隐丹参酮对宫颈癌细胞系Hela细胞放射增敏作用及其机制的研究

丹参的主要抗肿瘤活性成分一丹参酮（tanshinone）,是一组脂溶性菲醌类成分。隐丹参酮是丹参中提取的脂溶性成分之一,主要通过抑制细胞增殖、促进凋亡、影响细胞周期分布以及促进分化等机制发挥抗肿瘤作用。通过化学药物有目的地改变细胞周期,进而增强放疗敏感性,对肿瘤的治疗可能有重要意义。本实验主要研究隐丹参酮对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性、放射增敏作用及其对细胞周期的影响,进一步了解其作用机制,为隐丹参酮应用于宫颈癌放射增敏治疗提供临床依据。     

β-榄香烯对人肝癌细胞株的体外放射增敏作用

目的通过体外实验探讨β-榄香烯对人肝癌细胞株的放射增敏作用机制。方法用克隆形成法检测不同时间-浓度条件β-榄香烯和／或放射作用后的人肝癌细胞株存活分数，计算放射增敏率（SER）。用流式细胞仪分析不同时间-浓度条件下β-榄香烯对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果10、100、1000nmoL／L β-榄香烯作用24h后SER分别为1．32，1．71和1．36。β-榄香烯作用时间和浓度越高，人肝癌细胞G2／M期的比率也越高。100、1000nmoL／L β-榄香烯作用24h后，G2／M期比率明显升高。10nmol β-榄香烯作用24h细胞凋亡百分率20．71％。结论β-榄香烯对人肝癌细胞有放射增敏作用，其作用机制可能与对诱导肝癌细胞凋亡和β-榄香烯对细胞的G2／M期阻滞有关。     

吡柔比星在骨肉瘤细胞放射增敏中的作用研究

目的研究吡柔比星在骨肉瘤细胞MG-63的放射增敏中的作用。方法用MTF法检测不同浓度吡柔比星对对数生长期的MG-63细胞的抑制作用,确定IC10的数值,作为实验的药物浓度。用克隆形成分析法测定MG-63细胞在IC10浓度吡柔比星作用24h后给予不同剂量（0、2、4、6、8Gy）照射以及IC10浓度紫杉醇作用不同时间（12、24、36h）后给予一定剂量射线照射的存活分数（SF）,拟合细胞生存曲线并计算放射增敏比,分析吡柔比星作用于MG．63细胞不同时间（12、24、36h）后细胞生存率的变化。结果不同浓度吡柔比星作用24h后,MG-63细胞抑制率逐渐增高（P〈0．01）,其药物毒性呈浓度依赖性,IC10为0．004μg／ml。ICIO浓度吡柔比星增敏比分别1．49（DO比）、1．06（Dq比）和1．04（SF2比）,MG石3细胞a／13值为2．23,IC10浓度吡柔比星作用后为0．27。ICIO浓度吡柔比星作用于MG-63细胞不同时间后再进行照射,细胞存活分数随时间延长逐渐降低（P〈0．01）。结论吡柔比星对MG-63细胞有放射增敏作用,在一定时间内与药物作用时间呈正相关。     

青蒿琥酯对人结肠腺癌细胞的放射增敏作用

目的 研究青蒿琥酯对人结肠腺癌SW480细胞的放射增敏作用。 方法 用MTT法测定青蒿琥酯的半数抑制浓度(IC₅₀)。将SW480细胞分为4组：对照组、药物组(给予20% IC₅₀的青蒿琥酯)、照射组(给予6 MV 4 Gy X射线照射)、联合组(经20% IC₅₀浓度的青蒿琥酯培养8 h后,给予6 MV 4 Gy X射线照射)。MTT法测定4组细胞增殖抑制率。再测定细胞集落形成情况,计算细胞集落形成率(PE),细胞存活分数(SF)。根据多靶单击公式,计算平均致死剂量、外推值、2 Gy时的细胞存活分数和放射增敏比。用流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率。 结果 青蒿琥酯的IC50为20.87 μg·mL^-1。与对照组相比,3个实验组的细胞增殖抑制率和凋亡率有显著差异(P<0.05),而与其他3组相比,联合组的细胞增殖抑制率和凋亡率有显著差异(P<0.05)。放射增敏比为1.38。 结论 青蒿琥酯对人结肠癌腺癌SW480细胞有一定的放射增敏作用,机制可能与促进凋亡有关。     

