20(S)-人参皂苷Rg3对乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用

目的：探讨20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其可能机制。方法：人乳腺癌细胞MCF-7细胞株分为SPG-Rg3实验组及空白对照组。采用MTT法观察SPG-Rg3对MCF-7细胞生长的抑制作用，并计算出IC₅₀，依据IC₅₀值确定SPG-Rg3的有效浓度；流式细胞术检测SPG-Rg3作用后MCF-7细胞周期的变化；AO/EB双染从形态学上观察SPG-Rg3对MCF-7细胞凋亡的作用；免疫细胞化学染色和RT-PCR技术分别从蛋白水平和分子水平上检测SPG-Rg3对MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其与caspase-8基因的关系。结果：SPG-Rg3 IC₅₀为（155.70±0.71） mg•L^-1，当SPG-Rg3浓度在37.5~600.0ｍg•L^-1时，MCF-7细胞的生长抑制率随SPG-Rg3浓度的增加而增大，与对照组比较，细胞增殖受到明显抑制（P<0.05）；MCF-7细胞的生长周期也发生变化，S期细胞数增加,明显高于对照组（P<0.01)，G₂/M期细胞数则明显少于对照组（P<0.01)；并且在G₁峰前出现明显的凋亡峰，凋亡细胞数增加。形态学上观察到SPG-Rg3（150 mg•L^-1）实验组细胞大部分核着黄色荧光或橘红色荧光，形态呈固缩状、圆珠状或新月形，呈现明显的凋亡改变；caspase-8免疫细胞化学染色可见，对照组MCF-7细胞caspase-8蛋白不表达，SPG-Rg3实验组则呈强表达，两组细胞HSCORE得分为1.894±0.027及2.869±0.043，两组比较差异有显著性（P<0.01）；提取细胞mRNA并设计caspase-8引物进行RT-PCR，SPG-Rg3实验组细胞caspase-8大量表达，对照组细胞无表达。结论：SPG-Rg3能诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡，其机制可能与其活化caspase-8作用有关。     

人参皂甙Rg3上调FAS表达诱导乳腺癌MCF-7细胞的凋亡

背景与目的人参是我国传统中草药,其有效化学成分为人参皂甙,20（R）-人参皂甙R驴抗肿瘤作用最显著,可以通过多种作用机制抑制肿瘤的生长和转移。肿瘤的发生和发展是一个极其复杂的过程,有多种蛋白因子参与,并涉及多种分子机制。人参皂甙Rg3抗肿瘤机制的研究为目前中药抗肿瘤研究热点之一。本研究的目的在于探讨Rg3上调乳腺癌细胞的FAS蛋白从而促进肿瘤细胞的凋亡。材料与方法四甲基偶氮唑蓝法检测20（R）-人参皂甙Rg3能抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖活力,并得出半数抑制浓度（IC50）。流式细胞仪检测20（R）-人参皂甙Rg3能诱导细胞凋亡和调节细胞周期。免疫细胞化学检测MCF-7细胞FAS蛋白表达。结果Rg3对MCF-7抑制作用随着浓度的增加而增加,IC50为200μg／ml,流式细胞仪检测Rg3使MAF-7的s期细胞比率明显增加,凋亡率明显增加。免疫细胞化学显示Rg3能使MCF-7的FAS蛋白表达增加。结论人参皂甙Rg3上调FAs表达诱导乳腺癌MCF-7细胞的凋亡。     

20(R)-人参皂甙Rg3对K562/ADM细胞凋亡诱导的研究

目的 :探讨抗癌药物 2 0 (R) -人参皂甙Rg3(2 0 (R) -GinsenosideRg3)对肿瘤细胞凋亡的诱导。方法 :采用人红白血病耐阿霉素 (adriamycin ,ADM)细胞株K5 6 2 /ADM细胞作为实验模型 ,用ADM作阳性对照。结果 :MTT法细胞毒实验显示 ,Rg3对K5 6 2 /ADM细胞的IC 5 0为 10 4 9± 0 30 μg/ml;流式细胞仪法测定该细胞与浓度为 1 0 μg/ml(无毒剂量 )和 5 0 μg/ml(低毒剂量 )的Rg3共同培养 4 8h的细胞凋亡率分别为 3 39± 0 2 5 %和 9 36± 0 6 1% ;电镜下 ,可见凋亡的K5 6 2 /ADM细胞及凋亡小体。结论 :Rg3具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力 ,其诱导强度与其浓度呈正相关 ,对作用时间有依赖性。     

人参皂甙Rg3诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡的形态学研究

目的：探讨人参皂甙Rg3对卵巢癌细胞株H08910的抑制作用。方法：用人参皂甙Rg3处理H08910细胞，通过倒置显微镜和电子显微镜观察细胞形态学改变。结果：在人参皂甙Rg3作用下，H08910细胞呈凋亡改变，形成凋亡小体。结论：人参皂甙Rg3能诱导卵巢癌细胞凋亡，抑制卵巢癌细胞增殖。     

