生物素—链霉亲和素系统在放射免疫显像中的应用（文献综述）

本文综述了生物素－链霉亲和素（ＢＳＡ）系统在放射免疫显像中的应用原理，生物素和亲和素与单抗偶联物的制备方法，及其放射性核素标记方法以及该系统ＲＩＩ的动物实验和人体应用的初步结果。资料表明该方法具有提高ＲＩＩ的Ｔ／ＮＴ比值，降低非靶器官吸收剂量，可利用理想显像枋素如９９ｍＴＣ，１１１Ｉｎ以及避免抗体活性辐射损伤等优点。     

亲和素—生物素系统预定位技术在炎症显像中的应用

亲和素－生物素系统预定位技术已在肿瘤放射免疫显像中得到成功应用。近年来，这一新技术也已开始用于炎症的显像研究中。本文就亲和素－生物素系统预定位技术及其在炎症动物模型中的实验研究和临床试用研究中的情况进行简要综述。并就目前炎症显像的现状及存在的问题，以及预定位炎症显像的应用前景加以讨论。     

亲和素-生物素系统预定位技术在炎症显像中的应用

亲和素-生物素系统预定位技术已在肿瘤放射免疫显像中得到成功应用.近年来,这一新技术也已开始用于炎症的显像研究中.本文就亲和素-生物素系统预定位技术及其在炎症动物模型中的实验研究和临床试用研究中的情况进行简要综述.并就目前炎症显像的现状及存在的问题,以及预定位炎症显像的应用前景加以讨论.     

ABC和BA法的染色敏感性及其在病毒抗原定位中的应用

生物素—亲和素系统(Biotin Avidin System,BAS)是70年代发展起来的新颖试剂,国外应用比较广泛,国内近年来有应用亲和素—生物素酶复合物(Avidin—Biotin—Peroxidase Complex,ABC)方法的报导,但制剂多是成套进口。我们用自制ABC和酶标亲和素试剂并以生物素     

BAS试剂的研制

<正> 生物素亲和素系统(Biotin-Avidin System,BAS)是七十年代后期发展起来的一种新型生物反应放大系统。我们从1983年以来,陆续研制成功亲和素、活化生物素BNHS、生物素化羊抗兔(b-SARG)和生物素化兔抗鼠(b-RAMG)以及生物素化辣根过氧化物酶(b-HRP),组成了一套完整的BAS试剂系统。 亲和素是用CMC柱吸附-解离法,从鸡蛋清中分离获得,每ml蛋白含12活性单位。BNHS由生物素     

抗生物素单克隆抗体的制备及其在核酸检测中的应用

生物素与亲和素有相当强的亲和力 (Ｋｄ10 15Ｍ ) ,已被广泛用于细胞化学、免疫组织化学、免疫测定以及核酸原位分子杂交。但是生物素 亲和素系统中 ,亲和素是一种高碱性 (ｐＨ0 5 )糖蛋白 ,易引起较强的非特异性结合。最近Ｂａｇｅｒ报道抗生物素抗体有模拟亲和素功能作用 ,并显示较好的特异性[1] 。本文报道建立二株抗生物素单克隆抗体 ,并初步用于乙型肝炎ＤＮＡ的检测。1　材料和方法1 1　材料　生物素、Ｎ 羟基琥珀酰亚胺、二环已基碳二亚胺、ＢＳＡ、ＰＥＧ、ＨＡＴ、ＤＡＢ (3,3 ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ )、羊抗小鼠Ｈ…     

地高辛的生物素—链霉亲和素免疫法测定方法的建立

目的：将生物素链霉亲和素免疫反应系统引入地高辛血药浓度监测中，准确地监测地高辛血药浓度。方法：将生物素与抗ＤＩＧＩｇＧ化学连接，ＤＩＧ通过ＨＳＡ与ＨＲＰ连接，建立了生物素链霉亲和素免疫反应系统测定地高辛的竞争反应模型。结果：以０５、１、２、３、５μｇ／Ｌ五个标准点建立了竞争反应曲线，同时将ＢＮＨＳＩｇＧ作了１：４００、１：８００、１：１６００、１：３２００的稀释，探讨了竞争反应曲线的规律性变化，运用流行的四参数曲线拟合法对竞争曲线作了拟合。同时做了方法学评价。结论：流行的生物素链霉亲和素技术可以引入被动的酶联免疫吸附法中，提高反应的灵敏度     

