真菌植物松茸提取物抑制环磷酰胺致突变作用研究

目的:寻找安全有效的抗突变生物资源,为肿瘤预防和降低环磷酰胺的遗传危害提供科学依据.方法:采用修改的Ames试验和小鼠骨髓细胞微核试验,研究松茸提取物AMH对CP致突变作用的影响.结果:Ames试验结果表明,CP具有碱基对置换致突变作用,AMH能显著性抑制CP的致突变作用(P＜0.01),对测试菌株TA100的诱发回变菌落形成抑制率最高为79.9%;小鼠骨髓细胞微核试验也表明,AMH能显著性抑制CP对遗传物质的损害,微核形成抑制率达82%.AMH对CP致突变作用的抑制作用存在明显的剂量反应关系.结论:松茸提取物对CP致突变作用具有显著的抑制作用,在肿瘤预防和降低CP的毒副作用方面具有应用前景.     

真菌植物松茸提取物体外抑制苯并(a)芘致突变作用研究

目的:寻找安全有效的抗突变生物资源,为利用生物资源预防肿瘤提供科学依据.方法:采用修改的Ames试验,研究松茸提取物PME对强致癌物B(a)P致突变作用的影响.结果:PME能显著性抑制B(a)P的致突变作用(P＜0.01),对测试菌株TA97、TA98和TA100的诱发回变菌落形成抑制率最高分别达到91.0%、97.8%和90.5%,PME可使B(a)P的诱发回变菌落数下降至阴性范围.PME抑制B(a)P致突变作用存在明显的剂量反应关系.结论:松茸提取物PME对B(a)P致突变作用具有显著的抑制作用,PME具有抗突变作用,在肿瘤预防方面具有应用前景.     

中间体2-(2-羟乙基)-3-氨基-4-羧基吡唑的合成研究

 目的目的2-(2-羟乙基)-3-氨基-4-羧基吡唑是制备硫酸头孢噻利的重要中间体。方法经三步反应合成2-(2-羟乙基)-3-氨基-4-羧基吡唑:以氰乙酸乙酯为起始原料,与原甲酸三乙酯反应得2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯,与羟乙肼环合后再水解而得。结果在此条件下,收率可达60.8%。结论本实验方法与其他合成方法比较,具有收率高,操作容易,实用性强等特点,具有一定推广价值。     

土鳖虫多肽F2-2的体外药效研究

目的：通过体外试验,考察土鳖虫多肽F2-2的抗凝、抗血小板聚集与舒张血管药效。方法：以凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原含量（FIB）、血小板聚集率、纤溶图参数与离体血管环张力等为指标,评价多肽F2-2是否具有活血化瘀的作用。结果：土鳖虫多肽F2-2具有延长家兔血浆APTT/PT/TT、降低FIB、降低血小板聚集率、延长凝血启动时间并降低最大凝固程度以及增加大鼠离体血管环张力的作用。结论：体外实验表明,多肽F2-2是中药土鳖虫的活性组分,有继续研究的价值。     

2，3-二氢-1-氨基-2-羟基-4-硝基茚的合成研究

最近几年,国外开发了不少以茚为母体的系列药物和兽药。如：以系列抗HIV药物L-689,502;L-685,927;L-735,524等、系列平滑肌迟缓药SARs及系列抗精神分裂药物。此外,作为农药应用,有日本开发的除草剂一茚草酮及美国杜邦公司于1992年开发,并于2001年登记上市的氨基甲酸酯类杀虫剂——茚虫威等。     

五味子粗多糖抑制肿瘤和抗突变作用的实验研究

采用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验观察五味子粗多糖的抗突变作用;以 S-180和 H-22移植性肿瘤观察五味子粗多糖的抗肿瘤效果,目的是为了更好地开发利用五味子多糖提供实验依据。结果表明与阳性对照组比较,高中低三个剂量组微核形成率有显著的差异(P<0.01),说明五味子多糖具有抗突变的活性;对以 S-180和 H-22移植性肿瘤生长也有抑制作用。     

文冠果壳提取物体外抑制HepG2细胞增殖活性部位筛选研究

目的:筛选文冠果壳体外抑制肝癌Hep G2细胞增殖活性部位。方法:分别用水、10%、30%、50%、70%、95%的乙醇水溶液,从文冠果壳中提取得到A、B、C、D、E和F 6个提取部位(XSHE),采用MTT法来筛选抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性部位。结果:显示6个提取部位均有抑制HepG2细胞增殖作用,其中提取部位F(95%乙醇水溶液提取物)抑制HepG2细胞增殖作用最强,当95%XSHE给药质量浓度为75. 00μg·mL~(-1)时,其对HepG2细胞增殖的抑制率高达(80. 44±2. 33)%,高于等浓度的阳性对照丝裂霉素C(MMc),且Hep G2细胞在95%XSHE干预下形态发生变化,具体表现为细胞皱缩,细胞间隙变大,从培养板脱落等作用。结论:文冠果壳提取物在体外具有良好的抑制Hep G2增殖的生物活性,为我们进一步探索文冠果壳提取物抗肿瘤作用机制奠定了基础。     

