下颌骨牵张成骨中神经生长因子促进骨痂固化的动物实验

目的 明确神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在牵张成骨中促进骨痂固化的作用,为缩短固定期提供新思路.方法 新西兰白兔20只接受速率为0.5 mm/12 h的双侧下颌骨同步牵张成骨.在固定期早期,向一侧下颌骨新生骨痂中两次注射人类NGF-β溶液(0.04 mg/次),另一侧注射安慰剂.在固定期第14天(n=8)、第28天(n=8)取材,下颌骨标本接受机械强度测试和骨组织学定量分析.结果 与对照侧相比,在固定期第14和28天的NGF处理侧,骨痂最大负载值和骨量百分比均明显提高(P＜0.05).骨量百分比对照侧为(33.0±4.9)%、(52.8±8.8)%,实验侧为(49.8±11.6)%、(66.5±14.9)%.结论 局部注射的人NGF-β溶液能够促进兔下颌骨牵张成骨中新生骨痂的固化,这为缩短固定期提供了一种新的思路.     

重组人骨形成蛋白-2促进兔下颌牵张成骨的研究

目的　研究局部应用基因重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对兔下颌牵张成骨的影响。方法　在12只成年大耳白兔的双侧下颌骨前部行骨切开术,将rhBMP-2与胶原复合植入一侧下颌骨切开处,另一侧单纯植入胶原作对照。用自行研制牵张器延长双侧下颌骨6 mm,在牵张结束后第4周处死动物,取双侧牵张区新生骨痂行组织学、扫描电镜及Ca/P元素测定。结果　下颌延长后两侧牵张间隙均有新骨形成,应用rhBMP-2的一侧牵张骨痂中的新骨组织比对照侧多而成熟,钙化程度较高。结论　基因重组人骨形成蛋白-2可能有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

腺病毒介导的人骨形成蛋白2基因转染促进下颌牵张成骨的实验研究

目的探讨局部应用腺病毒介导的入骨形成蛋白2（adenovirus vectors containing human bone morphogenetic proteins 2, Ad-hBMP-2）对兔下颌骨牵张成骨的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组（12只）和对照组（12只），并建立下颌骨双侧牵张成骨模型。经过5d潜伏期后，以0．5mm／12h的速度牵张7d。固定期第1天，在实验组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的Ad-hBMP2，对照组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白。在固定期第7、14、28天对下颌骨牵张区进行骨密度及新生骨量比较。结果Ad-hBMP-2治疗组牵张区骨密度及新生骨量明显高于对照组。结论腺病毒介导的人骨形成蛋白2具有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

丹参酮Ⅱa磺酸钠对兔下颌骨牵张成骨促进作用的研究

目的：探讨丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液对兔下颌骨牵张成骨的作用。方法：将12只大耳白兔随机分为对照组和实验组,建立单侧兔下颌骨牵张成骨模型,实验组自牵张期开始每日注射丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液3mL,并分别于固定期1周、4周、7周各处死2只对照兔和2只实验兔,对标本进行大体观察、X线观察、组织学观察和骨组织计量学观察。结果：实验组动物牵张间隙内新骨形成速度及质量均优于对照组,实验组成骨细胞活跃,骨小梁较成熟,单位面积内成骨细胞个数及骨小梁面积百分比均高于对照组。结论：丹参酮Ⅱa磺酸钠对兔下颌骨牵张成骨过程具有促进作用。     

局部应用β1转化生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的：研究外源性β1转化生长因子对牵张成骨的作用。方法：将16口大耳白兔随机分为A、B两组，每组8只。在兔双侧下颌骨前部行骨切开术后用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm。从牵张开始第1天在A组动物牵张区每日注射TGF－β140ng，连续12d。不注射TGF－β1的B组动物用作对照。在牵张结束后第2和第4周分别处死A、B两组各4只动物，取下颌骨标本及牵张区新生骨痂进行X线和组织学检查。结果：注射TGF－β1的A组动物牵引间隙内新骨形成并不优于B组动物。相反，在第2周时还发现有较多的纤维组织和软骨形成。结论：导入外源性TGF－β1可能没有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

