左乙拉西坦对癫痫大鼠海马组织中突出后致密物PSD-95表达的影响

目的：探讨左乙拉西坦对氯化锂-匹罗卡品（Li-pilo）致痫的大鼠海马组织中突触后致密物（PSD95）表达的影响。方法：随机将清结级Wistar雄性4周龄幼鼠96只,分为生理盐水对照组（NS组）,左乙拉西坦对照组（LEV组）,模型组（Lipilo组）,治疗组（Li-pilo＋LEV组）,共4组,每组24只。建模成功后,将LEV组和Li-PILO＋LEV组予以LEV200mg/kg每日灌胃给药一次,连续4周。采用RT-PCR方法动态检测第1周、第2周和第4周四组大鼠海马组织中PSD95mRNA的表达水平。结果：模型组和治疗组在给药后均出现痫性发作。左乙拉西坦对照组组与生理盐水对照组相比,PSD95mRNA表达量的差异无统计学意义;模型组和治疗组的PSD95mRNA的表达量明显降低,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组与模型组相比,PSD95-mRNA的表达量明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：氯化锂-匹罗卡品致痫的大鼠海马组织中PSD95一mRNA的表达水平明显下降,左乙拉西坦能增强癫痫大鼠海马组织中PSD95一mRNA的表达。     

知母总皂苷对老年大鼠海马突触相关蛋白表达的影响

<正>有些人认为AD样痴呆是正常脑衰老的结果,皮质失联络是其重要基础。在20～100岁的正常衰老过程中,新皮质突触密度的下降趋向于(但未达到)AD发病的水平,如果出生时突触有缺陷或缺少教育,将引起突触过早下降到出现痴呆的水平。这种突触丧失的影响可能比斑块和神经原纤维     

左乙拉西坦对癫痫大鼠海马组织中Syt1和PSD95表达的影响

目的:探讨抗癫痫药物左乙拉西坦对癫痫大鼠海马组织中的突触囊泡膜蛋白Ⅰ(synaptotagminⅠ,Syt1)和突触后致密物(PSD95)表达的影响。方法:随机将清结级Wistar雄性4周龄幼鼠84只,分为A、B、C组。A组:生理盐水对照组,B组:模型组(Li-pilo组),C组:治疗组(LEV治疗组),其中A组24只,B、C两组组每组各30只。分组后分别给予造模,造模成功后,给予C组以LEV150mg/kg灌胃给药每日一次,连续4周。采用免疫组化方法分别在1周、2周和4周动态检测3组大鼠海马组织中Syt1和PSD95的表达。结果:B、C两组均出现癫痫样发作。左乙拉西坦对照组组与生理盐水对照组相比,Syt1和PSD95各表达量的差异均无统计学意义;B组的Syt1的表达量明显升高,PSD95的表达明显减少,与A组比较差异均有统计学意义(P<0.05);C组与B组相比,Syt1的表达量明显降低而PSD95的表达有所增加,各组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:癫痫反复发作后可能诱导Syt1表达增强,Syt1可能通过增加兴奋性神经递质的释放进一步促进癫痫发生。癫痫大鼠海马组织中PSD95的表达水平明显下降,左乙拉西坦能增强癫痫大鼠海马组织中PSD95的表达。     