20(R)-人参皂甙Rg3对大鼠肝癌细胞的作用

目的　探讨人参皂甙 Rg3对大鼠诱发性肝癌的作用及其机制。方法　建立 SD大鼠诱发性肝癌模型 ,经肿瘤供血动脉灌注不同剂量的 2 0 (R) -人参皂甙 Rg3(0 .375、1.5、6 .0 mg/ kg) ,磁共振成像 (MRI)技术测量治疗前、后肿瘤的体积变化 ,流式细胞仪 (FCM)和免疫组织化学方法检测肿瘤细胞的凋亡、增殖及坏死情况。结果　高剂量组对肿瘤体积的影响与对照组比较 ,其差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ;低、中、高三个治疗组诱导大鼠肝癌细胞的平均凋亡率 (% )分别为 11.0 8± 3.78、13.5 7± 3.34和 2 7.35± 16 .0 4 ,高剂量组较其它组差异显著 ;用药后测得 S期细胞的平均比率 (% )分别为 2 3.98± 9.4 4、19.73± 6 .6 2和 14 .0 9± 3.4 8,治疗组与对照组相比均有显著性差异 ,且药物剂量与其对肿瘤细胞的抑制作用呈正相关。高剂量组中增殖细胞核抗原 (PCNA)与肿瘤坏死因子 (TNF)的表达与对照组相比差异有显著性 ;治疗组组间 PCNA与 TNF的表达差异不显著。结论　经肿瘤供血动脉灌注人参皂甙 Rg3能明显的抑制肿瘤细胞增殖、有效的诱导肿瘤细胞凋亡、促进肿瘤组织坏死 ,并有剂量依赖性。     

人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的 探讨人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的诱凋亡作用及其对凋亡相关基因survivin的影响.方法 人肺鳞癌SK-MES-1细胞分为Rg3实验组、空白对照组和阳性对照组.阳性对照药物为三氧化二砷.流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率:免疫细胞化学法和RT-PCR法检测survivin蛋白和mRNA的表达.结果 不同浓度的人参皂甙Rg3处理SK-MES-1细胞48 h后,细胞凋亡率增加,作用呈剂量依赖关系.人参皂甙Rg3能够下调survivin蛋白和mRNA的表达,各实验组与宅白对照组间比较有统计学意义(P<0.05).结论 人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与其抑制survivin基因的表达有关.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对非小细胞肺癌细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导人非小细胞肺癌H596细胞发生凋亡,初步阐明非小细胞肺癌细胞经TRAIL诱导凋亡的作用和机制。方法：培养H596细胞,设对照组和不同浓度(0.01、0.03、0.10、0.30、1.00、3.00、10.00、30.00和100.00 μg•L^-1） TRAIL组,TRAIL作用H596细胞24 h后,酸性磷酸酶法检测细胞凋亡的百分率;Western blotting法检测TRAIL相关蛋白caspase-8、Bcl-2及Fas 相关死亡结构域（FADD）的表达情况。结果：TRAIL浓度为0.01～0.03 μg•L^-1时,对H596细胞的生长无明显抑制作用,细胞出现增殖趋势;从0.10 μg•L-1开始,随着TRAIL浓度升高,细胞开始出现凋亡,至10.00 μg•L^-1时细胞凋亡水平显著增加,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。Western blotting检测,caspase-8、Bcl-2和FADD蛋白表达正常。结论：高浓度的TRAIL可以诱导H596细胞发生凋亡,可能与TRAIL相关蛋白表达正常有关联。     

人参皂甙Rg3联合化疗对30例非小细胞肺癌的近期疗效观察

目的进一步评价一类抗癌新药人参皂甙Rg3治疗肺癌的疗效.方法采用临床对照试验方法,观察化疗联合人参皂甙Rg3对30例中晚期肺癌的疗效及其毒副作用,对照组单纯化疗,试验组在化疗的同时加用20(R)-Rg3,疗程6～8周.结果化疗联合人参皂甙Rg3能显著提高化疗疗效,试验组有效率(PR+CR)为36.6%,对照组为16.7%(P＜0.05);对不同组织学类型肺癌之间的疗效无显著性差异(P＞0.05).结论人参皂甙Rg3与化疗合用能显著提高肺癌患者的治疗效果.     

