α硫辛酸抑制6-羟基多巴胺诱导的PC12细胞中α突触核蛋白(α-synuclein)表达及机制

目的研究α硫辛酸(α-LA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病细胞模型中α突触核蛋白(α-syn)表达的影响及其机制。方法采用6-OHDA诱导PC12细胞建立帕金森病细胞模型,用α-LA处理。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,比色法检测细胞内铁含量和细胞内丙二醛(MDA)含量,荧光探针2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测α-syn蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组细胞活性显著降低,细胞内铁含量、MDA含量、ROS水平均显著增高,α-syn蛋白水平显著增加;与模型组相比,α-LA处理的细胞活性显著升高,细胞内铁含量、MDA含量、ROS水平显著降低,α-syn蛋白水平显著降低。结论α-LA能抑制α-syn过表达,减轻6-OHDA诱导所致的PC12细胞损伤,这可能与α-LA降低细胞内铁含量、氧化应激水平有关。     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺66多孔材料制备和生物安全性初步评价

采用注塑方法，以医用纳米羟基磷灰石僳酰胺66（n-HA／PA66）复合材料为原料，使用专用发泡剂，制备出了一种具有贯通孔，平均孔隙尺寸约为500衄1的多孔材料，并参照GB／T16886和GB／T16175标准方法，对其生物安全性进行了相关评价。细胞毒性试验、致敏试验、热原试验和溶血试验结果表明本研究制备的多孔n-HA／PA66复合材料无细胞毒性、无致敏性、无热原反应，溶血率为0．59％（〈5％），可初步认为n—HA／PA66多孔材料具有良好的生物安全性，可用于骨组织修复。     

羧乙基壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料细胞相容性和生物力学性能的实验研究

制备羧乙基壳聚糖-纳米羟基磷灰石(NCECS/nHA)复合材料,研究其生物力学性能以及与气管软骨细胞的生物相容性。方法 气管软骨片段取自8周龄大耳白兔,Ⅱ型胶原酶消化,将所获得软骨细胞传代培养。将体外制备的NCECS/nHA复合材料分别进行干态标本和湿态标本的生物力学检测。将第3代软骨细胞种植到NCECS/nHA复合材料,分别计算材料表面软骨细胞在2h、6h、12h细胞贴壁率,并用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性。结果 NCECS/nHA复合材料具有良好的生物力学性能。兔气管软骨细胞在NCECS/nHA复合材料表面上12h的贴壁率达(88.4±2.1)％,与其他组差异无统计学意义(P＞0.05)。同时MTT显示气管软骨细胞在NCECS/nHA复合材料表面生长状态良好。扫描电镜结果显示软骨细胞在NCECS/nHA薄膜上增殖和分化良好。结论 NCECS/nHA复合材料具备良好的细胞相容性和适宜的生物力学强度,作为一种具有开发潜力的生物材料,可用于组织工程气管的体外构建。     

鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-羟基脱氧鸟苷含量的变化

目的： 8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）是DNA损伤性生物标志物。通过检测鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-OHdG的水平,初步探究鼻咽癌的发生和发展是否与DNA损伤有关。方法： 利用抗8-OHdG单克隆抗体,通过ELISA和免疫荧光组织化学方法分别检测鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-OHdG的水平。结果：8-OHdG在鼻咽癌患者血清和组织中表达水平较高,与正常人血清和慢性咽炎组织比较差异显著（P<0.05）。结论： 结果提示鼻咽癌的发生和发展可能与8-OHdG的水平有关。8-OHdG有望成为辅助鼻咽癌诊断的一个生物标志物。     