知母总皂苷对老年大鼠学习记忆行为和海马突触相关蛋白表达的影响

目的探讨知母总皂苷(SAaB)对老年大鼠学习记忆能力及突触相关蛋白表达的影响。方法 ig给予18个月龄SD大鼠SAaB 100和200 mg.kg-1,每天1次,连续9周,第8周开始进行Morris水迷宫实验,记录逃避潜伏期及各象限游泳时间。免疫组织化学法观察海马突触素蛋白(SYP)分布。Western印迹法检测CA3区SYP、突触后致密蛋白95(PSD95)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白分布。结果与青年大鼠对照组比较,老年对照组大鼠逃避潜伏期显著增加,原平台象限游泳时间占总时间的百分比显著缩短(P<0.05),海马SYP,PSD95,p-Akt和p-mTOR表达显著降低(P<0.01)。与老年对照组相比,给予SAaB后,青年大鼠逃避潜伏期显著缩短,原平台象限游泳时间占总时间的百分比显著增加(P<0.05);海马SYP,PSD95,p-Akt和p-mTOR表达显著增加(P<0.01)。结论 SAaB能显著改善老年大鼠学习记忆能力,可能与上调SYP和PSD95表达及激活Akt/mTOR信号通路有关。     

淫羊藿苷对Aβ_(25-35)诱导的阿尔采末病大鼠海马突触素和突触后密度蛋白95表达的影响

目的探讨淫羊藿苷(Ica)对阿尔采末病(AD)大鼠海马突触素(SYN)和突触后密度蛋白95(PSD-95)表达的影响。方法雄性SD大鼠43只,随机分为对照组(n=13)、模型组(n=15)及Ica120 mg·kg-1组(n=15),每日灌胃给药1周后,右侧海马内注射Aβ25-3510μg制备AD模型,制模后继续给药3周。HE染色法光镜观察大鼠海马形态学变化,透射电子显微镜观察大鼠海马神经元超微结构,Western blot法检测大鼠海马SYN和PSD-95蛋白的表达。结果 HE染色显示模型组大鼠海马神经元排列稀疏,并有大量变性神经元,给予Ica治疗后,神经元排列较整齐,变性神经元数量减少;电镜观察发现模型组大鼠海马CA3区神经元数目减少,结构模糊,胞膜不完整,线粒体肿胀呈空泡样变,染色质成块状聚集,突触数目减少,Ica治疗后大鼠海马CA3区神经元数目较多,结构较清晰,线粒体肿胀减轻,染色质较均匀,突触数目增多;Western blot结果显示模型组大鼠海马SYN及PSD-95的表达较对照组明显降低(P<0.05),而Ica组大鼠海马SYN和PSD-95的表达显著增加(P<0.05)。结论 Ica可能通过增加突触标记蛋白SYN和PSD-95的表达改善Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆能力。     

五味子乙素对慢性酒精中毒大鼠海马突触相关蛋白表达的影响

目的 研究五味子乙素对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力及突触相关蛋白表达的影响.方法 连续用白酒以灌胃的方式建立动物慢性酒精中毒模型,随机将中毒模型制备成功后的大鼠分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组均8只;另取8只正常大鼠作为空白组.低、中、高剂量实验组分别按10,20,40 mg·kg-1的剂量给予0.01 g·mL...     

阿托伐他汀促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达

目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对体外培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元树突生长及突触相关蛋白是否有影响。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取大脑皮层,进行皮层神经元体外培养,神经元培养4 d后用于实验。实验分为对照组、不同浓度Ato处理组、Ato处理不同时间组;对照组:加入等量含0.1%DMSO培养基;Ato处理组:培养4 d神经元,加入不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h;Ato处理时间组:将Ato 5μmol.L-1加入培养4 d神经元,分别作用12、24、48 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突的生长,应用Tsview软件测量神经元树突分支总长度(totaldendritic branch length,TDBL)和一级树突数目(primary-or-der dendrite number,PDN);应用免疫荧光染色法和Westernblot检测皮层神经元突触素(synaptophysin,SYP)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)蛋白表达的改变。结果给予不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h后,神经元TDBL较对照组明显增加(P<0.01),神经元PDN较对照组呈浓度依赖性增加,Ato(0.1、1μmol.L-1)时可增加神经元PDN(P<0.05),Ato(5、10μmol.L-1)时明显增加神经元PDN(P<0.01);Ato 5μmol.L-1作用24 h后可增加神经元TDBL、PDN(P<0.05),Ato5μmol.L-1作用48 h后可明显增加神经元TDBL、PDN(P<0.01);应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突TDBL和PDN明显增加;免疫荧光和Western blot结果显示Ato可增加SYP、PSD-95表达水平。结论 Ato促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达。     

