FXR调控下Bsep在高脂血症大鼠胆固醇代谢中的作用机制

目的探讨在法尼基衍生物X受体(FXR)调控下胆盐输出泵(Bsep)在高脂血症大鼠胆汁酸及胆固醇代谢中的作用,为高脂血症的预防和治疗提供新的理论基础和治疗靶点。方法使用Wistar大鼠60只,随机分为2组,每组30只,实验组饲养高脂饮食,对照组饲养普通饮食。喂食3个月,定期测定大鼠体质量情况,并取血用自动生化仪检测与脂类相关生化指标,待成功建立高脂血症大鼠模型后,取实验组和对照组肝脏组织,石蜡包埋切片后用免疫组化SP法检测2组大鼠肝脏组织的FXR及Bsep表达强度。结果实验组大鼠各脂类相关生化指标含量高于对照组(P<0.05);免疫组化SP法结果显示,实验组与对照组FXR表达阳性率、Bsep表达阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以FXR及Bsep为靶点可为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗依据和方向。     

FXR在高脂血症大鼠肝组织中的表达状况

目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在高脂血症大鼠中的表达状况,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础.方法:取♂Wistar大鼠70只,随机均分为2组,对照组予以普通饮食、实验组予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型后,取对照组和实验组肝脏组织:(1)应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的F X R基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的FXR蛋白表达的强度.结果:实验组胆固醇及甘油三酯含量明显高于对照组.(1)电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425bp扩增带和FXR基因的283 bp扩增带,实验组FXR基因扩增带亮度强于对照组;(2)免疫组织化学SP法结果显示,实验组FXR表达阳性率为79%,对照组FXR表达阳性率为14.3%,差异具有统计学意义(P0.05).结论:实验组大鼠的FXR基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于FXR的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.     

普罗布考对高脂血症兔肝功能及胆汁酸受体表达的影响

目的观察普罗布考对高脂血症兔肝功能及肝脏胆汁酸受体(FXR)mRNA表达的影响。方法16只新西兰大白兔给予高脂饲料饲养8周后,随机分为:(1)高胆固醇组(n=8):继续饲以高脂饲料6周;(2)普罗布考组(n=8):在饲以高脂饲料的基础上给予1%普罗布考,共6周。正常饲料组(n=8):另选8只饲以普通饲料14周的兔为对照组。动态观察肝功能变化,实验结束后,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肝脏FXR mRNA的表达。结果①普罗布考治疗6周后,血清总胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均明显下降;②普罗布考组谷丙转氨酶(ALT)(45.34±14.91)U/L及谷草转氨酶(AST)(49.68±15.84)U/L,较高胆固醇组[ALT(67.20±17.34)U/L,AST(81.36±22.97)U/L]均明显降低,P均<0.01;③与高胆固醇组比较,普罗布考组血清总胆汁酸(TBA)(46.11±18.58)mmol/L vs(56.34±20.67)mmol/L,总胆红素(T-BIL)均明显降低,为(3.04±1.06)mmol/L vs(5.34±1.38)mmol/L,P均<0.05;④肝脏FXR mRNA的表达明显增加,为0.86±0.05 vs 0.62±0.06,P=0.018。结论普罗布考具有护肝作用,其降低HDL-C可能与上调FXRmRNA的表达有关。     

2型糖尿病大鼠肝胆汁酸代谢的变化

目的 探讨2型糖尿病大鼠肝胆汁酸代谢的变化.方法 35只SD雄性大鼠随机分为对照组15只和糖尿病组20只,分别喂以标准饲料和高脂饲料,8 w后通过口服糖耐量实验,胰岛素敏感指数(ISI),证实是否产生胰岛素抵抗.出现胰岛素抵抗的大鼠注射小剂量链脲佐菌素(STZ)以诱导2型糖尿病.成膜大鼠继续用高脂饲料喂养4 w,每组随机取10只大鼠,总胆管插管收集胆汁,股动脉采血,并留取部分肝组织.检测血生化指标,胆汁中胆汁酸、胆固醇和磷脂的浓度,RT-PCR检测胆汁酸代谢有关基因LXRα、CYP7A1、ABCG5和ABCG8 mRNA表达.结果 与对照组相比,糖尿病组大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胆汁酸以及胰岛素敏感指数明显升高(P＜0.01),体重明显增高(P＜0.05);与对照组相比较,糖尿病组大鼠胆汁中胆汁酸和胆固醇含量均有明显增加(P＜0.01),磷脂含量也有一定增加(P＜0.05),但胆汁酸和磷脂浓度总和与胆固醇浓度比值下降(P＜0.01);糖尿病组LXRα、CYP7A1、ABCG5和ABCG8 mRNA水平均明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 2型糖尿病状态下,肝胆汁酸合成增加,由肝细胞进入胆汁中的胆汁酸和胆固醇均增加,胆结石形成的可能性增大.     

