化学发光法在DNA杂交分析中的应用

化学发光法在ＤＮＡ杂交分析中的应用袁津玮，周宜开（武汉同济医科大学环境医学系武汉４３００３０）用于检测特异ＤＮＡ和ＲＮＡ序列的核酸杂交分析技术，作为分子生物学的最基本技术之一，已广泛应用在生命科学，尤其是医学的各个领域。传统的核酸分子杂交采用的是放射...     

核酸分子的化学发光标记和化学发光检测

非同位素标记是核酸分子杂交和检测的关键技术。在已知的各种非同位素标记检测方法中,化学发光标记和检测以其灵敏度高、安全无害和操作简便等优点,愈来愈受到重视。本文对核酸分子的化学发光标记和核酸杂交分子的化学发光检测作一简要介绍。     

化学发光和发光标记技术

化学发光免疫分析是继放射免疫分析和酶联免疫分析后建立起来的一种高灵敏、高特异性的免疫分析技术。化学发光标记是化学发光免疫分析的关键技术,不仅在小分子、大分子物质的标记分析中用于标记物的制备,而且在基因探针标记、肿瘤标记和诊断以及导向药物研究中广为采用。本文简要介绍了化学发光和发光标记技术。     

化学发光标记及发光免疫分析

化学发光标记及发光免疫分析张丽民上海第二军医大学，上海２００４３３化学发光标记（ＣＬＬ）及发光免疫分析（ＬＩＡ）是一种灵敏度高、特异性强、检测快速，无放射危害的分析技术。七十年代末以来，ＣＬＬ及ＬＩＡ得到了迅速发展。本文综述了该项技术的机理、实验技术...     

两种化学发光电泳迁移率变动分析技术的比较

采用DIG及Biotin标记寡核苷酸,研究了两种非放射性标记电泳迁移率变动分析的实验方法,即化学发光电泳迁移率变动分析实验(chemi-EMSA)的可靠性,并对两种标记体系的化学发光电泳迁移率变动分析实验进行了比较,以确立一种最佳的化学发光电泳迁移率变动分析实验技术。结果表明:通过对转录因子蛋白NF-κB的实验研究,两种标记体系均可以获得良好的电泳迁移率变动分析检测效果,其中“Biotin-streptavidin-HRP-ECL化学发光电泳迁移率变动分析”实验体系更好。     

时间分辨荧光各向异性及其在生物大分子研究中的应用

概述了时间分辨荧光各向异性（TRAMS）的工作原理和发展概况，描述了常用荧光探针，标记物及大分子的一般标记方法，讨论了其测定方法，研究特点及生物大分子中的构象及结构变化等研究方面的应用，展望了未来的应用前景。     

直接酶标HBV DNA探针及化学发光自显影检测技术的应用

本文报道用Ｒｅｎｚ等法制备探针，以ＰＢＯ（对苯醌）氧化ＨＲＰ使其产生活化位点，然后与ＰＥＩ（聚乙烯亚胺）缩合形成ＨＲＰ－ＰＢＯ－ＰＥＩ复合物，再以戊二醛为连接桥与ＨＢＶ ＤＮＡ共价结合构建直接酶标ＨＢＶ ＤＮＡ探针，杂交后用化学发光自显影检测技术观察结果。该法无同位素探针的缺点，但同样的特异及敏感，可检测０．１～０．５ｐｇ靶ＤＮＡ。检测１６份乙肝患者血清，与免疫法测定病毒标志阳性率的符合率为８７．     

化学发光免疫分析定量检测乙肝病毒标志物方法学研究

采用碱性磷酸酶标记,金刚烷衍生物发光,自动化学发光分析仪测量等,进行乙肝病毒五种标志物化学发光免疫分析(CLIA)方法学研究.结果表明这五种标志物CLIA方法的精密度、灵敏度、回收率和临床符合率等技术参数均达到方法学和临床诊断的要求.CLIA方法比ELISA和RIA更简便、快速而实用,为临床诊断和科研工作提供了一种有用的检测手段.     

增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用

增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用杨晓林，王申五，蒋中华，毕建进，马立人（北京医科大学附属人民医院中心实验室，北京１０００４４）编者按：本刊自１９９３年第二期刊登“生物和化学发光技术在生物、医学中的应用”专题以来，该技术的应用又有了许多新...     

核酸探针在生物医学中的应用与发展

核酸探针在生物医学中的应用与发展王金良核酸（基因）探针是经某种标记物标记过的单链ＤＮＡ和ＲＮＡ，它能与解链后的靶ＤＮＡ或ＲＮＡ进行杂交。凡是具有互补核苷酸序列的核酸可以杂交，其杂交信号可依标记物的特性而检出。凡不具互补核苷酸序列者则不能杂交，故不能检...     

