2种滤除白细胞方法及冰冻前4℃、不同保存时间对制备冰冻红细胞质量的影响

冰冻红细胞主要用于稀有血型和自身输血的贮存,其优点是可延长红细胞保存时间达10年,减少了Rh(D)阴性血液宝贵资源的浪费.我国<全血及成分血质量要求>~([1])规定冰冻解冻去甘油红细胞应由保存时间在<6 d的全血、浓缩红细胞、悬浮红细胞血液制剂中的红细胞分离制备.     

MAP保存液对冻融红细胞的保护作用

低温生物学原理应用于血液(红细胞)保存,可大幅度延长红细胞体外存活时间和存活率。用甘油作为低温保护剂冰冻保存红细胞可以追溯到1950年,自20世纪70年代Meryman将甘油保存红细胞用于人体输血首获成功以来,冷冻血液逐渐在临床输血治疗学中得到推广。由于甘油保存及洗涤过程中会导致溶血,保存过程中也会发生溶血。本血液中心研究改进了冰冻解冻红细胞制备技术,同时对不同红细胞悬液保存红细胞的质量进行初步比较,现报告如下。     

RhD(-)血液分离设备改进的效果观察

RhD(-)血液常以甘油作为保护剂对红细胞进行低温冰冻保存,临床使用前必须解冻去除甘油,使洗涤后红细胞悬液中甘油残留量含量<10g/L[1],因此解冻后的洗涤过程的操作至关重要。我们在制备解冻红细胞的过程中使用改良设备,取得了满意的效果。1材料与方法1.1材料设备组和改良组各20     

多联袋手工法快速制备冰冻去甘油红细胞的应用

正冰冻红细胞在国内外已普遍投入临床使用,为稀有血型患者输血提供了方便,争取了抢救时间,冰冻红细胞还可用于特殊患者的自身输血和部分调节血液供求不平衡现象,冰冻血是其他制剂所不能代替的血液制品~([1])。冰冻红细胞使用前要进行解冻去甘油,一种简便、快速、质量稳定的解冻去甘油方法是保证患者输血及时有效的关键,现将一种手工快速制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法及质量检测结果报告如下。     

甘油对冰冻解冻红细胞质量的影响探讨

目的比较两种方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量差异。方法随机取2~6℃保存6d内的RH阴性去白细胞悬浮红细胞60袋,应用ACP215全自动血细胞处理仪制备甘油化红细胞,-80℃冰箱保存1~24个月,其中30袋去甘油冰冻保存,30袋不去甘油冰冻保存,然后取出于37~40℃水浴快速融化后,选择ACP215全自动血细胞处理仪去甘油程序进行去甘油洗涤处理,检测冰冻解冻去甘油红细胞的质量指标,并与国家标准进行比较。结果两种方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞其血红蛋白水平、游离血红蛋白浓度、甘油残余量和细菌培养试验均满足《全血及成分血质量要求(GB18469-2012)》。结论两种方法均可制备符合国家标准的冰冻解冻去甘油红细胞。但从临床抢救角度看,采用冰冻前去甘油的方法,可以为临床抢救争取约30min的时间。     

冻存前细胞外多余甘油溶液的去留对解冻后红细胞质量影响的比较

目的探讨甘油化红细胞冻存前保留或去除细胞外多余甘油溶液对解冻后红细胞质量影响的差异。方法采取配对设计的方法,以甘油化红细胞冻存前保留细胞外多余甘油溶液为试验组,去除细胞外多余甘油溶液为对照组,制备生成6对红细胞添加液(甘露醇-腺嘌呤-磷酸盐,简称MAP)悬浮和6对0.9%Na Cl悬浮的冰冻解冻去甘油红细胞,比较分析其新鲜制备后甘油残留量、血红蛋白含量和游离血红蛋白(FHb)含量的差异,以及保存期间FHb含量和上清钾离子(K+)浓度的差异。结果新鲜制备的冰冻解冻去甘油红细胞,甘油残留量、FHb含量和血红蛋白含量均符合国家质量标准要求,试验组与对照组之间甘油残留量,FHb含量差异均无统计学意义,受实验过程留样损失的影响,试验组与对照组之间Hb含量差异有统计学意义;保存期间MAP悬浮和0.9%Na Cl悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,上清K+浓度和FHb含量均呈现试验组低于对照组的总体趋势,其中MAP悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,制备后21 d、28 d,试验组与对照组FHb含量差异具有统计学意义(P0.05),制备后7 d上清K+浓度差异具有统计学意义(P0.05),0.9%Na Cl悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,制备后12 h、24 h试验组与对照组FHb含量差异具有统计学意义(P0.05),制备后6 h、12 h、24 h上清K+浓度差异具有统计学意义(P0.05)。结论甘油化红细胞冻存前保留或去除细胞外多余甘油溶液对新鲜制备冰冻解冻去甘油红细胞质量的影响没有显著差异,但随着保存时间的延长前者表现出更有利于红细胞稳定性保持的特点。     

