NGF与CNTF促周围神经再生作用的差异性及协同性研究进展

神经生长因子 (NerveGrowthFactor ,NGF)和睫状神经营养因子 (CiliaryNeurotrophicFactor ,CNTF)是两种研究最为广泛和深入的神经营养因子 ,NGF和CNTF促进周围神经再生的作用机制和作用特点不仅具有差异性 ,而且存在有协同作用。本文就近年来该方面的文献报道综述如下。1　周围     

CNTF和NGF在损伤后变性神经组织中的表达与分布

目的：揭示睫状节神经营养因子（ＣＮＴＦ），神经生长因子（ＮＧＦ）在损伤后变性神经组织中的表达与分布。方法：以５例成人正中神经切割伤后２～３个月的神经为材料，取损伤处的近、远侧端，冰冻切片，用特异性抗ＣＮＴＦ、抗ＮＧＦ抗体免疫化学反应，ＡＢＣ系统显色。计算机图象处理技术定量测量阳性免疫反应强度与面积，对照组采用正常正中神经。结果：在神经损伤后的近、远侧端中的ＣＮＴＦ含量明显高于正常组，ＣＮＴＦ位于增生活跃的雪旺细胞内。ＮＧＦ在近、远侧端中的含量均高于正常组，ＮＧＦ主要分布在部分神经纤维的轴索中。结论：ＣＮＴＦ与ＮＧＦ在切割伤后的神经远侧端发生退行性变化的神经组织中仍可表达，呈向上调节趋势。通过神经趋化因子的表达，为神经再生与功能修复提供合适的微环境     

神经营养因子对烫伤大鼠不同脑区NO含量的影响

目的观察烫伤大鼠脑损伤时一氧化氮(NO)含量的变化及神经生长因子(NGF)、睫状神经营养因子(CNTF)分别对其不同脑区 NO 含量的影响,以初步探讨神经营养因子对烫伤大鼠脑组织的保护作用及其可能机制。方法 SD 大鼠侧脑室埋管,麻醉后制成30%TBSAⅢ度烫伤。分成非烫伤组、烫伤组、烫伤 神经生长因子组、烫伤 睫状神经营养因子组。伤后3天,取不同脑区匀浆,测定脑组织中 NO 的含量。结果烫伤后脑组织 NO 含量明显升高,给予 NGF、CNTF 后能明显降低不同脑区 NO 的含量。结论烫伤后脑内 NO 升高可能是造成脑损伤的因素之一,NGF、CNTF 对烫伤后脑组织的保护作用可能与其降低脑组织 NO 含量有关。     

神经营养因子对烫伤大鼠不同脑区NO含量的影响

目的观察烫伤大鼠脑损伤时一氧化氮（ＮＯ）含量的变化及神经生长因子（ＮＧＦ）、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分别对其不同脑区ＮＯ含量的影响,以初步探讨神经营养因子对烫伤大鼠脑组织的保护作用及其可能机制。方法ＳＤ大鼠侧脑室埋管,麻醉后制成３０％ＴＢＳＡⅢ度烫伤。分成非烫伤组、烫伤组、烫伤＋神经生长因子组、烫伤＋睫状神经营养因子组。伤后３天,取不同脑区匀浆,测定脑组织中ＮＯ的含量。结果烫伤后脑组织ＮＯ含量明显升高,给予ＮＧＦ、ＣＮＴＦ后能明显降低不同脑区ＮＯ的含量。结论烫伤后脑内ＮＯ升高可能是造成脑损伤的因素之一,ＮＧＦ、ＣＮＴＦ对烫伤后脑组织的保护作用可能与其降低脑组织ＮＯ含量有关。     