化学发光法和实时荧光定量PCR法检验EB病毒的临床效果对比

目的 分析化学发光法和实时荧光定量PCR法检测肝癌患者血清中的EB病毒载量,探讨EB病毒在肝癌检测中的意义.方法 以化学发光法和实时荧光定量PCR对正常对照组、乙肝组、丙肝组及肝癌组患者血清中的EB病毒载量进行检测,并将两种检测结果进行对比分析.结果 化学发光检测肝癌组患者EB表达水平为1.99,均显著高于乙肝(1.25,u=5.129,P＜0.05)、丙肝(1.31,u =4.497,P＜0.05)、正常组(0.03,u=10.927,P＜0.05).实时荧光定量PCR方法检测肝癌组患者的EB表达水平为1.89,高于乙肝(1.26,u=5.295,P＜0.05)、丙肝(1.32,u=4.983,P＜0.05)及正常组(0.04,u=11.394,P＜0.05),差异具有统计学意义;肝癌患者术前EB表达水平(化学发光:1.87;实时荧光定量PCR:1.85)明显高于术后(化学发光:0.03,u=12.873,P＜0.05);实时荧光定量PCR:0.04,u =11.936,P＜0.05),差异具有统计学意义.两种检测方法结果无统计学差异(P＞0.05).结论 化学发光法和荧光定量PCR具有特异性强、灵敏度高等优点,可以用于检测肝癌的早期诊断和分期.     

淋巴细胞化学发光临床意义的初探

用ConA诱导人外周血淋巴细胞化学发光(Ly-CL)方法,测定112例正常人和180例不同性质疾病患者(包括肿瘤78例、银屑病39例,带状疱疹18例、病毒性心肌炎18例、湿疹17例和荨麻疹10例)Ly-CL变化。结果表明:①正常人Ly-CL变化与性别无关,而与年龄因素有关,中老年者Ly-CL低于年青者;②与相近年龄的正常人相比,肿瘤、带状疱疹、银屑病和病毒性心肌炎患者Ly-CL降低,而荨麻疹Ly-CL增高。本文结果提示,人Ly-CL变化与淋巴细胞活性或功能之间存在一定联系,不同性质疾病患者淋巴细胞产生氧自由基能力有差异。     

小分子有机化合物化学发光免疫测定

对药物或激素小分子半抗原作免疫测定,不仅需要能与待测物发生特异性结合的抗体,还需要标记在抗原或抗体上的标示物,使结合反应进行的程度可以被测出。按使用不同的标示物,可将免疫测定分为:酶免     

镧系荧光探针在生物学与医学中的应用

镧系荧光探针在生物学与医学中的应用杨频，杨斌盛，慈云祥，杨燕生（山西大学分子科学研究所，太原０３０００６）在水溶液中只有铽（Ⅲ）和铕（Ⅲ）是发荧光的￣［１］，铽（Ⅲ）和铕（Ⅲ）ｆ电子的激发可由直接激发和间接激发实现，４８８ｎｍ的激光光源可使铽（Ⅲ）发...     

IMMULITE全自动化学发光免疫分析仪探针携带污染率的探讨

IMMULITE全自动化学发光免疫分析仪使用过程中异常高值对正常值、临界值是否有影响.我们收集了2005年到2006年60例异常AFP高值(100～＞363ng/ml),正常对照组40例.     

非对称酞菁作为荧光探针的研究与展望

酞菁在生物、医疗方面的应用研究越来越受到人们的关注,但这方面的研究大多以对称酞菁为主,本文对非对称酞菁及其衍生物作为荧光探针的设计思路、合成方法及其研究现状加以综述,展望了非对称酞菁用作荧光探针在生物大分子标记方面的应用前景。     

人T淋巴细胞化学发光测定

<正> 淋巴细胞化学发光(Ly-CL)技术常用于淋巴细胞活化、杀伤和氧化活性的研究。然而,目前所用的人外周血Ly-CL测定,其分离的淋巴细胞中除T和B细胞外,也包括少数单核细胞。Falck指出,在诱导细胞化学发光方面,有丝分裂原不像诱导淋巴细胞增殖反应那样具有选择性。因此,研究T或B细胞氧化活性时,还有赖于细胞亚群的纯化。本文报告建立人T淋巴细胞化学发光测定方法。     

一种提高基因芯片检测中杂交信号强度的简单方法

目的 改进PCR产物和固定探针杂交效率。提高信噪比，以提高基因芯片检测的灵敏度。方法 以淋球菌隐蔽型质粒pJD1的基因芯片检测为例，在荧光素标记引物的PCR产物中加入不同浓度的Taq酶抑制剂EDTA及位于固定探针所在位点的两翼的荧光素标记探针，一起变性后再进行常规杂交、冲洗。结果 加入EDTA和荧光素标记探针使基因芯片检测的荧光强度能提高6倍以上。结论 加入EDTA和荧光素标记探针是一种提高基因芯片检测的效率的简单而有效的方法。