维生素A诱导Shope肿瘤细胞凋亡

目的：探讨维生素Ａ抑制Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞生长的机理。方法：电镜观察Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞凋亡的形态学改变；琼脂糖凝胶电泳进行ＤＮＡ片段化；流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果：电镜下可见ＶＡ诱导的Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞变小，细胞浆固缩，染色质聚集并靠近核膜，在１．５％琼脂糖凝胶电泳中，Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞ＤＮＡ呈现明显的阶梯状图谱。流式细胞仪检测经１０＾－５ＭＶＡ作用２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后，凋亡细胞百分比     

紫杉醇诱导9L胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：通过体外实验探讨紫杉醇对恶性胶质瘤９Ｌ细胞株有否凋亡诱导作用。方法：在经ＭＴＴ比色法测试到紫杉醇对９Ｌ细胞具有细胞毒作用的前提下,进一步通过形态学观察,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪来检测其细胞毒作用是否与诱导细胞凋亡有关。结果：紫杉醇对９Ｌ细胞具显著细胞毒作用;０１μｍｏｌ／Ｌ紫杉醇作用下９Ｌ细胞分裂主要被阻滞在Ｇ２／Ｍ期,并在第７２ｈ出现凋亡细胞峰,此时培养细胞ＨＥ染色表现出典型的凋亡细胞形态特征,抽提其ＤＮＡ做琼脂糖凝胶电泳显示凋亡特有的ＤＮＡ“阶梯”。结论：紫杉醇具有抗胶质瘤作用,其机制与诱导细胞凋亡有关,通过进一步的体内实验,可为其最终广泛应用于临床脑胶质瘤病人提供充分的理论依据。     

紫杉醇对QGY细胞的作用:G2/M期阻滞和细胞凋亡

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌QGY细胞的作用。方法：检测紫杉醇对QGY细胞作用的时间效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对QGY细胞的增殖抑制作用就越明显。56μmol／L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达78，6％，形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

体外观察紫杉醇对肝癌HepG2细胞生长的影响

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌HepG2细胞的作用。方法：检测紫杉醇对HepG2细胞作用的效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制作用就越明显。70μmol/L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达80％，形态学及流式细胞仪分析显示S期及G2／M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞DNA合成期及分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

脑损伤诱导神经细胞凋亡的动物实验研究

为探讨脑损伤诱导神经细胞凋亡的作用及其机制,应用大鼠液压冲击脑损伤模型,在脑损伤后不同时间段（３ｈ,１２ｈ,２４ｈ,４８ｈ,７２ｈ）处死动物,分别应用ＨＥ染色、流式细胞仪检测、ＴＵＮＥＬ法测定、ＤＮＡ凝胶电泳分析,免疫组化研究神经细胞凋亡的改变。结果显示：动物经中度脑损伤处理后,其受伤各时间段脑组织可见凋亡的神经细胞及ＴＵＮＥＬ阳性细胞,ＤＮＡ呈现“梯状”断裂现象,细胞凋亡百分率为９．８％￣１４．     

紫杉醇诱导胶质瘤细胞凋亡的体内外实验研究

目的：通过体内、外实验探讨抗癌新药紫杉醇有否诱导胶质瘤细胞凋亡的作用。方法：应用ＭＴＴ比色法、培养细胞ＨＥ染色、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪观察到多行性胶质母细胞瘤ＢＴ３２５株在紫杉醇作用下发生凋亡，将其作用于小鼠胶质瘤细胞Ｇ４２２动物模型，计算抑瘤率、观察瘤细胞形态及分析ＤＮＡ片段。结果：ＢＴ３２５细胞在紫杉醇作用下，细胞生长被明显抑制，细胞分裂阻滞在Ｇ０／Ｇ１期并诱导细胞发生凋亡，具有典型的凋亡细胞形态学特征；小鼠皮下Ｇ４２２胶质瘤在紫杉醇作用下肿瘤抑制率明显增加，细胞形态学表现及琼脂糖凝胶电泳证实其与诱导细胞凋亡有关。结论：紫杉醇具有明显的抗胶质瘤作用     

紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及基因调控的研究

目的 探讨紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡的基因调控机制。方法 用紫杉醇诱导卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡，采用荧光染色，透射电镜，流式细胞仪，蛋白免疫印迹等方法进行检测和观察。结果 卵巢癌细胞在紫杉醇作用下，首先表现为G2／M期阻滞，一定时间后出现细胞凋亡。凋亡抑制基因bcl-2在细胞凋亡过程中低表达而促凋亡基因bax呈高表达。结论 紫杉醇可诱导卵巢癌细胞凋亡，bcl-2和bax基因在紫杉醇诱导的卵巢癌细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的影响