人参皂甙Rg1抑制~(60)Co照射诱导心肌细胞凋亡

目的研究人参皂甙Rg1对60Co照射诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能的分子机制。方法应用60Co照射诱导心肌细胞凋亡,采用TUNEL法及流式细胞仪检测各组细胞凋亡效率。采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹技术,检测凋亡相关基因和蛋白的表达。结果正常对照组凋亡率为(7.07±0.99)%,4Gy60Co照射组为(44.99±2.52)%,4Gy60Co+5mg/LRg1、4Gy60Co+50mg/LRg1组的凋亡效率分别为(39.47±0.84)%、(33.16±1.73)%;Rg1可显著降低60Co照射所致的心肌细胞凋亡,同时降低心肌细胞凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、Bax和相关蛋白磷酸化-应激性蛋白激酶(p-JNK)、p-p38的表达,升高磷酸化-细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)蛋白表达。结论Rg1对60Co照射所致的心肌细胞凋亡具有明显的保护作用,其作用的机制可能与抑制凋亡相关基因caspase-3、Bax的过度表达有关,并且JNK、ERK及p38激酶信号通路可能参与了机制发挥。     

20(S)-人参皂苷Rg3抑制肿瘤生长的作用

目的：观察20(S)-人参皂苷Rg3的抗肿瘤生长的作用并探讨其机制。方法：通过B16黑色素瘤实体瘤模型、MTT法观察Rg3对B16黑色素瘤生长的作用,采用新生血 管计数实验、流式细胞术检测Rg3对肿瘤组织血管生成及细胞周期的影响。结果：实体瘤模型中,不同浓度Rg3各组瘤重明显低于对照组（P<0.01）,且Rg3组肿瘤周围的血管数也明显少于对照组（P<0.01）。体外实验中,MTT法见Rg3抑制B16黑色素细胞的生长,其IC₅₀为（7.76±0.46）mg·L^-1,并且Rg3可阻滞B16黑色素瘤细胞于G0/G1和S期,使G₂/M期细胞数明显减少。 结论：Rg3抑制B16黑色素瘤的生长,其机制可能是通过抑制肿瘤内血管生成及阻滞肿瘤细胞进入分裂期来发挥作用的。     

20(S)-人参皂苷Rg3与化疗药物联合应用对S180肉瘤的影响

目的：探讨〖BF〗20(S)-人参皂苷Rg₃（SPG-Rg₃）与化疗药物联合应用对S180肉瘤生长以及荷瘤小鼠生命延长期的影响。方法：体外通过染料排斥实验观察SPG-Rg₃抗肿瘤细胞生长的作用。体内建立S180实体瘤模型,将荷瘤小鼠随机分为6组,即SPG-Rg₃ 3、1和0.3 mg·kg^-1组及环磷酰胺组（CTX）、溶剂对照组（Control）以及联合用药组（CTX+SPG-Rg₃）,每日腹腔内给药,持续10 d,停药24 h后处死动物,称体重、瘤重,计算肿瘤生长抑制率（%）及两药相互作用指数（CDI）。并建立S180腹水瘤模型,动物随机分为SPG-Rg₃ 3、1 和0.3 mg·kg^-1组及环磷酰胺组（CTX）、溶剂对照组（Control）以及联合用药组（5-FU+SPG-Rg₃）6组,连续5 d腹腔给药,记录小鼠存活天数,计算生命延长期。结果：体外实验中,SPG-Rg₃抑制了S180肉瘤细胞生长,其IC50值为(10.49±2.96)mg·L^-1。体内实验中,SPG-Rg₃对S180肉瘤生长有明显的抑制作用,（SPG-Rg₃+CTX）联合用药组抑制肿瘤生长的作用优于SPG-Rg₃和CTX组。SPG-Rg₃和5-FU均延长荷瘤小鼠的生存期,（SPG-Rg₃+5-FU）联合用药组生命延长率比5-FU单独用药组明显增高。结论：SPG-Rg₃可明显抑制肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存期,且SPG-Rg₃可以提高CTX和5-FU的抗肿瘤作用,有一定的协同增效作用。     

20（S）-人参皂苷Rg3抗异丙肾上腺素诱导心肌缺血作用

[目的]研究20（S）-人参皂苷Rg3抗心肌缺血作用及其机制.[方法]随机将50只Wistar大鼠分成5组,即空白对照组（CON）,异丙肾上腺素组（ISO）,20（S）-人参皂苷Rg3（5、10、20 mg/kg）组.各组大鼠灌胃给予相应药物,除CON外其余各组大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素（20 mg/kg）制备心肌缺血模型.末次注射异丙肾上腺素2h后麻醉大鼠,取血检测血清中肌酸激酶（creatine kinase,CK-MB）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力,取大鼠左心室制备匀浆后检测心肌组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidas,GSH-Px）活性、总抗氧化能力（total antioxygencapabilit,T-AOC）及丙二醛（malonaldehyd,MDA）含量.[结果]与CON组相比,ISO组血清CK-MB、LDH活力明显增高.与ISO组比较,20（S）-人参皂苷Rg3（5,10,20 mg/kg）可显著降低血清CK-MB、LDH活力;与CON组比较,ISO组SOD活性、GSH-Px活性及T-AOC降低,MDA含量增高;与ISO组相比,20（S）-人参皂苷Rg3（5、10、20 mg/kg）可显著提高SOD活性、GSH-Px活性及T-AOC,降低MDA含量.[结论]20（S）-人参皂苷Rg3具有抗心肌缺血作用,其作用机制与清除自由基和抗脂质过氧化有关.     