高效液相色谱法测定2-(2,6-二氯苯基氨基)苯乙酸-4-(4-苯基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物-3-)甲氧基苯甲酯原料药的研究

 目的采用反相高效液相色谱法建立2-(2,6-二氯苯基氨基)苯乙酸-4-(4-苯基-1,2,5-二唑-2-氧化物-3-)甲氧基苯甲酯(ZLR-8)原料药质量控制的方法。方法色谱柱为Lichrospher ODS柱(4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-乙腈-水(55∶20∶10),检测波长为226 nm,流速为1.0 mL·min^-1。结果中间体及各降解产物对样品测定不产生干扰,ZLR-8的浓度为11.18～223.6mg·L^-1时与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8,n=5),重复性良好(RSD%=0.47,n=6),检测限为54μg·L^-1。结论该方法可以用于ZLR-8原料药的含量测定和有关物质检查。     

4-氨基-2-甲基斑蝥胺对惊厥大鼠脑电、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸受体的影响

 目的 研究4-氨基-2-甲基斑蝥胺（AMC）的抗惊厥作用及对皮层脑电图（EcoG）、γ-氨基丁酸（GABA）和γ-氨基丁酸受体（GABA_B）受体的影响。方法 建立大鼠皮层运动区定位注射青霉素诱发惊厥（PIC）模型,以丙戊酸钠（VPA）为阳性对照,以惊厥潜伏期和Racine分级评定药效,RM6240C型多道生物信号采集处理系统同步记录惊厥大鼠EcoG,分析灌胃AMC（25.0,100.0 mg·kg^-1）后的抗惊厥作用及对EcoG影响。采用免疫组化技术,测定皮层和海马区GABA和GABA_B受体蛋白量的变化。结果 两剂量AMC均能显著减轻大鼠惊厥发作及癫痫样脑电（P<0.01）;小剂量AMC组皮层和海马GABA含量虽然均较正常组和模型组高,但差异无显著性（P>0.05）;海马部位的GABA_B受体蛋白表达量升高(P<0.05),而在皮层部位的表达量虽然较模型组高,但差异无显著性（P>0.05）。VPA组和大剂量AMC组皮层、海马区GABA含量与GABA_B受体蛋白表达量均显著升高 (P<0.05)。结论 AMC可对抗PIC惊厥,抑制痫性放电。抗惊厥作用的机制与提高皮层和海马区的GABA含量和GABA_B受体表达有关。     

(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇的合成工艺研究

目的 对(2S,3R)- 1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇合成工艺进行研究.方法 以3-戊酮为起始原料,经Mannich反应、手性拆分、Grignard反应等步骤合成(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇,并对化学拆分进行工艺优化.结果 合成(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇,总收率为30.6％.结论 工艺改进后提高了目标产物的收率,同时也减少了原料的浪费.     

真菌及其培养物提取液在细叶石斛种子萌发中的作用

来源于兰科植物原球茎中的几种真菌,对细叶石斛种子萌发有明显促进效果。种子伴菌播种,发芽率达20%以上,而无菌播种无一粒种子萌发;这些真菌培养物的醇、水提取液培养种子,发芽率达40～70%,但菌丝伴播种子方法,有利于萌发形成的原球茎继续发育。     

药用植物内生真菌诱导子与宿主互作机制研究进展

药用植物内生真菌诱导子是一类由药用植物体内内生真菌产生且对宿主植物生长及次生代谢产物合成有一定诱导作用的物质。其可以是寡糖、多糖及植物激素等,多数来源于内生真菌的表面结构性成分和一些分泌物质。在与宿主植物互作时,对宿主植物的生长发育、次生代谢产物合成积累及抗性反应等有一定作用,两者互作机制较为复杂且相关研究较少。对已有相关研究成果进行归纳总结,从内生真菌诱导子种类、真菌诱导子与宿主间相互作用、作用机制研究进展3个方面进行综述,以期为后续深入研究内生真菌诱导子与宿主植物互作复杂关系,以及内生真菌诱导子的开发应用提供参考。     

水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究

目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6-15mg／mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。     

