益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织MMP-1、Ⅰ型胶原、BNP的影响

目的观察益气活血复方对心力衰竭大鼠血清脑钠素（BNP）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及Ⅰ型胶原的影响,探讨其防治慢性心力衰竭的作用机制。方法以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等造成大鼠慢性心力衰竭动物模型,对造模成功大鼠分为中药组、西药组、模型组,另设空白对照组（正常组）。中药组灌服益气活血复方9.2 g生药/（kg.d）;西药组灌服赖诺普利1.5 mg生药/（kg.d）。利用免疫组化法及蛋白印迹方法检测MMP-1及Ⅰ型胶原的变化情况。酶联免疫法测定大鼠血清BNP。结果与正常组相比,模型组BNP、MMP-1水平显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组相比,中药组、西药组BNP、MMP-1明显降低（P〈0.05）,西药组MMP-1比中药组降低明显（P〈0.05）;模型组Ⅰ型胶原蛋白表达较正常组明显下降（P〈0.01）,与模型组相比,中药组、西药组Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高（P〈0.01）,中药组较西药组升高明显（P〈0.01）。结论益气活血复方能够降低血清BNP水平,从而防止慢性心力衰竭的发展,改善心功能,对心肌组织MMP-1有抑制作用,对Ⅰ型胶原具有升高作用,可抑制或逆转心室重构的过程,从而有抗心力衰竭的作用。     

益气活血复方配合运动训练对慢性心衰大鼠心肌组织MMP-1、Ⅲ型胶原蛋白影响的实验研究

目的:随着老龄化社会的到来,慢性心衰发病率及病死率呈现上升趋势,通过研究益气活血复方联合运动训练对心肌梗死后慢性心衰大心室重构的影响,探讨治疗慢性心衰的新途径。方法:利用冠脉结扎法配合力竭式游泳与减食法,模拟慢性心衰大鼠动物模型,以实时荧光定量PCR法和免疫组化法检测金属蛋白酶基质-1(MMP-1)和Ⅲ型胶原蛋白的含量,明确益气活血复方联合运动训练减轻心室重构的机制。结果:模型组心肌组织MMP-1 mRNA是空白对照组的2.671倍,中药加运动组是空白对照组的1.1213倍,中药组是空白对照组的1.420倍,西药组是空白对照组的1.555倍等。结论:益气活血复方联合运动训练能减轻心室重构,效果优于益气活血中药组、运动训练组、西药组,其机制可能为抑制MMP-1的表达,提高Ⅲ型胶原表达,进而减轻甚至逆转心室纤维化,为临床综合治疗慢性心衰提供科学依据和有效方法。     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中I、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测I、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1（MMP-1）,金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。结果模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转I、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量。结论益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的。     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的 探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型.应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1(MMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达.结果 模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量.结论 益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的.     

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织MMP-1及MMP-9表达的影响

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:将清洁级同龄雄性Wistar大鼠36只称重后,随机分为正常对照组(A组)、COPD对照组(B组)、GBE早期干预组(C组)、GBE后期干预组(D组)、红霉素早期干预组(E组)、红霉素后期干预组(F),每组6只。B、C、D、E和F五组采用烟雾吸入、脂多糖气管内注入等因素对大鼠进行COPD造模,C和D组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射GBE[0.40 m L/(kg·d)],E和F组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射红霉素(10 mg/kg2),43 d后采集各组大鼠肺组织,采用免疫组织化学分析法检测各组大鼠肺组织MMP-1和MMP-9的表达及含量。结果:B、C、D、E和F组大鼠肺组织MMP-1及MMP-9阳性细胞表达率均高于A组,B组的MMP-9阳性细胞表达率高于其他组。结论:GBE可通过降低大鼠肺组织中MMP-9的表达,从而预防和减少COPD大鼠肺组织重塑及纤维化。在通过MMPs在COPD大鼠肺组织中的表达来判断肺组织重塑及肺纤维化上,MMP-9与MMP-1相比较具有更高的敏感性。红霉素在降低MMP-1及MMP-9在COPD大鼠肺组织中的表达作用不明显,因此红霉素抗肺组织纤维化的作用机制还有待进一步研究。     

强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-9蛋白表达的影响

目的：研究强心胶囊对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能和心肌基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-9蛋白表达的影响，探讨MMPs在CHF发病中的作用及该胶囊防治心肌重塑的作用的机理。方法：采用腹腔注射阿霉素法制备CHF模型。各组相应处理8周后，检测血流动力学、心肌MMP-1、MMP-9表达变化。结果：强心胶囊能提高CHF大鼠＋dp／dt max、-dp／dt max、LVSP水平，降低LVEDP水平，减低心脏重量指数，降低上调的MMP-1、MMP-9表达。结论：强心胶囊能够改善CHF大鼠左室收缩和舒张功能，降低上调的MMP-1、MMP-9蛋白表达及活性，可能是强心胶囊干预心力衰竭间质重塑的重要机制之一。     

