巫山淫羊藿饮片HPLC特征图谱研究及朝藿定C的定量分析

目的:建立巫山淫羊藿饮片中朝藿定C的含量测定方法及巫山淫羊藿饮片的HPLC特征图谱。方法:采用HPLC法对20批巫山淫羊藿饮片进行特征图谱研究,建立HPLC特征图谱共有模式,进行相似度比较,并将巫山淫羊藿饮片与淫羊藿饮片进行相似度比对。色谱条件:采用Welchrom C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1mL·min-1,检测波长270nm,柱温25℃。结果:朝藿定C进样量在0.0996～4.980μg(r=0.9996)范围内线性关系良好,巫山淫羊藿饮片羊油炙品和生品中的平均加样回收率(n=6)分别为100.7%(RSD=0.64%)和99.78%(RSD=1.5%);建立了巫山淫羊藿的HPLC特征图谱,确定了5个共有峰,巫山淫羊藿饮片生品和羊油炙品的平均相似度为0.91;巫山淫羊藿饮片与淫羊藿饮片的平均相似度为0.84,二者特征图谱差异明显。结论:巫山淫羊藿饮片和淫羊藿饮片特征图谱差异明显,可以作为饮片辨识和鉴别的参考方法。且该方法简便、准确,专属性强,为2010年版中国药典一部增订巫山淫羊藿饮片含量测定项进行了研究。     

淫羊藿饮片指纹识别模式的建立与评价

摘 要 目的： 建立淫羊藿饮片的综合质量评价模式,为其质量控制提供参考。方法: 通过指纹识别模式的建立,对市售淫羊藿饮片指纹峰进行双向反馈,评价淫羊藿饮片整体质量。采用HPLC Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-水梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1,柱温：30℃。结果: 初步建立了市售淫羊藿饮片HPLC指纹图谱,确定共有峰16个,市售淫羊藿饮片整体被分为两类,并且两类质量相差较大。结论:建立淫羊藿饮片指纹图谱的11批饮片相似度相差较大,不同产地、采集时间等因素对淫羊藿饮片整体质量影响较大。指纹评价模式能很好的反应出中药饮片质量的整体趋势,适合多成分中药及其制剂的综合质量评价。     

基于PMP柱前衍生化-HPLC法的淫羊藿多糖的单糖指纹图谱研究

建立了淫羊藿多糖酸水解的柱前衍生化单糖HPLC指纹图谱方法。淫羊藿多糖经2.0 mol/L盐酸水解,再经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化处理后,用HPLC法测定其单糖组成。采用YMC-Pack ODS-A柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm。采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》,建立了40批淫羊藿样品的共有指纹图谱,确立了10个共有峰,通过与对照品比对,指认了8个共有峰,分别为D-甘露糖、D-葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖醛酸、D-无水葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。通过相似度结合正交偏最小二乘法,对7批巫山淫羊藿进行分析。结果显示,相似度小于0.9,并得到4个差异性单糖成分。建立的指纹图谱方法简单、易操作,可为淫羊藿药材的质量评价提供参考。     

不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分含量比较

目的:对不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分进行比较。方法:以反相高效液相色谱(PR-HPLC)法同时测定炙朝鲜淫羊藿饮片中5种主要黄酮类成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I的含量。结果:朝藿定A以亳州千草药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;朝藿定B、朝藿定C以药都集团茗都中药饮片有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;淫羊藿苷、宝藿苷I以安徽滕王药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高。结论:建立多种成分的含量测定方法可全面控制炙朝鲜淫羊藿饮片质量。     

淫羊藿黄酮苷类成分的指纹图谱与含量测定研究

目的：建立淫羊藿黄酮苷类指纹图谱和含量测定方法,对淫羊藿质量进行分析。方法：本文采用HPLC法,对来源于5个基原种（淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum ( Sieb.et Zucc. ) Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.、朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T. S. Ying）的淫羊藿进行了黄酮类成分指纹图谱分析,并比较了5种基原样品中淫羊藿苷、朝藿定A、B、C和宝霍苷I的含量。结果：淫羊藿各基原种的指纹图谱及5种黄酮类成分的含量显示一定的差异。结论：本文建立的方法简便,数据可靠,可以为淫羊藿标准的修订提供有益参考。     

不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的影响

目的:研究不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C及淫羊藿苷的影响。方法:采用RP-HPLC法,使用Shim-pack VP-ODS(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-水(25∶75)流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温30℃,比较不同炮制品中朝藿定C及淫羊藿苷含量的变化。结果:巫山淫羊藿不同炮制品中活性成分淫羊藿苷含量均有较大程度的上升;而朝藿定C变化则比较复杂,除羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降外,其余均有较小程度的上升。结论:加热炮制可能促使巫山淫羊藿中的其他成分分解或转化为淫羊藿苷;羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降,提示朝藿定C可能不是淫羊藿中的助阳成分;不同方法炮制对巫山淫羊藿主要成分影响较大,提示巫山淫羊藿在临床应用时必须选择合适的炮制方法。     