促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。     

生物素-亲和素技术锚定肝素于胰岛表面

背景：胰岛微血管在胰岛分离过程中被破坏,进而影响移植后胰岛的营养供应。肝素对于血管的再生具有非常重要的意义;同时,临床胰岛移植多应用肝素来抑制血栓形成,但全身肝素化增加了出血的风险。而亲和素同时具备生物素和肝素2个较强的结合位点。 目的：利用亲和素这一特性,应用生物素-亲和素技术,将肝素锚定于胰岛的表面,促进胰岛再血管化,同时达到避免全身应用大剂量肝素带来出血风险的目的。 方法：根据Ricordi自动化法分离纯化成人胰腺,然后将成人胰岛依次和0,0.5,1,1.5,2 g/L生物素(包括生物素N-羟基丁二酰亚胺酯、长臂活化生物素、肼化生物胞素、生物素酰肼、TFP-biotin),1 g/L亲和素素,0.5,1.0,1.5,2.0 g/L肝素孵育培养,观察肝素化变化。 结果与结论：TFP-biotin介导胰岛表面肝素化效果最好,且其肝素化前后胰岛活力率变化的差异无显著性意义(P > 0.05),同时肝素化和未肝素化胰岛具备相似的胰岛素释放反应(P > 0.05)。提示生物素-亲和素技术是一种安全、有效的胰岛表面肝素化处理方法。     

生物素化抗细胞因子单克隆抗体的制备

目的 探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法 应用经超滤、硫酸铵沉淀、ProteinG亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠IL-5、IL-4和IFN-γ单克隆抗体，以每mg抗体加入生物素制剂80ug室温反应60min，其反应液经SephadexG-25层析纯化，然后用生物素-亲和素ELISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果 该法制备的生物素化抗体活性高，用于检测感染巴西钩虫的IL-5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本敏感性好。结论 该生物素化抗体的抗备方法具有制备简单、稳定性好等优点。     

生物燃料电池酶电极电化学性能研究

目的研究一种新型酶电极电化学性能,该电极能够被应用到生物燃料电池中。方法通过生物素-亲和素系统固定葡萄糖氧化酶,制备了生物燃料电池酶电极,应用循环伏安法研究了酶电极的电化学性能,并讨论了酶的层数、底物浓度、扫描速率和温度等条件对其性能的影响。结果通过生物素、亲和素间的特异性结合力固定化酶制备的生物燃料电池酶电极对葡萄糖有较好的电流响应。结论制备的酶电极能够满足生物燃料电池的要求,适合在人体环境中使用。     

BSA-ELISA在检测抗HBs中的应用

本文采用自制的生物素-链霉亲和素系统(BSA)试剂建立测定抗HBs的双抗原夹心BSA-ELISA,并与生物素-亲和素系统(BA)ELISA进行比较,对两法不一致的标本用相应Abbott试剂作最终考核。结果表明,BSA-ELISA本底极低,且具有较高的敏感性和特异性。     

亲和素-生物素系统介导的炎症预定位显像研究

目的：探讨亲和素-生物素系统在小鼠炎症模型中进行预定位炎症显像的实验研究。方法：实验动物均为用肌肉注射松节油所致炎症模型,采用生物素化人免疫球蛋白（B-hIgG）和99mTc标记亲和素（99mTc-Avi-din）进行二步法预定位炎症显像,在注药后3h、6h、12h对小鼠炎症模型进行显像和体内生物学分布测定,并以^99mTc-hIgG和^99mTc-Avidin作为对照组。结果：二步法预定位显像组炎症病灶在3h即可显像,其靶/非靶（T/NT）比值为1.95,6h达3.12,血中放射性清除较快。而^99mTc-hIgG组T/NT在3h仅0.38,由于其分子量较大,血中清除时间较长,血本底较高,6h-12h血中仍保持较高放射性水平,且肝脏积聚放射性较多,图像也不清晰;^99mTc-Avidin组则在肝、肾有较多放射性浓聚。结论：二步法预定位炎症显像的T/NT比值较^99mTc直接标记hIgG法为高,且病灶显像时间提前,并可提高图像的清晰度。     

