酶联免疫吸附试验诊断慢性布鲁氏菌病标准的探讨

酶联免疫吸附试验(ELISA)是70年代建立起来的检测特异性抗原、抗体的新技术。国外的Cohsoon等人用该方法检查牛血清布病抗体,得到了满意的效果后,该法在布病的科研防治方面已逐步得到了推广和应用。国内郭恒昌等首先用于人布病的抗体检测,并与其它血清学方法比较,其敏感性和特异性以ELISA为首。有人认为此法应列为布病血清学常规法之一。但是,到目前为止,ELISA的诊断标准仍未有统一,笔者根据几年来实验室积累的病人有关数据资料归纳整理,对ELISA诊断慢性期布病病人的标准提出初步看法。     

酶联免疫吸附试验诊断布鲁氏菌病的研究

Carlesson 氏应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定牛种布氏菌抗体获得较好结果。ELISA 陆续用于人畜布氏菌病的诊断。目前,大多数作者认为,ELISA,检测布氏菌抗体,具有方法简便、快速、特异及灵敏等优点。但也有资料表明,本试验在检测抗体敏感性上还不及试管凝集试验。此外,关于 ELISA 检测布氏菌抗体类型以及对布氏菌病患者的诊断标准等,这在布氏菌病(简称布病)防治工作上仍是尚未解决的课     

利凡诺尔凝集试验检测慢性布病患者血清抗体的实验

血清抗体IgG的存在乃是慢性布病患者感染过程的重要指征,特异性抗体IgG的测定具有临床诊断重要意义,也是区别免疫接种与自然感染的重要指标。经利凡诺尔(Rivanol)处理后,r-球蛋白IgG不发生沉淀仍保留在血清中,其它蛋白均发生沉淀。FAC/WHO布病专家委员会指出:Rivanolum试验可以取代较烦琐的CFT。该试验应用于人布病抗体的测定在我国尚未见报道,现将用该技术对慢性布病患者血清抗体的观察(同时作SAT,CFT比较)结果报告如下。     

混合反向抗球蛋白血凝试验及其测定抗布氏菌抗体的研究

混合反向抗球蛋白血凝试验(M_RPAH)是由 Coomb's 等建立的一种新的血清学试验,它主要用于检测抗细菌性抗体类型。据报导该试验操作简便、敏感性高、特异性强。它兼有荧光抗体、放射免疫分析和ELISA 的优点,可直接测定抗体量和类型。而且无需特殊的结合剂和试验设备,在一般血清学实验室均可进行。为了解 M_RPAH 在布病诊断和研究工作     

人和动物布氏菌病血清IgG抗体的固相放射免疫分析法及其应用的研究——Ⅰ 检测布病病人和奶牛血清IgG抗体的固相放射免疫分析法(SPRIA)

本文报道,应用~(125)I—SPA为结合剂建立一种间接固相放射免疫分析法(SPRIA),可以同时检测布氏菌病病人和病牛血清的布氏菌IgG抗体。对于其IgG同SPA结合力很差的犊牛血清IgG抗体的检测,只需在加入~(125)I—SPA之前,先加入1:100的兔抗牛血清即可完成。如用於布病病牛血清抗体的检测,灵敏度更高,而用於病人血清的检测,结果同SPRIA一致。方法学检验结果证明,SPRIA和双抗体SPRIA均有良好的特异性、灵敏度和重复性,效果优於CFT、SAT和ELISA,而且方法简便快速,一天即可完成测定。方法对於人、畜布病的血清学诊断和实验研究,具有较为广泛的适应性。     

酶标金葡菌A蛋白结合物用于猪种布病疫区人群血清流行病学检查的价值

本文介绍了应用HRP-SPA结合物,作为第二抗体做ELISA试验,用于猪种布病疫区人群血清流行病学检查。本方法重复性好,特异性强,敏感性高。用该法对猪种布病疫区1168份人血清进行检查,同时用布病血检常规(SAT、CFT、PAT、RBPT、AGT),进行对比检定,结果表明:无论对人猪种布病的诊断或疫区人群的普查,ELISA的阳性率都比SAT、CFT、RBPT、PAT、AGT高。ELISA与SAT的符合率为92.6％。发现ELISA与SAT之间有良好的正相关;HRP-SPA结合物与HRP-兔抗人IgG结合物敏感性、特异性相似。认为利用HRP-SPA作为第二抗体的ELISA技术,无论对人猪种布病的诊断或疫区人群进行大规模血清流行病学检查都是适用的,有推广的价值。     

布鲁氏菌感染机体抗独特型抗体测定——机体免疫调节作用初探

通过对93例布病患者和12只实验性布鲁氏菌感染家兔的血清测定,均检出了抗独特型抗体(Anti-Idotype):布病患者的临床表现和抗独特开型抗体之间存在一定关系,症状缓解期病人的Anti-Id所占阳性比例较大。以抗布鲁氏菌多克隆抗体血清免疫家兔,制备了抗独特型抗体,通过特异性、交叉性和抑制性试验证明,所制备的抗血清,即是抗独特型抗体,为进行免疫调节的研究打下了基础。     