肝纤维化大鼠肝组织Smads基因表达状况及意义

目的:研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织Smad基因表达的变化及其意义.方法:80只健康雄性SD大鼠分为2组:正常组(C组,n=40)和模型组(M组,n=40).以CCl4 sc 法诱导肝纤维化,HE和VG胶原染色观察肝脏胶原沉积情况,原位杂交法及免疫组化法检测肝组织Smads分子表达水平变化.结果:与C组比较,M组大鼠肝脏组织学积分显著增加(3.29±0.68 vs0,P<0.05),平均胶原面积显著增加(290.86±89.37 μm2 vs 56.12±21.45 μm2,P<0.01),肝组织Smad4蛋白表达率较C组明显增加(4.27%±0.43% vs 2.86%±0.86%,P<0.05),而Smad7蛋白表达虽然增加,但水平低下;Smad 3 mRNA表达A值明显增加(0.167±0.092 vs 0.010±0.002,P<0.05),Smad4 mRNA表达A值也明显增加(0.24 1±0.098 vs 0.021±0.004,P<0.05),Smad6、Smad7 mRNA虽然增加,但表达水平仍然低下.结论:实验性大鼠肝纤维化存在肝脏Smads分子表达水平的比例失调,TGF-Smad信号通路可能参与了肝纤维化的形成与发展.     

胆囊胆固醇结石病的遗传基础

胆囊胆固醇结石病的发生与胆汁胆固醇过饱和、成核缺陷以及胆囊收缩功能异常有关 ,同时受到遗传因素的影响。为进一步探索胆石病发病机制 ,复习近年来国内外胆石病的遗传基础研究取得的进展。     

牛蒡茶对高脂血症大鼠的降脂作用

目的观察牛蒡茶对高脂血症大鼠血脂参数的影响。方法喂饲法建立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成对照组及牛蒡茶低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水和牛蒡提取液0.83、1.67、5.00 g/kg灌胃,连续35 d,测定实验前后各组血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。结果中剂量组的TG明显低于对照组（P〈0.05）;高剂量组的TC、TG明显低于对照组,HDL-C明显高于对照组（P均〈0.05）。结论牛蒡茶提取物能明显降低高脂大鼠的TC及TG水平,并升高HDL-C水平,具有调节血脂的作用,可开发为防治高血脂的纯天然保健食品。     

肝细胞低密度脂蛋白受体,胆汁中胆汁酸及胆固醇在兔胆囊结石？…

目的 研究肝细胞低密度脂蛋白受体，胆汁中胆汁酸和胆固醇的动态变化及其在胆囊结石过程中可能的机制。方法 利用高胆固醇膳食诱发兔胆固醇结石模型，分别对进食高胆固醇膳食后１、２、３、４周组及对照组，采用双波长薄层扫描法测定胆汁中胆汁酸、硫磷铁法测定胆汁中胆固醇以及＾１２５Ｉ－ＬＤＬ放免标记法测定肝细胞低密度脂蛋白受体（ＬＤＬｒ）活性。结果 高胆固醇膳食后１周开始出现胆囊结石，２，３和４周组分别有４／１０     

牛磺胆酸钠转运蛋白在肝癌大鼠肝组织中的表达状况

目的:本研究通过建立肝癌大鼠模型,以牛磺胆酸钠转运蛋白(sodium/taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp)为研究对象,初步了解Ntcp在肝癌大鼠中的表达状况,以期能找到新的手段和方法进行肝癌的治疗.方法:取Wistar大鼠(♂、体质量160 g±8 g)60只,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、二乙基亚硝胺饮食实验组(简称实验组)予以含二乙基亚硝胺饮水.经过20 wk,建立肝癌大鼠模型,取对照组和实验组肝脏组织:(1)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的Ntcp蛋白表达的强度;(2)Western blot法检测两组模型肝脏组织的Ntcp蛋白表达的强度.结果:免疫组织化学SP法及Western blot法结果均显示,实验组Ntcp表达阳性率高于对照组Ntcp表达阳性率(25.7%),他们之间的表达差异有统计学意义(?2=10.62,P0.05).结论:实验组大鼠的Ntcp蛋白的表达较对照组增多,提示我们在肝癌的治疗中,Ntcp有可能成为新的治疗靶点和方向.     