姜黄素对宫颈癌放射增敏的研究进展

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,其发病率仅次于女性乳腺癌,居第二位,其病死率已跃居妇科恶性肿瘤之首。放射治疗是中晚期宫颈癌的主要治疗手段,但由于宫颈癌对辐射中低度敏感,想达到满意的疗效需提高宫颈癌对辐射的敏感性。近年来,姜黄素因具有提高肿瘤放射敏感性的特性而引起了国内外学者的广泛关注。多项体外实验证实姜黄素对宫颈癌具有抑制及放射增敏作用,本文就其对宫颈癌放射增敏机制进行了归纳总结。现将此方面的研究进展进行综述。     

吉西他滨对人胰腺癌细胞系BxPC-3的放射增敏作用

目的 探讨吉西他滨对人胰腺癌细胞系BxPC-3的细胞毒性、放射增敏作用.方法 用MTT法测定吉西他滨对BxPC-3细胞生长的作用,集落形成法观察其对BxPC-3细胞的放射增敏作用,流式细胞术分析吉西他滨作用后细胞周期及凋亡变化,免疫细胞化学染色观察Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 占西他滨对BxPC-3细胞具有浓度依赖性抑制作用(IC50-106 μg/ml),选择浓度为IC10(0.04μg/ml),可增加X射线对BxPC-3的杀伤作用,放射增敏比SER为1.15.药物浓度为0.04μg/ml时S期细胞比例增高.吉西他滨作用24 h后,细胞Bax表达增加,而Bcl-2表达下降.结论 吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞系有细胞毒性作用和一定的放射增敏作用;其机制可能与吉西他滨引起S期阻滞和调节凋亡相关基因的表达有关.     

放射增敏剂的临床研究进展

分析和探讨利用放射增敏剂提高肿瘤中乏氧细胞对放射疗法(放疗)的敏感性, 能提高放射线对肿瘤细胞的杀伤率, 增强放疗的效果. 理想的放射增敏剂应可以显著增加放疗的疗效, 对正常组织没有或很少有不良反应. 国内外学者进行大量的研究, 在基因和分子靶向药物等方面取得新进展, 显示未来放疗增敏剂发展的趋势.     

苦参碱对宫颈癌Hela细胞的作用

目的:观察不同浓度的苦参碱对宫颈癌Hela细胞的作用。方法:浓度分别为0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml的苦参碱体外培养Hela细胞24h、48h、72h后,分别用MTT法观察苦参碱对Hela细胞的生长抑制作用、AnnexinV-PI双标染色用流式细胞仪检测苦参碱对Hela细胞凋亡的影响。结果:不同浓度的苦参碱具有抑制宫颈癌Hela细胞增殖的作用,呈明显的时间、剂量依赖性。各浓度和时间之间比较具有显著差异性(P<0.01)。FCM检测结果显示苦参碱作用后,细胞的凋亡率增加,呈现随时间和剂量依赖性。各浓度和时间之间比较也具有显著差异性(P<0.01)。结论:苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用,能诱导肿瘤细胞的凋亡。     

姜黄素对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用

目的:研究姜黄素对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用。方法:姜黄经75%乙醇提取、纯化得姜黄素。MTT法检测姜黄素对体外培养Hela细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜观察Hela细胞形态学变化;Western blot法检测抑癌基因p53蛋白的表达;流式细胞仪检测Hela细胞凋亡和周期分布。结果:姜黄素对Hela细胞生长24 h的最佳抑制质量浓度为116.68μg/ml,抑制率为63.20%;11.67、35.00、58.34μg/ml姜黄素培养24 h,人宫颈癌Hela细胞数目明显减少,细胞变圆、缩小、老化,核质发散,并与质量浓度呈正相关。29.17、145.85μg/ml姜黄素可增强p53蛋白的表达;11.67、35.00、58.34μg/ml姜黄素可促进人宫颈癌Hela细胞凋亡,并与质量浓度呈正相关,G0/G1期细胞和S期细胞逐渐减少,G2/M期细胞逐渐增多。结论:姜黄素对人宫颈癌Hela细胞增殖有明显抑制作用,并能促进其凋亡和p53的表达,阻滞Hela细胞的G2/M期。     

