSE)为临床上常见致病菌 ,可引起伤口感染、尿路感染、肺部感染、心内膜炎、败血症及侵袭性操作后感染 ,由于它们对多种抗生素形成较高的耐药性 ,临床治疗较为困难 ,必须注重监测与药敏分析。1　材料与方法1.1　标本来源　从临床标本中共检出金黄色葡萄球菌 10 8株 ,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 31株 ,占2 8.7% ,共检出表皮葡萄球菌 6 2株 ,其中耐甲氧西林表皮葡萄球菌 (MRSE) 2 5株 ,占 40 .3%。1.2　 MRSA与 MRSE检测及药敏试验　 MRSA与 MRSE检测及药敏试验均采用…     

214株金黄色葡萄球菌耐药性检测分析

目的：了解金黄色葡萄球菌（SAU）耐药状况,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法：收集2005年6月～2007年6月临床分离的SAU,培养鉴定,采用纸片扩散法（K-B法）测定11种常见药物的耐药情况,进行统计分析。结果：SAU主要存在于呼吸道和伤口标本中。214株SAU中检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）157株,检出率为73.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）57株,检出率为26.6%。MRSA与MSSA对青霉素、苯唑西林、阿奇霉素、庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星的耐药性差异具有显著性（P〈0.05）。结论：临床分离的SAU对多种抗菌药物的耐药率高,尤其是MRSA感染的耐药情况更为严重,临床微生物实验室应加强对MRSA的检测。     

金黄色葡萄球菌的耐药分忻

目的:了解金黄色葡萄球菌(SA)尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药状况,指导临床合理用药。方法:对本院感染标本中分离出的132株金黄色葡萄球菌分别进行了药敏试验。结果:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占金黄色葡萄球菌感染标本总数的74.2％,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)皆对万古霉素敏感,而多数甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌仅对西林G和氨苄西林耐药。结论:万古霉素是治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的首先抗生素。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性引起广泛关注。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

<正>耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicllin-resistsnt staphyl-ococcus aureus,MRSA)不仅对甲氧西林耐药,且具有     

抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能.方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体.用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度.用Tris-tricine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,Western blot确定蛋白来源.以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性.ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价.结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%.提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性.提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合. ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1:12 000.结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低.在体外能够特异性地与白念珠菌结合.     

老年人下呼吸道感染细菌谱及抗生素耐药性监测

目的探讨老年人下呼吸道感染细菌谱及致病菌株对抗生素的耐药性.方法采用微量肉汤稀释法及双纸片法测定了154株致病菌对20种抗生素的敏感性,并进行耐甲氧西林葡萄球菌和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)研究.结果革兰阳性菌34株,以凝固酶阴性葡萄球菌(50%)和金黄色葡萄球菌(26%)多见,万古霉素、利福平为最敏感.其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率占59%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为(67%),对青霉素、苯唑青霉素的耐药率,对万古霉素的敏感性均为100%.革兰阴性菌120株,克雷伯菌属(29%)和大肠埃希氏菌(18%)常见,亚胺硫霉素、阿米卡星和头孢他啶的抗菌活性最强,覆盖率广.17株产ESBLs主要为克雷伯菌(58%)和大肠埃希氏菌(29%).结论老年人下呼吸道感染的常见致病菌中MRSA,MRCNS和产ESBLs的比例很高.开展细菌药物敏感性监测,以强调临床合理使用抗生素.     

几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价

目的对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法以PCR检测金黄色葡萄球茵甲氧西林决定因子A（mecA）为金标准,按临床实验室标准化委员会（CLSI）操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测。结果155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为61．9％（96／155）;头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100％;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95．8％,特异性为91．5％;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100％,特异性为98．3％;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。     

氟喹诺酮类抗菌药物的交叉耐药性分析

目的调查氟喹诺酮类抗菌药物的交叉耐药性,以指导氟喹诺酮类抗菌药物的合理更换与应用。方法采用微量肉汤稀释法进行药敏试验并进行统计、分析。结果革兰阴性杆菌对氟喹诺酮类抗菌药物存在交叉耐药性,氟喹诺酮类抗菌药物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌无抗菌作用,第四代的加替沙星和第三代的左氧氟沙星对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌敏感性无显著差别。结论氟喹诺酮类抗菌药物存在交叉耐药性。不需要应用加替沙星替代左氧氟沙星用于抗甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌感染的治疗。     

耐甲氧西林葡萄球菌药性分析

耐甲氧西林葡萄球菌是引起医院内感染的重要致病菌。为了解该菌的耐药情况，进而为临床预防与治疗提供依据，我们对不葡萄球菌进行了耐甲氧西林及耐其它１４种常用抗生素和产β－内酰胺酶的测定。结果：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为５６％，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率为４７．６％；耐甲氧西林敏感葡萄球菌对１４种常用抗生素的耐药性及多重耐性均高于甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌；产β－内酰胺酶最高的是耐甲氧西     

紫花地丁联用苯唑西林对质粒介导的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染小鼠败血症的治疗作用

目的观察紫花地丁联用苯唑西林对质粒介导的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillinresistant staphylococcus aureus,MRSA)感染小鼠败血症的治疗作用,探寻逆转MRSA抗药性的新方法。方法采用腹腔注射质粒介导的MRSA诱导小鼠败血症模型,分别以生理盐水、紫花地丁、苯唑西林、紫花地丁联用苯唑西林进行干预,观察各组小鼠的死亡数及存活率。结果模型组小鼠存活率为0%,紫花地丁组与苯唑西林组小鼠存活率分别为0%和6.67%,与模型组比较差异无统计学意义(P0.05),紫花地丁联用苯唑西林组小鼠存活率为53.33%,明显高于苯唑西林组(P0.01)。结论紫花地丁能增强苯唑西林对MRSA的敏感度,提高苯唑西林对MRSA感染小鼠败血症的治疗作用。     

抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY的制备及生物活性的研究

目的:从免疫了幽门螺杆菌(Hp)抗原的母鸡蛋黄中提取抗Hp-IgY。方法:用超声破碎的Hp抗原免疫21周龄罗曼产蛋母鸡,取免疫后所产鸡蛋卵黄,利用水稀释法加硫酸铵盐析方法,提纯IgY,ELISA间接法检测抗体效价,Bradford法检测抗体蛋白含量,SDS-PAGE法检测其相对分子质量及纯度。结果:母鸡初次免疫后第7天,抗体效价即渐渐升高,约第45天达到高峰;蛋黄抗体经纯化后,抗Hp-IgY蛋白纯度可达90%以上,含量为6.25 g/L。结论:用超声破碎的Hp抗原免疫母鸡,盐析法提纯免疫母鸡产蛋黄中的抗Hp-IgY,可获得高纯度及高效价的抗Hp的特异性蛋黄抗体。