强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-9蛋白表达的影响

目的:研究强心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能和心肌基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-9蛋白表达的影响,探讨MMPs在CHF发病中的作用及该胶囊防治心肌重塑的作用的机理.方法:采用腹腔注射阿霉素法制备CHF模型.各组相应处理8周后,检测血流动力学、心肌MMP-1、MMP-9表达变化.结果:强心胶囊能提高CHF大鼠 dp/dt max、-dp/dt max、LVSP水平,降低LVEDP水平,减低心脏重量指数,降低上调的MMP-1、MMP-9表达.结论:强心胶囊能够改善CHF大鼠左室收缩和舒张功能,降低上调的MMP-1、MMP-9蛋白表达及活性,可能是强心胶囊干预心力衰竭间质重塑的重要机制之一.     

灵芝对糖尿病大鼠肾组织MMP-2、MMP-9和IV型胶原表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝的干预作用.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常时照组(C组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病灵芝(1.2g·k-1·d-1)治疗组(GL组),用免疫组化方法(SP法)检测治疗后各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9及Ⅳ-C的表达,同时进行光镜、透射电镜观察各组大鼠肾皮质病理改变.结果:DM组大鼠肾小球MMP-2、MMF-9蛋白表达较C组明显降低,Ⅳ-C蛋白表达明显升高,出现糖尿病肾病典型的病理改变.GL组MMP-2、MMP-9蛋白较DM组表达明显升高,Ⅳ-C表达较DM组明显降低,病理改变好转.结论:灵芝通过上调MMP-2、MMF-9蛋白表达,减少细胞外基质Ⅳ-C积聚而对糖尿痛大鼠起到肾脏保护作用.     

灵芝对糖尿病大鼠肾组织MMP-2、MMP-9和Ⅳ型胶原表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝的干预作用.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常时照组(C组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病灵芝(1.2g·k-1·d-1)治疗组(GL组),用免疫组化方法(SP法)检测治疗后各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9及Ⅳ-C的表达,同时进行光镜、透射电镜观察各组大鼠肾皮质病理改变.结果:DM组大鼠肾小球MMP-2、MMF-9蛋白表达较C组明显降低,Ⅳ-C蛋白表达明显升高,出现糖尿病肾病典型的病理改变.GL组MMP-2、MMP-9蛋白较DM组表达明显升高,Ⅳ-C表达较DM组明显降低,病理改变好转.结论:灵芝通过上调MMP-2、MMF-9蛋白表达,减少细胞外基质Ⅳ-C积聚而对糖尿痛大鼠起到肾脏保护作用.     

益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠TNF-α及IL-6的影响

目的探讨中药益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠血清中TNF-α及IL-6的影响。方法选用健康雄性Wistar大白鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心力衰竭的动物模型。将造模成功的大鼠随机分为4组:模型组、中药大剂量组、中药中剂量组和西药对照组,每组8只;另设一组正常大鼠作为对照组。喂药及正常喂养8周后,用彩色超声多普勒心动图测定大鼠心功能且采用放射免疫方法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素6(IL-6)的含量。结果大鼠模型组心功能明显降低(P<0.01);血清中TNF-α和IL-6含量显著高于对照组(P均<0.01);中药组和西药组TNF-α及IL-6含量均低于模型组(P均<0.01)。结论益气活血复方可以降低TNF-α、IL-6的水平,改善心脏功能。     

益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织AngⅡ及PKC的影响

目的:旨在通过动物实验观测中药益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和蛋白激酶C(PKC)介导的信号传导的影响,进而阐明益气活血复方治疗慢性心衰的作用机制.方法:选用健康雄性SD大鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心衰的动物模型.将造模成功的大鼠随机分为4组:模型组、中药大剂量组、中药中剂量组和西药组,每组8只;另设一组作为正常组.喂养8周后,采用ABC免疫组化方法测定心肌组织中Ang Ⅱ和PKC的含量;用透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化.结果:与正常组比较,模型组心肌局部组织的Ang Ⅱ、PKC含量高于正常组(P＜0.01).中药组和两药组Ang Ⅱ、PKC含量均低于模型组(P＜0.01),左心室超微结构较之模型组有明显改善.结论:益气活血复方可能通过降低Ang Ⅱ水平达到抑制RAS系统作用,下调PKC水平,影响其传导通路,以此来改善和纠正心衰.     