生物素—亲和素系统在免疫学检测中的应用

<正> 早些年前,学者们发现给动物喂食大量卵白蛋白可引起维生素 H(即生物素,biotin)缺乏症,此后证明其原因是卵白蛋白中存在一种对生物素有异常强亲和力的碱性糖蛋白,称之为 avidin,译名有抗生物素蛋白、卵白素和亲和素等。前二者易与抗体或卵白蛋白混淆,本文采用亲和素。自七十年代中期起,亲和素与生物素之     

抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

亲和素、生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时，敏感性依然不够。为此，作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗，通过选择性扩大ABC复合物，增加底物信号，增强亲和素一生物素免疫测定法的敏感性。     

抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

亲和素,生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时,敏感性依然不够。为此,作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗,通过选择性扩大ABC复合物,增加底物信号,增强亲和素-生物素免疫测定法的敏感性。     

肺移植前后可溶性细胞间黏附分子1的变化

背景:应用生物素-链亲和素系统建立的可溶性细胞间黏附分子1测定法,是一种敏感度高、可测范围广的检测方法。目的:建立可溶性细胞间黏附分子1生物素-链亲和素系统时间分辨荧光免疫分析方法并应用于临床,探讨肺移植前后血清可溶性细胞间黏附分子1的变化及临床意义。方法:使用2株匹配的单克隆抗体分别作为捕获抗体和检测抗体,利用制备的铕标记链亲和素(SA-Eu3+)作为示踪物并与生物素化的检测抗体特异结合,建立双位点多层夹心法,通过对30例健康人血清可溶性细胞间黏附分子1检测和26例肺移植受者手术前后血清可溶性细胞间黏附分子1的变化测定,对可溶性细胞间黏附分子1生物素-链亲和素系统方法学和在肺移植术前后的临床应用价值进行评价。结果与结论:30例健康对照测定结果为(348.63±69.12)μg/L。移植前可溶性细胞间黏附分子1与对照组无显著性差别;移植后,各组与对照组之间比较差异有显著性意义(P0.05),急性排斥反应时血清可溶性细胞间黏附分子1升高,并发感染时降低,但各组之间比较无明显差别。表明可溶性细胞间黏附分子1生物素-链亲和素系统是一种新型的高灵敏度、宽范围的非放射性标记免疫分析法,对肺移植受者移植前后监测血清可溶性细胞间黏附分子1可作为辅助诊断急性排斥反应的免疫学指标。     

用ABC法研究血浆凝块法培养的人巨核系祖细胞

<正> 自从Vairmhenker于1979年报道人类巨核细胞集落形成单位(Colony-forming unit megakaryocyte,CFU-M)体外培养成功以来,已有不少GFU-M培养方法相继问问。本文应用近年来迅速发展起来的新型生物反应放大系统,生物素-亲和素系统     

ABC-ELISA在检测HBeAg中的应用

ABC—ELISA是ELISA与BAS(生物素—亲合素系统)相结合的新技术。为提高HBeAg检出率和乙型肝炎正确诊断率, 现将生物素—亲和素与HRP结合成ABC—ELISA,对HBeAg进行检测,获得效果较满意,报告如下。     

三种酶联免疫吸附法筛选"渗漏"型SCID小鼠的比较

目的　选择简单的方法筛选“渗漏”型SCID小鼠。　方法　采用 3种酶联免疫吸附法 (双抗夹心ELISA、双抗夹心间接ELISA及生物素 亲和素夹心ELISA)测定SCID小鼠血清中IgG含量。　结果　生物素 亲和素夹心ELISA法灵敏度最高 ,用此法共检测了 4 1只 6～ 8周龄小鼠 ,其中 4 0只的IgG含量为 0 2 4± 0 16mg L ;只有 1只小鼠IgG含量为 2 3mg L ,渗漏比例为 2 4 %。　结论　用生物素 亲和素夹心ELISA法对SCID小鼠“渗漏”进行初筛 ,是简便、敏感、可行的方法