芪骨胶囊高效液相指纹图谱研究

目的 ：建立芪骨胶囊指纹图谱,为其质量标准提高提供参考。方法 ：采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱和甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,于柱温30℃、流速1 mL/min、检测波长270 nm、梯度洗脱进行HPLC检测。以淫羊藿苷为参照峰,绘制21批芪骨胶囊指纹图谱,进行相似度评价。结果 ：21批芪骨胶囊共检测到15个共有峰,相似度均大于0.9。通过与对照品的比对,指认松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷、柚皮苷、朝藿定A、淫羊藿次苷Ⅰ、朝藿定B、宝藿苷Ⅰ、朝藿定C、大黄素、淫羊藿苷11个色谱峰的化学成分。结论：所建立HPLC指纹图谱和共有峰相关分析结果为芪骨胶囊的质量控制提供参考。     

不同干燥和炮制方法对朝鲜淫羊藿中黄酮类化合物的影响

目的以朝鲜淫羊藿中总黄酮与淫羊藿苷的含量为考察指标,评价不同干燥和炮制方法对朝鲜淫羊藿中黄酮类化合物的影响。方法采用HPLC法与紫外分光光度法,测定不同干燥和炮制方法的朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷和总黄酮的含量。结果不同干燥方法干燥品中总黄酮的含量:阴干>100℃烘干>晒干>微波干燥>50℃烘干>红外干燥;淫羊藿苷的含量:100℃烘干>50℃烘干>阴干>晒干>微波干燥>红外干燥。不同炮制方法炮制品中总黄酮含量依次为:生品>酒润>酒炙>烤制>清炒>酒蒸>羊脂油炙>盐炙>酒油共炙>醋炙≈米泔水浸>酒煮>酒浸;淫羊藿苷含量:清炒>羊脂油炙>盐炙>酒炙>酒油共炙>醋炙>烤制>酒蒸>酒煮>生品>酒润>米泔水浸>酒浸。结论综合朝鲜淫羊藿药材中总黄酮和淫羊藿苷含量情况,100℃烘干总黄酮和淫羊藿苷含量最高,其次是阴干、晒干、微波干燥和50℃烘干干燥,红外干燥最差;炮制过程中总黄酮和淫羊藿苷的变化趋势主要受其炮制工艺条件决定,临床应用可根据其不同目的选择不同的炮制方法。     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别的山茱萸酒炙前后对比研究

目的:建立山茱萸生品和酒炙品HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法比较酒炙前后化学成分指纹峰的差异,寻找差异标志物,为山茱萸的酒炙工艺研究提供科学依据.方法:采用HPLC法,Phenomenex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0....     

4种不同药材来源郁金饮片醋炙前后的HPLC特征图谱分析及水煎出物含量比较

目的:研究4种不同药材来源郁金生品及醋炙品水煎液的共有特征成分峰,并比较其水煎出物含量,为解析临床用郁金饮片的多来源性及补充和完善郁金的质量标准提供参考。方法:采用高效液相色谱法测定不同药材来源郁金(温郁金、桂郁金、黄丝郁金和绿丝郁金)生品和醋炙品的特征图谱,通过指纹图谱软件和镜像对比进行成分分析,并比较其醋炙前后水煎出物含量的变化。结果:4种不同药材来源郁金生品及醋炙品均有7个共有特征成分峰,醋炙对郁金各成分峰均有不同程度的影响,有的峰面积增加、有的峰面积减少、有新产生的成分峰、亦有消失的成分峰;但醋炙后4种不同药材来源郁金的共有成分没有发生质的变化,仅色谱峰面积有增减,温郁金、桂郁金、黄丝郁金醋炙后7个共有成分中有5个共有成分峰面积增大,而绿丝郁金醋炙后7个共有成分中仅3个共有成分峰面积增大。醋炙后4种不同药材来源郁金水煎出物含量均增加。结论:4种不同药材来源郁金含有7种共有成分;醋炙对其共有成分无质的影响,但会增加其色谱峰峰面积和水煎出物含量。     

一点红药材中异槲皮苷的分离鉴定及指纹图谱研究

目的:从一点红药材中分离黄酮类化合物异槲皮苷,同时建立一点红的HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用半制备高效液相色谱法分离异槲皮苷,并以氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、质谱(MS)确定其结构。采用高效液相色谱技术分析指纹图谱;色谱条件:苏州环球C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.4%醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长273 nm。结果:分离得到异槲皮苷,其纯度>98%;按照中国药典规定,11批一点红指纹图谱相似度均在0.9以上,确定了16个共有峰。结论:半制备高效液相色谱法制备异槲皮素方法简单、高效,指纹图谱分析方法准确性高、重复性较好,可作为一点红质量评价的依据。     