益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠TNF—α及IL-6的影响

目的探讨中药益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠血清中TNF-α及IL-6的影响。方法选用健康雄性Wistar大白鼠，采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心力衰竭的动物模型。将造模成功的大鼠随机分为4组：模型组、中药大剂量组、中药中剂量组和西药对照组，每组8只；另设一组正常大鼠作为对照组。喂药及正常喂养8周后，用彩色超声多普勒心动图测定大鼠心功能且采用放射免疫方法测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白介素6（IL-6）的含量。结果大鼠模型组心功能明显降低（P〈0．01）；血清中TNF-α和IL-6含量显著高于对照组（P均〈0．01）；中药组和西药组TNF-α及IL-6含量均低于模型组（P均〈0．01）。结论益气活血复方可以降低TNF-α、IL-6的水平，改善心脏功能。     

鹿茸液对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的实验研究

目的研究鹿茸液对慢性心力衰竭（cHF）大鼠心肌细胞凋亡和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响，探讨鹿茸液治疗CHF的作用和机制。方法本实验采用SD大鼠冠状动脉结扎法制备心梗后CHF动物模型，随机分为鹿茸液高、中、低剂量组、卡托普利组、模型组和空白组，给予相应的药物干预，4周后观察心肌细胞凋亡，心间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化情况。结果鹿茸液各剂量组和卡托普利组CHF大鼠心肌细胞凋亡及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与模型组相比较低，二者具有统计学差异（P〈0．05），鹿茸液中剂量组和卡托普利组之间无统计学差异（P〉0．05），均优于鹿茸液高剂量组和低剂量组（P〈0．05），鹿茸液高剂量组优于低剂量组（P〈0．05）。结论鹿茸液能够减少CHF大鼠心肌细胞凋亡，减少Ⅰ、Ⅲ型胶原沉淀，从而抑制左室重构，具有良好的应用前景。     

扶正化瘀方对大鼠纤维化肺组织MMP-2活性与Ⅳ型胶原表达的影响

目的观察扶正化瘀方影响肺组织MMP-2活性与Ⅳ型胶原表达的抗肺纤维化作用机制.方法一次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型,分模型对照组、扶正化瘀方组、甲强龙组,每组各14只模型大鼠.另设正常组10只,一次性气管内注射等量生理盐水.造模次日扶正化瘀方组予以4.6 g·kg-1大鼠体重的扶正化瘀方灌胃;甲强龙组予以15 mg·kg-1大鼠体重的甲强龙腹腔注射,正常组和模型组灌喂等量生理盐水;每日1次,共4周.Masson染色观察肺组织胶原沉积,称量肺重量与计算肺系数,Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸含量,明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性,Western blot检测肺组织MMP-2,MMP-9和Ⅳ型胶原的蛋白表达量.结果与正常组比较,模型组肺系数明显增加,肺组织胶原沉积明显,Hyp含量、Ⅳ型胶原、MMP-2与MMP.9蛋白表达增加,MMP-2活性水平升高,尤其是活性型MMP-2活性升高明显,而MMP-9活性略有下降.与模型组比较,扶正化瘀方与甲强龙均不同程度减轻模型组肺组织胶原沉积与Ⅳ型胶原蛋白表达,减少肺系数与肺组织Hyp含量,降低MMP-蛋白与2活性水平,尤其是活性型MMP-2水平.其中,对肺系数、Ⅳ型胶原蛋白与MMP-2蛋白与活性的抑制作用以扶正化瘀方较为明显.而2种药物对MMP-9蛋白表达与活性无明显影响.结论扶正化瘀方具有良好的抗大鼠肺纤维化作用,其部分作用机制在于抑制纤维化肺组织的MMP-2蛋白及其活性,以减少组织的炎性破坏;抑制Ⅳ型胶原过度表达,以减少胶原的病理增生沉积.     

扶正化瘀方对大鼠纤维化肺组织MMP-2活性与IV型胶原表达的影响

目的：观察扶正化瘀方影响肺组织MMP-2活性与IV型胶原表达的抗肺纤维化作用机制。方法：一次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型,分模型对照组、扶正化瘀方组、甲强龙组,每组各14只模型大鼠。另设正常组10只,一次性气管内注射等量生理盐水。造模次日扶正化瘀方组予以4.6 g·kg^-1大鼠体重的扶正化瘀方灌胃；甲强龙组予以15 mg·kg^-1大鼠体重的甲强龙腹腔注射,正常组和模型组灌喂等量生理盐水；每日1次,共4周。Masson染色观察肺组织胶原沉积,称量肺重量与计算肺系数,Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸含量,明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性,Western blot检测肺组织MMP-2,MMP-9和Ⅳ型胶原的蛋白表达量。结果：与正常组比较,模型组肺系数明显增加,肺组织胶原沉积明显,Hyp含量、Ⅳ型胶原、MMP-2与MMP-9蛋白表达增加,MMP-2活性水平升高,尤其是活性型MMP-2活性升高明显,而MMP-9活性略有下降。与模型组比较,扶正化瘀方与甲强龙均不同程度减轻模型组肺组织胶原沉积与Ⅳ型胶原蛋白表达,减少肺系数与肺组织Hyp含量,降低MMP-蛋白与2活性水平,尤其是活性型MMP-2水平。其中,对肺系数、Ⅳ型胶原蛋白与MMP-2蛋白与活性的抑制作用以扶正化瘀方较为明显。而2种药物对MMP-9蛋白表达与活性无明显影响。结论：扶正化瘀方具有良好的抗大鼠肺纤维化作用,其部分作用机制在于：抑制纤维化肺组织的MMP-2蛋白及其活性,以减少组织的炎性破坏；抑制Ⅳ型胶原过度表达,以减少胶原的病理增生沉积。     