神经生长因子与睫状神经营养因子促进大鼠坐骨神经再生的协同作用研究

目的:利用新型神经再生小室探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)促进周围神经再生的协同性作用。方法:36只大鼠随机分为A、B、C3组,每组12只,用自行研制的梭形双通道桥接管桥接坐骨神经10mm缺损。A组,2支管内均注入几丁糖凝胶(100μl);B组,一侧支管内注入几丁糖(100μl) NGF(5μl) 生理盐水(5μl),另一侧支管内注入几丁糖(100μl) NGF(5μl) CNTF(5μl);C组,一侧支管内注入几丁糖(100μl) CNTF(5μl) 生理盐水(5μl),另一侧支管内注入几丁糖(100μl) NGF(5μl) CNTF(5μl)。术后8、16周对再生神经的大体形态、常规病理及超微结构进行观察,并用核黄逆行示踪评估再生神经的轴浆运输功能。结果:NGF CNTF侧再生神经呈淡黄色,质韧,弹性佳,优于对照侧,形态学观察见再生神经纤维数目多,粗细均匀,排列整齐,有髓纤维髓鞘厚,轴突直径大。其轴浆运输功能也明显优于对照侧。结论:NGF与CNTF对促进周围神经形态结构和功能的恢复均具有明显的协同作用。     

睫状神经营养因子对周围神经损伤后再生的影响

目的 研究睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对周转神经损伤后再生的影响。方法 用硅胶管桥接大鼠双侧坐骨神经缺损,形成神经再生室。左侧室内注入基因重组人ＣＮＴＦ,右侧注入生理盐水（ＮＳ）。术后１４、３０、６０和９０天取材,行大体、光镜、电镜观察。术后９０天行轴突图像分析、电生理检测及霍乱毒素－辣根过氧化物酶（ＣＢ－ＨＲＰ）逆行追踪。结果 与对照侧相比,实验侧再生有髓神经纤维数目较多、轴突较粗且髓鞘较厚,复合肌肉动作电位（ＣＭＡＰ）的潜伏期较短、神经传导速度较快且波幅较高。实验侧ＣＢ－ＨＲＰ标记的脊髓前角运动细胞数明显多于对照侧。结论 外源性ｈＣＮＴＦ有明显促进周围神经再生作用。     

运动神经元睫状神经营养因子在喉返神经运动神经元中的表达

运动神经元的功能活性是周围神经再生的关键 ,睫状神经营养因子 (CNFT)能保护、营养多种神经元 ,但运动神经元是否分泌 CNFT尚不清楚 [1 ]。本研究旨在阐明喉返神经再生过程中疑核神经元 CNFT表达、分布 ,报道如下。材料与方法一、动物手术及取材 :健康成年犬 12只 ,按以往方法切断并缝合右侧喉返神经 ,分别于术后 2、3、6、12、18、2 4周后取材 ,每时间组 2只犬 ;颈动脉灌注固定 ,取延髓及脑桥下 1/ 3冰冻切片 ,片厚 5 0 μm,每隔 6张取一组切片 ,第 1至 3片分别作原位杂交、免疫组化及 Niss1染色。二、疑核 CNTF m RNA原位杂交 :…     

睫状神经营养因子的研究进展

睫状神经营养因子 ( Ciliary neurotrophic fac-tor,下简称 CNTF)最初是从鸡的睫状体中提取出来 ,并可维持鸡副交感神经节的存活而得名[1,2 ] 。它与 NTF( neurotrophic factor)家族明显不同 ,没有同源性 ,是非靶源性的营养因子 ,与白血病抑制因子( LIF)、白细胞介素 6( IL - 6)等具有相似的螺旋框架结构 ,被认为属于 IL- 6家族。CNTF具有多种功能 ,能促使多种神经细胞的存活 ,是第一个被发现的能维持在体和离体脊髓运动神经元的存活及突起生长的神经营养因子 ,CNTF还具有肌肉营养作用 ,在神经系统发育、分化和神经损伤修复中具有…     

