氨基糖甙类体外抑制人表皮角质形成细胞tRNA的生物合成过程

病原体对抗生素逐步增长的耐药现象以及缺乏强效的抗菌药成为感染性疾病治疗中的主要问题，因而有必要进一步了解抗生素在分子水平上的作用机制。以往的证据表明RNA是抗细菌和抗病毒药作用的关键靶点，而氨基糖甙类抗生素除了可以抑制病原体的核糖体功能，抑制蛋白质合成，还有报道可干扰各种RNA分子并在体外能抑制人角质形成细胞的增殖。     

皮肤科学基础

20 0 10 0 0 1　影响新生鼠角质形成细胞及成纤维细胞Fas及其配体表达的因子 /贺为东 (中国医大一院皮肤科 )…∥中华医学杂志 (英文版 ) .- 2 0 0 0 ,113(9) .- 833～ 835以 RNase防护法及流式细胞分析法检测角质形成细胞和成纤维细胞 Fas及 Fas配体 (Fas L)的表达 ,并观察了维甲酸 (RA)及地塞米松 (Dex)对其表达的影响。结果发现 Fas m RNA被新生鼠角质形成细胞表达 ,全反式维甲酸上调而 Dex下调。RA和 Dex同时也增加角质形成细胞 Fas蛋白的表达。新生鼠角质形成细胞表达 Fas L m RNA,RA和 Dex对其都有上调作用。新生鼠成纤维…     

MTX对正常人表皮角质形成细胞体外培养增殖的作用及影响

目的　探讨甲氨蝶呤 (MTX)对表皮角质形成细胞的作用及影响 ,进而了解MTX治疗银屑病的机理。方法　将人体离体角质形成细胞培养、分离传代并测定其自然生长曲线作对照 ;将不同浓度MTX与角质形成细胞混合培养 ,测定在MTX作用下的角质形成细胞生长曲线 ,比较MTX对细胞生长的影响。结果　MTX对角质形成细胞的体外生长具有明显的抑制作用 ,不仅明显抑制角质形成细胞的正常生长 ,而且可以促使细胞的提前凋亡。结论　MTX通过抑制角质形成细胞的DNA及RNA合成调节细胞的生长代谢及自然凋亡过程 ,尤其对银屑病患者生长过度活跃的表皮角质形成细胞产生调节作用 ,使细胞的过度生长受到抑制 ,保持角质形成细胞的自然生长平衡     

存活素反义寡核苷酸对角质形成细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨存活素反义寡核苷酸对角质形成细胞增殖和凋亡的影响。方法以脂质体介导存活素反义寡核苷酸转染体外培养的角质形成细胞。采用MTT方法观察存活素反义寡核苷酸对角质形成细胞生长曲线的影响;采用RT-PCR方法观察存活素反义寡核苷酸对角质形成细胞存活素表达水平的影响;采用流式细胞仪检测存活素反义寡核苷酸对角质形成细胞细胞周期和凋亡的影响。结果存活素反义寡核苷酸作用于角质形成细胞后,细胞增殖受到明显抑制,存活素mRNA表达水平明显下降,细胞出现明显的凋亡现象。结论存活素反义寡核苷核酸能够抑制角质形成细胞增殖,促进角质形成细胞凋亡。提示存活素可能会成为一个新的治疗银屑病的靶分子。     

芦荟对银屑病患者外周血单核细胞和角质形成细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨芦荟对银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)和角质形成细胞增殖和凋亡影响.方法选择寻常性银屑病患者PBMC,共20例,正常人16例,及角质形成细胞株Colo-16细胞.采用MTT方法检测细胞增殖,ELISA方法检测细胞凋亡.结果芦荟对正常人和银屑病患者PBMC增殖均有抑制作用(P＜0.01),无促进细胞凋亡作用,对角质形成细胞株Colo-16细胞有明显的抑制增殖和促进凋亡作用(P＜0.01).结论芦荟抑制银屑病患者PBMC的增殖和诱导角质形成细胞凋亡可能是芦荟治疗银屑病的重要药理作用之一.     

