细胞凋亡调控因素有关基因的研究

抑制细胞凋亡的基因主要是Ｂｃｌ－２基因和Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂｃｌ－ＸＬ，ＭＣＬ－１），其编码的蛋白质能抑制细胞凋亡和延长细胞寿命，其抑细胞凋亡作用以Ｂｃｌ－２最为重要。促进细胞凋亡基因或因素较多，主要有Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂａｘ，Ｂｃｌ－Ｘｓ）、ｐ５３肿瘤抑制基因、ｃ－ｍｙｃ原癌基因、ＴＧＦ－β、Ｆａｓ抗原及其配体，其中Ｂａｘ基因、ｐ５３基因与Ｂｃｌ－２基因在细胞凋亡的调控作用方面密切相关     

维生素A对胸腺凋亡有关基因的影响

为观察营养缺乏及补充维生素Ａ（ＶＡ）对胸腺细胞凋亡有关基因的影响，采用原位杂交及免疫组化的方法观察了胸腺组织ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ，Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达。结果表明营养缺乏的大鼠胸腺细胞ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显降低，而Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达则明显增强；补充ＶＡ后大鼠胸腺ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显增强，Ｂａｘ蛋白的表达明显降低，而Ｆａｓ蛋白的表达无明显变化。本结果表明：营养缺乏时胸腺细胞凋亡增加导致免疫功能降低，补充ＶＡ可抑制细胞凋亡，可能是通过促进ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，抑制Ｂａｘ蛋白的表达而起作用     

钙通道激动剂诱发小鼠中枢神经系统c─fos表达的研究

本实验用免疫组织化学方法观察了Ｌ型钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４皮下注射后小鼠中枢神经系统原癌基因ｃ－ｆｏｓ的表达特点。结果表明，给ＢａｙＫ８６４４后１／２ｈｃ－ｆｏｓ的表达产物Ｆｏｓ蛋白在前嗅核、嗅结节、梨状皮质、齿状回、感觉运动皮质、丘脑室旁核、大脑视皮质纹状区、颞叶听区、中缝核群等区域出现，给药后２～４ｈ表达达高峰，之后进行性消退，１６ｈ恢复正常水平。使用钙通道拮抗剂ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ对ＢａｙＫ８６４４所致的Ｆｏｓ表达有拮抗作用。结果提示ＢａｙＫ８６４４诱导的Ｆｏｓ表达与Ｌ型钙通道在脑内的分布较为一致。对Ｆｏｓ和ＣａＢＰ进行双标记显示，在被观察的脑区Ｆｏｓ／ＣａＢＰ双标细胞在ＣａＢＰ免疫反应细胞中的比例约占６０．４２％～７２．８８％，ｃ－ｆｏｓ和ＣａＢＰ的共存是否提示这种细胞同时含有Ｌ型钙通道     

人肺癌细胞凋亡与p53、bcl-2、Bax的表达

目的：探讨人肺癌组织细胞自发凋亡的发生,ｐ５３基因及凋亡相关基因ｂｃｌ－２、Ｂａｘ在肺癌组织中的表达及与肺癌细胞凋亡和生物学行为的关系。方法：用甲基绿－派诺宁染色检测５０例肺癌组织切片中凋亡细胞,ＬＳＡＢ免疫组化法检测ｐ５３和Ｂａｘ的蛋白表达,原位杂交方法检测ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ的表达。结果：１００％小细胞肺癌凋亡发生数１０个／ＨＰＦ,２１％的肺鳞癌和１５％的肺腺癌凋亡发生数〉１０个／ＨＰＦ。ｐ５     

肝细胞提取物对肝癌细胞（BEL—7402）凋亡相关基因表达的影响

肝细胞提取物经ＨＰＬＣ，ＦＰＬＣ进一步分离纯化，得到了单一色谱峰，激光飞行时间质谱仪测分子量为４．０２０ｋＤ该单一组分（Ｓ４）对ＢＥＬ－７４０２肝癌细胞有增殖回落作用，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为７．５８ｍｇ／Ｌ。对ＢＥＬ－７４０２细胞的基因表达影响研究，Ｓ４对Ｐ５３，Ｆａｓ表达有增强作用，而抑制Ｂｃｌ－２，ｃ－ｍｙｃ的表达，Ｓｏｕｔｈｅｒｍｂｌｏｔ技术表明，Ｓ４可抑制Ｂｃｌ－２的ｍＲＮＡ转录，提示     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl—2蛋白在甲状腺肿瘤组织中？…

