乳糖诱导重组人SOD基因在大肠杆菌中的表达

利用乳糖代替IPTG诱导rhCu/Zn-SOD在大肠杆菌(Escherichia coli）BL21（DE3）中的表达,并将菌体生长情况及产物表达规律与IPTG诱导进行比较。对诱导所需的乳糖浓度、金属离子浓度等因素进行了研究,并分析了低温下诱导对重组蛋白表达的影响。最终在摇瓶发酵条件的基础上,实现了乳糖诱导重组菌的5L全自动发酵罐培养,rhCu/Zn-SOD酶活性达到1810U/ml(发酵液）。结果表明,乳糖可以诱导rhCu/Zn-SOD在Escherichia coli中的表达,并且酶活性达到IPTG诱导时的89%。     

重组人促红细胞生成素不良反应149例文献分析

摘 要 目的：分析重组人促红细胞生成素（rHuEPO）药品不良反应（ADR）的发生情况,为临床安全用药提供参考。方法: 收集国内外公开报道的rHuEPO的ADR文献资料,按患者年龄、性别、原患疾病、ADR发生时间、累及器官及临床表现、转归等进行整理并分析。结果:经检索,rHuEPO的ADR共计149例,累及器官主要有心血管系统损害（43.4%）、血液系统损害（20.8%）、皮肤及其附件损害（12.7%）。临床表现前3位分别是高血压、再生障碍性贫血、高钾血症。发生时间多集中在用药后5~12周内（43.0％）。结论:rHuEPO在临床使用过程中应关注其ADR、发生时间,注意患者用药教育及随访,避免严重ADR的发生。     

临床药师参与阿帕替尼致肾小球损害治疗实践

目的 为发生甲磺酸阿帕替尼致肾小球损害的小细胞肺癌患者的用药监护提供参考。方法 对1例口服甲磺酸阿帕替尼片后出现肾小球损害患者的临床资料进行回顾性分析,结合临床药学专业知识,从患者出现肾脏损害的原因、治疗措施等方面进行分析,并复习相关文献,提出口服阿帕替尼出现肾脏损害的解决措施,实施全程药学监护。结果 甲磺酸阿帕替尼引起的肾小球损害可能与其导致内皮细胞损伤有关,出现肾脏损害后应及时停药,并根据不良反应缓解程度调整剂量,临床药师参与后患者肾脏损伤改善明显。结论 阿帕替尼导致的肾小球损害较少见,在用药过程中临床药师需注意监护,及时调整用药方案并给予对症治疗,减少不良反应的发生率。     

肺结核患者抗结核药物引起肝损害的临床特点分析

目的探讨应用抗结核药物所致药物性肝损害的临床特点,为临床预防和治疗提供理论依据。方法回顾我院2010年10月～2013年10月收治的474例肺结核患者的临床资料,分析发生肝损害患者的临床特点。结果474例患者抗结核药物引起肝损害52例（10．97％）。60岁以上肺结核患者肝损害患病率明显高于60岁以下者,复发肺结核患者肝损害患病率明显高于初发患者,HBsAg阴性患者肝损害患病率明显低于阳性患者,在疗程开始3个月内患者发生肝损害率高于3个月后,差异均有统计学意义（P〈0．05）。男性患者肝损害发生率11．26％,与女性10．50％相似,差异无统计学意义（P〉0．05）。肝损害患者经过保肝治疗,均获得良好的治疗效果。结论高龄、复发、HBsAg阳性及疗程开始3个月内是肺结核抗结核药物治疗发生肝损害的高危人群及时间,应密切观察患者肝功能,做到早发现、早预防和早治疗,有助于顺利完成抗结核化疗疗程。     

Organ-Specific Hematopoietic Changes Induced by a Recombinant Human Interferon-{alpha} in Mice