角质形成细胞与皮肤免疫屏障

角质形成细胞(keratinocytes,KC)是皮肤免疫屏障中的重要一员.角质形成细胞可表达模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)识别病原体,启动固有免疫反应;角质形成细胞可作为抗原提呈细胞,参与抗原呈递,并分泌多种免疫活性分子参与皮肤免疫防御机制;还可表达抗菌肽直接杀灭或间接活化细胞因子防御病原体.烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamideadenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶参与上皮防御的机制则是新的研究热点,其在角质形成细胞的表达及影响因素尚待进一步研究.     

DC-SIGN在皮肤病与性病的研究进展

DC-SIGN是一类表达在树突细胞上的C型凝集素受体,能识别和捕获多种糖基化抗原,与不同的糖基化配体及病原体作用可能参与不同的免疫调控.DC-SIGN为广谱的病原受体,与病毒、细菌及真菌等病原体相关,并参与慢性炎症及变态反应的过程,在皮肤科的作用越来越受到重视.DC-SIGN主要分布于外周组织不成熟DC以及淋巴组织成熟DC,最近发现亦表达于角质形成细胞、Schwann细胞.     

中波紫外线诱导的人角质形成细胞凋亡与SSA/Ro抗原表达

目的 为明确紫外线对光敏感型皮肤型红斑狼疮的作用机制,光照后人角质形成细胞表面SSA/Ro抗原的形成机理及其在皮损形成中的作用。方法 用M154培养基体外培养角质形成细胞,经UVB照射后先用相差显微镜观察细胞形态学改变,并用原位末端标记法测定凋亡细胞的断裂DNA片段,同时用间接免疫荧光法测定角质形成细胞表达SSA/Ro抗原情况;然后分别用DNase、RNase、DNase+RNase消化,碘化丙啶复染。用ELISA法测定细胞上清液SSA/Ro抗原;小剂量UVB照射后的角质形成细胞与亲和纯化的SSA/Ro特异血清及正常人血清孵育,台盼蓝染色观察细胞活性。结果 不同剂量UVB(52.8mJ/cm²、105.6mJ/cm²、158.4mJ/cm²、200mJ/cm²、211mJ/cm²)照射后KC凋亡,表面有凋亡小泡,细胞核有断裂DNA缺口并表达SSA/Ro抗原,随UVB剂量的递增,凋亡和表达SSA/Ro抗原的细胞数增多。这种抗原位于凋亡细胞的凋亡小体中,表达于细胞表面的SSA/Ro抗原可在原位诱导补体杀伤,而在细胞上清液中未测到SSA/Ro抗原。结论 UVB照射角质形成细胞通过诱导角质形成细胞凋亡表达自身抗原SSA/Ro,该抗原并不释放到上清液中,在补体和相应抗体存在的情况下可引起细胞损伤。     

姜黄油对角质形成细胞体外增殖分化影响的研究

目的：探讨姜黄油对角质形成细胞体外增殖分化的影响。方法：以人角质形成细胞株COLO-16细胞为模型，噻唑盐比色法(MTT)检测细胞活性和生长情况；免疫组化SABC法检测姜黄油对增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响；电镜观察姜黄油对细胞超微结构的影响。结果：姜黄油抑制角质形成细胞增殖，随药物浓度增加，其抑制增殖能力增加，PCNA表达逐渐减弱，且对角质形成细胞超微结构有直接损伤作用。结论：姜黄油具有抑制体外角质形成细胞增殖分化的作用，有望成为一种治疗增殖性皮肤病的外用药物。     

rhFGF-7对体外培养人皮肤角质形成细胞增殖的影响

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定,并用细胞计数法测定细胞的生长曲线,MTT法检测rhFGF-7对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。结果与胰酶消化分离表皮相比,dispaseⅡ酶消化获得的表皮,其细胞贴壁率高,增殖速度快,且成纤维细胞污染少;荧光显微镜下细胞胞浆呈黄绿色,为角蛋白阳性染色;培养的角质形成细胞可持续增殖至第8代,10ng/mL的rhFGF-7促角质形成细胞增殖作用最显著。结论所建立的人皮肤角质形成细胞分离和培养方法,可获得高纯度的人皮肤角质形成细胞,rhFGF-7可促进体外培养人皮肤角质形成细胞的增殖。     