运动对快速老化小鼠海马突触素表达的影响

目的研究运动对快速老化小鼠（SAMP8）海马突触素表达的影响,探讨运动改善阿尔茨海默病（AD）学习记忆功能的机制。方法 3月龄SAMP8小鼠40只随机分为运动组（采用跑笼运动训练）和对照组,2个月后HE染色观察2组海马神经元形态改变;免疫组化技术检测2组海马突触素表达。结果 5月龄SAMP8小鼠对照组海马部分神经元细胞变性、死亡,核浓缩,空泡变性;运动组偶有神经元细胞变性、死亡,大部分细胞形态正常。海马突触素表达运动组较对照组显著增高（P〈0.05）。结论运动可以延缓SAMP8小鼠海马神经元变性,提高海马突触素表达,这可能是运动改善AD学习记忆功能的重要机制之一。     

丙泊酚对癫痫大鼠学习记忆及海马TLR4表达的影响

目的探讨丙泊酚对癫痫大鼠学习记忆的影响,以及与苯巴比妥钠联合用药对癫痫大鼠学习记忆的影响。方法36只大鼠均制备癫痫模型,随机分为癫痫模型组(EP)、生理盐水+癫痫组(NS)、脂肪乳+癫痫组(LE)、苯巴比妥钠+癫痫组(PB)组、丙泊酚+癫痫组(Prof)以及苯巴比妥钠与丙泊酚联合用药+癫痫组,每组6只。对每只大鼠进行Morris水迷宫行为测试,评价其学习记忆能力;用酶联免疫吸附方法测定海马TLR4蛋白表达量。结果与癫痫模型组相比,给予生理盐水或脂肪乳对癫痫大鼠学习记忆能力及海马TLR4蛋白表达量均无明显影响(P>0.05)。给予丙泊酚后可使癫痫大鼠潜伏期明显延长,平台停留期缩短,TLR4蛋白表达明显增高(P<0.05)。给予苯巴比妥钠后可使癫痫大鼠平台停留期缩短,TLR4蛋白表达明显增高(P<0.05),但潜伏期无明显差异(P>0.05)。联合用药组与苯巴比妥钠组对比,潜伏期明显延长,平台停留期缩短,TLR4蛋白表达明显升高(P<0.05)。联合用药组与丙泊酚组对比,平台停留期缩短,TLR4蛋白表达明显增高(P<0.05),潜伏期无明显差异(P>0.05)。结论丙泊酚对癫痫大鼠学习和记忆功能均有损害;苯巴比妥钠对癫痫大鼠的学习能力没有明显影响,对其记忆功能有损害;丙泊酚与苯巴比妥钠联合用药对癫痫大鼠的学习和记忆功能均有损害。海马TLR4可能参与了丙泊酚与苯巴比妥钠对癫痫大鼠学习和记忆的影响过程。     

麻黄碱对PC12细胞内BDNF、PSD95和synapsin1表达水平的影响

目的 考察麻黄碱对PC12细胞内的脑源性神经营养因子(BDNF)、突触后致密蛋白95(PSD95)和神经突触素1(synapsin1)表达水平的影响,探讨麻黄碱对PC12细胞毒性的作用机制。方法 通过不同浓度的麻黄碱处理PC12细胞后,采用噻唑蓝试剂(MTT)法测定细胞存活率;采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;采用蛋白印迹(Western blot)法检测BDNF、PSD95和synapsin1的蛋白表达水平。结果 麻黄碱呈浓度依赖性降低PC12细胞活力,其引起PC12细胞死亡的IC₂₅和IC₅₀分别为0.536 mmol和2.8 mmol。随着麻黄碱浓度的升高,PC12细胞体积变小,边界模糊,突触数减少,轴突长度减短;BDNF和PSD95的表达水平明显升高;synapsin1的表达水平有所降低。结论 麻黄碱对PC12细胞的毒性作用机制可能与影响BDNF、PSD95和synapsin1的表达水平有关。     