Organ-Specific Hematopoietic Changes Induced by a RecombinantHuman Interferon- in Mice. ROSENTHAL, G. J., STRANAHAN, R. P.,ILL, THOMPSON, M., BLAIR, P., GERMOLEC, D. R., COMMENT, C. E.,SCHWAB, K., AND LUSTER, M. I. (1990). Fundam. Appl. Toxicol.14, 666–675. Interferon-a (IFN-) is a naturally occurringcytokine that mediates numerous biological activities and hasdemonstrated therapeutic potential in a variety of malignancies.Encouraging activity against HIV-1 replication has also beenobserved with IFN- in the treatment of AIDS, although hematotoxicityhas been a frequently observed side effect. In addition, invitro studies have suggested that IFN- may function as a down-regulatorof myelopoiesis. A recombinant hybrid of subtypes of human IFN-,rHuIFN-A/D, has antiviral activity in mu-rine cells in vitroand In vivo. This study examines the effect of acute and subchronicexposure to rHuIFN-A/D on hemopoietic and immune parametersin C57B1/6 mice. IFN-a was administered ip at 0, 1000, 10,000,and 100,000 units/day for either 1 or 10 consecutive days. Manyof the known effects of IFN- in humans such as anemia, leukopenia,and thrombocytopenia were observed in mice following subchronicexposure, with the latter two effects also manifested followingacute exposure. Further analysis showed that this leukopeniawas not selective. Both splenic and bone marrow cells were examinedfollowing 10 days of dosing with the high dose of IFN-. Lymphocyteswere reduced in both compartments, while granulocytes were increasedin both compartments. Bone marrow cells programmed to differentiateinto granulocytes (CFU-G) were suppressed, while macrophageprogenitors (CFU-M) were stimulated. Erythroid cells decreasedin the marrow but increased in the spleen, suggesting that themicroenvironmerit may play a significant role in the effectof IFN-. The proliferative capacity of both B and T spleniclymphocytes was significantly suppressed in a dose-related fashionfollowing multiple exposure to IFN-a. Clinically, IFN-a is mostoften given in multiple doses and the present data suggest thatsuch a regimen is toxic to both erythroid and myeloid cells,as well as being immunotoxic to splenic B and T lymphocytes.     

重组可溶性TRAIL冻干保护剂的初步筛选

目的 筛选出适合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）冻干制剂的保护剂。方法在TRAIL蛋白中加入不同浓度配方的甘露醇、清蛋白和乳糖，经过冷冻干燥，观察冻干制剂的色泽、外观、溶解度和澄明度，并且测定冻干制品的水分和生物学活性，筛选出最佳保护剂。结果初步筛选出2％甘露醇＋3％乳糖作为TRAIL蛋白的保护剂。结论 TRAIL蛋白药物加入该保护剂后，外观、溶解度、澄明度及生物活性都比较好。在不同温度，对TRAIL蛋白生物活性有很好的稳定作用。     

Liver and Kidney Damage Induced by N-Hydroxyparacetamol

1. Liver and kidney glutathione are depleted in rats and mice following administration of N-hydroxyparacetamol.

2. Centrilobular hepatic necrosis and necrosis of renal proximal convoluted tubules were also found, the liver lesion predominantly in mice and the renal lesion predominantly in rats. Glutathione depletion was not responsible for this species difference.

3. These results indicate that N-hydroxyparacetamol is the metabolic precursor of the reactive toxic intermediate of paracetamol. They are also relevant to the pathogenesis of the renal damage associated with long term abuse of phenacetin containing compound analgesics.     

重组人生长激素辅助治疗肝硬化的临床效果观察

目的 :观察重组人生长激素 (rhGH)辅助治疗肝硬化的临床效果。方法 :将 2 2例肝硬化患者配对分成观察组与对照组 ,两组均常规保肝及对症支持治疗 ,观察组加用rhGH 4U ,3次 /周 ,疗程 2个月。结果 :观察组有改善症状、消除腹水等效果 ,患者外周血红细胞、白细胞、血小板及血清白蛋白水平均显著上升 ,尿素氮、肌酐水平逐渐下降 ,未出现肝肾综合征及肝脑综合征病例。结论 :短期协用hGH治疗肝炎后肝硬化 (失代偿期 )有一定近期效果 ,可防止或延缓肝肾综合征、肝脑综合征的发生。     

突变型人胰高血糖素样肽-1对神经细胞损伤的保护

目的研究突变型人胰高血糖素样肽-1(mutated human glucagon-like peptide-1,mGLP-1)对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法环磷酸腺苷(cAMP)试剂盒检测细胞内cAMP含量,比较mGLP-1和天然人胰高血糖素样肽-1(natural human glucagon-like peptide-1,nGLP-1)与GLP-1受体结合的能力;以谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤,同时用mGLP-1处理SH-SY5Y细胞,采用MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH的释放量;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特征;钙流法检测胞内钙离子浓度变化;通过检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(total GS)含量的变化判断细胞氧化损伤程度。结果 mGLP-1与nGLP-1类似,都能提高细胞内cAMP水平;mGLP-1能缓解谷氨酸诱导的细胞损伤,增加细胞存活率,降低LDH释放量;mGLP-1对谷氨酸导致的细胞内钙离子变化没有修复作用;mGLP-1能抑制氧化损伤指标MDA含量升高,促进抗氧化系统指标SOD活性增强和total GS含量增加。结论 mGLP-1可导致细胞内cAMP含量增加。mGLP-1对谷氨酸所致神经细胞损伤具有保护作用,这可能是mGLP-1通过对神经细胞的抗氧化损伤作用实现的,而不是改善谷氨酸导致的钙稳态失衡。mGLP-1的保护作用与nGLP-1类似,而mGLP-1在体内稳定性更强,半衰期更长;提示mGLP-1可能对相关神经退行性疾病的治疗具有更佳的潜在价值。     