乳鼠成骨细胞与珊瑚-羟基磷灰石支架材料在旋转式生物反应器中培养的实验研究

目的探讨联合运用成骨细胞、珊瑚-羟基磷灰石(CHA)支架材料和自行研制的旋转式生物反应器在体外构建组织工程化骨的可行性.方法运用骨片组织培养法,分离培养Wistar乳鼠的成骨细胞,传至第3代后,形成成骨细胞-CHA复合物,然后在自行研制的生物反应器中培养.通过茜素红(ARS)染色,MTT法及其他组织化学的方法来研究在生物反应器中培养14 d时的成骨潜能.结果成骨细胞和CHA支架材料有良好的生物相容性.在生物反应器中,成骨细胞-CHA复合物培养至第14天时,CHA明显促进了细胞的增殖,ARS染色呈弱阳性反应,同时,碱性磷酸酶(ALP)的分泌减少.结论CHA材料和生物反应器可以为成骨细胞提供良好的生物学及力学环境,三者联合运用有希望成为构建组织工程骨的理想方法.     

1α,25-二羟基维生素D3抑制人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性

目的探讨1α,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性的影响及作用机制。方法 1,25(OH)_2D_3(100 nmol/L)干预和溶剂对照处理SW480细胞48 h;用双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性;Western blot检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin在细胞核/质内的定位变化;用RT-qPCR和Western blot检测β-catenin和FOXM1 mRNA及蛋白水平。采用siRNA敲降SW480细胞中FOXM1后,检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin转录活性的变化。结果 1)在SW480细胞中,1,25(OH)_2D_3能显著降低β-catenin的转录活性(P0.05),但不影响β-catenin mRNA和蛋白表达水平; 2)1,25(OH)_2D_3上调SW480细胞中FOXM1蛋白水平的表达(P0.05); 3)敲降SW480细胞中FOXM1降低1,25(OH)_2D_3对β-catenin转录活性的抑制作用(P0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3通过上调FOXM1的表达,发挥抑制β-catenin转录活性的作用。     

生物样品中普鲁托品的HPLC测定方法和普鲁托品在大鼠体内药代动力学

本文建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定大鼠血浆、尿、粪、肝组织匀浆中药物浓度的方法。流动相为甲醇、水和10％冰醋酸,以C_(18)柱分离,紫外检测波长为285um,生物样品在碱性条件下经两次乙醚处理可获得良好分离。血浆样品最低检测浓度为50ng/ml,组织样品最低检测浓度为25ng/ml,日内精密度为2.08％～3.06％,日间精密度为1.04％～3.92％,平均方法回收率为96.00％～103.81％。为全面了解普鲁托品(protopine)在大鼠体内代谢过程,给大鼠尾静脉注射protopine 10mg/kg后,测定不同时间各组织和体液中protopine的含量。结果表明,protopine在大鼠     

内耳免疫反应中白细胞上α4-整合素和L-选择素的表达

目的 探讨α4－整合素（α4－integrin)和L－选择素（L－selectin)在内耳免疫反应中的作用。方法 采用钥孔虫戚血蓝蛋白激发已2次全身致敏的大鼠内耳,诱发其内耳免疫反应,制造迷路炎模型,然后通过免疫组织化学技术,检测内耳L－selectin在内耳中的表达。同时用流式细胞仪检测L－selectin和α4-integrin在外周血白细胞上的表达。用ELISA法检测外周血白细胞介素1（IL-1)浓度。结果 内耳炎症期间L－selectin表达与炎症程度成反比,α4－integrin的表达上调。迷路炎期间,IL－1浓度明显升高。结论 内耳免疫反应时,α4－integrin在炎性细胞从循环系统进入内耳的过程中发挥着重要作用。α4－integrin升高与外周血IL－1浓度有相关性。     

整合多组微阵列芯片分析骨关节炎患者滑膜中生物标志物和治疗靶点

背景:骨关节炎是老年人中常见的慢性疾病之一,目前还没有有效的治疗方法.目的:鉴定骨关节炎滑膜组织中的差异表达基因和相关信号通路,阐明骨关节炎的发病机制并寻找有效的药物靶点.方法:①从GEO数据库中收集10个相关数据集,包括120个骨关节炎患者滑膜组织样本和85个正常人滑膜组织样本,鉴定出差异表达基因;②对这些差异表达基...     