NMDAR/PSD-95/nNOS复合物在神经病理性疼痛中的研究进展

神经病理性疼痛是一种常见的慢性疼痛疾病,发病机制复杂且临床治疗效果欠佳。最近研究表明, N-甲基-D-天冬氨酸受体/突触后致密蛋白95/神经元型一氧化氮合酶（NMDAR/PSD-95/nNOS）复合物在神经病理性疼痛中发挥重要作用。研究发现,如果不直接抑制NMDAR或nNOS,选择性阻断NMDAR/PSD-95或者nNOS/PSD-95的相互作用,可以在不影响NMDAR和nNOS生理功能的前提下抑制神经病理性疼痛中NO的病理性释放,可能获得没有明显副作用的安全有效的神经病理性疼痛的治疗药物。故本文对NMDAR/PSD-95/nNOS复合物在神经病理性疼痛中的研究进展进行综述。     

天冰调督胶囊改善癫痫大鼠学习、记忆及对海马ChAT、AchE表达的影响

目的探讨天冰调督胶囊对癫痫认知学习记忆改变的影响.方法Sprague-Dawley大鼠腹腔注射印防己毒素(1.5 mg·kg-1·d-1)连续30d,制作反复发作癫痫模型,点燃模型随机分为模型组、天冰调督胶囊低、高(1.2,4.8 g·kg-1)剂量组、吡拉西坦组、丙戊酸钠和吡拉西坦组,各组均qd灌胃给药,连续给药28 d,以Morris水迷宫观察各组大鼠的空间学习记忆能力、免疫组织化学方法观察海马ChAT、AchE的表达变化.结果经过30 d点燃癫痫大鼠再观察治疗28 d,与正常组相比,模型组大鼠空间记忆能力明显降低(P＜0.01),海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应阳性数量显著减少,CA2区乙酰胆碱酯酶(AchE)免疫反应阳性数量增多(P＜0.05);天冰调督胶囊观察组学习记忆指标以及ChAT、AchE的表达,与模型组相比有不同程度改善(P＜0.05,P＜0.01).结论天冰调督胶囊可在一定程度上改善反复发作后癫痫大鼠的学习记忆能力.     

APP17肽对APP转基因小鼠突触相关蛋白表达的影响

目的研究APP17肽对APP转基因小鼠(APP V717 I)海马神经元突触相关蛋白表达的影响。方法将3 mon龄的APP转基因小鼠随机分为模型组和APP17肽治疗组(皮下注射0.16 mg.kg-1.d-1,每周3次),并以相同年龄和背景的C57BL/6 J小鼠做正常对照组。7 mon后行Morris水迷宫测定,小鼠脑组织灌注固定后进行PSD-95、Shank1蛋白的免疫组化染色。结果模型组小鼠水迷宫实验的逃避潜伏期明显长于治疗组和正常对照组,且模型组小鼠大脑海马CA4区中的PSD-95、Shank1阳性反应神经元明显减少,染色浅;APP17肽治疗组与正常对照组相近。结论APP转基因小鼠大脑中存在突触后致密区蛋白表达异常,由此引起突触功能损害,进而导致记忆、学习能力的改变;而APP17肽能通过提高PSD-95、Shank1的表达,使突触的损伤接近恢复正常。并能改善小鼠的记忆、学习能力。     

NMDAR/PSD-95/nNOs复合体及其解偶联剂在治疗缺血性卒中的应用

缺血性脑卒中是一种高死亡率、高致残率、高复发率的疾病。目前认为,脑卒中是由各种血管性病因引起的急性或局灶性脑功能障碍,且持续时间超过24 h或引起死亡的临床症候群。随着对脑卒中发病机制的深入研究,其治疗药物也日新月异,该文综合国内外文献,根据NMDAR/PSD-95/nNOs复合体结构特点及其如何在缺血性脑卒中产生病理作用,阐明新型解偶联药物在治疗缺血性卒中的应用前景。     