目的：了解Ｆａｓ抗原及ｂｃｌ－２蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺瘤及３２例结节性甲腺肿组织中Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果：上述３组织中均测到Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ〉０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ〉０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ抗原表达与ｂｃｌ－２蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６     

细胞凋亡的遗传调控

细胞凋亡是基因指导的细胞主动死亡。目前发现的促使细胞凋亡的基因有Ｂａｘ，Ｂｃｌ－Ｘｓ，Ｃｅｄ－３，Ｃｅｄ－４，ｐ５３，Ｃ－ｎｙｃ等；抑制细胞凋亡的基因有Ｂｃｌ－２，Ｃｅｄ－９．Ｂｃｌ－Ｘ＿Ｌ等。细胞凋亡机理的阐明将对某些疾病的治疗提供新的途径。     

原癌基因bcl－2对Fas和穿孔素介导的初级CTL的溶胞途径的调节作用

原癌基因ｂｃｌ－２对Ｆａｓ和穿孔素介导的初级ＣＴＬ的溶胞途径的调节作用［英］／ＭｉｃｈａｅｌＳ…／／ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ．一１９９５．２５．一３５０９～３５１９ＣＴＬ诱导靶细胞溶解有两条途径：一是通过ＣＴＬ表面的Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）与靶细胞表达的...     

SLE病人外周血Bcl—2／JH基因重排检测的意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测３１例ＳＬＥ病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象和流式细胞仪间接双标记法分析其Ｔ（ＣＤ３）、Ｂ（ＣＤ１９）细胞Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果显示，ＳＬＥ病人Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于正常人（４２．９５％±２８．４７％对比９．９４％±４．９６％，Ｐ＝０．０００４），尤其以活动期ＳＬＥ病人为明显，而Ｂ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达与正常人之间并无统计学差异（７９．２１％±１０．６９％对比８１．９６％±６．９７％；Ｐ＝０．４６０２）。７例ＳＬＥ病人具有典型的Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排（占２２．５８％），且均为ＳＬＥ活动期病人，其Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于无基因重排的ＳＬＥ病人，其Ｂ细胞Ｂｃｌ－２表达并无差异（Ｐ＞０．３９０５）。说明Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象可见于ＳＬＥ，并与Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白高表达有关，表明细胞凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２在ＳＬＥ发病机制中具有重要作用。     

细胞凋亡与缺血性心脏病

缺血性心脏病中的心肌细胞除了有明显的坏死外，还有一部分发生凋亡。 Ｂｃｌ２ 家族（ Ｂｃｌ２ 和 Ｂａｘ） 、ｐ５３ 、 Ｆａｓ 抗原以及肿瘤坏死因子（ Ｔ Ｎ Ｆα） 等可能参与了缺血性心脏病中心肌细胞凋亡的调节。由于凋亡在细胞死亡过程中具有潜在的可复性，因此，凋亡的出现可能为人类在急性心肌梗塞发生发展过程中的心脏保护提供一个新的治疗措施。     

凋亡相关基因产物Fas和bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达

用流式细胞免疫技术检测胃癌组织中Ｆａｓ及ｂｃｌ－２蛋白表达,报告如下。１　材料与方法１．１　一般资料　２７例进展期胃癌病人中男１５人,女１２人,年龄２７～６６岁。术前未化疗、放疗。即取新鲜癌组织和切缘正常粘膜组织各１．０ｇ左右,ＰＢＳ冲洗两遍,滤纸吸干后放入１０％福尔马林中待检。１．２　方法　制备单细胞悬液,调整细胞为１０９／ｍｌ。取两试管,每管加细胞悬液１００μｌ,其中一管加Ｆａｓ－ＦＩＴＣ（或ｂｃｌ－２－ＦＩＴＣ）（法国国际免疫公司提供）２０μｌ,一管加ＩｇＧ１－ＦＩＴ－Ｃ２０μｌ,室温避光…     

