24个产地龙葵中澳洲茄碱的含量测定

目的:对来自10个省市、24个产地的不同生境、生长周期的龙葵中澳洲茄碱进行分析.方法:采用HPLC,AgilentTc-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm);以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;检测波长为203 nm;体积流量:0.9mL/min;柱温为30℃.结果:龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、生境及生长周期不同差异很大.尤以生境及生长周期对澳洲茄碱的含量影响最为显著.结论:龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、生境及生长周期不同差异很大,因此控制龙葵药材的来源及最佳采收期,以保证龙葵药材的质量.     

龙葵中澳洲茄碱含量的动态规律

目的：通过研究龙葵不同产地、生长周期及药用部位中澳洲茄碱的动态规律,为进一步优化龙葵的采收期、药用部位及栽培提供依据。方法：采用HPLC,AgilentTC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm）;以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;检测波长为203 nm;体积流量：0.9 mL·min-1;柱温为30 ℃。结果：龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地不同差异很大。龙葵地上部分澳洲茄碱含量的高低主要取决于所结果实的多少,以盛果期含量最高;不同成熟程度果实中澳洲茄碱含量的规律为：成熟果实＜青果＜幼果。结论：在龙葵的生长过程中,龙葵中澳洲茄碱的含量随着其生长发育进程而发生变化。根据龙葵不同生长阶段所含澳洲茄碱在各器官中的含量变化,龙葵的最佳采收期为盛果期,最佳药用部位为幼果和青果。     

龙葵药材质量标准

目的:修订和完善龙葵药材的质量标准.方法:依据2010年版《中国药典》附录药品标准研究方法对龙葵药材进行显微、薄层鉴别,对10批龙葵药材的水分、灰分、酸不溶性灰分进行检查,并测定其有效成分含量.结果:确定了龙葵药材的显微特征,并建立了其TLC鉴别方法;水分不得＞10.0％,酸不溶性灰分不得＞3.0％;澳洲茄碱进样量在1.002～20.04μg内呈良好线性关系,澳洲茄边碱进样量在1.023 ～20.46 μg内呈良好线性关系.结论:不同产地所含澳洲茄碱与澳洲茄边碱的总量差异较大,建立的方法能准确反映龙葵的内在质量,可作为龙葵药材质量标准的修订内容.     

反相高效液相色谱法同时分析龙葵中3种甾体生物碱

目的:利用反相高效液相色谱法快速测定龙葵中3种甾体生物碱的含量.方法:采用Agilent Zorbax SB-C1s(4.6mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1%磷酸为流动相,流速1.0 mL·min-1,进样量20μL,柱温30℃,205 nm条件下检测,以梯度洗脱方式在30 min内分离了澳洲茄碱、澳洲茄边碱和khasianine 3种生物碱.结果:澳洲茄碱含量测定的线性范围为0.860～10.320μg(r=0.999 7);澳洲茄边碱含量测定的线性范围为0.726～8.710μg(r=0.999 7);khasianine含量测定的线性范围为0.696～8.352μg(r=0.9998).方法的平均回收率分别为100.18%,99.08%,99.88%.结论:方法简便快速、准确度高,可用于龙葵药材的质量评价.     

不同产地的龙葵果中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定比较研究

目的比较不同采收期、同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。方法采用高效液相色谱法测定不同产地龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。结果以吉林产的鲜龙葵果含含澳洲茄碱、澳洲茄边碱的量最高,安徽,辽宁,河北等地的龙葵干果的含量也较高。结论不同产地的龙葵果中鲜果与干果里面所含有澳洲茄碱以及澳洲茄边碱的含量存在显著性差异,应注意采时的产地和龙葵果的新鲜程度对龙葵药材质量的影响。     

龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定

目的:寻找可以作为评价龙葵药材质量的指标成分,提高龙葵药材的质量标准。方法:采用柱层析方法分离化学成分,应用光谱法进行结构鉴定,用高效液相色谱法测定其在龙葵药材不同部位的含量。结果:从龙葵药材中分离并鉴定了2个含量较高的甾体类生物碱苷澳洲茄碱(solasonine)和澳洲茄边碱(solamar-gine);建立了龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的HPLC含量测定方法。结论:这两种生物碱在龙葵药材中含量较高,可用于龙葵药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定龙葵中澳洲茄碱的含量