神经生长因子与睫状神经营养因子促进感觉和运动纤维再生的差异性研究

目的探讨神经生长因子(NGF)与睫状神经营养因子(CNTF)对不同类型神经纤维再生的促进作用。方法利用梭形双通道桥接管桥接32只SD大鼠坐骨神经10mm缺损。将动物随机分为两组,A组:两支管内均加入医用几丁糖凝胶;B组:两支管内加入医用几丁糖凝胶后分别注入NGF和CNTF。术后12、16周行电生理检测和组织化学染色。结果Holmes银染示B组CNTF侧再生纤维均较NGF侧再生神经外膜薄,纤维排列整齐,粗细均匀;硫代乙酰化胆碱染色示B组CNTF侧呈棕红色的阳性纤维较NGF侧数目较多,粗细均匀,排列整齐;而碳酸酐酶染色则显示B组NGF侧呈褐色的阳性神经纤维密度及排列稍较CNTF多。电生理检测见NGF侧再生神经复合肌肉动作电位(CMAP)和皮层体感诱发电位(CSEP)的潜伏期较CNTF侧长,而波幅较低(P<0.05)。结论CNTF促进运动纤维再生的相对作用较强,而NGF具有相对较强的促进感觉纤维再生的作用。     

睫状神经营养因子涂层的聚羟基乙酸聚乳酸神经导管修复犬胫神经缺损

目的 探讨应用脉冲等离子体方法涂层睫状神经营养因子（CNTF）的聚羟基乙酸聚乳酸（PGLA）神经导管修复犬胫冲经缺损的疗效。方法 18只杂交犬．每只犬左后肢制成胫神经2．5cm缺损模型，随机分别应用三种方法修复。A组：应用脉冲等离子体方法涂层CNTF的PGLA神经导管；B组：单纯PGLA神经咩管；C组：自体神经。应用苏木精-伊红和Masson染色、S-100免疫组化染色、神经电生理及神经轴突计数方法评价神经再生效果。同时动态记录犬行走步态变化，实验观察期3个月。结果 神经导管血管化良好且大部分降解吸收，再生神经均已通过所有神经导管。A组与C组的神经传导速度和神经轴突计数差异无统计学意义（P〉0．05），而A组和C组的数据均优于B组（P〈0．05）。A组和C组的犬基本恢复正常行走步态，而B组犬仍有跛行。结论 脉冲等离子体方法涂层CNTF的PGLA神经导管能有效修复犬2．5cm胫神经缺损，取得与自体神经相近的效果。     

烧伤血清对内皮细胞核因子-κB核移位的影响

目的　了解烧伤血清对内皮细胞核因子 κB (NF κB)异二聚体 p5 0 /p6 5核移位 ,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响 ,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用。方法　采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4 ,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 (PDTC)刺激内皮细胞 ,并以正常培养的内皮细胞为对照。应用激光共聚焦显微镜观察刺激 30、6 0、12 0、4 80min后内皮细胞 p5 0 /p6 5核移位情况 ,采用Western印迹法检测刺激 30、6 0、90、12 0min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况。　结果　与对照组比较 ,烧伤血清刺激内皮细胞 30min后 ,p5 0、p6 5即发生核移位 ,30～ 6 0min达高峰 ,2h后恢复至刺激前状态 ;而烧伤血清刺激 30min后 ,IκBα发生降解 (P <0 .0 1) ,刺激 4 5～ 6 0min后最为明显 ,2h后表达逐渐恢复。PDTC能有效抑制烧伤血清作用 30、6 0min后 ,p5 0、p6 5的核移位和IκBα降解。 　结论　烧伤血清可导致内皮细胞NF κBp5 0、p6 5发生核移位 ,并使IκBα降解 ,进而活化NF κB ,诱导内皮细胞分泌细胞因子。PDTC对这一系列变化可能有抑制作用     