定量缓释rhBMP-2纳米微粒促进兔下颌骨牵张成骨的实验研究

目的:制备可定量缓释的rhBMP-2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微粒缓释剂,进行体外释药特性研究,并在兔下颌骨牵张成骨中局部应用以促进成骨。方法:采用乳化溶液聚合法制备rhBMP-2纳米微粒注射剂。将18只新西兰大白兔随机分为2组,每组9只,建立兔下颌骨双侧牵张成骨动物模型。实验组自牵张期开始,于牵张间隙注射rhBMP-2纳米微粒连续10d,对照组注射等量不含rhBMP-2的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米乳液。牵张后固定期第1、3、6周,分别检测血清骨钙素含量和ALP活性,进行影像学、组织形态学观察,并对下颌骨新生骨进行生物力学和骨矿物密度检测。两组间均值比较采用t检验,以SPSS11.0软件包进行统计学分析。结果:电镜下rhBMP-2纳米微粒形态规整,rhBMP-2的包封率为78%。体外缓释试验表明,纳米微粒中rhBMP-2至少可以维持10d以上。在兔下颌骨牵张成骨中,应用rhBMP-2纳米微粒组的新骨形成速度、质量均高于对照组;固定后6周,实验组骨矿物密度平均为(0.719±0.004)g/cm2,对照组为(0.564±0.020)g/cm2,P<0.01;实验组下颌骨三点弯曲试验结果平均为(92.143±10.795)N/mm,对照组为(55.266±0.774)N/mm,P<0.05。结论:rhBMP-2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微粒具有确定的缓释作用,能够有效维持rhBMP-2浓度及活性,延长rhBMP-2的作用时间,可作为注射性骨诱导制剂。局部应用rhBMP-2,可以促进下颌骨牵张成骨的成骨速度及质量。     

兔双侧下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立

目的:建立兔双侧下颌骨牵张成骨实验动物模型。方法:选用16只成年雄性新西兰大白兔,随机分为4组,每组4只。在双侧下颌骨第一前磨牙前方无牙区行骨切开术,用自制牵张器固定。经过7d潜伏期,以每次0.5mm的速度牵张,每天2次,连续7d。分别在潜伏期末、牵张结束、固定期第14天、第28天处死动物,切取标本行X线和组织学观察。结果:全部动物的下颌骨被成功延长,牵张间隙逐渐被新生骨组织充填。结论:该方法建立的动物模型具有可行性和可重复性。     

下颌骨牵张成骨过程中TGF-β1动态表达的实验研究

目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在牵张成骨过程中时间和空间上的表达,探讨TGF-β1发挥的作用及其作用机制。方法:选用成年新西兰大白兔16只,行两侧下颌骨切开术,经7天间歇期后以0.5mm/12h的速度牵张,7d后固定。分别于间歇期1d、7d,牵张期1d、4d、7d,固定期1、3、5周随机处死2只动物取下颌骨标本,运用SABC免疫组织化学染色方法,对不同时间段的下颌骨标本进行TGF-β1的检测。结果:TGF-β1在潜伏期和固定期表达较弱,牵张期表达明显增强,在牵张第7天表达达高峰,且集中表达于未分化间充质细胞、成纤维细胞、成软骨细胞和成骨细胞。结论:TGF-β1在牵张成骨过程中,发挥着较为重要的作用。有望利用外源性TGF-β1提高牵张成骨形成骨的质和量,从而为牵张成骨术更好地应用于临床提供理论基础。     

放疗对兔下颌骨牵张成骨骨再生的影响

目的：探讨兔下颌骨放疗后牵张成骨（DO）的可行性及其骨再生的特点。方法：将12只成年新西兰大白兔随机分为放疗组和未放疗组，每组6只：放疗组用^60Co机照射大白兔下颌骨，5．4Gy／次，隔天1次，共5次，总剂量为27Gy。3个月后，在2组动物下颌骨的双侧截骨处安装牵张器，经5天延迟期开始牵张，速率为1mm／d，0．5mm／次，每天2次．连续7d，共延长下颌骨7mm．固定期的第4、6周拍摄下颌骨侧位X线片，取双侧新生骨痂行组织学和扫描电镜检查，观察其成骨特征。结果：X线片显示，2组动物同一固定时间牵张间隙内透射密度无明显差异；组织学观察显示，牵张区以膜内成骨为主，但放疗组有更多的软骨形成，放疗组较未放疗组新骨骨小梁细小、稀疏；扫描电镜示同定第6周时，放疗组新骨不如未放疗组致密、成熟。结论：在兔下颌骨放射损伤区行DO是可行的，但成骨质量较差，成骨方式以膜内成骨为主，放射线照射可促进软骨成骨。     