中链甘油三酯对小鼠胆固醇代谢和胆固醇7α-羟化酶表达的影响

目的：研究中链甘油三酯对小鼠胆固醇代谢的影响及可能的机制。 方法： 分别用AIN-93G配方饲料（BC），含1％胆固醇的AIN-93G配方饲料（Chol），含1％胆固醇和14%富含豆蔻酸的长链甘油三酯（LCT）的AIN-93G配方饲料（Chol＋LCT），含1％胆固醇和14％的中链甘油三酯（MCT）的AIN-93G配方饲料(Chol+MCT)喂养C57小鼠6周，每组15只。观察血清总胆固醇（TC）、肝脏胆固醇含量、机体总胆汁酸含量以及肝脏胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）的表达。 结果： Chol＋MCT组小鼠血清TC低于（P＜0.01）、肝脏胆固醇高于（P＜0.01）、机体总胆汁酸含量低于（P＜0.01）、CYP7A1表达低于（P＜0.01）Chol组小鼠；Chol＋MCT组小鼠血清TC低于（P＜0.01）、机体总胆汁酸含量以及CYP7A1 表达高于（P＜0.01）Chol+LCT组小鼠、肝脏胆固醇含量不变。 结论： MCT对机体胆固醇水平的影响与CYP7A1表达有关。     

MMP-14和缺氧诱导因子-1α在口腔鳞癌组织中表达及临床意义

目的探讨口腔鳞癌(OSCC)组织中基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其临床意义,为临床诊治OSCC提供依据。方法选择经病理组织确诊OSCC患者80例,其中男性45例,女性35例;年龄35~77岁,平均年龄52.85岁;根据TNM分期标准,其中Ⅰ期15例,Ⅱ期23例,Ⅲ期26例,Ⅳ期16例;分化程度,低分化45例,中分化23例,高分化12例。20例活组织检查正常口腔黏膜组织作为对照组,其中男性11例,女性9例;年龄33~68岁,平均年龄52.17岁。应用免疫组织化学的链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测80例OSCC组织(OSCC组)、80例OSCC癌旁组织(癌旁组)、正常口腔黏膜组织20例(正常组)中MMP-14和HIF-1α的表达阳性率。分析癌组织中MMP-14和HIF-1α表达与OSCC转移、分期及预后的关系。采用Spearman相关分析法分析MMP-14和HIF-1α表达的相关性。结果 OSCC组MMP-14和HIF-1α表达阳性率明显高于癌旁组和正常组(83.75%vs 28.75%vs 5.00%、88.75%vs 23.75%vs 5.00%;P_(MMP-14)=0.000、0.000、0.012,P_(HIF-1α)=0.000、0.011、0.024)。有淋巴结转移的患者癌组织中MMP-14和HIF-1α表达阳性率明显高于无淋巴结转移患者(94.55%vs 60.00%,96.36%vs 72.00%;P_(MMP-14)=0.016,PHIF-1α=0.002);Ⅰ+Ⅱ期患者癌组织MMP-14和HIF-1α表达阳性率明显低于Ⅲ+Ⅳ期(68.42%vs 97.65%,78.95%vs 97.62%;P_(MMP-14)=0.009,PHIF-1α=0.008);MMP-14和HIF-1α表达呈正相关关系(r=0.713,P=0.024);MMP-14阴性表达患者总生存率与MMP-14表达(+)、(++)及(+++)患者总生存率比较,差异有统计学意义(P=0.021、0.022、0.000);HIF-1α阴性表达患者总生存率与HIF-1α表达(+)、(++)及(+++)患者总生存率比较,差异有统计学意义(P=0.011、0.012、0.001)。结论 MMP-14和HIF-1α异常表达与OSCC的发生、发展密切相关,其表达上调参与肿瘤形成、发展、侵袭和转移,可作为判断OSCC生物学行为的临床参考指标。     

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肺癌细胞系BE1和LTEP-α-2中Axin基因表达及细胞增殖的影响