SIM对人骨形态发生蛋白-2诱导大鼠异位成骨的X射线学研究

目的在重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导异位成骨过程中,局部应用不同浓度的辛伐他汀(SIM),探讨SIM对rhBMP-2诱导成骨的作用。方法①以牛松质骨为原料经过脱脂、脱蛋白等步骤制备牛骨基质明胶载体,将辛伐他汀和rhBMP-2分别与BMG载体复合;②将45只雄性SD大鼠随机分为3组。A组:高剂量实验组;B组:低剂量实验组;C组:对照组;③将复合体植入大鼠股后部肌袋中,术后15d、30d、60d对实验大鼠进行大体观察、X线检测。结果①大体观察:各组组织块均随着时间延长而变硬,范围变大;②X线结果,各组植入部位术后15d、30d未见显影,于术后60d各组可见不同密度的影像,B组和C组钙化明显,成高密度影像;A组成低密度影像。成骨区灰度值A组明显低于B组和C组。结论高浓度辛伐他汀可明显抑制rhBMP-2的促进成骨作用;低浓度辛伐他汀的抑制作用则不明显;证实了rhBMP-2在促进成骨方面有重要作用。     

重组人肝星状细胞激活相关蛋白抗大鼠肝纤维化的作用

为了观察重组人肝星状细胞激活相关蛋白(rhSTAP)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝功能及病理形态学的影响.建立大鼠CCl4肝纤维化模型,从早期干预组自造模开始起注射给药,持续12周,治疗组自造模6周后开始给药,维持6周,造模周期结束后测定大鼠血清中谷丙氨转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)的含量及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量并对肝组织进行病理组织学检查.结果显示重组人源肝星状细胞激活相关蛋白能显著降低大鼠血清中ALT、AST、HA及肝组织中羟脯氨酸含量的升高,明显改善大鼠肝组织病理变化.因此重组人源肝星状细胞激活相关蛋白能有效干预CCl4诱导的大鼠肝纤维化,值得深入研究.     

汞中毒相关性肾损害病例报道一例

1 临床背景 患者青年女性,165cm/70kg,BMI25.7.9个月前(2009年2月中旬),患者应用面部化妆品后,出现间断脱发,未予特殊注意,继续使用该化妆品.此后偶尔出现齿龈出血,能自止.     

非甾体抗炎药致肝功能损害病例分析

目的:对非甾体抗炎药致肝功能损害病例进行分析,为临床合理用药提供参考。方法:对1例成年女性Still病患者因使用非甾体抗炎药加重肝功能损害进行因果关系分析。结果:患者住院期间口服尼美舒利分散片和维C银翘片可能导致丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)异常升高,经停药并予以还原型谷胱甘肽、多烯磷脂酰胆碱和异甘草酸镁治疗后,ALT和AST逐渐降低。结论:尼美舒利和维C银翘片应慎用于肝功能损害者,同时应定期监测患者肝功能。     

重组人血小板生成素治疗血液肿瘤化疗后血小板减少的系统评价

目的:评价重组人血小板生成素(rhTPO)治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少的有效性与安全性。方法:采用循证医学的方法,计算机检索CBM、CNKI、MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆临床对照试验资料库等数据库,收集rhTPO治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少的临床研究证据。结果:共纳入7篇文献。与对照组相比,rhTPO试验组血小板计数最低值、血小板计数恢复的最高值、血小板<50×109·L-1的持续天数、血小板恢复≥100×109·L-1的天数以及血小板输注量加权均数差值(WMD)(95%可信区间(CI))分别为1.06(-0.08,2.20)、67.19(32.1,101.58)、-3.35(-4.51,-2.18)、-2.97(-4.63,-1.32)、-2.58(-4.92,-0.24),不良反应发生率相对危险度(RR)(95%CI)为4.69(1.90,11.58)。结论:现有研究显示,在治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少方面,rhTPO能够提高血小板恢复的最高值和增加值,缩短化疗后血小板<50×109·L-1的持续天数,加快血小板的恢复速度,并间接减少血小板输注量,且不良反应轻微。然而,目前临床试验设计存在不足,尚需进行设计良好的大样本研究验证。     

重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）的安全性与临床评价

目的：评价重组人粒细胞集落刺激因子在临床应用的作用机制、药代动力学、适应证、用法、用量及其禁忌证。方法：采用国内外文献综述方法。结果及结论：rhG-CSF在治疗粒细胞减少症、严重感染等方面有良好的前景,但选择适应证、个体化用药很重要。     