目的:建立测定龙葵中澳洲茄碱含量的HPLC分析方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6×150mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长205nm,柱温30℃。结果:澳洲茄碱在0.812-8.120μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998;样品的平均加样回收率为100.22%;方法精密度及重现性良好。结论:方法简便、准确,结果稳定、重现性好。     

龙葵的质量分析研究

目的建立澳洲茄碱、澳洲茄边碱和khasianine的UPLC同时检测方法,为龙葵药材质量评价提供方法。方法采用UPLC法,ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×250 mm,1.7μm),甲醇-0.5%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为205 nm,流速为0.5 mL/min,柱温为35℃。结果龙葵药材中3个成分进样量依次在0.865～17.300μg、0.730～14.600μg,0.700～14.000μg内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率(n=9)分别为98.86%、98.91%、98.27%,RSD值均小于1.50%;广东省境内8个产区龙葵药材质量存在差异。结论该方法快速简便、准确可靠、灵敏度高、重复性好,可为龙葵药材的质量控制提供快速准确的检测方法。     

龙葵果HPLC指纹图谱研究

目的:建立龙葵果的HPLC指纹图谱分析方法,为该药材的鉴别及质量评价提供依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温为25℃,流速为1.0 m L/min,检测波长为205 nm,进样量10μL,分析龙葵果的HPLC图谱;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A版)进行相似度评价。结果:建立了10批龙葵果药材的指纹图谱,确定了12个共有峰,指认了澳洲茄碱、澳洲茄边碱2个特征峰。结论:建立的龙葵果HPLC指纹图谱可为该药材的鉴别及质量评价提供更全面的参考。     

RP-HPLC测定水茄果实不同提取物中澳洲茄碱含量

目的:建立水茄果实提取物中澳洲茄碱的含量测定方法,并比较不同提取物中澳洲茄碱的含量。方法:通过系统溶剂萃取法提取水茄果实中澳洲茄碱,比较不同提取部位中该成分含量。采用HPLC测定澳洲茄碱含量,流动相乙腈-0.2%磷酸溶液(15∶85),流速0.5 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温30℃。结果:澳洲茄碱在2~80μg呈良好线性关系,平均回收率100.93%,RSD 0.60%。水洗脱部位、10%乙醇洗脱部位、30%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、95%乙醇洗脱部位、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位和水相样品中澳洲茄碱分别为0.062 9,0.939 0,0.020 5,0.118 0,0.005 1,0.004 4,0.010 6,0.031 4,0.070 5,0.113 0 mg·g-1。结论:该方法简便、准确、专属性强,可作为水茄果实提取物中澳洲茄碱的含量测定方法,不同提取部位中该成分含量差异较大。     

中药龙葵提取物澳洲茄碱对肺癌细胞抑制作用

目的研究中药龙葵提取物澳洲茄碱对肺癌细胞的抑制效果及其可能的机制。方法采用MTT法检测了中药龙葵提取物澳洲茄碱对人类肺癌细胞株A549及小鼠Lewis肺癌细胞株LLC的抑制效果;以稍高半致死剂量的澳洲茄碱处理A549细胞,并进行细胞形态学观察和应用annexin V凋亡检测试剂盒进行流式细胞分析。结果澳洲茄碱对A549和LLC肺癌细胞均有明显的抑制作用,两者的24h IC50分别约为18μg/ml和20μg/ml。细胞形态学观察表明以终浓度为20μg/ml澳洲茄碱处理的A549细胞大多呈现细胞膜皱缩样的垂死形态,Annexin V/PI流式细胞分析结果表明细胞的总死亡率为42.43%[(Q2+Q3)/(Q2+Q3+Q4)],其中,早期凋亡细胞占总死亡细胞约22.08%[Q3/(Q2+Q3)],晚期凋亡或晚期凋亡和坏死细胞约占77.92%[Q2/(Q2+Q3)]。结论澳洲茄碱能明显抑制肺癌细胞的生长,其方式主要是诱发细胞凋亡或细胞凋亡和细胞坏死。     

龙葵愈伤组织生长特性及次生代谢产物积累研究

目的 建立龙葵Solanumnigrum愈伤组织最优培养体系，研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累，为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响，采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比，运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量，TTC还原法测定细胞活力，邻苯二酚法测定多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性，氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，愈创木酚比色法测定过氧化物酶（peroxidase,POD）活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量，高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段，最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT，愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势，20 d时细胞活力达到最高峰...     