目的本研究的目的是探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza)对人肺癌细胞系BE1及LTEP-α-2的增殖和侵袭的调节及其可能的机制。方法两个细胞系均应用5-Aza进行处理,并应用MTT法检测两细胞系经5-Aza处理后细胞增殖能力的变化,Transwell法检测了两细胞系处理后侵袭能力的变化,Westernblot检测Axin、β-catenin、cyclin D1和MMP-7的表达。结果 5-Aza抑制BE1和LTEP-α-2细胞的增殖和侵袭能力(<0.05),与LTEP-α-2细胞系相比,BE1细胞系受抑制程度更为明显(<0.05)。5-Aza上调BE1细胞中Axin的表达,抑制β-catenin、cyclin D1和MMP-7的表达,但对LTEP-α-2细胞中Axin等的表达没有明显的影响。结论 5-Aza可以抑制肺癌细胞的增殖和侵袭,BE1细胞中的Axin基因可能存在异常高甲基化,高甲基化的Axin基因可能成为未来治疗肺癌的靶点。     

5-杂氮胞苷和甲基硝基亚硝胍处理细胞DNA中5-甲基胞嘧啶含量的HPLC分析

应用高效液相色谱技术对5-azaCR及MNNG处理的FL、Wish及Vero-E6细胞的DNA中5—甲基胞嘧啶(~mC)含量进行直接测量。结果表明5—aza CR(2×10~(-6)mol/L)处理细胞DNA的~mC含量较对照细胞为低(P<0.01),但在MNNG处理的FL细胞(5×10~(-6)及1×10~(-5)mol/LMNNG)及Wish和Vero-E6细胞(2及3.3×10~(-5)mol/L MNNG)中,DNA的~mC含量与对照并无差异(P>0.05)。这与用HpaⅡ限制性片段长度放射活性分析法检测新复制DNA甲基化状态的结果一致。认为文献中关于细胞DNA低甲基化是化学致癌启动过程普遍规律的结论是由于实验设计的内在缺陷所致。     

牙周基础治疗对糖尿病患者血清和龈沟液中肿瘤坏死因子-α的影响

目的 观察牙周基础治疗对2型糖尿病伴牙周炎患者血清及龈沟液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度、临床牙周状态、血糖控制的影响.方法 选取2型糖尿病伴牙周炎患者60例,随机分做牙周基础治疗组(观察组)和不做牙周基础治疗组(对照组),每组各30人.分别在治疗前、治疗后1个月和3个月记录所有患者牙周临床指数:探诊深度(PD),附着丧失(AL)及菌斑指数(PLI),并检测糖化血红蛋白(HbAlc)及血清及龈沟液中TNF-α的含量.结果 观察组中PD、PLI和龈沟液中TNF-α含量在治疗后1个月和3个月时均显著降低(P＜0.05),AL和血清中HbAlc及TNF-α含量仅在治疗后3个月显著降低(P＜0.05).对照组的PD,AL,PLI,HbAlc,龈沟液及血清中TNF-α的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 牙周基础治疗有助于2型糖尿病伴牙周炎患者的血糖控制,牙周状态改变和血清及龈沟液中TNF-α含量下降.     

α-磷酸三钙骨水泥糊料在Ringer's溶液中硬化和水化物的结构分析

研究了 α-磷酸三钙 ( α- TCP)骨水泥糊料在 Ringer's溶液中硬化的现象 ,并用红外光谱( FTIR)和 X射线衍射 ( XRD)对 α- TCP的水化产物作了结构分析 ,进一步揭示了磷酸盐对 α- TCP水泥的促凝作用     

胃癌中p53、PTEN、VHL和缺氧诱导因子-1α的表达及其相互关系

材料：从我院病理科档案材料中选取2000～2002年间石蜡包埋胃癌标本60例，男性38例，女性22例，年龄34～69岁，平均54．6岁。组织学类型：乳头状腺癌6例、管状腺癌33例、黏液腺癌8例、印戒细胞癌9例、未分化癌4例。其中淋巴结转移阳性42例。     