Requirement of PSD-95 for dopamine D1 receptor modulating glutamate NR1a/NR2B receptor function

Aim： To elucidate the role of scaffold protein postsynaptic density （PSD）-95 in the dopamine D1 receptor （D~R）-modulated NRla/NR2B receptor response. Methods： The human embryonic kidney 293 ceils expressing D1R （tagged with the enhanced yellow fluorescent protein） and NRla/NR2B with or without co-expres- sion of PSD-95 were used in the experiments. The Ca^2＋ influx measured by imaging technique was employed to monitor N-methyl-D-aspartic acid receptors （NMDAR） function. Results： The application of dopamine （DA, 100 μmol/L） did not alter glutamate/glycine （Glu/Gly）-induced NMDAR-mediated Ca^2＋ influx in cells only expressing the D1R/NRla/NR2B receptor. However, DA increased Glu/Glyinduced Ca^2＋ influx in a concentration-dependent manner while the cells were co-expressed with PSD-95. D1R-stimulated Ca^2＋ influx was inhibited by a selective D1R antagonist SCH23390. Moreover, pre-incubation with either the protein kinase A （PKA） inhibitor H89, or the protein kinase C （PKC） inhibitor chelerythrine attenuated D1R-enhanced Ca^2＋ influx induced by the N-methyl-D-aspartic acid （NMDA） agonist. The results clearly indicate that D1R-modulated NRla/NR2B receptor function depends on PSD-95 and is subjected to the regulation of PKA and PKC. Conclusion： The present study provides the first evidence that PSD-95 is essential in D1R-regulated NRla/NR2B receptor function.     

安神补脑液对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆及脑源性神经营养因子表达的影响

目的：研究安神补脑液对睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力影响，并从脑源性神经营养因子（BDNF）角度探讨其机理。方法：SD大鼠，随机分成正常对照组、正常对照＋安神补脑液小剂量组及模型＋蒸馏水组及模型＋安神补脑液大、小剂量组。灌胃给予安神补脑液2周后，用多站台水环境法进行睡眠剥夺造模4d，用避暗法测试其学习记忆能力，并取海马组织用Westem blot法测定BDNF表达量。结果：与正常对照组比较，睡眠剥夺大鼠避暗测试潜伏期显著减短，表明出现学习记忆能力障碍；大剂量安神补脑液给药能显著延长模型大鼠的潜伏期，表明该药可有效减轻大鼠睡眠剥夺后的学习记忆障碍。安神补脑液也能延长正常大鼠避暗实验的潜伏期。在睡眠剥夺大鼠海马组织BDNF表达量显著降低，而用安神补脑液干预后模型大鼠BDNF表达量增加，在大剂量组出现显著性差异。结论：安神补脑液能提高睡眠剥夺鼠的学习记忆能力，其机理之一可能与提高海马BDNF含量有关。     