澳洲茄边碱提取纯化工艺及其抗肿瘤作用的研究

目的:从龙葵中提取纯化澳洲茄边碱,并探讨其抗肿瘤活性.方法:龙葵药材粗粉80％乙醇回流提取,以硅胶柱色谱和重结晶的方法纯化澳洲茄边碱,最后鉴定结构和检查纯度;MTT法筛选澳洲茄边碱对人肿瘤细胞的体外生长抑制作用,并研究其对肝癌H22和EAC小鼠移植瘤的作用.结果:澳洲茄边碱含量达到97.9％;体外对6种肿瘤细胞均具有明显抑制作用,并且在2.4 mg· kg-1的给药剂量下对肝癌H22和EAC小鼠移植瘤具有明显的抑制作用.结论:澳洲茄边碱具有较好的抗肿瘤效果.     

正交试验优选龙葵的提取工艺

龙葵(Solanum Nigrum L.)是茄科(Solanaceace)植物龙葵的干燥地上部分,是我国传统草药,民间用于抗炎、抗病毒等.中国龙葵主要有2种和1变种,即龙葵、少花龙葵(S.photeinocarpum Nakam.et Odashi)和黄果龙葵(S.nigrum L.vat.suaveolens G.L.Guo)[1-2].近年来的研究表明,龙葵中的生物碱类成分具有很好的抗肿瘤活性,引起了医药工作者的关注[3].龙葵中所含有的主要是甾体类生物碱,主要有澳洲茄碱(solasonine)等,苷元是澳洲茄胺(solasodine).     

假烟叶树叶中澳洲茄碱和澳洲茄边碱的HPLC-ELSD测定

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)测定假烟叶树叶中澳洲茄碱和澳洲边茄碱的方法。方法通过方法学要素考察检测方法的可行性。结果以0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃;ELSD漂移管温度70℃,雾化管温度30℃,载气压力35psi,经梯度洗脱,澳洲茄碱和澳洲茄边碱达到良好分离;样品用质量50倍的1%甲酸甲醇在60℃超声提取30min,提取液直接进样。澳洲茄碱对照品在0.62～6.2g线性关系良好,加标回收率为100.95%;澳洲茄边碱在0.2～7.5g线性关系良好,加标回收率为95.34%。测定样品中澳洲茄碱含量为1.19mg/g;澳洲茄边碱含量为1.06 mg/g。结论该方法能准确快速地测定假烟叶中澳洲茄碱和澳洲茄边碱的含量。     

三峡库区栽培重楼属药用植物中薯蓣皂苷元含量测定

目的建立高效液相色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元含量,考察不同产地和不同品种重楼属药用植物中薯蓣皂苷元的含量。方法采用岛津Inertsil ODS-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(92∶8)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长203 nm,柱温30℃。结果不同产地、不同品种的重楼属药材中均含有薯蓣皂苷元,渝北区的长药隔重楼含量最高(6.813 7 mg/g),城口县的狭叶重楼含量次之(5.758 4 mg/g),最低的为石柱县的滇重楼(1.952 2 mg/g),表明不同栽培品种重楼药材化学品质差异较大,可能与产地、品种及栽培技术等因素有关。结论非药典品种长药隔重楼、狭叶重楼含量超过中国药典收载品种,具有较大的药用价值。     