益母草和枸杞对UVB损伤角质形成细胞的保护作用

目的探讨中草药益母草、枸杞对中波紫外线损伤角质形成细胞的保护作用及作用机制。方法用益母草和枸杞对HaCaT细胞进行预处理24h,采用30mJ/cm2、40mJ/cm2、50mJ/cm2剂量的UVB照射细胞,以MTT法检测细胞生存率,以酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α的分泌量,以Annexin-V凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。结果经UVB照射后,细胞损伤程度与UVB照射剂量有关,益母草和枸杞均可提高UVB照射后角质形成细胞的生存率,减少细胞因子TNF-α的分泌。UVB照射后早期细胞损伤以凋亡为主,晚期以死亡为主,UVB照射8h后益母草和枸杞预处理的HaCaT细胞凋亡率明显减少(P<0.05)。结论UVB对角质形成细胞有损伤作用,且与照射剂量相关,益母草和枸杞对角质形成细胞具有光保护作用。抑制TNF-α的释放和减少细胞凋亡可能是其保护作用机制之一。     

链球菌抗原刺激的银屑病外周血单个核细胞培养上清液对角质形成细胞的作用

目的 了解链球菌抗原刺激的银屑病外周血单个核细胞(PBMCs)培养上清液对角质形成细胞的作用以探讨链球菌感染后的银屑病的发病机制。方法 ^3H—TdR掺入法检测PBMCs培养上清液对角质形成细胞DNA合成的影响；免疫组织化学方法检测细胞间教附因子1(ICAM—1)和人类白细胞抗原DR分子(HLA—DR)表达。结果 银屑病患者链球菌抗原刺激的PBMCs培养上清液对角质形成细胞的促增殖作用较对照组显著增强，并能诱导角质形成细胞表达HLIA—DR和ICAM—1分子。结论 受链球菌抗原刺激的银屑病PBMCs培养上清液可促进角质形成细胞增殖和活化，可能是链球菌感染之后银屑病发病的重要原因。     

环孢素A及雷公藤内酯醇对CD4＋T细胞、角质形成细胞和HeLa细胞增殖的影响

目的比较环孢素A(CyA)和雷公藤提取物T0 对CD4 T细胞、角质形成细胞和HeLa细胞增殖的影响。方法采用人外周血单一核细胞(PBMC)、人表皮角质形成细胞和HeLa细胞培养 ,3H TdR掺入法测定药物对细胞DNA合成的影响。结果T0 和CyA都能抑制ConA诱导的人外周血T淋巴细胞增殖。T0 在体外可抑制生长于低钙无血清角质形成细胞培养基中的正常人角质形成细胞和HeLa细胞株的生长 ,而CyA在药理浓度下无抑制作用。结论T0 与CyA均能抑制T细胞增殖 ,但对上皮细胞的作用不同。     

T肽对人类角质形成细胞的免疫调节作用

T肽 (peptideT)是位于HIV包膜蛋白 gp12 0V2区的一个 8肽分子。据报道T肽有利于银屑病皮损的消退。但其抗炎机制未明。作者目的是研究T肽对角质形成细胞体外表达转化生长因子 - β1,细胞间黏附分子 1,αv整合素 ,以及热休克蛋白 70的影响 ,明确其对角质形成细胞的免疫调节作用。方法 :人类角质形成细胞取自于正常成人的手术切取的皮肤。皮肤经过裂解、消化后获得的角质形成细胞置于完全培养基中培养。使用时角质形成细胞接种至多孔板 ,加入不同浓度 (10 - 8,10 - 7,10 - 6 mol/L)T肽 ,作用时间分别为 4h ,6h ,12h及2 4h。采用蛋白印迹及…     