M115与ACP215制备冰冻解冻去甘油红细胞的比较研究

红细胞冰冻是保存稀有血型红细胞的一项技术,也用于自体红细胞储存及保持血型平衡[1～4].冷冻保护剂多为甘油,可长期保存[5],输注前要解冻并去甘油,洗涤方法有手工和机器两种.本研究采用M115型、ACP215型细胞洗涤机来制备冰冻解冻去甘油红细胞,并对产品各种质控指标进行分析.     

离心参数对冰冻红细胞解冻时游离血红蛋白检测的影响

正随着医疗事业的发展,RH(D)阴性等稀有血型患者输注冰冻解冻去甘油红细胞已成为当代医学重要的支持手段。游离血红蛋白(FHB)是冰冻解冻去甘油红细胞质量评价的重要指标[1],离心力对检测结果有较大的影响。《全国临床检验操作规程》等相关检验资料中未明确血液质量抽检标本的离心参数,为探讨不同离心参数对冰冻解冻去甘油红细胞游离血红蛋白的影响,笔者对2015年1月以来质量抽检的所有冰冻解冻去甘油红细胞分别用三种不同     

细胞洗涤机去甘油化技术的应用

以40%甘油作为保护液,红细胞在-80℃低温保存,实现了稀有血型红细胞、自身输血者的红细胞的长期保存使用(使用年限为10年)[1]。笔者采用40%甘油冰冻红细胞,用血细胞处理机洗涤红细胞去甘油化,最后添加MAP液制备成冰冻解冻去甘油红细胞,各项技术指标检测结果较为满意,现报告如下。1材料与方法1.1材料57.1%的甘油、三珠袋、9%的浓氯化钠(北京博得桑特输血器材公司);羟乙基淀粉40氯化钠(江苏常熟制药厂);0.9%的氯化钠(上海市血液中心)。1.2仪器RC.12BP离心机(美国Sorvall公司);Haemon-etics115细胞洗涤系统(美国血液公司);Julabo MP.19循…     

冻存前滤除白细胞对解冻红细胞质量影响的研究分析

目的探讨冻存前滤除白细胞对冰冻解冻去甘油红细胞的血液质量和生化指标的影响。方法随机采集20名无偿健康献血者全血400mL×20袋,常规分离血浆制备成悬浮红细胞2μ×20袋。根据配对设计方法,将血液等量分成两份1μ×20袋,其中20袋在2~4℃静置2~4h后用一次性白细胞滤器滤除白细胞为滤白组,另20袋不做其他处理为非滤白组。两组红细胞经40%甘油化后冻结,保存在低于-65℃的超低温冰箱至少30d,解冻后红细胞复悬于MAP红细胞保存液中,4℃保存。分别在0、7、14、21d检测解冻红细胞的血液学和生化学指标。结果滤白组冰冻解冻去甘油红细胞较非滤白组冰冻解冻去甘油红细胞的溶血率低、氨浓度低及ATP浓度高,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。滤白组可见LDH水平明显抑制,钾浓度增加速度相对较缓。结论滤白组解冻红细胞长期生存能力较非滤白组解冻红细胞强。     

MAP洗涤红细胞再冰冻的实验研究

目的对红细胞洗涤后冰冻保存的安全性探讨。方法选择20袋(2u/袋)悬浮红细胞,每袋分成2份(1u/份)为实验组和对照组,实验组制备成M AP洗涤红细胞后再冰冻保存;对照组直接制备成冰冻红细胞,一周后实验组和对照组用同等方法进行去甘油解冻,并计算红细胞的回收率及其相关质控指标。结果实验组和对照组冰冻红细胞回收率,甘油残余量,上清液游离血红蛋白含量及体外溶血率比较无显著性差异(P>0.05),两组成品无菌试验均阴性。结论M AP洗涤红细胞制备成冰冻红细胞,各项质量指标符合国家标准,能应用于临床,因而有效解决临床备用洗涤红细胞剩余而造成的血液浪费。     