地塞米松对大鼠内毒素急性肺损伤肺泡灌洗液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α含量的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠内毒素（LPS）急性肺损伤（ALI）肺泡灌洗液中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组（内毒素ALI模型组）、地塞米松干预组,每组16只.每组大鼠依据不同的观察时间点（以大鼠气管内滴注LPS的时刻为起始时刻后的1、2、4、8 h 4个时间点）分为4个亚组（n=4）.给予正常对照组气管内滴注0.9%氯化钠溶液 0.3 mL,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;急性肺损伤组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg（溶于0.3 mL 0.9%氯化钠溶液）,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;地塞米松干预组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg,10 min后股静脉注射地塞米松注射液3 mg/kg（溶于1 mL 0.9%氯化钠溶液）.各组于1、2、 4、8 h 4个时间点于心脏抽血检测动脉血氧分压（PaO2）;取肺组织进行肺湿/干质量比值（W/D）测定,并采用苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学变化;用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺泡灌洗液（BALF）中IL-1β和TNF-α的含量.结果 给予气管内滴注LPS后于1、2、4、8 h观察大鼠动脉血PaO2,急性肺损伤组、地塞米松干预组较正常对照组显著降低,两组PaO2均在4 h时达最低点,各时间点动脉血PaO2对比,地塞米松干预组均显著高于急性肺损伤组,差异均有统计学意义（P〈0.05）.在LPS致炎后1、2、4、8 h 4个时间点急性肺损伤组、地塞米松干预组各时间点W/D比值均较正常对照组显著增加,两组间比较地塞米松干预组较急性肺损伤组降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）.病理形态学观察可见急性肺损伤组与地塞米松干预组均出现肺水肿、出血、炎性细胞浸润,而地塞米松干预组肺损伤程度较急性肺损伤组减轻.ELISA试验结果显示急性肺损伤组在气管内滴入LPS 1 h后BALF中IL-1β、TNF-α含量迅速升高,4 h时达峰值,地塞米松干预后IL-1β、TNF-α表达在相同时间点均较模型组显著降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而正常对照组BALF中IL-1β、TNF-α在不同时间点无明显变化.结论 地塞米松可通过抑制内毒素性大鼠ALI肺组织中IL-1β、TNF-α的表达,改善呼吸氧合功能,减轻肺损伤.     

脑缺血再灌注损伤中氧自由基、α-生育酚和全血超氧化物岐化酶(SOD)的变化

家兔18只,用上述脑缺血再灌注模型,分对照组,脑缺血20min组和脑缺血20min再灌注4h组,每组6只。脂质过氧化物(LPO)含量用硫代巴比妥酸荧光法、α-生育酚用反相高效液相色谱法、SOD用极谱氧电极法测定。大脑皮层LPO(nM/mgPro.)变化:缺血组(0.35±0.06)显著低于对照组(0.56±0.01)(P<0.01)。     

慢性结缔组织病患者滑囊液和血浆中肿瘤坏死因子-α浓度与颞颌关节痛的关系

目的　本研究的目的是为了确定在具有慢性结缔组织炎症的柯斯顿氏综合症 (TMJ)患者的滑液 (SF- TNF- α)和血浆 (P- TNF- α)中肿块坏死因子 -阿尔法 (TNF- α)浓度 ,并调查它与 TMJ疼痛、痛觉过敏、和 allodynia的关系。方法　在本研究中包括了 2 4例已被确诊为具有慢性结缔组织炎症和 TMJ疼痛的患者。已对可视化模拟等级、TMJ触痛、和下颌运动的疼痛进行了记录 ,并对压痛下限和压痛上限进行了测定。为了获取 TNF- α和与 TMJ疼痛、痛觉过敏、allodynia的关系程度 ,对 TMJ的滑液样本和血浆进行了分析。结果　在 2 4例患者中 …