四氯化碳对胚胎神经细胞分化和膜结构的影响

用大鼠胚胎中脑物经细胞作原代微团培养,培养物经不同浓度四氯化碳染毒,研究四氯化碳对细胞分化的影响,并用扫描电镜观察细胞形态和膜结构的变化。结果表明,处于分化前期的胚胎中脑细胞经5天培养形成细胞集落,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫化学法鉴定,集落中的细胞是已分化的神经元细胞。四氯化碳可抑制细胞分化,并显示剂量——效应关系,其半数生长抑制浓度(ICV50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为10.0和1.0μmol/L,V/D值为10。扫描电镜显示四氯化碳可引起细胞形态的改变和膜结构的损伤。经四氯化碳染毒的细胞脂质过氧化作用增强,并与细胞膜被破坏的程度一致。认为四氯化碳具体外细胞致畸作用。     

锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１８．０μｍｏｌ／Ｌ。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量－效应关系,表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）为１０．０μｍｏｌ／Ｌ１半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（Ｖ／Ｄ）均大于１     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养（微团试验）研究了氟化钠（ＮａＦ）的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎神经细胞的分化，半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（ｖ／ｄ）大于５．０。本研究表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理     

五氧化二钒的体外发育毒性研究

采用胚胎肢芽细胞进行原代微团培养,培养物经不同浓度的五氧化二钒（Ｖ２Ｏ５）对细胞肢芽细胞经５天增减形成细胞集落,Ｖ２Ｏ５对体外肢细胞的分化有明显抑制作用,并有较明显的剂量－效应关系,其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）和半分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）分别为１２．６和１．６μｇ／ｍｌ,Ｖ／Ｄ值为７．９。表明抑制细胞分化可能是Ｖ２Ｏ５致发育危害的重要作用机理。     

神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞原代微团培养,研究神经生长因子（ＮＧＦ２．５Ｓ）对不同浓度的四氯化碳（ＣＣｌ４）致毒性拮抗效应,观察细胞分化以及细胞形态的影响,同时做了ＣＣｌ４的毒性试验并与正常细胞的分化进行了比较,结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少,表明ＣＣｌ４可抑制胚胎中脑神经细胞的分化,其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１０．０μｍｏｌ／Ｌ,并显剂量－效应关系     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ可抑制细胞细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞储落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少，并显示剂量－－效应关系，其半数生长抑制浓度为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度为２μｇ／ｍｌ。。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ可抑制细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量──效应关系，其半数生长抑制浓度（ＩｃＶ５０）为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度（ＩｃＤ５０）为２μｇ／ｍｌ。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．５，判断为醋酸铅可能具有体外细胞致畸作用     

锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ICV50）为18.0μmol／L。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量-效应关系。表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ICD50）为10.0μmol／L,半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（V／D）均大于1.8。表明抑制神经元细胞分化可能是锰致发育危害的重要作用机制。     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养了氟化钠的细胞生及其对神经元分化的细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎细胞的分化，半数分化抑制浓度为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制２与半数分化抑制浓度的比值大于５．０。本表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理。     

神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,研究神经生长因子（NGF2．5S）对不同浓度的四氯化碳（CCl4）致毒性拮抗效应．观察细胞分化以及细胞形态的影响同时做了CCl4的毒性试验并与正常细胞分化进行了比较。结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小．细胞间神经纤维减少．表明CCl4可抑制胚胎中脑神经细胞的分化．其半数生长抑制浓度（ICV50）为10．0μmol／L,并显剂量-效应关系。当NGF2.5S和CCl4混合后,在低浓度的CCl4情况下,微团中的集落形成率有明显的增加．ICV50为50．0μmol／L时,NGF2．5S也能促进细胞分化的功能．因此．NGF2.5S对CCl4有一定的拮抗效应。     

五氧化二钒的体外发育毒性研究

采用胚胎肢芽细胞进行原代微团培养 ,培养物经不同浓度的五氧化二钒 (V2 O5 )对细胞肢芽细胞经 5天增减形成细胞集落 ,V2 O5 对体外肢芽细胞的分化有明显抑制作用 ,并有较明显的剂量 -效应关系 ,其半数生长抑制浓度(ICV5 0 )和半分化抑制浓度 (ICD5 0 )分别为 12 .6和 1.6μg ml,V D值为 7.9。表明抑制细胞分化可能是V2 O5 致发育危害的重要作用机理     

无机氟对大小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

采用胚胎肢芽细胞微团培养方法，观察无机氟对ＳＤ大鼠和昆明种小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果显示培养液中一定浓度的氟对两种动物胚胎肢芽细胞增殖和分化有明显抑制作用，且呈剂量－反应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线，计算得大、小鼠半数抑制分化浓度（ＩＤ５０）分别为６．８μｇ／ｍｌ、７．３μｇ／ｍｌ；半数抑制增殖浓度（ＩＰ５０）为４４．１μｇ／ｍｌ、６３．６μｇ／ｍｌ。ＩＰ５０／ＩＤ５０分别为６．４和８．７。表明无机氟是肢芽细胞分化的特异性抑制剂。     