脉冲等离子体涂层神经导管修复周围神经缺损实验研究

目的:探讨经脉冲等离子体涂层并固定睫状神经营养因子(CNTF)的聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物(PGLA)神经导管修复周围神经缺损的效果.方法:应用脉冲等离子方法对PGLA膜片或神经导管表面进行处理,然后固定CNTF.该膜片表面种植人胚胎视神经细胞,经处理的神经导管修复SD大鼠坐骨神经1.5 cm缺损.观察人胚胎视神经细胞在经处理的膜片上生长情况,并用电生理和轴突计数法评价经处理的神经导管内神经再生质量.设立未固定CNTF的PGLA膜片组和未经过脉冲等离子体涂层的神经导管组作为对照组比较.结果:在经处理的PGLA膜片上,人胚胎视神经细胞生长较对照组密集,且发现有轴突延伸相接现象.经处理的PGLA修复大鼠坐骨神经缺损,在1个月和3个月时,均发现神经导管内神经传导速度和再生神经轴突均明显大于对照组(P＜0.05).结论:经脉冲等离子体涂层并固定睫状神经营养因子(CNTF)的PGLA神经导管可能通过CNTF的接触诱导和持续缓释作用,促进周围神经再生.     

睫状神经营养因子对不全视神经损伤的保护效应

目的 观察睫状神经营养因子(CNTF)对猫视神经不全损伤后的神经保护效应.方法 制作猫视神经不全损伤模型;CNTF组分别给予CNTF 8μl(1g/L)玻璃体内注射,对照组给予生理盐水8μl;术后15d双侧上丘、外侧膝状体显微注射DiI 5μl逆行神经示踪;术前、术后3、15、30d行视觉诱发电位(P-VEP)检测;术后30 d原位心脏灌注;视网膜铺片,视网膜神经节细胞计数;取术侧视神经组织,光镜和电镜观察视神经形态变化.结果 对照组术侧眼PVEP P-100较CNTF组振幅明显减低,潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.01);与手术组相较.CNTF组视网膜神经节细胞存活数[(1256±124)个/mm2]明显高于对照组[(632±61)个/mm2](P<0.01),神经结构更加完整.结论 视神经不全损伤后CNTF玻璃体注射具有视神经保护效应.     

神经生长因子与睫状神经营养因子影响周围神经再生的比较研究

目的　比较神经生长因子 (nervegrowthfactor ,NEF)和睫状神经营养因子 (ciliaryneurotrophicfactor ,CNTF)促进大鼠坐骨神经再生作用的差异性。方法　用梭形双通道乳胶管桥接 3 2只SD大鼠坐骨神经缺损 (长 10mm)。按注入桥接管内物质的不同 ,将大鼠随机分为 2组。A组 :医用几丁糖凝胶组 (双侧 ) ,B组 :医用几丁糖凝胶 NGF(左侧 )和医用几丁糖凝胶 CNTF(右侧 )组。术后 12、16周对再生神经作肌电检测和形态学观察。结果　术后 16周 ,A组双支管内再生神经的形态无显著差异 (P >0 .0 5 )。B组NGF侧再生纤维排列欠整齐 ,以有髓纤维为主 ,且髓鞘厚 ,轴突直径大 ;CNTF侧再生神经纤维排列整齐 ,分布均匀 ,有髓纤维与无髓纤维均增加。NGF侧再生神经的运动传导速度慢于CNTF侧 ,但复合运动动作电位 (compoundmotoractionpotential,CMAP)和皮层体感诱发电位 (cortexsomatosesensoryevokedpotential,CSEP)的潜伏期较CNTF侧长 ,波幅较低 (P <0 .0 5 )。结论　NGF促进有髓纤维再生和髓鞘形成的作用较强 ,CNTF可同时促进有髓纤维和无髓纤维再生 ,且其促进神经功能恢复的作用优于NGF。     

