亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901增殖的影响.方法： 应用集落形成试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成的影响;应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响;应用电镜及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用.结果： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关.流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24 h后,细胞周期发生改变,G1期细胞百分率减少,S期细胞百分率增加,DNA直方图上出现典型的亚二倍体细胞的“凋亡峰”;电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边,核膜扭曲等特征.结论： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的增殖具有抑制作用,抑制作用程度与作用浓度和时间呈正相关;亚硒酸钠抑制SGC-7901细胞生长的机理之一是诱导细胞凋亡.     

亚硒酸钠对人补体系统激活的影响

用经典的50%溶血法证实,高浓度Na_2SeO_3在体外对CH_(50)有抑制作用,但低浓度Na_2SeO_3对溶血活性有促进作用。Na_2SeO_3对APH_50仅有抑制作用,无增强效应。本文对以上结果的意义进行了讨论。     

亚硒酸钠对荷瘤小鼠免疫系统的影响

研究亚硒酸钠对荷瘤机体的免疫调节作用。方法：实验分别测定了亚硒酸钠＋肿瘤组，肿瘤对照组和正常对照组动物的脾淋巴细胞转化率，ＡＮＡＥ＾＋淋巴细胞百分率和免疫器官指数，并在光镜下对脾脏和胸腺的形态学变化作了观察。     

亚硒酸钠对人补体溶血功能的抑制作用

本实验结果表明,亚硒酸钠(Na_2SeO_3)在体外对人血清补体介导的溶血功能(CH_(50))具有明显的抑制作用。火箭免疫电泳检测补体C_3及C_4活化片段的结果表明,C_3活化受到抑制,而C_4活化则无明显影响,提示硒对补体系统的旁路活化途径具有抑制作用。     

亚硒酸钠对U—937细胞增殖,分化及双链RNA含量的影响

采用流式细胞仪检测等方法,初步研究亚硒酸钠对U-937细胞的抑制增殖作用和诱导分化作用及其对U-937细胞双链RNA的影响,结果提示:亚硒酸钠可抑制U-937细胞增殖,其作用随剂量增加和时间延长而增强。可使细胞用期发生改变,表现为G_0/G_1期细胞比例增加,S期细胞减少,G_2/M期细胞减少。可增强细胞非特异性酯酶和酸性磷酸酶活性,同时伴有单核细胞样形态变化,提示亚硒酸钠可能有诱导U-937细胞分化的作用。亚硒酸钠尚可明显降低U-937细胞双链RNA过量百分率。     

细胞因子联合亚硒酸钠对白血病细胞凋亡的影响

目的 探讨rhGM—CSF／IL—3联合Na2SeO3对白血病细胞诱导凋亡的作用。方法 采用白血病骨髓细胞，应用MTT法检测rhGM—CSF／IL—3联合Na2SeO3对白血病细胞生长和增殖的作用；用形态学、DNA琼脂糖电泳、流式细胞术研究细胞因子与化疗药物对白血病细胞诱导凋亡的作用。结果 细胞因子、药物对白血病细胞的生长、增殖有抑制作用；而rhGM—CSF／IL—3联合Na2SeO3对白血病细胞增殖有明显的抑制作用和诱导细胞凋亡的作用。结论 细胞因子联合化疗药物对白血病细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的协同作用。     

冬凌草甲素对人乳腺癌Bcap-37细胞的增殖抑制作用及其机制

目的观察冬凌草甲素对人乳腺癌细胞株Bcap-37细胞的生长抑制作用,初步探讨冬凌草甲素调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法 MTT比色法检测冬凌草甲素对Bcap-37细胞的增殖抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期分布,RT-PCR检测p21、cdc2和cyclin B1 mRNA表达。结果冬凌草甲素对Bcap-37细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖趋势（P〈0.01）;处理后的Bcap-37细胞发生明显的形态改变;作用24h后,Bcap-37细胞在G2/M期阻滞;冬凌草甲素作用Bcap-37细胞后,p21 mRNA水平的表达增加,而cdc2、cyclin B1 mRNA的表达降低（均P〈0.05）。结论冬凌草甲素可抑制乳腺癌细胞的增殖,该作用可能与p21 mRNA表达上调及cdc2、cyclin B1 mRNA表达下调有关。     

亚硒酸钠对小鼠骨髓细胞染色体的致畸变作用

目的研究亚硒酸钠（Na2SeO3）对小鼠骨髓细胞染色体的致畸变作用。方法采用灌胃法使小鼠染毒，设亚硒酸钠高、中、低三个剂量组，另设蒸馏水作阴性对照，环磷酰胺为阳性对照组。结果染色体畸变率在Na2SeO3高、中、低剂量组与阴性对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；染色体畸变率在三个剂量组随Na2SeO3剂量的增加而增强，低剂量组与高剂量组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Na2SeO3对小鼠骨髓细胞染色体有明显致畸作用且随剂量增加而增强。     