应用间接固相放射免疫分析法对牛布病血清抗体的检测

据报道采用RIA作为结合剂所建立的间接固相放射免疫分析法(SPRIA),检测布病血清抗体比SAT、CFT、ELISA等常规法灵敏度高、特异性强、操作简便、仪器设备经济等优点。本次应用该方法对布病流行区的基础母牛及犊牛(小于8个月龄)和常规法进行对比检测,结果如下。     

2006年北京市延庆县布鲁杆菌病高暴露人群血清学监测结果分析

目的 了解北京市延庆县人间及畜间布鲁杆菌病(简称布病)感染现状,为有效地控制布病在人间的发病与流行提供科学依据.方法 2006年在延庆县采取整群抽样方法,以高暴露人群和养殖的奶牛作为观察对象.使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和试管凝集试验(SAT)方法进行高暴露人群血清抗体检测,并对其基本情况、职业、疫苗接种史、临床表现等进行流行病学调查.同时采集喂服S2布鲁杆菌减毒活疫苗1个月后的奶牛血清,用SAT法检测布鲁杆菌抗体水平.结果 共采集216名奶牛养殖人员血液样本,其中27例抗体滴度呈阳性,阳性率为12.50%,经调查均无临床症状;抽取2185头奶牛血样做抗体检测,1488头奶牛血清抗体阳性,阳性率为68.10%.所有奶牛均无显性感染.结论 延庆县奶牛养殖人员中布病隐性感染率较高,今后需加强从业人员在工作中的自身防护,积极开展相关的宣传教育工作,并坚持开展畜间检疫、免疫、淘汰病畜及人群血清学监测工作,以保障布病高暴露人群的健康.     

云南省大理州漾濞县首起布鲁菌病疫情报告

目的总结云南省漾鼻县布鲁菌病(布病)疫情调查处置情况,为以后处置布病等人兽共患病疫情提供经验。方法搜集、整理和分析漾濞县发生人间和羊间布病疫情现场流行病学调查资料、布病病例临床诊疗资料;人血清检验方法采用WS269-2007《布鲁氏菌病诊断标准》规定的试管凝集实验方法,羊血清采用虎红平板凝集试验方法。结果 2015-06漾濞县动物卫生监督所某兽医,先后出现右膝关节、左踝关节疼痛,伴多汗、乏力等症状,该患者对自己采血进行虎红平板试验布病初筛,结果为阳性,到云南省地方病防治所进行布病抗体检测布病抗体为1∶1600++,实验室诊断为急性布病病例。疾病预防控制中心对全县共有各类畜牧从业人员(不包括牧民)148名采集血清进行布病抗体检测,除首例患者病例阳性外,另检出阳性1例;对有母羊流产、羊只死亡现象发生的苍山西镇的白羊村和下街村2村全部羊只(68只)采血进行布病抗体检测,在下街村1户28只羊中检出布病抗体阳性9只。结论此起布病在漾濞县属于首起布病疫情,调查和处置及时,疫情得到有效控制。     

用羊种布鲁氏菌外膜蛋白作抗原的ELISA调查血清抗体的初步结果

酶联免疫吸附试验(ELISA),因其敏感性较高已广泛地应用于布病的检测。使用的抗原多为光滑型牛种布鲁氏菌1生物型如104M的培养物或是其脂多糖(LPS)。其和光滑型布鲁氏菌产生的血清抗体可呈现阳性反应,但对布鲁氏菌粗糙性抗原产生的抗体则不能发生可见的阳性结果,而布鲁氏菌属各菌种     

2005-2008年贵州省人间布鲁杆菌病监测结果分析

目的 分析贵州省人间布鲁杆菌病(简称布病)监测结果,了解相关人群布鲁杆菌感染现状,为制定预防控制措施提供依据.方法 2005-2008年,根据《布鲁杆菌病监测标准》(GB 16885-1997),在贵州省选择花溪、乌当、兴义、独山、册亨、龙里、息烽、凯里和紫云等区(市、县)为监测点,选择畜牧业职业人群、农区接触家畜的农民和学生为监测对象,采用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)检测布病抗体.结果 2005-2008年贵州省布病抗体检出率为0.63％(37/5904),花溪、乌当、兴义和册亨等县(市、区)的布病抗体检出率分别为2.28％ (19/832)、0.16％(2/1274)、1.84％(15/815)和0.14％( 1/735);畜牧业职业人群、农区接触家畜的人群、学生布病抗体检出率分别为1.29％(36/2800)、0.04％(1/2814)、0％(0/290).布病抗体阳性者以奶牛养殖人员为主,占总感染人数的83.78％( 31/37).结论 贵州省部分县(市、区)养殖奶牛、山羊的人群存在布鲁杆菌感染,直接接触病畜是人间布病主要的传播途径.加强对牲畜的检疫和及时处理染疫病畜是布病防治工作的关键.     