高脂血症大鼠肝脏中牛磺胆酸钠转运蛋白的表达状况

目的:本研究以牛磺胆酸钠转运蛋白(Na+/taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp)为研究对象,通过分析Ntcp在高脂血症大鼠模型肝脏中的表达状况,寻求新的高脂血症治疗措施.方法:取♂Wistar大鼠(体质量150 g±5 g)60只,随机均分为实验组及对照组.喂食90 d,建立高脂血症模型,喂食期间定期取血检测胆固醇及胆汁酸含量,建模成功后,分别取两组大鼠肝脏组织.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测肝脏组织的N t c p基因表达的状况.应用免疫组织化学SP(streptavidinperosidase)法检测肝脏组织的Ntcp蛋白表达的状况.结果:实验组胆固醇及胆汁酸含量提高明显.电泳结果显示:两组肝脏组织都出现了位于425 bp的内参β-actin基因的扩增带和位于325 bp的Ntcp基因扩增带,实验组Ntcp基因扩增带亮度减弱;免疫组织化学结果显示:实验组Ntcp表达阳性率为23.6%,对照组N t c p表达阳性率为75.2%,差异有统计学意义(χ2=9.858,P0.05).结论:实验组大鼠的Ntcp基因的表达明显减弱,提示我们Ntcp基因可能会成为高脂血症及其相关疾病新的药物治疗靶点.     

正常肝组织和肝癌组织中Pim-2基因的表达

肝癌(HCC)的发生、发展与细胞凋亡有着密切的关系,肝细胞的凋亡受到多种基因、转录因子,生长因子、细胞因子和激素的调节[1].Pim-2基因是丝氨酸苏氨酸激酶Pim家族成员之一,属于一种钙/钙调蛋白调节激酶,在多种细胞组织的进化过程中高度保守,可通过磷酸化底物发挥抗凋亡,促进细胞维持自我生存作用[2].     

层粘连蛋白γ2链基因在纤维化大鼠肝组织中的原位表达

目的：了解层粘连蛋白γ２链基因（Ｌｎγ２）是否在正常大鼠肝组织中表达及其在肝纤维化过程中的作用。方法：以皮下注射四氯化碳（ＣＣｌ４）诱发大鼠肝纤维化模型，采用地高辛原位杂交技术对Ｌｎγ２ｍＲＮＡ在肝组织中表达进行检测，并与Ⅳ型前胶原α１链（α１（ＩＶ）基因表达进行比较，结果：正常大鼠肝组织无Ｌｎγ２ｍＲＮＡ表达，纤维化早期肝组织即有Ｌｎγ２ｍＲＮＡ的异常表达，其表达细胞肝内分布与α１（ＩＶ）相似，     

烟酸对高脂血症兔脂肪细胞胆固醇流出和肝X受体表达的影响

目的探讨烟酸对高脂血症兔脂肪细胞胆固醇流出和肝X受体（LXR）α、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γmRNA表达的影响。方法选取12只健康雄性新西兰兔给予高胆固醇饲料培养8周,建立高胆固醇兔模型后,随机分为高胆固醇组（继续饲以高胆固醇饲料6周,n=6）,烟酸治疗组（在饲以高胆固醇饲料的基础上给予烟酸缓释剂0．2g·kg^-1·d^-1,共6周,n=6）,另选普通饮食14周雄性新西兰兔（n=6）作为对照组。实验结束后,取皮下脂肪行脂肪细胞培养,用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,运用逆转录聚合酶链反应检测LXRα mRNA的表达。此外,在体外观察不同浓度的烟酸缓释剂（0．25、0．5、1、2mmol／L）对健康雄性新西兰兔脂肪细胞LXRα、PPARγ mRNA的影响。结果高胆固醇组脂肪细胞胆固醇流出率（5．94±1．26）％明显低于正常对照组（12．68±1．31）％,烟酸治疗组脂肪细胞胆固醇流出升高明显（16．39±3．32）％,3组间比较差异有统计学意义。逆转录聚合酶链反应显示烟酸治疗组较高胆固醇组LXRα mRNA表达高,与胆固醇流出率呈正相关。体外实验亦显示,烟酸缓释剂呈浓度依赖性升高脂肪细胞LXRα、PPARγ mRNA的表达。结论烟酸增加高脂血症兔脂肪细胞LXRα mRNA的表达及细胞内胆固醇流出。     

基因多态性参与胆固醇结石发病机制的研究进展

胆汁胆固醇过饱和及胆汁淤积是胆固醇结石的重要诱因。基因多态性通过影响胆固醇的转运及代谢,导致胆汁胆固醇过饱和、降低胆囊动力加重胆汁淤积,使个体对胆固醇结石的易感性增加。此文就近几年来对基因多态性在影响胆固醇结石发生方面的研究进展进行综述,以期进一步了解基因多态性在胆固醇结石发生中的作用,增进对胆固醇结石发病机制的了解,并为胆固醇结石的诊治提供新的思路。     