益气活血方对大鼠放射性肺损伤组织MMP-2/TIMP-2表达的影响

目的: 检测益气活血方干预前后大鼠放射性肺损伤组织基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)和基质金属蛋白酶抑制剂2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase,TIMP2)表达的影响,了解该方剂的作用机制. 方法: 健康成年雌性SD大鼠120只,随机分为模型组30只、照射加益气活血方高剂量组30只、照射加益气活血方低剂量组30只、空白组30只.益气活血方高、低剂量组大鼠受照当天开始,用药量20,10 g·kg^-1,每次ig益气活血方剂5 mL·kg^-1,2次/d;模型组、空白组每次ig蒸馏水5 mL·kg^-1,2次/d.4组大鼠分别于照射后第4,8,12,16,20周末随机抽取6只,处死并取其右肺组织保存.分别用反转录PCR技术(RT-PCR),蛋白质印迹法(Western-blotting)检测MMP-2／TIMP-2 mRNA及蛋白表达的动态变化. 结果: 模型组MMP-2 mRNA及蛋白表达于第12周达高峰,而TIMP-2 mRNA及蛋白表达在照射后第4周至20周期间出现逐渐升高的趋势,各时间点模型组与空白组相比均具有明显差异(P<0.01).益气活血方高剂量组与模型组相比,各mRNA及蛋白表达趋势与模型组相似,MMP-2 mRNA及蛋白表达在12周前低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).益气活血方低剂量组各项指标均有变化,趋势与模型组类似,差异没有统计学意义. 结论: 益气活血方高剂量在放射性肺损伤的各个时间段,从转录及翻译层面对MMP-2/TIMP-2的表达进行调整,使MMPs/TIMPs趋于平衡,从而减轻放射性肺损伤,这可能是该药防治放射性肺损伤的分子生物学机制.     

益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌重构影响的实验研究

目的 研究中医药治疗慢性心衰的疗效机理.方法 利用冠脉结扎法配合力竭式游泳与减食法,模拟慢性心衰大鼠模型,使用益气活血复方与赖诺普利对照治疗观察,用蛋白印迹法和免疫组化法检测和心室重构关系密切的金属蛋白酶基质-1(MMP-1)和Ⅰ型胶原蛋白含量.结果 模型组MMP-1蛋白表达明显升高,经药物干预后各治疗组MMP-1蛋白表达明显下降,其西药组效果最为明显;模型组Ⅰ型胶原蛋白表达明显降低,经药物干预后各治疗组Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高,中药组最为明显.结论 益气活血复方组总体治疗效果优于赖诺普利组,说明中医药治疗慢性心衰有着毒副作用小,疗效突出等优势,为中医药治疗慢性心衰提供了理论支持和实验依据.     

补肾复方对压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察补肾复方对压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达的影响．探讨补肾复方逆转心肌纤维化的分子机制。方法：采用RT—PCR的方法检测心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原的基因表达。结果：模型组大鼠左室心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原mRNA表达较假手术组显著上升,卡托普利组和补肾复方大、小剂量组大鼠左室心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原mRNA表达较模型组显著下降。结论：补肾复方与卡托普利具有基本一致的逆转-心肌纤维化的作用,该作用可能是通过降低α2（Ⅰ）型胶原和α2（Ⅲ）型胶原基因表达来实现的。     

祛瘀生肌法对实验性创面肉芽组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和MMP-1 mRNA表达的动态影响

目的探讨祛瘀生肌法在创面修复早、中期对实验性创面新生肉芽组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和胶原金属蛋白酶-1(MMP-1)mRNA表达的影响。方法采用Northem blot杂交法对大鼠创面肉芽组织中MMP- 1和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA在创面修复早期和中期表达进行检测。结果创面修复初期(3天)和中期(10天)对比,生肌化瘀组MMP-1的mRNA表达明显降低；Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达无明显变化。模型组MMP-1的mRNA表达无明显变化；Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达明显下降。结论祛瘀生肌法对实验性创面新生肉芽组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和MMP-1 mRNA表达的影响是其促进创面修复的机理之一。