柳树叶提取物诱导肝癌细胞株hep-G2凋亡的实验研究

目的:研究柳树叶水提物抗肿瘤作用,为最终提取一种有效抗肿瘤药物及临床前实验提供依据。方法:柳树叶水提物制备药物血清作用于培养的肝癌细胞株hep-G2,检测其凋亡。采用端粒重复序列扩增(TRAP)法结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测端粒酶活性。结果:柳树叶水提物制备药物血清对靶细胞有明显的抑制生长现象。孵育一段时间后,能使肝癌细胞发生凋亡,并呈现对浓度的依懒性和伴随端粒酶活性下降。结论:柳树叶提取物能诱导肝癌细胞株hep-G2凋亡。     

乙肝舒对小鼠细胞免疫功能及白细胞介素-2生成的影响

乙肝舒对正常ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴细胞增殖有明显抑制作用，对泼尼松处理小鼠淋巴细胞增殖有促进作用，但与ＣｏｎＡ无明显协同或对抗作用；对脾脏ＮＫ细胞活性有明显增强作用；对淋巴细胞ＩＬ－２生成有显著促进作用。     

蛇足石杉内生真菌DSJ5的分离及其代谢产物HPLC-DAD筛选研究

目的:从蛇足石杉中筛选分离能产生生物活性物质石杉碱甲及其类似物的内生真菌。方法:从蛇足石杉新鲜植株中分离纯化内生真菌,采用HPLC-DAD筛选内生真菌的代谢产物。结果:内生真菌DSJ5代谢产物的色谱峰与石杉碱甲在相同的色谱条件下保留时间相同,且紫外光谱相近;DSJ5经形态特征鉴定为胶胞炭疽菌Colletotrichum gloeosporioide。结论:HPLC结合紫外光谱特征可用于检测内生真菌中微量的代谢产物;蛇足石杉内生真菌DSJ5可能产生石杉碱甲。     

四物汤抑制H2O2诱导神经细胞凋亡的实验研究

目的:探讨传统中药四物汤水提液对人神经母细胞瘤的抗氧化损伤作用及其机制。方法:在人神经母细胞瘤株SK-N-MC细胞以0.5×106/ml的密度接种于6孔板和2×104/ml于96孔板或以2×106/ml于10cm的圆盘后孵育24h。用不同浓度H2O2处理(1～300μM,12h)诱导SK-N-MC细胞损伤以后,通过MTT、DAPI和流式细胞技术,观察传统中药四物汤的作用。结果:H2O2引在1～300μM范围内,对SK-N-MC细胞损伤具有明显的量效关系。四物汤提前预处理2h,可明显减少由H2O2(30μM)预处理引起的SK-N-MC死亡率[由对照组的(59.87±2.04)%,上升到(83.04±5.12)%～(89.47±5.68)%(P<0.01)],抑制细胞凋亡[由对照组的(29.24±3.54)%下降到(7.56±1.96)%(P<0.01)],用30μM的H2O2处理12h后,可以明显的诱导SK-N-MC细胞出现sub-G1期,但是事先用250μg/mL四物汤处理却明显地降低H2O2导致细胞凋亡产生的sub-G1峰。结论:四物汤水提液可能通过抗细胞凋亡等途径,减少SK-N-MC细胞的氧化损伤。     

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的:观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白 A（ConcanavalinA,ConA）刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用。方法:用ConA刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法（MTT法）,流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用。结果:结血蒿醇提物对体外ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性。结论:结血蒿醇提物可抑制ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性。     

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的：观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白A（Concanavalin A,ConA）刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用.方法：用Con A刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法（MTT 法）,流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用.结果：结血蒿醇提物对体外Con A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性.结论：结血蒿醇提物可抑制C0n A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性.     

赤雹果乙醇提取物对子宫内膜炎继发性痛经作用研究

目的: 观察赤雹果乙醇提取物(AETF)对子宫内膜炎继发性痛经的治疗作用。方法: 采用大鼠子宫内植入塑料管法,诱发子宫内膜炎继发痛经模型。术后第2天开始灌胃(ig)给药,AETF低、中、高剂量(0.3,0.6,1.2 g ·kg^-1)连续7 d。以子宫的肿胀度,血液流变学(全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集率)及子宫组织中PGE₂含量为指标,观察AETF治疗继发性痛经的作用。结果: AETF 0.3,0.6,1.2 g ·kg^-1剂量组大鼠的子宫肿胀度、血浆黏度、红细胞聚集率均显著低于模型组(P<0.01或P<0.05);1.2 g ·kg^-1剂量组大鼠全血黏度显著低于模型组(P<0.01);0.6,1.2 g ·kg^-1剂量组大鼠子宫组织中的PGE₂含量显著低于模型组(P<0.05)。结论: AETF治疗子宫内膜炎继发性痛经的作用与血液流变学指标的改善、子宫组织中PGE₂含量的降低有关。