目的：研究青蒿素对体外培养的HeLa细胞生长的抑制作用。方法：用台盼蓝染色观察药物对细胞的增殖抑制率；MTT法测定药物的抗肿瘤活性；透射电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：台分蓝染色法证实青蒿素对HeLa细胞有抑制作用，抑制率与药物浓度正相关；细胞经药物作用48h后的IC50为55．58μmol/L；电镜观察细胞有典型的凋亡形态特征（凋亡小体）；流芪细胞仪检测细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度正相关。结论：青蒿素可抑制HeLa细胞的生长，诱导HeLa细胞凋亡。     

紫杉醇对人食管癌Eca109细胞株生长的影响

目的：观察不同浓度的紫杉醇对食管癌细胞Eca109的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验,细胞形态学观察及流式细胞仪等方法对人食管癌细胞Eca109进行检测和观察。结果：MTT实验显示紫杉醇可抑制食管癌细胞增殖;光镜及电镜可发现药物作用组细胞核固缩、解聚以及凋亡小体,流式细胞仪检测显示G1峰前有明显的凋亡峰。细胞周期分析提示紫杉醇可将Eca细胞阻滞于G2－M期,且与浓度相关。结论：紫杉醇对人食管癌细胞系Eca109细胞的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于G2－M期,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

硒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究硒抑制肿瘤细胞生长的机理。方法：采用ＤＮＡ电泳及流式细胞仪分析等方法。结果：硒能诱导Ｈｅｌａ细胞凋亡。１．５％琼脂凝胶电泳呈现典型的阶梯现象。流式细胞仪检测显示大量的亚二倍体细胞。结论：硒促进ＨｅＬａ肿瘤细胞凋亡，可能是硒抑制肿瘤细胞生长的机理之一。     

Fas基因在卵巢癌细胞凋亡中的作用

目的：检测Ｆａｓ基因表达并观察转染Ｆａｓ基因对卵巢癌细胞凋亡的影响,探讨其在卵巢癌发生、发展中的作用。方法：经流式细胞术、ＲＴ－ＰＣＲ方法检测６种卵巢癌细胞Ｆａｓ的表达水平。构建ｐｃＤＮＡ３－Ｆａｓ真核表达载体。经脂质体转染细胞,通过流式细胞仪检测Ｆａｓ基因表达变化。应用ＰＩ染色经流式细胞术检测观察转染Ｆａｓ基因对３ＡＯ细胞凋亡的影响。结果：６种卵巢癌细胞均表达Ｆａｓ均属中低表达,经ｐｃＤＮＡ３－     

细胞自噬对紫杉醇诱导宫颈癌CaSki细胞死亡的影响

目的：通过对自噬基因Beclin1的表达调节来观察细胞自噬对紫杉醇诱导人宫颈癌CaSki细胞株死亡的影响,并探讨在该过程中自噬与凋亡之间的相互作用及关系。方法：利用脂质体法将Beclin1的过表达质粒pcDNA3.1-Beclin1和RNA干扰质粒pSUPER-Beclin1分别体外转染CaSki细胞并筛选稳定表达株后,电镜下观察细胞内自噬囊泡的形成,Western 印迹检测转染前后Beclin1与LC3蛋白的表达变化。上述细胞株经紫杉醇作用后MTT法检测细胞增殖情况的改变,流式细胞仪检测自噬细胞与凋亡细胞的百分率。结果：在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中,电镜观察到细胞内存在大量的自噬囊泡;Beclin1与LC3蛋白的表达在pcDNA3.1-Beclin1转染细胞株中被上调。MTT法检测提示Beclin1过表达细胞株存活细胞明显少于未转染对照细胞株。流式细胞仪检测提示经紫杉醇作用后与空白对照组比较,Beclin1过表达组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有明显增加,其中凋亡增加尤其明显;而Beclin1干扰组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有所减少。结论：在紫杉醇对宫颈癌CaSki细胞株的杀伤过程中细胞自噬与凋亡均发挥了作用,在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中可通过增加紫杉醇诱导的细胞凋亡来增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用。     

阿霉素诱导人粘液表皮样癌细胞凋亡的形态学观察

探讨阿霉素能否导致粘液表皮样癌ＭＥＣ－１凋亡，为口腔涎腺肿瘤的化疗提供资料。通过细胞染色用光镜，电镜观察１０ｍｇ／Ｌ阿霉素作用下ＭＥＣ－１细胞形态的变化，流式细胞仪检测ＭＥＣ－１细胞受药物作用后的ＤＮＡ变化。     

蛋白合成抑制剂促进TNFα诱导大肠癌细胞凋亡

目的探索放线菌酮和ＴＮＦ。协同诱导人大肠癌Ｌ。ＶＯ细胞凋亡的发生规律。方法用细胞体外培养方法，以放线菌酮和均小剂量作用于人大肠癌ＬｏＶｏ细胞，经Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色，光镜观察形态改变，并用流式细胞术检测ＤＮＡ断裂情况。结果单用ＴＮＦａ５万［Ｊ／Ｌ或放线菌酮４ｍｇ／Ｌ，均未引起ＬｏＶｏ细胞凋亡效应。而两者协同，作用１２ｈ至４８ｈ，ＬＯＶＯ细胞逐渐出现明显的凋亡形态学改变和ＤＮＡ断裂。结论小剂量的放线菌阴和ＴＮＦＱ协同作用于人大肠癌Ｌ。ＶＯ细胞，出现明显的凋亡效应。     