TGF-β1在下颌骨牵张成骨中的局部表达及作用的实验研究

目的 :探讨下颌骨牵张成骨过程中的TGF β1在局部表达及其作用。 方法 :采用免疫组化定性及ELISA定量方法检测狗下颌骨牵张成骨中不同时间点TGF β1变化水平 ,并对照观察狗下颌骨骨不连中TGF β1的变化。结果 :ELISA定量检测中可见牵张组中骨痂组织TGF β1的表达在牵张中 6d ,牵张固定 2周 ,牵张固定 8周 ,均比骨不连组及正常组高 ;免疫组化染色可见阳性着色主要定位于牵张中 6d牵张区边缘活跃的成骨细胞及新生的血管壁周围 ,牵张固定 2周牵张区中间新形成的类骨质周围的活跃成骨细胞及基质 ,牵张固定 8周牵张区中间新形成与牵张力平行的骨小梁边缘的成骨细胞及基质。结论 :对狗下颌骨进行牵张成骨的过程中 ,机械的牵张力刺激 ,可使局部牵张区TGF β1持续较高表达 ;持续较高表达的TGF β1可能参与促进了牵张区新骨的形成     

下颌骨缺损牵张成骨动物模型的建立

目的建立兔下颌骨缺损牵张成骨动物模型,为进一步研究牵张成骨奠定实验基础。方法25只健康成年兔随机分成6组,实验组5组,每组4只,对照组1组共5只。25只兔均行一侧下颌骨切开截骨术,实验组安置自行设计的下颌骨牵张器,经6 d间歇期后,以每天2次,每次0.4 mm的速度牵张8 d进入固定期,于牵张中期(牵张第4天)、牵张末期(牵张第8天),固定期第2、4、6周分别处死4只动物;对照组术后仅保持缺隙而不牵张,与实验组对应的每个时间点处死1只动物,取下颌骨观察骨愈合情况。结果牵张器牵张效率好,固位稳定,实验组动物的下颌骨被成功牵张,牵张区可见新骨形成。实验对照组表现为不同程度的骨不连及骨缺损。结论本研究建立的兔下颌骨缺损牵张成骨模型是较理想的动物模型。     

bFGF—in vivo基因治疗促进兔下颌牵张成骨的实验研究

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因促进兔下颌牵张成骨的可行性。方法：选用16只新西兰白兔,建立下颌牵张模型后随机分为实验组和对照组。在牵张结束的最后1d,对实验组的牵张间隙内注入转染重组腺病毒（Ad5一bFGF）,而对照组的牵张间隙内则注入生理盐水。并于牵张结束后4周处死所有实验动物,将取下的下颌骨标本分别进行影像学和组织学分析。结果：影像学、组织学以及三维CT重建结果证实：实验组牵张间隙内新骨形成的量明显高于对照组;双能X线（DXA）分析也显示实验组牵张间隙内新骨的骨密度（BMD）和骨矿物质含量（BMC）均明显高于对照组。结论：bFGF—invivo基因治疗可有效地促进DO过程中的新骨形成。     

Runt相关基因2修饰的骨髓间充质干细胞促进兔下颌骨牵张成骨的研究

目的探讨Runt相关基因2（Runx2）修饰的自体骨髓间充质干细胞（MSCs）促进兔下颌牵张成骨新骨形成的可行性。方法 将48只成年雄性新西兰大白兔随机分为3组：A组为Runx2重组质粒组,B组为不含Runx2重组质粒组,C组为生理盐水对照组。建立兔下颌牵张成骨模型;于牵张的第5天,A组兔牵张间隙内注射转染重组质粒adv-hRunx2-gfp的自体骨髓MSCs;B组注射转染adv-gfp质粒的自体骨髓MSCs;C组注射同体积生理盐水。在牵张结束后第8周处死所有动物,进行大体、影像学、组织学观察和三点弯曲测试。结果 CT平扫及组织学结果表明,A组牵张间隙内新骨形成和骨痂密度均明显高于B、C组;双能X线及三点弯曲测试表明,A组牵张间隙内新生骨组织密度、新生骨矿物质含量及最大载荷均高于B、C组（P<0.01）。结论 基于MSCs的Runx2体外基因治疗可有效地促进牵张成骨新骨形成,从而缩短固定期,为临床颅颌面骨缺损的重建提供一个极具价值的修复策略。     

Effects of locally applied nerve growth factor to the inferior alveolar nerve histology in a rabbit model of mandibular distraction osteogenesis

Distraction osteogenesis (DO) is widely used in deformities and defects of the craniofacial bone. Accelerating inferior alveolar nerve (IAN) recovery would aid the process. Nerve growth factor (NGF) plays a vital role in peripheral nerve regeneration. In this study, the ability of locally applied human NGF beta (hNGFβ) to enhance the morphological recovery of the IAN in a rabbit model of mandibular DO was studied. Rabbits underwent bilateral DO with a rate of 0.5 mm per 12 h. Two doses of 40 μg hNGFβ in buffer were injected into callus at the beginning the of consolidation time. The contralateral side received injections of placebo. Rabbits were killed at 14 and 28 days. IAN specimens were subjected to histological and histomorphometric analysis. In both 14 and 28 days consolidation experiments, nerve histological analysis showed less degeneration and more regeneration in nerve fibers on the hNGFβ treated side than the control side. Histomorphometric analysis showed that the myelinated fiber density on the hNGFβ treated side was significantly higher than on the control side (p < 0.01). The data indicate that locally applied hNGFβ can accelerate the morphological recovery of the IAN and may play a role in reducing nerve injury in mandibular DO clinically.     