靶肌肉注射睫状神经营养因子促周围神经再生的功能评价

目的　评价靶肌肉注射睫状神经营养因子 (CNTF)对受损周围神经功能恢复的影响。方法　用硅胶管桥接 80只大鼠左侧坐骨神经长 6 m m缺损 ,随机分为两组 ,分别行 CNTF、生理盐水 (NS)靶肌肉注射。术后行坐骨神经功能指数 (SFI)测定、电生理检测、轴突图像分析及霍乱毒素 -辣根过氧化物酶 (CB- HRP)逆行追踪。结果　 CNTF组 SFI恢复率、各项电生理及轴突图像分析指标、CB- HRP标记的脊髓前角运动细胞数明显优于 NS组。结论　靶肌肉注射 CNTF可明显促进周围神经再生和神经功能恢复。     

电穿孔介导睫状神经营养因子基因转染延缓失神经肌萎缩

目的　探索一次性电穿孔介导睫状神经营养因子 (ciliaryneurotrophicfactor ,CNTF)转染延缓失神经骨骼肌萎缩的疗效。方法　制备 3 6只SD大鼠右下肢腓肠肌失神经支配模型 ,按手术先后顺序随机分成失神经对照组 (A组 )和CNTF基因转染组 (B组 ) ,每组 18只大鼠。于术后 2、4、8周测定肌湿重维持率、肌细胞截面积、肌肉蛋白含量、胶原纤维与肌细胞面积比和细胞凋亡数。结果　术后 2、4周B组的肌湿重维持率、肌细胞截面积和肌肉蛋白含量均明显高于A组 (P <0 .0 5 ) ,但胶原纤维与肌细胞面积比和细胞凋亡数明显低于A组 (P <0 .0 5 )。术后 8周 ,两组间各参数无明显区别 (P >0 .0 5 )。结论　一次性电穿孔介导CNTF基因转染可延缓失神经骨骼肌萎缩四周。     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓及坐骨神经中睫状神经营养因子及其受体mRNA的表达

目的　探讨不同年龄大鼠坐骨神经损伤再生过程中 ,脊髓及坐骨神经睫状神经营养因子 (CNTF)及其受体α(CNTFRα)mRNA变化。方法　幼年、成年及老年大鼠各 96只 ,随机分为正常组 (1 2只 )和实验组 (84只 ) ,实验组大鼠切除右侧长 6mm的坐骨神经 ,分为伤后 1、3d和 1、2、4、8、1 2周组。利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)及原位杂交法检测脊髓及坐骨神经中CNTF、CNTFRαmRNA的表达变化。结果　原位杂交及RT PCR结果显示 ,各年龄组大鼠伤后损伤侧脊髓和伤侧神经CNTFR及CNTFRαmRNA表达均较正常组及未伤侧显著升高 (P <0 .0 5) ,4周达最高峰 ;伤侧近、远端神经中CNTFmRNA 1d～ 1周表达较正常组及未伤侧减低 (P <0 .0 5) ,2周后开始升高 ,4周达高峰 (近端 :1 .59± 0 .1 3、1 .1 9± 0 .1 7和 0 .69± 0 .0 4 ,远端 :1 .1 3±0 .1 6、0 .84± 0 .0 6和 0 .57± 0 .0 3 ,P <0 .0 5)。其中幼年鼠变化最大 ,成年鼠次之 ,老年鼠最弱 ,近端较远端神经有变化大的趋势。结论　不同年龄大鼠坐骨神经损伤后脊髓、神经中CNTF及CNTFRαmRNA表达显著升高。     