重组人粒细胞集落刺激因子在恶性肿瘤化疗后应用的疗效观察

目的:研究国产重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在恶性肿瘤化疗后所致白细胞(WBC)和中性粒细胞绝对值(ANC)减少的临床效果及不良反应(ADR)。方法:采用自身交叉方法将62例恶性肿瘤病人随机分为AB和BA2组。AB组A周期为治疗周期,即化疗结束48h开始,用国产rhG-CSF治疗,B周期单用化疗,为对照周期;BA组正好相反。隔日查血常规1次,观察WBC和ANC的变化。结果:国产rhG-CSF可以减轻化疗所致的WBC和ANC下降程度,促进化疗患者WBC和ANC的恢复,缩短WBC和ANC减少的持续时间,有助于化疗按期进行。主要ADR有注射部位疼痛、皮疹、发热、肌肉疼痛、乏力。结论:在恶性肿瘤化疗中应用国产rhG-CSF,能有效减轻WBC和ANC降低,缩短WBC和ANC恢复时间,确保化疗顺利进行。     

大剂量辛伐他汀预防造影剂所致早期肾功能损害的临床观察

目的:观察不同剂量的辛伐他汀对冠状动脉造影(CAG)和经皮冠状动脉成形术(PCI)后患者肾功能损害的预防作用。方法:将我院115例行CAG或PCI术的患者,随机分为常规剂量组(n=57)和大剂量组(n=58)。2组均于术前2～3d开始用药,常规剂量组给予辛伐他汀10mg,每晚1次;大剂量组给予辛伐他汀40mg,每晚1次。所有患者分别于术前,术后第1天、第2天空腹测定血液流变学指标。结果:术后第2天,2组血清胱抑素(CysC)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)、尿微量白蛋白(mALB)均显著降低,且大剂量组下降幅度更明显(P<0.05)。结论:CAG和PCI术前短期给予大剂量的辛伐他汀对改善造影剂所致肾损害可能更有效。CysC、α1-MG、mALB可能成为CAG和PCI术后监测早期肾损害的指标。     

Pro-oxidant Induced DNA Damage in Human Lymphoblastoid Cells: Homeostatic Mechanisms of Genotoxic Tolerance

Oxidative stress contributes to many disease etiologies including ageing, neurodegeneration, and cancer, partly through DNA damage induction (genotoxicity). Understanding the i nteractions of free radicals with DNA is fundamental to discern mutation risks. In genetic toxicology, regulatory authorities consider that most genotoxins exhibit a linear relationship between dose and mutagenic response. Yet, homeostatic mechanisms, including DNA repair, that allow cells to tolerate low levels of genotoxic exposure exist. Acceptance of thresholds for genotoxicity has widespread consequences in terms of understanding cancer risk and regulating human exposure to chemicals/drugs. Three pro-oxidant chemicals, hydrogen peroxide (H(2)O(2)), potassium bromate (KBrO(3)), and menadione, were examined for low dose-response curves in human lymphoblastoid cells. DNA repair and antioxidant capacity were assessed as possible threshold mechanisms. H(2)O(2) and KBrO(3), but not menadione, exhibited thresholded responses, containing a range of nongenotoxic low doses. Levels of the DNA glycosylase 8-oxoguanine glycosylase were unchanged in response to pro- oxidant stress. DNA repair-focused gene expression arrays reported changes in ATM and BRCA1, involved in double-strand break repair, in response to low-dose pro-oxidant exposure; however, these alterations were not substantiated at the protein level. Determination of oxidatively induced DNA damage in H(2)O(2)-treated AHH-1 cells reported accumulation of thymine glycol above the genotoxic threshold. Further, the H(2)O(2) dose-response curve was shifted by modulating the antioxidant glutathione. Hence, observed pro- oxidant thresholds were due to protective capacities of base excision repair enzymes and antioxidants against DNA damage, highlighting the importance of homeostatic mechanisms in "genotoxic tolerance."     

莲房原花青素对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02氧化损伤的保护作用

目的研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02氧化损伤的保护作用。方法观察200mmol·L-1乙醇,5、10、25mg·L-1的LSPC,5、10、25mg·L-1的LSPC与200mmol·L-1乙醇共同作用于肝细胞L-02 24h后,运用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验和微核实验(MNT)观察DNA和染色体损伤情况,用流式细胞术(FCM)分析凋亡率的变化以及活性氧探针(2,7-二氯荧光素)探测细胞内活性氧(ROS)水平的变化。结果 LSPC组与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。纯乙醇组与正常对照组比较,差异有显著性意义,与乙醇组相比,5mg·L-1和10mg·L-1LSPC能显著降低olive尾矩(OTM)、微核率(MNF)、凋亡率和ROS的水平(均P<0.05),但高剂量组(25mg·L-1)对乙醇引起的肝细胞损伤保护作用不明显。结论适量浓度的莲房原花青素对乙醇诱导的肝细胞L-02的氧化损伤有保护作用。其机制可能与LSPC的抗氧化活性有关。