弱激光对牵张成骨作用的实验研究

目的：探讨弱激光对牵张成骨作用的影响。方法：将家兔下颌牵张成骨实验模型分为两组，A组接受弱激光照射，B组未接受弱激光照射。采用彩色病理图像测量系统对两组定量分析，比较新骨形成情况。结果：在牵张成骨过程中，A组骨小梁形成明显优于B组(P＜0．01)。结论：弱激光能加速骨形成，促进牵张成骨。     

兔下颌骨牵张成骨模型的建立

目的建立兔下颌骨牵张成骨动物模型。方法随机选取新西兰大白兔28只,施行双侧下颌骨切开术,安放牵张器,间歇1周后以0.4 mm/12 h的速度牵张,牵张7 d后固定,在不同时间随机处死动物2只,取下颌骨标本分别行影像学和组织学观察。结果实验动物均耐受手术,并基本获得预期牵张距离,影像学和组织学观察发现,裂隙内随时间延长渐有骨形成。结论以兔下颌骨建立牵张成骨模型经济、可重复性好。     

Animal model for evaluation of strain gauge in mandibular distraction osteogenesis in rabbits

AIM: To design and assemble a distraction device with a strain gauge, and establish an animal model for testing it during mandibular distraction osteogenesis. METHODS: An osteotomy was made in the same position at the junction of mandibular angle and body in 12 rabbits. A customised distraction device attached to a strain gauge was used to distract the mandible. To find out which was the better material, both polyurethane and silicone were used as encapsulation material. After distraction, radiographs were taken, and specimens were examined histologically to record bone formation. RESULTS: Distraction osteogenesis was carried out successfully on all rabbits when the device used polyurethanes as the encapsulation material, it did not transfer the strain signals, but those made with silicone did. CONCLUSION: The device with silicone used as the encapsulation material can be used for strain-testing during mandibular distraction osteogenesis in a rabbit model.     

引导组织再生膜促进兔下颌骨牵张成骨的实验研究

目的 探讨引导组织再生膜（GTRM）对兔下颌骨牵张成骨新骨形成的促进作用。方法 将20只新西兰大白兔随机分为2组,每组10只,建立兔下颌骨牵张成骨模型,A组单纯单侧下颌骨牵张成骨;B组将GTRM固定于牵张器内侧行单侧下颌骨牵张成骨。分别于固定期第2、6周时随机处死半数动物获取标本,通过X线、骨组织形态计量学比较2组牵张间隙内成骨效果。采用SPSS11.0软件包对数据进行两样本均数t检验。结果 通过X线及骨组织形态计量学检查并经过统计学分析发现,在固定期第2周和6周时,B组牵张区域内成骨质量显著好于A组（P<0.05）。结论 引导组织再生膜能有效促进兔下颌骨牵张成骨区域新骨的形成。     

Mandibular distraction osteogenesis: a rabbit model using a novel experimental design.

PURPOSE: Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that targets bone regeneration and elongation, currently used in the treatment of many craniofacial deformities. The quest for optimization of DO clinical parameters has led to the development of a variety of animal models. Our study aims to establish a rabbit animal model of mandibular DO, in which the control osteotomy and distraction device are placed on the opposite hemimandible from the one being distracted, within the same animal host. Furthermore, we propose to histologically characterize the different stages or distraction and consolidation in the same animal model. MATERIALS AND METHODS: Twenty-five rabbits underwent mandibular osteotomies and bilateral placement of distraction devices. After a latency of 3 days, the distraction device was activated on one side of each animal at a rate of 0.5 mm/12 hours for 7 days, while the other side remained inactive (control). This was followed by a consolidation period of 14 days. Five animals per time-point were killed on days 3, 7, 10, 17, and 24. RESULTS: Gross tissue analysis showed a 7-mm callus formation at the distracted side and a well-healed osteotomy in the non-distracted side. Clinically, a unilateral Class III malocclusion occurred in the distracted side. Histology at each time-point shows new bone formation and orientation of the bony spicules along the axis of the mechanical strain. CONCLUSIONS: We have established and characterized an animal model of mandibular DO that outlines valid biologic controls and provides thorough monitoring of the DO process.