喷昔洛韦对宫颈癌细胞系抑制作用的研究

目的喷昔洛韦9位取代鸟嘌呤化合物,在体内外对单纯疱疹病毒I型(HSV-I)、II型(HSV-II),带状疱疹病毒(VIV)有良好的抑制作用。我们从基础研究入手,在细胞水平上探讨喷昔洛韦对HPV(人乳头瘤病毒)相关细胞系的作用,为扩大此药的治疗适应症提供新的思路。方法采用不同来源的宫颈癌细胞系CaSki(HPV16型阳性的人宫颈鳞状上皮细胞系)、Hela(HPV18型阳性的人宫颈腺上皮细胞系)、N(由HPV16E6/E7基因和HSV的N片断共转染得到的恶性转化宫颈鳞状上皮细胞系)和2BS(人正常纤维细胞)及原代培养的正常人鳞状上皮细胞,加入不同浓度的喷昔洛韦,测定不同细胞在喷昔洛韦药物作用下的半数致死浓度(ED50),喷昔洛韦对上述细胞的ED50分别是2.5×10-3mol.L-1,7.5×10-3mg.L-1,2.5×10-3mg.L-1,5.0×10-3mg.L-1,15.0×10-3mg.L-1。选择合适的喷昔洛韦浓度加到各种细胞系中,在不同时间下,用倒置显微镜观察细胞的形态结构改变及测定了各种细胞的生长速度(生长曲线),用透射电子显微镜观察了细胞的超微结构变化。结果选择7.5×10-3mol.L-1喷昔洛韦作用于不同细胞,比较各自变化。作为阳性对照的N细胞24h后出现死亡,加药的第4d细胞几乎死亡殆尽,CaSki与N细胞的改变相近,表明喷昔洛韦药物对鳞状上皮细胞抑制作用最强;对HeLa细胞抑制程度相对较弱;对2BS细胞也有较强抑制作用;对正常人原代上皮细胞抑制作用不明显。生长受抑制的细胞在电镜观察下呈现不同程度的坏死改变。结论喷昔洛韦对HPV相关细胞系有一定的抑制作用,可以进一步探讨此药对HPV引起的组织病变的治疗作用。     

沙利度胺对人宫颈癌Hela细胞周期的影响探讨

目的观察沙利度胺(THD)对人宫颈癌Hela细胞周期形成的影响。方法利用不同浓度的THD(50μg/mL、100μg/mL与200μg/mL)处理人宫颈癌Hela细胞,利用流式细胞术检测细胞周期分布情况。结果不同浓度的THD作用于人宫颈癌Hela细胞,能明显降低细胞活力,且体现出浓度依赖性(P <0.05);作用24 h后,Hela细胞G0/G1期细胞数目增加显著(P <0.05);S期细胞显著减少(P <0.05)。另外,THD持续处理Hela细胞24 h后,p-p53/p53比值显著增加(P <0.05)。结论 THD对人宫颈癌Hela细胞周期形成有较明显的抑制作用。     

Growth Inhibition and Apoptosis-Induced Effect on Human Cancer Cells of Toosendanin,a Triterpenoid Derivative from Chinese Traditional Medicine

Summary Toosendanin, a triterpenoid derivative isolated from the barks of Melia toosendan Sieb et Zucc, has been used as an anthelmintic vermifuge against ascaris for more than fifty years in China. In the present study, we investigated the growth inhibition and apoptosis-induced effect of toosendanin on human cancer cells. The result showed that toosendanin significantly suppressed the proliferation of tested human cancer cell lines. The IC₅₀ values were less than 1.7 × 10⁻⁷ M and U937 was the most sensitive cell line with a IC₅₀ of 5.4 × 10⁻⁹ M. Flow cytometric analysis revealed that treatment of U937 cells with toosendanin resulted in a dose- and time-dependent accumulation of cells in the S phase with a concomitant decrease in cells processing to G₀/G₁ phase. The growth inhibition of U937 cells after exposure to toosendanin was subsequently associated with the induction of apoptosis, as evidence by the typical condensed and fragmented nuclei, DNA fragmentation, and exposure of phosphatidylserine on the outer leaflet of plasma membrane. All these results indicated that toosendanin could serve as a potential candidate for anticancer drug.     