Bcl-xL mRNA在正常肝及肝癌组织中的表达

１．材料与方法：肝癌组织２１例（男１２例，女９例），平均年龄６４岁（范围３３～７６岁），Ⅱ期６例，Ⅲ期１３例，Ⅳ期２例；高分化癌３例，中分化癌９例，低分化癌７例，未分化癌２例。１０例正常肝组织（男６例，女４例），平均年龄５７岁（范围３９～７５岁）。所有组织行Ｂｃｌ－ｘＬ ｍＲＮＡ的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析，统计学处理用ｔ检验。 ２．结果：肝癌组织中，ｂｃｆ—ｘＬｍＲＮＡ呈现低表达（３８％），而在正常肝组织中呈高表达。与正常肝组织相比，９５％（２０／２１）的肝癌组织有ｂＣＩ—ｘＬｍＲＮＡ水平下…     

大鼠肝再生增强因子mRNA在损伤肝组织的表达

我们通过复制ＣＣ１４诱导的大鼠急性肝损伤模型,利用半定量ＲＴ－ＰＣＲ法研究损伤肝组织肝再生增强因子（ＡＬＲ）ｍＲＮＡ的表达变化,为从分子水平研究ＡＬＲ在肝损伤修复过程中的保护作用提供实验依据。 １、材料与方法：将２０只成年健康ＳＤ大鼠随机分为两组,正常对照组５只,不予任何处理;实验组１５只,行一次性腹腔注射 ５０％ ＣＣｌ４ ４ ｍｌ／ｋｇ,复制急性肝损伤模型。分别于染毒后的６、１２、２４ ｈ从实验组随机选取５只大鼠,与正常对照组一起抽提肝组织总ＲＮＡ。按大鼠ＡＬＲｃＤＮＡ序列及β－ａｃｔｉｎ ｃＤＮ…     

核受体在胆汁酸和胆固醇代谢中的作用

人体内多种核受体参与胆汁酸和胆固醇的代谢调节.近年来核受体调节胆汁酸及胆固醇代谢的研究已成为国内外研究的热点,其中尤以法尼酯X受体和肝X受体α作用最为重要,此文着重对该两种核受体的研究现状作一综述,对其他核受体作用作简要叙述.     

Na2SiO3对高脂血症大鼠外周血白细胞黏附分子表达的影响

目的 探讨Na2SiO3对高胆固醇血症大鼠外周血白细胞黏附分子表达和血清白介素水平的影响 .方法 36只SD大鼠分为三组正常对照组、高脂血症模型组(模型组,喂高脂饲料)、硅剂组(喂高脂饲料,同时灌胃Na2SiO3溶液2 ml/只,用量按硅元素计算为 10 mg·kg-1·d-1).10 w后断头采血,测定血清胆固醇、IL-1、IL-8浓度和外周血白细胞CD54、CD106表达量.结果 模型组白细胞CD54 和CD106表达量分别为5.98±0.61和6.38±0.39,比正常对照组分别增加0.39倍和0.79倍(P＜0.01);模型组血清IL-8、IL-1浓度分别为(0.578±0.071)、(0 .331±0.032) ng/ml,比正常对照组分别增加0.63倍和0.29(P＜0.01).说明模型组有炎症反应发生.灌胃Na2S iO3溶液可使CD54表达量下降13.2%(P＜0.05),CD106下降15.1%(P＜ 0.01),IL-8降低26.8% (P＜0.01),但是硅剂组的IL-1未见下降.结论 Na2SiO3能抑制高胆固醇血症条件下的炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一.     

胰腺弹力蛋白酶在大鼠肝纤维化组织中的表达

目的:观察胰腺丝氨酸弹力蛋白酶的基因、蛋白及活性在大鼠肝纤维化中的表达,探讨弹力蛋白酶在肝纤维化形成中的作用.方法:采用二甲基亚硝胺(DMN)4周12次腹腔注射制备Wistar雄性大鼠肝纤维化模型,以正常组作对照.观察肝功能,肝脏病理组织学,肝组织羟脯氨酸含量以及肝组织弹力蛋白酶mRNA、蛋白及其活性的表达.结果:弹力蛋白酶mRNA、蛋白及其活性在正常大鼠肝组织均有一定程度的表达,在肝纤维化模型组,假小叶内肝细胞弹力蛋白酶mRNA表达有所减少,弹力蛋白酶活性在正常组和模型组分别为(11.43±2.35)U/g、(8.02±1.62)U/g,模型组显著降低(P＜0.05).结论:某种程度的弹力蛋白酶表达是维持正常细胞外基质合成与降解动态平衡的需要;在肝纤维化形成过程中,大鼠胰腺丝氨酸弹力蛋白酶的表达下降是促进肝纤维化形成的因素之一.