Apo－1／Fas抗原与细胞程序化死亡

Ａｐｏ－ｌ／Ｆａｓ抗原是一种跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）受体超家族的一个成员，Ａｐｏ－ｌ／Ｆａｓ是细胞程序化死亡信号传导系统的重要组成部份。Ａｐｏ－ｌ／Ｆａｓ系统介导的细胞程序化死亡，与粘附分子ＣＤ５４、原癌基因Ｂｃｌ－２的表达，以及二磷酸腺苷多聚化过程有关。Ａｐｏ－ｌ／Ｆａｓ系统的研究，有助于自身免疫疾病的发病机制，以及抗肿瘤基因治疗方案的设计和研究。     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl-2蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的：了解Ｆａｓ 抗原及ｂｃｌ２ 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４ 例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺腺瘤及３２ 例结节性甲状腺肿组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达进行检测。结果：上述３ 组织中均测到Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白。３ 种组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ＞０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ＞０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ 抗原表达与ｂｃｌ２ 蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６,Ｐ＜０．０５）,其他两种组织中Ｆａｓ 抗原与ｂｃｌ２ 表达均无相关性（ Ｐ＞０－０５）。结论：上述３ 种组织中均有Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达,均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。     

何杰金病中EB病毒感染和bcl—2蛋白的表达

目的探讨Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒与ｂｃｌ－２基因的关系。方法利用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测了６４例何杰金病ＥＢ病毒的潜在膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）和ｂｃｌ－２蛋白的表达。用原位杂交方法检测了４１例何杰金病组织中的ＥＢＥＲ。又用双重染色的方法检测了７例ＥＢＥＲ和ｂｃｌ－２蛋白双阳性的何杰金病例。结果ＬＭＰ－１和ＥＢＥＲ的阳性率分别为３９％和４４％,所有ＥＢＥＲ阳性的病例ＬＭＰ－１均为阳性。ｂｃｌ－２蛋白的阳性率为２３％,其中仅有７例ＬＭＰ－１和ｂｃｌ－２蛋白同时阳性。双重染色结果为,在７例双阳性病例中ｂｃｌ－２阳性的细胞只有约５０％ＥＢＥＲ阳性,约４０％ＥＢＥＲ阳性的肿瘤细胞ｂｃｌ－２阳性。结论研究结果提示,在本组研究的病例中Ｒ－Ｓ细胞的ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＥＢ病毒的存在与否无明显相关性。     

Bcl-2 和Bax蛋白在慢性病毒性肝炎肝组织中的表达

目的研究细胞凋亡相关的Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白在慢性病毒性肝炎（ＣＨ）肝组织中表达的情况与该病发生发展的关系。方法对３５例不同病变程度的ＣＨ肝组织用免疫组化法检测Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达及定位。结果Ｂｃ１－２和Ｂａｘ分布基本一致，轻、中度ＣＨ主要见于碎屑样坏死（ＰＮ）区中的单个核细胞（ＭＮ），邻近ＰＮ区边缘的肝细胞浆中也有强阳性表达。ＨＥ染色观察，这些Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性肝细胞多呈重度水样变性或嗜酸性变。在重度ＣＨ肝组织中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性的ＭＮ主要分布于重度ＰＮ区和桥接坏死区，周围部分肝细胞Ｂａｘ阳性，而Ｂｃｌ－２为阴性。在慢性重型肝炎，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ除在亚大块肝细胞坏死区浸润的ＭＮ胞浆内表达外，残存肝细胞亦呈阳性表达。结论Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在肝组织中的表达可能不仅与ＣＨ的细胞凋亡有密切关系，而且与慢性重型肝炎的发生发展有关     

ACI血小板、淋巴细胞膜Fas、APO2.7、bcl-2表达

测急性脑梗死（ＡＣＩ）患者血浆中血小板和淋巴细胞膜Ｆａｓ,ＡＰＯ．２７,ｂｃｌ－２阳性表达率,为研究上述促,抑凋亡基因对ＡＣＩ形成机制及预后的影响,寻找超早期防治措施。用流式细胞仪对制备好的血小板和淋巴细胞膜样本进行测定。结果：ＡＣＩ组血小板,Ｆａｓ,ＡＰＯ２．７ｂｃｌ－２阳性表达率均显著高于对照组,Ｐ〈０．０５。     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节，其表达变化与神经元对缺血的敏感性相关     