康定地区人工种植掌叶大黄的HPLC指纹图谱研究

目的:研究康定地区人工种植掌叶大黄的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:色谱柱为Shim-packVP-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.1%磷酸甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为280nm。结果:建立了康定地区人工种植掌叶大黄的HPLC指纹图谱,确定了56个共有峰,并且对10批药材进行了相似度计算,建立了共有模板。结论:本方法简单可行,能够从整体上反映康定地区人工种植掌叶大黄的质量。     

Two new anthraquinone glycosides from the roots of Rheum palmatum

Two new anthraquinone glycosides, named 1-methyl-8-hydroxyl-9,10-anthraquinone-3-O-β-D-(6'-O-cinnamoyl)glucopyranoside (1) and rhein-8-O-β-D-[6'-O-(3'-methoxyl malonyl)]glucopyranoside (2), have been isolated from the roots of Rheum palmatum, together with seven known compounds, rhein-8-O-β-D-glucopyranoside (3), physcion-8-O-β-D-glucopyranoside (4), chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside (5), aleo-emodin-8-O-β-D-glucopyranoside (6), emodin-8-O-β-D-glucopyranoside (7), aleo-emodin-ω-O-β-D-glucopyranoside (8), and emodin-1-O-β-D-glucopyranoside (9). Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectral analysis.     

超声聚焦刀对胰腺癌细胞的生长抑制作用及机理研究

目的应用免疫组织化学分析胰腺癌细胞中bcl-2蛋白,研究超声聚焦刀对bcl-2蛋白表达的关系。方法以对胰腺癌Capan-1细胞、胰腺癌患者超声聚焦刀治疗前后的穿刺组织（18例）为研究对象,采用免疫组织化学（SP法）检测bcl-2的表达。结果无转移、高分化的胰腺癌bcl-2蛋白明显高于有转移和低分化的胰腺癌。结论bcl-2蛋白可能作用于胰腺细胞的癌变阶段,超声聚焦刀治疗后对bcl-2蛋白表达有明显减低。     

Two new anthraquinone glycosides from the roots of Rheum palmatum

Two new anthraquinone glycosides, named 1-methyl-8-hydroxyl-9,10-anthraquinone-3-O-β-d-(6′-O-cinnamoyl)glucopyranoside (1) and rhein-8-O-β-d-[6′-O-(3″-methoxyl malonyl)]glucopyranoside (2), have been isolated from the roots of Rheum palmatum, together with seven known compounds, rhein-8-O-β-d-glucopyranoside (3), physcion-8-O-β-d-glucopyranoside (4), chrysophanol-8-O-β-d-glucopyranoside (5), aleo-emodin-8-O-β-d-glucopyranoside (6), emodin-8-O-β-d-glucopyranoside (7), aleo-emodin-ω-O-β-d-glucopyranoside (8), and emodin-1-O-β-d-glucopyranoside (9). Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectral analysis.     

利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响研究

目的:研究利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响。方法:以A549、Hela细胞为模型细胞,分别分为对照组和利巴韦林低、中、高剂量(20、40、80μmol/ml)组,作用24 h后检测各组细胞的存活率、迁移能力、凋亡情况、酸性膜泡积累情况、自噬标志蛋白LC3(以LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ为指标)的表达情况。结果:与对照组比较,利巴韦林能降低A549、Hela细胞的存活率(中、高剂量组差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)和迁移能力,增加A549、Hela细胞的凋亡率(低、中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)、酸性膜泡积累数量与剂量呈反相关,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.01),作用与剂量呈正相关。结论:利巴韦林可能通过诱导细胞自噬降低A549、Hela细胞的迁移并诱导其凋亡。