ATRA诱导肺癌细胞株A549分化与凋亡

目的:体外研究维甲类化合物的衍生物ATRA对A549肺癌细胞株作用,探讨ATRA对肿瘤防治作用的可能机制。方法:取对数生长期的常规培养的肺癌A549细胞用于试验,试验分1×10-5mol/L,1×10-6mol/L,1×10-7mol/L三组药物浓度和对照及空白对照5组,加药48h进行MTT测定,第6 d对1×10-5mol/L,1×10-6mol/L及对照组细胞进行流式细胞检测,并对1×10-5mol/L,1×10-6mol/L浓度进行电镜观察。结果:不同浓度ATRA对细胞增殖有明显地抑制作用,与阴性对照组比较,有统计学意义(P<0.01)。增殖抑制有良好剂量效应关系,(r=0.968),细胞阻滞于G0/G1期,高浓度组电镜下见凋亡细胞。结论:ATRA可诱导A549细胞分化及凋亡,为临床应用ATRA化学预防肺癌提供理论依据。     

姜黄素氧化损伤线粒体诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的探讨姜黄素诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的机制。方法 80μmol/L姜黄素作用于肝癌细胞后,用流式细胞仪检测细胞过氧化氢(H2O2)、线粒体膜电位和细胞亚二倍体凋亡峰情况;比较姜黄素组和预处理组(姜黄素联合过氧化氢酶)线粒体膜电位和细胞亚二倍体凋亡峰变化情况。结果 80μmol/L姜黄素作用于肝癌细胞1、2、3h后检测H2O2分别为(13.49±3.23)%、(52.43±6.04)%、(48.21±7.18)%,以2h时间点最高。细胞线粒体膜电位在6、12h分别为(59.68±4.47)%、(29.83±6.22)%,差异有统计学意义(P<0.01)。细胞亚二倍体凋亡峰在24、48h分别为(26.53±4.28)%、(39.50±6.14)%,差异有统计学意义(P<0.01)。过氧化氢酶均能抑制上述2项指标改变,差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素作用肝癌细胞后产生H2O2,H2O2损伤细胞线粒体,呈时间依赖性诱导肝癌细胞凋亡。     

布洛芬抑制人NSCLC细胞株NCI-H460和乳腺癌细胞株SKBR3增殖和转移的机制探讨

目的 阐述布洛芬在人非小细胞肺癌(non-small cell lung caner,NSCLC)细胞株NCI-H460和乳腺癌细胞株SKBR3中的抗增殖和抑制迁移作用,并对其机制进行探讨。方法 运用MTT法检测布洛芬作用下两种不同肿瘤细胞株的细胞增殖抑制情况;运用Transwell方法检测布洛芬作用下两种不同肿瘤细胞株的迁移抑制情况;运用real-time聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹方法分析肿瘤细胞survivin和E-cadherin的mRNA和蛋白表达情况。结果 MTT法检测结果显示,布洛芬降低了两种肿瘤细胞株的增殖,并且随着布洛芬药物浓度增高抑制增殖作用增强;Transwell显示,2mmol/L布洛芬作用于两种肿瘤细胞株12h,能够抑制肿瘤细胞株的转移;RT-PCR和蛋白质印迹分析显示,布洛芬能够导致肿瘤细胞survivin的表达降低,使E-cadherin表达增高。结论 布洛芬体外能够显著抑制人非小细胞肺癌细胞株NCI-H460和乳腺癌细胞株SKBR3增殖和迁移,这一抑制作用与survivin表达降低和E-cadherin表达增高有关。     

全反式维A酸诱导肺癌细胞株凋亡的研究

目的: 探讨全反式维A酸(ATRA)对小细胞肺癌细胞株SH-77的治疗作用及机制,寻找肺癌治疗的新途径。方法: 采用不同浓度的ATRA处理肺癌细胞株SH-77,通过苔盼蓝拒染实验检测细胞活力、MTT法检测细胞生长抑制率和流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡和Bcl-2蛋白的表达。结果: 不同浓度的ATRA对SH-77的生长均有抑制作用,G₁/G₀期细胞比例升高,S期细胞比例降低,增殖指数(PI)降低,凋亡指数(AI)和AI/PI比值升高,诱导细胞凋亡;Bcl-2蛋白比例下降(P<0.01)。结论: ATRA对肺癌细胞株SH-77的生长有抑制作用,同时可诱导其凋亡,可能与下调其Bcl-2蛋白表达有关。