苯对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化与增殖的影响

目的 探讨苯对胚胎肢芽、中脑细胞分化和增殖的影响及对肢芽器官发育的影响.方法 分离12d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞进行微团培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖;结果 随着苯染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少,肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系;苯对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为89.93μmol/L和396.77μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为116.29μmol/L和831.46μmol/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用.结论 苯对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

无机氟对大小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

采用胚胎肢芽细胞微团培养方法，观察无机氟对ＳＤ大鼠和昆明种小鼠胚胎芽细胞增殖和分化的影响。结果显示培养液中一定浓度的氟对两种动物胚胎肢芽细胞增殖和分化有明显抑制作用，且呈剂量－反应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线，计算得大、小鼠半数抑制分化浓度（ＩＤ５０）分别为６．８％μｇ／ｍｌ、７．３μｇ／ｍｌ；半数抑制增殖浓度（ＩＰ５０）为４４．１μｇ／ｍｌ、６３．６μｇ／ｍｌ。ＩＰ５０分别为６．４和８．７。     

硝酸铅对大鼠胚胎中脑神经细胞发育毒性的研究

目的：研究硝酸铅对胚胎中脑神经细胞分化和增殖的毒性作用。方法：利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度(0．01、0．1、1．0、10．0、100．0mg／L)的硝酸铅对细胞分化、增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：结果显示硝酸铅可抑制中脑神经细胞的增殖和分化，导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目、细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量一效应关系，其半数生长抑制浓度(ICV50)为23mg／L，而半数分化抑制浓度(ICD50)为3mg／L。结论：ICV50与ICD50比值为7．7，判断为硝酸铅可能具有体外细胞毒性及致畸作用，抑制细胞的分化和增殖可能是硝酸铅致发育危害的重要作用机理     

丙氧岛苷对K562细胞抑制增殖和诱导分化作用

目的 研究丙氧鸟苷（ＧＣＶ）抑制Ｋ５６２细胞增殖作用和机制。方法 细胞培养、集落培养、联苯胺染色。结果 ０．６２５￣４０μｍｏｌ浓度的ＧＣＶ对Ｋ５６２细胞有明显的抑制增殖作用，作用４ｄ时的半数抑制量（ＩＣ５０）为２．９９μｍｏｌ，作用７ｄ后克隆形成抑制率达４３％，联苯胺染色阳性细胞百分率随药物剂量的增加和培养时间的延长而逐渐增加。结论 ＧＣＶ体外抑制Ｋ５６２细胞增殖并能诱导其向红系分化。     

MTT法检测丙烯酰胺对神经细胞的毒性作用

目的介绍一种用四氮唑蓝（ＭＴＴ）为底物的酶反应定量比色分析法。方法用ＭＴＴ法测定了丙烯酰胺对体外培养的大鼠胚胎中脑神经细胞的毒性。结果在１×１０４～４×１０５／ｍｌ细胞浓度范围内，吸光值与细胞数呈良好的线性关系；丙烯酰胺对神经细胞有明显的细胞毒性作用，其半数生长抑制浓度（ＩＣ５０）为８６μｇ／ｍｌ。结论ＭＴＴ法用于测定细胞毒性作用具有快速、正确等优点。     

牛磺酸对维生素A致胎鼠中脑细胞分化抑制的保护作用

目的：进一步探讨牛磺酸在神经细胞分化中的作用。方法：采用胎鼠中脑神经元细胞微团培养物的方法，观察牛磺酸对维生素Ａ引起的神经细胞分化抑制是否具有保护作用。结果：同时加入牛磺酸和维生素Ａ组微团细胞集落数要较单独加入维生素Ａ的集落数多，而单独加入牛磺酸组微团集落数也多且微团之间的束状联接较多。结论：牛磺酸本身有促进神经细胞分化的作用，对维生素Ａ引起的细胞分化抑制可起保护作用。     

牛磺酸对维生素A致胎鼠中脑细胞分化抑制的保护作用

进一步探讨牛磺酸在神经细胞分化中的作用。方法；采用胎鼠中脑神经元细胞微团培养物的方法、观察牛磺酸对维生素Ａ引起折神经细胞分化抑制是否具有保护作用。结果：同时加入牛磺酸和维生素Ａ组微团细胞集落数要较单独加入维生素Ａ的集落数多，而单独加入牛磺酸组微团集落数也多显微团之间的束状联接较多。     

小鼠胚胎干细胞的培养

ＥＳ细胞的培养应满足促进细胞增殖和抑制细胞分化而保持其高度未分化潜能。我们用胚胎成纤维细胞作为饲养层，培养基ＤＭＥＭ中加白血病抑制因子的方法来培养ＥＳ细胞。培养的ＥＳ细胞呈集落状生长，细胞排列紧密，呈未分化状态。胚胎成纤维细胞作为饲养层是分离培养ＥＳ细胞最普遍使用而且有效的方法。本文还围绕ＥＳ细胞培养中的促进增殖和抑制分化这两个方面的影响因素进行了讨论。