温肾中药对原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖的影响

目的观察温肾中药对雌二醇和孕酮所致的原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖的影响。方法采用消化法进行正常人乳腺上皮细胞分离及原代培养。在相差倒置显微镜和透射电镜下对细胞进行形态学鉴定。应用雌二醇和孕酮干预以促使正常人乳腺上皮细胞增殖,给予不同浓度温肾中药及他莫昔芬进行药物干预。采用MTT法检测不同浓度、不同药物干预下乳腺上皮细胞的增殖情况。结果原代培养正常人乳腺上皮细胞经形态学鉴定符合正常人乳腺上皮细胞的形态学特征。浓度均为1×10-5g/L的雌二醇和孕酮混合培养液可以明显促进正常人乳腺上皮细胞增殖。高浓度温肾中药能明显促进原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖,而低浓度温肾中药则可抑制其增殖。他莫昔芬对原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖无明显影响。结论雌二醇和孕酮可以促进正常人乳腺上皮细胞增殖。温肾中药调节正常人乳腺上皮细胞增殖的作用与药物浓度相关。     

亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响

目的：探讨亚砷酸钠对人皮肤细胞增殖作用的影响。方法：使用原代培养的人真皮成纤维细胞和表皮细胞，采用直接细胞计数法和MTT法检测亚砷酸钠对两种细胞系生长的影响。结果：成纤维细胞较表皮细胞易于培养；MTT法检测，不同剂量的亚砷酸钠与对照组比较，吸光度值均有提高，有剂量－效应关系（P＜0.01)；0.5-8.0μmol/L的亚砷酸钠对成纤维细胞有明显增殖作用；低浓度（0.8μmol/L、1.6μmol/L)对表皮细胞有明显的增殖作用，浓度高于3.2μmol/L时，表皮细胞生长受抑制；10.00μmol/L亚砷酸钠对成纤维细胞有毒性作用。结论：无机砷诱导人皮肤细胞的增殖作用可能是引起慢性砷中毒皮肤损伤的重要原因，具体作用机制有待进一步研究。     

亚砷酸钠对体外培养淋巴细胞存活率及金属硫蛋白含量的影响

目的:了解亚砷酸钠对体外培养淋巴细胞活性及金属硫蛋白(MT)表达的影响。方法:无菌抽取健康人血液,分离出淋巴细胞,分别用2、5、10、15、30、60μmol/L亚砷酸钠(2、5、10、15、30、60μmol/L染毒组)作用于淋巴细胞,采用四噻唑兰还原法测定不同染毒时间(24、48、72h)各染毒剂量组淋巴细胞存活率,采用银饱和-血红蛋白原子吸收分析法测定各组MT含量。结果:低浓度亚砷酸钠(2、5μmol/L)组细胞存活率较对照组明显升高(P<0.05);其它各组细胞存活率随染毒剂量增加而降低,与对照组及2、5μmol/L染毒组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同剂量亚砷酸钠染毒一定时间后细胞MT含量增加,且存在时间-剂量交互效应(P<0.05),MT含量在染毒48h左右达到高峰,其中2、5μmol/L组MT含量高于对照组及其它各剂量组。结论:低剂量砷可促进淋巴细胞的体外存活,并可诱导其MT合成增加。     

Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响

目的:研究Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响。方法:培养Bcap-37细胞系,加入Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂Cyclopamine作用72 h,观察光镜下细胞形态学的变化;采用单四唑(MTT)和溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入的方法,检测Cyclopamine对Bcap-37细胞系生长和DNA合成的影响;再用流式细胞仪检测Cyclopamine对Bcap-37细胞周期的影响。结果:与对照组相比,加入5×10-6mol/L的Cyclopamine后在倒置显微镜下可见细胞立体感消失,细胞内空泡增多;5×10-6mol/L的Cyclopamine使Bcap-37细胞的生长曲线下移,10-7~10-5mol/L的Cyclopamine可剂量依赖性地抑制Bcap-37细胞的生长;Bcap-37细胞系的DNA合成被Cyclopamine明显抑制,S期细胞比例降低,并出现了明显的G2期阻滞。结论:Cyclopamine可以有效地抑制Bcap-37细胞的生长和增殖,提示Hh信号通路可能在乳腺癌中被异常激活,抑制Hh信号通路的活性可能对乳腺癌的治疗起到一定的作用。     

亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素表达的影响

目的:探讨亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素表达的影响及二者间的关系,从而研究亚硒酸钠和脂联素在糖尿病肾病中的作用机制。 方法:通过链脲佐菌素法并给予高脂饮食诱导模拟大鼠糖尿病肾病模型,实验设空白对照组、糖尿病肾病对照组、亚硒酸钠干预组,每组10只。亚硒酸钠干预组每日给予亚硒酸钠溶液1 μg/kg灌胃,其他各组给予等量盐水溶液灌胃。灌胃10周后处死大鼠,取大鼠血、尿标本测相关生化指标。快速切取小块肾皮质组织,4%戊二醛固定,制电镜切片扫描电镜观察超微结构。取肾脏组织标本制石蜡切片光镜下观察病理改变及免疫组化分析定位蛋白表达,定量PCR法检测脂联素的mRNA表达、蛋白质印迹法检测脂联素蛋白表达。结果:亚硒酸钠干预组大鼠基本状况和生化指标较糖尿病肾病对照组明显改善,光镜下亚硒酸钠干预组病理改变和电镜下超微结构较糖尿病肾病对照组明显减轻。免疫组化分析,亚硒酸钠干预组脂联素蛋白着色较糖尿病肾病对照组明显增强,且肾小管、肾小球内均有着色。亚硒酸钠干预组脂联素mRNA是空白对照组的2.043倍,糖尿病肾病对照组脂联素mRNA是空白对照组的1.373倍。亚硒酸钠干预组脂联素蛋白表达水平高于糖尿病肾病对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:亚硒酸钠通过抗氧化应激、增加外周组织对胰岛素的敏感性从而促进肾脏脂联素表达,表明亚硒酸钠和脂联素在延缓和防治糖尿病肾病的发生发展中可能起重要作用。     

亚硒酸钠溶液诱导胃上皮肿瘤SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的：探讨亚硒酸钠能否诱导胃上皮肿瘤SGC 7901细胞凋亡,以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法：亚硒酸钠溶液不同浓度、不同作用时间分别处理SGC 7901细胞,应用电子显微镜观察亚硒酸钠溶液作用后细胞形态变化,应用DNA末端原位标记染色法 (TUNEL)及流式细胞仪技术分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果：亚硒酸钠作用于SGC 7901细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩、染色质凝集、呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。TUNEL染色法细胞凋亡指数在8.4％～33.4％。结论：亚硒酸钠能够诱导SGC 7901细胞凋亡,亚硒酸钠诱导SGC 7901细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关。     

亚硒酸钠对异丙肾上腺素致损豚鼠心肌细胞延迟外向钾电流的影响

采用全细胞膜片钳技术,以豚鼠单个心肌细胞钾通道电流为指标,观察硒对正常及ＩＳＯ致损心室肌细胞延迟外向钾电流的影响。结果表明,硒对正常心室肌细胞外向钾电流影响不明显,但可抑制异丙肾上腺素引起的延迟外向钾电流增加。使Ｉｋｓｔｅｐ 从（２９３３±１６１）ｐＡ降至（１６９４±１７６）ｐＡ,Ｉｋｔａｉｌ从（１２１０±１５３）ｐＡ降至（７９６±２０９）ｐＡ。提示硒具有抗异丙肾上腺素损伤效应,对心室肌细胞起到一定的保护作用。     

贫铀对人肾小管上皮细胞的恶性转化及苯乙酸、亚硒酸钠的抑制作用

目的:探讨贫铀(DU)是否会引起人肾小管上皮细胞(HKC)向恶性表型转化,以及抑制物是否可有效地抑制这种恶性转化. 方法: 将HKC用可溶性DU溶液(0.063～0.500 g/L)作用24 h后,再与1.0～2.5 μmol/L的苯乙酸(PA)或亚硒酸钠(SS)孵育1 d～3 mo,观察不同代龄细胞的集落形成率、生长曲线、刀豆蛋白(ConA)凝集实验、半固体琼脂集落形成率及裸小鼠成瘤性;检测脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白在转化细胞中的表达. 结果: 传约20～30代后,HKC在半固体琼脂中形成集落,注入裸小鼠后成瘤. 部分转化细胞的FHIT蛋白表达也较正常HKC减弱. PA, SS可明显减少HKC在半固体琼脂集落形成率至(0.6±0.1)‰,裸小鼠也无皮下肿瘤形成(0/3)(P<0.05). 结论: DU可诱发HKC向恶性表型转化;用PA,SS抑制这种恶性转化的效果相似.