红细胞深低温保存技术在Rh(D)阴性血液保存中的应用

红细胞深低温保存是现代临床输血中唯一能长期保存红细胞的方法 ,这一技术可以使稀有血型红细胞、自身输血者的红细胞得以长期保存 ,长沙血液中心于 2 0 0 1年 3月将该技术用于 Rh(D)阴性红细胞保存 ,至 2 0 0 2年 2月已有81.75单位 (5 4袋 )深低温保存的 Rh(D)阴性红细胞供应临床使用 ,现将结果报告如下。材料与方法1　制备冷冻红细胞　采用慢速冷冻法 ,将 Rh(D)阴性全血或悬浮红细胞离心去除血浆或添加剂 ,压积红细胞转移至三联血袋 (北京血液中心提供 ) ,使用 5 7.1%的甘油 (北京血液中心提供 )作为红细胞冷冻保护剂 ,将甘油加入红细…     

全自动血液处理机洗涤低温保存1年的红细胞的质量跟踪

目的 观察经Haemontics 215型全自动机器洗涤低温保存1年的红细胞在冰冻、融化、洗涤后的各项质控指标,以评价全自动血液处理机在红细胞保存、洗涤中的作用以及红细胞较长时间低温保存的可行性。方 法取6例保养液为输血用复方枸橼酸钠注射液（ACD-B）的全血,于采血后6d内离心压去血浆制成浓缩红细胞,用215型血液处理机滴入低温保护剂,于室温静置20～30min后轻离心压去上清多余甘油后快速冰冻,再移入65℃冰箱冰冻保存。1年后取出融化,使用Haemontics215型全自动血液处理机进行梯度洗涤。于融化后以及洗涤后分别取样浏定有关质控指标,并于3、6、12、24、48和72h测定游离血红蛋白值和体外溶血值。结果 使用Haemonfics215型全自动血液处理机洗涤低温保存1年的红细胞,其各项指标直至72h全部符合国家规定,无菌实验为阴性。结论 使用Haemontlcs215型全自动血液处理机器保存、洗涤红细胞的效果好、保存时间长,洗涤时间短,完全可以在日常工作中使用。     

一种新型国产红细胞洗涤仪洗涤效果的初步探讨

冰冻条件下保存红细胞可达到长期贮存的目的,国家规定冰冻(-80℃)红细胞的有效保存时间为10年.目前冰冻红细胞主要用于稀有血型血液,如RhD(一)血液的保存.由于冰冻红细胞在临床输注前必须经过洗涤去甘油后才能应用,现国内相当一部分血站仍采用手工方法洗涤冰冻红细胞.这种洗涤方法尽管费用低,但过程烦琐、费时、红细胞容易被污染,而使用进口设备自动洗涤则由于费用高,增加了怂患者医疗成本而受到一定的限制.     

冰冻解冻去甘油红细胞制备工艺的改良

深低温冰冻保存可大幅度延长红细胞的体外存活时间和存活率[1].上世纪80年代初,美国FDA批准冰冻保存红细胞的有效期为10年[2].随着无偿献血工作的开展,为了使稀有血型血液得到长期保存和开展自身储血,国内也逐渐兴起了此项技术的应用.但由于冰冻解冻去甘油红细胞制备工艺复杂,影响质量的因素较多.     

冰冻-解冻-去甘油过程红细胞形态变化与损伤相关性的探讨

目的探讨冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞形态变化与其损伤的相关性。方法依据配对设计原理,采用冻存前保留红细胞外多余甘油溶液(方法1)和冻存前离心去除红细胞外多余甘油溶液(方法2)的两种常规方法,制备冰冻解冻去甘油红细胞,对冰冻-解冻-去甘油过程各关键制备节点留取的样本,进行血常规及上清游离血红蛋白(FHb)含量的检测,分析红细胞形态变化及其与损伤的关联。结果 (1)冰冻-解冻-去甘油过程红细胞因甘油化而体积增大,后因去甘油化而复原,方法2较之方法1甘油化红细胞(冻存前)和冰冻解冻去甘油红细胞的平均体积(MCV)增高(P0.01,P0.05);(2)冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞损伤分布依次为:去甘油化过程(63.20±10.99)%、甘油化过程(30.78±10.47)%、冰冻解冻过程(6.02±4.11)%,两种制备方法间差异无统计学意义;(3)红细胞破坏与甘油化过程红细胞体积变化率呈中度负相关;(4)随着贮存时间的延长,冰冻解冻去甘油红细胞上清游离血红蛋白含量逐渐增加,0.9%氯化钠悬浮冰冻解冻去甘油红细胞储存12 h、24 h,MAP悬浮冰冻解冻去甘油红细胞储存21 d、28 d,两种制备方法间差异有统计学意义(P0.05)。结论冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞损伤与其变形能力呈负相关,且损伤主要发生在去甘油化过程,冻存前离心去除红细胞外多余甘油溶液导致红细胞膜骨架因剪切力作用而受损,进而对冰冻解冻去甘油红细胞贮存质量产生不利影响。     