左乙拉西坦对致痫大鼠海马组织中BMP4表达的影响

目的：建立氯化锂－匹罗卡品幼年大鼠癫痫模型,观察左乙拉西坦对癫痫海马组织中骨形成蛋白（BMP4）表达的影响,以探讨左乙拉西坦的抗癫痫作用机制。方法：将116只21d龄Wistar雄性大鼠随机分为4组,其中空白对照组（NS组）24只、左乙拉西坦对照组（LEV对照组）24只、氯化锂一匹罗卡品模型组（PILO组）34只、氧化锂一匹罗卡品模型＋左乙拉西坦治疗组（LEV治疗组）34只。PILO组和LEV治疗组大鼠首先给予腹腔注射氯化锂（125mg／kg）进行诱导,16h后腹腔注射硫酸阿托品（1mg／kg）,30min后再以匹罗卡品（60mg／kg）腹腔注射,如果没有癫痫发作,可在半小时后,再次腹腔注射匹罗卡品15rag／kg,直至充分点燃建立癫痫模型。其中,LEV治疗组,每日给予左乙拉西坦200mg／kg,连续3周进行灌胃治疗,并分别于1周,2周,3周,处死各组大鼠,并通RT--PCR的方法分别检测及观察海马组织中BMP4表达的变化。结果：PILO组与NS对照组相比,BMP4的表达增加,第1周达高峰（P〈0．01）,第2周、第3周BMP4表达逐渐下降,但较NS对照组仍高表达（P〈0．05）,LEV治疗组与PILO对照组相比,BMP4表达逐渐降低（P〈0．05）,LEV对照组与NS对照组无统计学意义（P〉0．05）。结论：癫痫发作后BMP4表达增加,提示BMP4与癫痫形成密切相关,左乙拉西坦可能通过抑制海马组织中BMP4表达而发挥抗癫痫发作。     

天麻素对癫疒间大鼠海马氧化应激水平的影响

目的研究天麻素对戊四氮(PTZ)致疒间大鼠海马氧化应激水平的影响。方法将30只成年Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、癫疒间模型(PTZ)组、天麻素(GS)组,观察三组大鼠的行为学和脑电图的变化,采用比色法检测大鼠海马超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量的变化。结果与PTZ组比较,GS组大鼠癫疒间发作程度减轻,脑电图明显改变,海马组织中SOD和GSHPx活力增加,M DA含量明显减少(P<0.01)。结论天麻素可通过增加癫疒间大鼠海马SOD、GSH-Px活力、抑制M DA的产生,从而影响氧化应激水平,达到对抗癫疒间的效果。     

纳洛酮对脑震荡大鼠学习记忆和海马CA3区锥体细胞内钙离子的影响

目的：研究纳洛酮对大鼠脑震荡后空间学习记忆能力的影响及机制。方法：用金属单摆打击装置制作SD大鼠脑震荡模型,随机分为3组：假打击组,脑震荡组,脑震荡+纳洛酮组。用Morris水迷宫训练方法,评价动物的空间学习记忆能力,用激光共聚焦显微镜观察海马CA3区锥体细胞内钙离子荧光量值。结果：打击后d8～13脑震荡组隐匿平台逃避潜伏期明显比假打击组长(P＜0.01),穿越原平台位置水域的次数明显比假打击组减少(P＜0.01),海马CA3区锥体细胞内游离钙荧光量平均值(3.0±s 0.6)×10~6较假打击组(1.0±0.3)×10~6明显增高(P＜0.01)。脑震荡+纳洛酮组隐匿平台逃避潜伏期明显比脑震荡组缩短(P＜0.01),穿越原平台位置水域的次数明显比脑震荡组多(P＜0.01),海马CA3区锥体细胞内游离钙荧光量平均值(0.9±0.4)×10~6较脑震荡组明显减低(P＜0.01)。结论：纳洛酮能显著减轻大鼠脑震荡后的空间学习记忆障碍,其机制可能与其防止海马神经细胞内钙离子增高有关。     

丙泊酚对大鼠空间学习记忆能力影响的实验研究

目的研究丙泊酚对于大鼠空间学习记忆能力的影响。方法给予大鼠丙泊酚(10、30和75mg·kg-1)腹腔注射,给予脂肪乳腹腔注射作为对照,然后应用Morris水迷宫评价其对于大鼠空间学习记忆的影响。结果30和75mg·kg-1的丙泊酚腹腔注射可以损害大鼠的空间学习记忆能力,而10mg·kg-1的丙泊酚腹腔注射不影响大鼠的空间学习记忆能力。结论多次给大鼠腹腔注射丙泊酚重复实施麻醉或镇静可以损害其空间学习记忆能力。