增生瘢痕中转化生长因子基因的表达

目的　探讨转化生长因子 (TGF) β1和转录因子Smad 2 ,Smad 3三种基因影响增生性瘢痕形成和皮肤伤口无瘢痕愈合的调节机制。方法　 3 2份被检测标本中包括增生性瘢痕 8份 ,其自体正常皮肤组织 8份 ,胎儿和成人皮肤组织各 8份。用逆转录 多聚酶链反应方法 (RT PCR)检测上述基因在不同的组织细胞内的表达变化规律。结果　TGF β1、Smad 2和Smad 3基因在增生性瘢痕、胎儿和成人皮肤组织细胞内都有表达。在所检测 8对增生性瘢痕和其对应正常皮肤细胞中 ,这 3种不同基因在增生性瘢痕细胞中的表达量高于正常皮肤细胞的组数分别为 :TGF β1基因有 5对 ,Smad 2基因有8对 ,Smad 3基因有 5对。在胎儿皮肤细胞内 ,TGF β1的mRNA含量明显低于成人皮肤细胞 (t =2 2 0 4 ,P <0 0 5 ) ,差异有显著意义 ;Smad 3基因表达也呈相似的变化规律 ,mRNA含量显著低于成人皮肤细胞 (t=4 2 69,P <0 0 1) ,差异有非常显著意义 ;而Smad 2基因的mRNA含量却明显高于成人皮肤细胞 (t=6 685 ,P <0 0 1) ,差异亦有非常显著意义。结论　TGF β1和它的下游信号分子Smad2 ,Smad 3可能与增生性瘢痕形成密切相关。在增生性瘢痕细胞内 ,这 3种基因高表达可诱导胞外基质大量沉积 ,加速成纤维细胞增殖 ,促进组织纤维化。TGF β1和Smad 3基     

核转录因子-κB对肝癌细胞Hep3B COX-2表达的调节

目的 探讨核转录因子(NF)-κB对肝细胞癌细胞Hep3B中COX-2表达的调控作用。方法 以体外合成的NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)处理Hep3B细胞72h，利用Western blot方法检测ASODN处理的Hep3B细胞p50和COX-2蛋白表达水平。利用电泳凝胶迁移法测定经ASODN处理的Hep3B细胞核内NF-κB水平。对照组为p50正义寡聚脱氧核苷酸(SODN)和未经处理的Hep3细胞。结果(1)Western blot分析显示，与以SODN处理和对照组的Hep3B细胞相比，以AS ODN处理的Hep3B细胞其NF-κB亚单位p50蛋白的水平明显降低，Hep3B细胞核抽提物NF-κB水平也相应减低。(2)以ASODN处理的Hep3B细胞其COX-2蛋白水平低于以SODN处理的Hep3B细胞和对照组细胞。结论 在肝细胞癌细胞Hep3B中，NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)可抑制NF-κB活性，导致COX-2的表达下调。由此反过来推测．活化的NF-κB对COX-2具有激活和诱导作用，提示COX-2在肝细胞中作用与NF-κB通道有关．在肝细胞癌的形成和以NSAIDs预防性或治疗性用于肝细胞癌时，NF-κB有了新的作用。     

小白菊内酯改善胰岛素抵抗的分子学机制

目的探讨小白菊内酯（PTL）对胰岛素抵抗（IR） 的作用及其分子学机制。方法用不同浓度的胰岛素对HepG2 细胞进行不同时间的诱导,通过葡萄糖氧化酶法测定HepG2 细胞葡萄糖含量,明确建立稳定的HepG2胰岛素抵抗模型的胰岛素诱导浓度及诱导时间。模型建立后,应用不同浓度PTL分别作用于IR细胞24 h,通过CCK8法评价细胞活性,葡萄糖氧化酶法测定IR模型HepG2细胞葡萄糖消耗量,明确PTL最佳作用浓度,Q PCR法检测细胞核因子κB（NF κB）及IκBα mRNA表达情况,免疫蛋白印迹技术检测蛋白IκBα表达情况。结果HepG2 细胞产生IR的最佳作用时间是24 h,最佳胰岛素浓度为10 μg·mL－1。PTL的最佳作用浓度为 20 μmol·L－1,应用其干预IR的HepG2细胞后,与IR的HepG2细胞相比,NF κB活性明显降低（P＜0.05）,IκBα降解被抑制（P＜0.05）。结论PTL可明显抑制IκBα降解,减少NF κB解离, 改善高胰岛素诱导产生的IR。