真菌病

20 0 2 0 0 86　白念珠菌与培养人角质形成细胞的相互作用及其分子机理 /冉玉平 (四川大学华西医院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34 ( 5) .- 336～ 339研究直接作用后的形态学、生物学反应及其分子机理。采用 1将白念珠菌孢子加入角质形成细胞培养系统中定时用扫描和透射电镜观察 ;2用荧光法和计数法测定白念珠菌等与角质形成细胞共同培养上清液对角质形成细胞生长的影响 ;3用 EL ISA法测定白念珠菌或乳胶颗粒与角质形成细胞共同培养上清液和角质形成细胞内液中细胞因子的含量。结果 1发现与角质形成细胞粘附的白念珠菌随时间经过而增加 ,灭活的白念珠菌几乎不发生粘附 ,乳胶颗粒与角质形成细胞粘附后被吞噬。角质形成细胞伸出很多纤维样结构与菌体或乳胶颗粒粘附 ;2白念珠菌与角质形成细胞共同培养液在 50 %浓度下可显著促进角质形成细胞增殖 ,灭活的白念珠菌或乳胶颗粒与角质形成细胞共同培养液对角质形成细胞增殖有一定的促进作用 ;3白介素 1a在白念珠菌与角质形成细胞共同培养上清液中增高 ,但细胞内液中下降 ,转化生长因子 -α和碱性成纤维细胞生长因子在上清液及细胞内液中水平均增高。结...     

常用治疗银屑病的中药对肿瘤坏死因子-α刺激后角质形成细胞生长及分泌白介素-8的影响

目的研究常用中药治疗银屑病的作用机制。方法采用体外细胞培养技术,观察常用于治疗银屑病的8味中药提取液对角质形成细胞生长及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激后角质形成细胞分泌细胞因子白介素-8(IL-8)的影响。结果多数中药表现出抑制角质形成细胞增殖的作用,其中牡丹皮、赤芍、金银花、拳参、全蝎、苦参还表现出拮抗TNF-α刺激后角质形成细胞分泌IL-8的作用。结论初步证明几种常用于治疗银屑病的中药具有抑制TNF-α刺激后角质形成细胞增殖及分泌IL-8作用,从细胞生物学水平探讨了中药抗银屑病作用机制。     

微小RNA主导的免疫调节在银屑病发病机制中的研究现状

银屑病是一种慢性皮肤炎症性疾病,以炎症反应、角质形成细胞增殖加速和表皮更替频繁为主要病理特点,其发病机制复杂,由固有免疫、适应性免疫及其相关免疫细胞和细胞因子参与的免疫调节在其中发挥重要作用.微小RNA参与多种生物学过程,包括细胞增殖、分化、凋亡及器官形成和发育等,与机体免疫调节密切相关.微小RNA可能通过对T细胞、角质形成细胞、固有免疫细胞以及细胞因子的调控参与到银屑病发病.     

γ—干扰素诱导角质形成细胞凋亡及其Fas抗原表达研究

目的：探讨γ－干扰素在银屑病发病中的作用。方法 通过流式细胞仪测定角持形成细胞中亚二倍体细胞含量、片段化DNA分析及AnnexinV法检测经γ－干扰素诱导的角质形成细胞凋亡;采用组织化学、流式细胞仪测定经γ－干扰素作用后的角质形成细胞Fas抗原表达。结果 γ－干扰素上调角质形成细胞Fas抗原表达（P＜0．01）,诱导角质形成细胞凋亡（P＜0．01）。结论 γ－干扰素可能通过上调角质形成细胞Fas抗原表达,进而诱导角质形成细胞凋亡而参与银屑病发病。     

成纤维细胞在银屑病发病机制中的作用

银屑病是一种以角质形成细胞的过度增殖和异常分化为特征的慢性炎症性皮肤病。银屑病全层皮肤均存在异常,多种细胞和细胞因子在银屑病发病中起重要作用。成纤维细胞作为真皮组织的重要组成部分,在皮肤组织创伤修复方面发挥作用;还为角质形成细胞的增殖、分化和成熟提供合适的微环境;可通过表达某些黏附分子、受体或表面标记及分泌多种细胞因子,影响其他细胞的功能,从而在银屑病发展中起重要的调节作用。     

γ-干扰素诱导角质形成细胞表达抗原呈递相关分子研究进展

角质形成细胞具有广泛的免疫学特性 ,在某些疾病状态下 ,角质形成细胞可表达主要组织相容性复合体Ⅱ类分子及细胞间粘附分子 -1 ,表明其具备了抗原呈递细胞的基本条件 ,在诱导上述两类分子表达过程中 ,γ-干扰素发挥着重要作用 ,对有关研究进展进行综述。