虫草多糖对人外周血IL－2、IL－ZR及IFN－γ调节作用的研究

本研究观察了冬虫夏草多糖（ｃｏｒｄｙｃｅＰｓＰｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ，ＣＰ）对体外培养的外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）的ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ、ＩＦＮ－γ的影响。结果表明，ＣＰ可单独或协同ＰＨＡ诱导ＩＬ－２Ｒ的表达，促进可溶性ＩＬ－２Ｒ（ｓＩＬ－２Ｒ）的生成，但对ＰＨＡ诱生的ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ活性有选择性抑制作用。其协同或抑制作用均呈剂量依赖性，吲哚美辛可部分或全部消除其抑制效应。提示ＣＰ对体外培养的ＰＢＬ具有双向免疫调节作用。     

穿孔素和Fas配体在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌浸润细胞中表达

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）和Ｆａｓ配体（Ｌ）介导的细胞毒作用在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将４０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机等分为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）及不含病毒的病毒稀释液经腹腔接种，于接种后７天处死，取其心脏。应用免疫组化、逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位杂交等方法，检测细胞介导的细胞毒作用的主要效应分子ＰＦＰ和ＦａｓＬ在心肌浸润细胞中的表达。结果（１）实验组小鼠的心肌组织中均有ＰＦＰ和ＦａｓＬ抗原阳性细胞浸润，对照组则无；（２）ＲＴ－ＰＣＲ检测发现实验组鼠的心肌组织中ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ的阳性率均为１００％，明显高于对照组的２０％和３０％（Ｐ均＜０．０１）；（３）原位杂交检查显示，实验组小鼠心肌组织中均可见ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ阳性的浸润细胞，而对照组则均未发现。结论ＣＶＢ３小鼠心肌炎急性期，其心肌浸润细胞中有ＰＦＰ和ＦａｓＬ表达，提示它们在病毒性心肌炎发病机制中可能有重要作用     

SRBC膜提取物对猪PBMNC第二信使的影响

胰酶水解绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）释放膜表面活性蛋白组分Ⅲ（ＴＲＦ－Ⅲ），单独作用可使猪外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）胞内ｃＡＭＰ水平升高，以１００μｇ／ｍｌ浓度刺激达最高峰，由对照组０．９４±０．１４ｐｍｏｌ／Ｌ升高到２．７５±０．２５ｐｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。如果ＰＢＭＮＣ事先与腺苷酸环化酶（ＡＣａｓｅ）抑制剂ＬｉC１孵育后再以ＴＲＦ－Ⅲ或ＰＡＨ刺激。ｃＡＭＰ增高受到抑制（Ｐ＜０．０１）；而ＥＤＴＡ－２Ｎａ（一种磷酸二酯酶ＰＤＥ抑制剂）对此ｃＡＭＰ升高无影响。结果提示，此ｃＡＭＰ升高主要是通过活化ＡＣａｓｅ水解ＡＴＰ生成ｃＡＭＰ，而不像是抑制ＰＤＥ减少ｃＡＭＰ降解引起的。ＴＲＦ－Ⅲ诱导猪ＰＢＭＮＣ胞内Ｃａ~(２＋)浓度升高，以１００μｇ／ｍｌ刺激２分钟升高最多，由对照组的２４２±７ｎｍｏｌ／Ｌ升高到３２３±１５ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。以ＥＧ－ＴＡ除去胞外Ｃａ~(２＋)再以ＴＲＦ－Ⅲ或ＰＡＨ刺激，仅观察到小范围［Ｃａ~(２＋)］ｉ升高。看来这一过程包括了刺激胞内Ｃａ~(２＋)释放和胞外Ｃａ~(２＋)内流两种方式。以上结果证明，ＴＲＦ－Ⅲ对淋巴细胞功能影响与细胞内第二信使有关。