HPLC-DAD变波长法同时测定博尔宁胶囊中12种指标成分

目的建立HPLC-DAD波长切换联合梯度洗脱法同时测定博尔宁胶囊中12种指标成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷、澳洲茄碱、澳洲茄边碱、重楼皂苷VII、重楼皂苷VI、重楼皂苷II、重楼皂苷I、特女贞苷、迷迭香酸、大黄酸、大黄酚和大黄素的量。方法采用HPLC-DAD法,Atlantis T3 C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.8 m L/min,梯度洗脱;变波长扫描;进样量为20μL。结果 12种指标成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷、澳洲茄碱、澳洲茄边碱、重楼皂苷VII、重楼皂苷VI、重楼皂苷II、重楼皂苷I、特女贞苷、迷迭香酸、大黄酸、大黄酚和大黄素分别在1.97~19.70μg/m L(r=0.999 2)、1.022~10.220μg/m L(r=0.999 3)、0.982~9.820μg/m L(r=0.999 1)、1.1~11.0μg/m L(r=0.999 6)、1.154~11.540μg/m L(r=0.999 8)、1.114~11.140μg/m L(r=0.999 5)、1.102~11.020μg/m L(r=0.999 3)、2.768~27.680μg/m L(r=0.999 3)、3.04~30.40μg/m L(r=0.999 6)、3.379~33.790μg/m L(r=0.999 5)、3.286~32.860μg/m L(r=0.999 4)、3.507~35.070μg/m L(r=0.999 7)质量浓度与峰面积具有较好的线性关系;精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%;平均加样回收率和相应的RSD分别为100.08%、1.27%;98.11%、1.15%;99.68%、1.13%;101.38%、0.87%;101.87%、0.95%;100.53%、0.74%;98.52%、0.83%;99.52%、0.88%;97.84%、1.33%;98.31%、0.71%;99.66%、0.57%;101.73%、1.41%。12批次供试品中12种指标成分质量分数分别为0.085~0.1_(18) mg/g、0.065~0.085 mg/g、0.051~0.075 mg/g、1.822~1.888 mg/g、1.532~1.599 mg/g、1.027~1.148 mg/g、2.420~2.621 mg/g、6.428~6.937 mg/g、0.258~0.289 mg/g、0.122~0.143mg/g、0.159~0._(18)4 mg/g、0.222~0.273 mg/g。结论建立的HPLC-DAD波长切换联合梯度洗脱法同时测定博尔宁胶囊中的12种成分,方法操作简便、快速、准确,可作为博尔宁胶囊全面可靠的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定龙葵中的澳洲茄胺

目的建立龙葵中澳洲茄胺的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法采用甲醇酸水超声提取龙葵生物碱,在回流条件下对生物碱苷进行酸性水解,得到相应的澳洲茄胺。然后进行高效液相色谱检测,色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm）,乙腈-0．05％七氟丁酸（30：70）体系为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为210nm。结果龙葵生物碱获得了良好的基线分离;澳洲茄胺的线性范围为102～612μg·ml-1（r=0．9999）;加样回收率超过96．0％,RSD为3．35％（n=6）。结论该方法简单快速,准确可靠,可作为龙葵药材及其制剂的质量控制方法。该方法也为龙葵质量标准的制定及进一步的药效学研究提供了可靠的数据和方法学平台。     

不同产地知母药材质量分析评价

目的:对不同产地知母药材的质量进行分析比较。方法:采用UPLC-TQ/MS法,同时测定知母药材中的9种成分。色谱柱:Phenomenex Kinetex XB-C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相:0.1%甲酸-乙腈(梯度洗脱),流速为0.4 m L/min,柱温35℃;串联质谱离子多反应检测模式(MRM)。结果:在15 min内9种化学成分得到较好的分离,9种化学成分浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数0.9917~0.9992,回收率98.1%~103.7%,精密度RSD为1.7%~4.7%。不同产地知母药材中知母皂苷元含量为0.074~3.620 mg/g,知母皂苷AⅢ为0.042~2.530 mg/g,知母皂苷BⅡ为22.1~50.4 mg/g,新知母皂苷BⅡ为0.10~8.28 mg/g,知母皂苷BⅢ为0.64~7.29mg/g,芒果苷为3.28~27.40 mg/g,异芒果苷为1.83~7.21 mg/g,新芒果苷为0.36~9.25 mg/g,宝藿苷Ⅰ为4.72×10-5~1.38×10-3mg/g。结论:所建方法快速、准确,可用于知母药材质量评价,不同产地知母药材质量存在差异。道地产地河北产知母药材皂苷类成分的含量较其他地区为高。     

HPLC法测定不同产地喜树果中喜树碱

目的 建立喜树果药材中喜树碱定量测定的HPLC方法,并对不同产地喜树果药材中喜树碱的量进行比较分析.方法 用HPLC法测定喜树果药材中喜树碱的量,色谱条件:色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(250 mm × 4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(55:45),体积流量:0.8 mL/min,检测波长:254 nm.结果 喜树碱在0.112～0.672μg与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为102.19%,RSD=2.90%(n=6),40批不同产地喜树果药材中喜树碱的量为0.0315%～0.2424%.结论 建立的喜树果定量测定方法准确可靠,不同产地喜树果药材中喜树碱的量有较大差异.