骨疏丹指纹图谱分析及其活性相关性研究

目的建立骨疏丹的高效液相色谱指纹图谱,分析其成分与促成骨样细胞增殖活性的相关性,确定活性成分并推荐质量控制指标。方法色谱条件为:色谱柱为DiamonsilTMC18,流动相为20 mmoL.L-1NaH2PO4溶液和乙腈,采用梯度洗脱,柱温为25℃,检测波长为270 nm。对用撤药法拆方所得处方进行HPLC色谱指纹图谱分析和促成骨样细胞的增殖活性试验,采用相关分析和回归分析将活性数据分别与各指纹峰峰面积及组方药味相关联。结果指纹图谱分析方法的精密度、重复性、稳定性均符合有关规定。从指纹图谱中得到了18个主要色谱峰,其中9个色谱峰与活性相关,选择淫羊藿苷、柚皮苷作为质量控制指标。配伍关系研究结果与中医组方原则一致。结论骨疏丹指纹图谱可为骨疏丹的质量控制和活性及配伍关系研究提供了依据。     

提高更年乐胶囊质量标准的研究

目的：修订了更年乐胶囊的质量标准。方法：采用TLC对处方中的人参和淫羊藿进行鉴别;用高效液相色谱法测定淫羊藿苷的含量。结果：在TLC色谱中均能检出人参和淫羊藿；淫羊藿苷的含量限度不低于0．13mg／粒。结论：所建立的方法简便可行，重现性好，提供了更年乐胶囊较佳的质量控制方法。     

补肾强身胶囊质量标准研究

目的:建立补肾强身胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对处方中淫羊藿、女贞子进行定性鉴别;用高效液相色谱(HPLC)法测定淫羊藿苷的含量:色谱柱为汉邦十八烷基硅烷键合硅胶填充柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇(30∶70),流速为1.0mL.min-1,检测波长为270nm,柱温为30℃。结果:女贞子、淫羊藿的TLC斑点清晰,分离度好。淫羊藿苷进样量在0.266 4~0.932 4μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);平均回收率为99.77%,RSD=1.89%(n=6)。结论:所建标准可用于补肾强身胶囊的质量控制。     

参龙健脑胶囊质量标准的研究

目的:建立参龙健脑胶囊质量控制方法.方法:采用TLC方法对参龙健脑胶囊中的人参、地龙、淫羊藿药材进行定性鉴别;采用HPLC法对参龙健脑胶囊中的淫羊藿苷进行含量测定.色谱条件:Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水-磷酸(30:70:0.025)为流动相,柱温40℃,流速1 mL·min-1,检测波长270 nm.结果:采用TLC法能检出人参、地龙、淫羊藿;淫羊藿苷在10～160 μg.mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000,n=5).淫羊藿苷的平均回收率为99.5％,RSD=0.96％.结论:本方法可准确地进行定性、定量,可用于控制参龙健脑胶囊的质量.     

不同生长期穿心莲药材HPLC指纹图谱及化学模式识别

目的:建立不同生长期穿心莲药材HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别技术对其进行质量评价.方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1;检测波长225、250 nm.采用中药指纹图谱相似度评...     

RP-HPLC法同时测定不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分含量的方法。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为270nm,柱温为30℃,同时测定淫羊藿药材中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量。结果:5种成分均能达到基线分离,线性良好。不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分的含量差别较大。结论:建议在考察淫羊藿药材的质量时,不能只考察淫羊藿苷,应建立多种黄酮类成分测定指标,以全面控制淫羊藿药材的质量。     

穿心莲药材指纹图谱提取方法研究

目的以建立指纹图谱为目标,研究不同提取方法对穿心莲药材化学成分提取效果的影响。方法采用不同提取方式、提取时间、提取溶剂及提取温度对穿心莲药材化学成分进行提取,并对提取物进行高效液相色谱法检测比较。结果以75%甲醇水溶液作为提取溶剂,80℃水浴回流2h的提取条件下获得的指纹图谱信息较为丰富,响应值较高。结论此方法简便、重现性好,可作为构建穿心莲药材HPLC指纹图谱的供试品溶液制备方法。     

正交设计优化淫羊藿总黄酮最佳提取条件

目的：研究淫羊藿总黄酮最佳提取条件。方法：采用正交设计试验研究不同浓度的乙醇,溶剂体积和提取时间对淫羊藿总黄酮回流提取的影响;采用紫外分光光度法和HPLC法测定提取物中总黄酮和淫羊藿苷含量。结果：淫羊藿总黄酮最佳提取条件是采用90％乙醇,20倍量提取溶剂,提取时间为1h。结论：采用以上提取条件,所得提取物中总黄酮和淫羊藿苷含量最高。     

姜黄炮制前后化学成分比较研究

目的:研究姜黄炮制前后的化学成分的变化.方法:通过姜黄炮制前后有效成分、指纹图谱的变化进行研究.结果:姜黄炮制后有效成分会有一定的损失,姜黄指纹图谱共标出指纹峰11个,姜黄片则标示出7个.结论:姜黄炮制前后有效成分含量有一定变化,姜黄经炮制后HPLC指纹图谱指纹峰减少,印证了姜黄炮制后有效成分有损失的结论.