不同血清抗体检测方法在布病监测中的意义

以往对人群进行布病流行病学监测时,最常采用的血清抗体检测方法有玻片凝集试验(PAT)、试管凝集试验(SAT)、二疏基乙醇凝集试验(2—ME)、补体结合试验(CFT)和Coomb′s试验,并以此来辨别与布病有关的各类特异性抗体。     

中国美利奴(科尔沁型)羊布鲁氏菌病最佳免疫和检疫时间的探讨

<正> 1987～1988年我们在无疾病表现的成达苏种畜场、探讨了中国美利奴(科尔泌型)羊、布鲁氏菌病最佳免疫接种和检疫时间,为本品种羊免疫、检疫提供了参考依据。 一、材料和方法 (一)试验动物:取无布病的纯种中国美利奴(科尔沁型)羊494只。1.母源性抗体测定组:用猪二号菌免疫过成年羊所产羔羊234只。2.一次接种后抗体测定组:选择无母源抗体150～180日龄羊130只。3.二次接     

酶联免疫吸附试验测定流行性乙型脑炎病人血清中IgG及IgM抗体(摘要)

<正> 1983年我们在南昌市及吉水县,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对临床诊断为乙型脑炎病人的111份血清作了IgG及IgM抗体测定,现报告如下。 (二)间接ELISA测定IgG抗体,结果南昌市54份血清,阳性49份广告水县57血清,阳性47份。南昌市54份血清同时测IgG和IgM,结果IgG阳性者49     

微量全血ELISA法检查布病的应用

酶联免疫吸附试验(ELISA)法检查人耳垂全血诊断布病曾有过报道。但应用于大面积的布病流行病学调查和考核效果如何未有定论。作者采用了该方法进行了现场初筛试验,结果如下:     

绵羊抗布鲁氏菌特异性IgG,IgA和IgM抗体的观察

<正> 测定特异性IgG、IgA和IgM抗体,对于反映布病机体状态是有意义的。直接提取Ig测定,既费时,Ig又不纯;吸收法费血清,价高,难推广;2ME试验不能确切反映lg之间量的关系。本文以绵羊为实验对象,用ELISA方法测定特异性IgG,IgA和IBM抗体,观察了不同毒力、不同菌量和不同途径下的特异性Ig消长规律及其诊断意义。 材料和方法:兔抗羊IgG,IgA和IgM及羊抗兔IgG是以亲合层析提纯。结合物以戊二醛二步法标记,间接法测抗体,结果以酶标定量仪测定。 动物分组:以血清莱特氏凝集反应低于1:10的     

免疫斑点法检测布氏菌病人血清中抗原的初步应用

免疫斑点试验是一种酶联免疫分析新技术,应用硝基纤维素纸结合蛋白质,比聚苯乙烯吸附牢固这一特点,来替代聚乙烯作固体载体,据报道,对实验动物绵羊布氏菌病的抗原检测,具有可靠性,特异性强,敏感性高等优点,但仍有操作烦杂,有非特异干优因素,目前用斑点——ELISA双抗夹心法检测病人血清抗原的报道甚少,作者以硝酸纤维膜(NC)作为载体,检测了36例布病患者及43例因S_2菌苗感染抗体阳性血清(同时作SAT和RBPT抗体测定为参考),结果如下。1 实验材料与方法 材料:硝酸纤维膜,直径0.4cm,北京化工学校附属工厂生产,包被抗体自制,以牛型104M布氏菌     

布氏菌病患者三种自身抗体的测定

布氏菌病为一种经久不愈、反复发作为其临床特征的慢性病,一些学者根据该病的临床表现开始注意了自家免疫机制在布病发病过程中的作用。研究资料显示,不仅在慢性布病患者血清中检出抗肝、脾、淋巴结等组织的自身抗体,而且证实这些抗体具有细胞毒性(自身攻击)作用。在病程中,其含量随着疾病的康复而逐渐减少。为了观察自身免疫参与布病发病机制的可     

酶联免疫吸附试验检测人血清弓形体IgG,IgM抗体的研究

对ELISA检测人血清弓形体IgG、IgM抗体进行了研究。450份孕妇血清中,ELISA阳性率显著高于IHA;抗体滴度分折,ELISA一般高于IHA2～10倍。25份ELISA IgG抗体阳性血清,IFA检出19份;3份IgM抗体阳性和2份IgG、IgM抗体均阳性血清,IFA分别检出2份。2份阴性和4份含不同抗体滴度的阳性血清于第一次测定后,第7天和第21天测定的阴、阳性结果一致,OD值变异系数为2.43～16.52％。39份阳性血清抗体滴度与OD值呈直线比例关系(r=0.991,P<0.0005)。结果表明,ELISA用于弓形体感染的血清学诊断具有较好的实用性。