深低温保存Rh阴性血液的质量控制

目的　确保深低温保存Rh阴性红细胞解冻后的质量。方法取ACD抗凝 ,4℃保存 6d内Rh阴性红细胞悬液或全血离心除去添加剂或血浆的浓缩红细胞 ,将红细胞经 (4 0 % )浓度甘油处理后 ,置 - 80℃冰冻保存。临床需要时 37℃水浴解冻复苏红细胞 ,依次用 9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl各洗涤 1次。用生理盐水羟乙基淀粉溶液悬浮红细胞。结果 35袋冰冻解冻红细胞去甘油后红细胞回收率为(81 .1 7± 1 8.5 ) % ,游离血红蛋白为 (0 .6 3± 0 .1 6 ) g/L ,甘油残留量平均为 5 .3g/L ,体外溶血试验血红蛋白增加率为2 5 .1 9%。结论冰冻解冻去甘油红细胞各项指标均达到了国家规定的质量标准 ,临床输用效果良好     

趋势分析方法在血液成分质量控制中的探索和应用

目的采用趋势分析方法对全年血液成分质量进行总体评价。方法收集整理2013年供应临床的10种血液成分质控数据,选取关键指标,采取制作折线图的方式,并设置警戒限和行动限,进行连续性趋势分析。结果除新鲜冰冻血浆、冷沉淀外,其余血液成分抽检结果的各项关键指标均符合《全血及成分血质量要求》。冰冻解冻去甘油红细胞血红蛋白含量项目出现1次偏离数据(1个月中有3袋检测结果超出警戒限),甘油残留量项目数据曲线距离警戒限较远。悬浮红细胞血红蛋白含量项目出现1次偏离数据(检测结果趋势有严重漂移)。新鲜冰冻血浆Ⅷ因子活性项目出现2次偏离数据(超过警戒限)。结论根据趋势分析图进行连续性趋势分析的方法适用于血液成分质控项目,为血液制品稳定性评价提供了借鉴。     

去白细胞成分血质量对降低输血不良反应的影响

目的保证去白细胞成分血液的效果、提高滤白血液质量,评价临床输注去白细胞血液成分预防过敏反应发生率的实际效果。方法统计本站2016年制备去白细胞悬浮红细胞95 017袋,其中滤白不畅61袋,引起临床过敏反应1袋;随机抽取本站制备的悬浮红细胞和去白细胞悬浮红细胞各48袋,对比分析两者的储存期末溶血率;同时回顾本站2016年发给1家三甲医院的临床输注合格血液成分,即去白细胞悬浮红细胞22 138袋,悬浮红细胞221袋,根据临床《医疗(安全)不良事件报告表》统计输血反应,对比分析两组输血反应发生率。结果悬浮红细胞和去白细胞悬浮红细胞的储存期末溶血率对比,差异无统计学意义(P0.05);输注去白细胞悬浮红细胞和悬浮红细胞过敏反应发生率分别是0.04%和5.43%,两组间过敏反应比较差异有统计学意义(P0.005);滤白不畅发生率0.06%,滤白不畅导致过敏反应发生率1.6%。结论提高滤白血液质量,防止或降低输血不良反应的发生率。     

软心包装去白细胞滤器效果观察

实践证明,将血液及其成分滤除白细胞对于输血安全和临床治疗具有重要作用[1],因此国内越来越多的采供血机构都相继采用了这项技术.但以往国产的一次性去白细胞滤器都是硬壳产品,且体积较大(一般都在9×9cm以上),在强大的离心力作用下,滤器硬壳易破裂或滤心被损坏,因此只能将滤器独立,这样如使用无菌接管机,则增加成本又费事,如不使用,存在着血液开放污染的风险;若滤白器与采血袋做成了一体性联袋,则必须将血液先行去白过滤,才能离心进行成分分离,其结果,若先行去白过滤,将失去了由全血制成血小板成分的机会,又因据文献报道"热血"过滤去白效果较差[2,3];且过滤之后马上高速离心进行成分分离,对红细胞膜的损害大,溶血增加[1],所以难保证血液采集后6-8h内制成新鲜血浆及冷沉淀产品.