胃癌细胞凋亡过程中PKC活性表达的变化

目的：探讨胃癌细胞凋亡过程中胞浆、胞膜和总蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的变化。方法：选择顺铂诱导胃癌细胞凋亡,采用光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡;应用竞争蛋白结合法检测ＰＫＣ活性。结果：顺铂浓度为２μｇ／ｍｌ作用于胃癌细胞２４ｈ出现典型的凋亡改变,即凋亡小体、细胞皱缩,染色质固缩和片段化,ＤＮＡ梯状条带,流式细胞仪上见“凋亡峰”;胃癌细胞凋亡过程中,从３０ｓ到２４ｈ,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性均低于对照组。结论：胃癌细胞凋亡过程中,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性呈下调趋势     

顺铂诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的观察

在体外采用光镜、电镜及ＤＮＡ断片检测方法对顺铂作用于人食管癌Ｅｃａ１０９细胞后的形态学及生化改变进行了观察。药物作用后细胞皱缩变小，呈圆形，细胞核固缩、破裂或消失，胞浆红染，有的细胞似出芽状，可见到凋亡小体及凋亡小体被吞噬的现象。顺铂低浓度时凋亡现象不明显，５ｍｇ／Ｌ以上时作用明显。药物作用２４ｈ时经ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳，可见到呈梯状的条带。结果提示：顺铂可引起Ｅｃａ１０９细胞凋亡，ＤＮＡ降解是细胞凋亡过程中的重要变化之一。     

自噬及自噬性细胞死亡抑制紫杉醇诱导的胃癌细胞凋亡

目的明确自噬和自噬性细胞死亡在胃癌SGC-7901及BGC-823细胞紫杉醇处理过程中的存在,探讨其对紫杉醇诱导的凋亡敏感性的作用。方法流式细胞仪和MTT法分别检测紫杉醇诱导SGC-7901及BGC-823细胞的凋亡率和总死亡率,死细胞DAPI染色荧光显微镜检测非凋亡性细胞死亡,吖啶橙染色流式细胞仪和荧光显微镜分别定量、定性检测自噬和自噬性细胞死亡的存在,自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和紫杉醇共同作用细胞后流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化。结果紫杉醇处理SGC-7901及BGC-823细胞早期(24h内)可出现明显的细胞自噬性变化,自噬高峰期出现紫杉醇诱导3~6h,自噬性细胞死亡存在并可能是紫杉醇诱导的非凋亡性细胞死亡的主要形式,抑制紫杉醇诱导的细胞自噬可以促进紫杉醇诱导细胞凋亡的发生。结论紫杉醇可以诱导胃癌SGC-7901及BGC-823细胞自噬及自噬性细胞死亡,并且紫杉醇诱导的胃癌细胞自噬会拮抗胃癌细胞凋亡的发生,从而为胃癌化疗耐受提供新的解释,可能为胃癌治疗提供新的途径。     

细胞内游离钙浓度在胃癌细胞凋亡过程中的动态变化及发生机制

探讨胃癌细胞凋亡过程中细胞内游离钙浓义的动态变化及其发生机制。方法选择顺铂诱导胃癌细胞凋亡,采用光镜,电镜,琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡。Ｆｕｒａ－２荧光负荷技术测「Ｃａ＾２＋」ｉ,竞争性蛋白结合法测三磷酸肌醇浓度。结果质量浓度为２μｇ／ｍｌ的顺铂作用于胃癌细胞２４小时出现典型的凋亡改变,即凋亡小体和细胞皱缩,染色质固缩和片段化,ＤＮＡ梯状条带,流式细胞仪上见“凋亡峰”;胃癌细胞凋亡过程中「     

榄香烯诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的 从８种抗病毒,抗肿瘤药物中筛选出诱导ＨｅＬａ细胞凋亡的药物,并对其抗肿瘤机理进行探讨。方法 应用相差显微镜、电镜和流式细胞你等检测手段,证实ＨｅＬａ细胞凋亡,并对凋亡的ＨｅＬａ细胞周期变化进行分析。结果 榄香稀粗滞ＨｅＬａ细胞在Ｇ２／Ｍ期,降低ＨｅＬａ细胞分裂能力,抑制其增殖;榄香稀抗肿瘤作用存在的明显的阈值,即达到某一有效剂量,就可发挥强烈的抗肿瘤作用。结论：榄香烯是一种有效的诱导细胞凋亡     

钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

目的 探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法 以Kou(50μmol／L)作用于LoVo细胞，经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况，并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果 通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞，细胞周期状态发生明显变化，G0／G1期细胞从31．3％上升到42.3％，S期细胞从62．0％下降到38．7％。结论 Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且存在时间依赖关系，Kou可抑制细胞DNA的合成，阻止细胞由G1期向S期转化。