多西他赛热敏脂质体的制备及含量和包封率的测定

目的制备多西他赛(DTX)热敏脂质体(docetaxel-loaded thermosensitive liposomes,DTL),建立其含量和包封率测定方法。方法采用薄膜分散法制备DTL并用高效液相色谱法(HPLC)测定脂质体中多西他赛的含量。采用高速离心法分离脂质体与游离药物并测定包封率。结果制备的DTL粒径均一,平均粒径为104 nm,相变温度为42.20℃。辅料和溶剂不干扰主药含量测定,线性范围为1.0～100.0μg/ml(r=1);多西他赛平均回收率为99.50%(RSD=0.65%)。药物在脂质体中的包封率大于98%。结论薄膜分散法可用于制备DTL。药物含量和包封率测定方法简便快速,准确可靠,专属性强。     

多西他赛热敏脂质体的制备及含量和包封率的测定

目的制备多西他赛（DTX）热敏脂质体（docetaxel-loaded thermosensitive liposomes,DTL）,建立其含量和包封率测定方法。方法采用薄膜分散法制备DTL并用高效液相色谱法（HPLC）测定脂质体中多西他赛的含量。采用高速离心法分离脂质体与游离药物并测定包封率。结果制备的DTL粒径均一,平均粒径为104 nm,相变温度为42.20℃。辅料和溶剂不干扰主药含量测定,线性范围为1.0～100.0μg/ml（r=1）;多西他赛平均回收率为99.50%（RSD=0.65%）。药物在脂质体中的包封率大于98%。结论薄膜分散法可用于制备DTL。药物含量和包封率测定方法简便快速,准确可靠,专属性强。     

高效液相色谱法测定奥扎格雷钠脂质体的包封率

 目的 建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定奥扎格雷钠脂质体包封率的检测技术。方法 采用HPLC,以C₁₈色谱柱分离,以0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=7.0)-甲醇-乙腈(80∶15∶5)为流动相,检测波长为274 nm测定。结果 奥扎格雷在10～100 μg/ml浓度范围内线性关系良好,r=0.9997。日内、日间RSD均小于0.5%,方法回收率为(100.2±0.42)%,样品的平均包封率为(94.89±0.44)%。结论 该测定方法简单,准确度高,灵敏度好,适合奥扎格雷钠脂质体的包封率测定。     

多聚胺阳离子脂质体转染效率及细胞毒性的评价

目的评估四种多聚胺阳离子脂质体的转染效率及细胞毒性,筛选高效低毒的阳离子脂质体。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol、DC-Chol与中性磷脂DOPE分别以1：1、3：1摩尔比制备多聚胺阳离子脂质体,转染以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的质粒PIRES2-EGFP入Hela细胞、Hep2细胞,倒置荧光显微镜下检测转染细胞的报告基因表达,筛选出高效的阳离子脂质体,通过MTT法检测转染细胞毒性,从而筛选相对高效低毒的阳离子脂质体。结果所制备的多聚胺阳离子脂质体在透射电镜下呈圆形、椭圆形囊泡样结构,少数呈管状、不规则状,粒径50-200nm,可将质粒PIRES2-EGFP有效转染入Hela细胞、Hep2细胞,其中多聚胺阳离子脂质TC-Chol与DOPE以3：1摩尔比制备的多聚胺阳离子脂质体是一种相对高效低毒的阳离子脂质体,转染效率39．5％～42．1％。结论多聚胺阳离子脂质TC-Chol、DC-Chol与中性磷脂DOPE以一定的摩尔比可制备高效低毒的多聚胺阳离子脂质体,其转染效率和细胞毒性与阳离子脂质的结构和中性磷脂DOPE的比例有关,在基因转染和基因治疗方面具有较广阔的应用前景。     

提高悬浮细胞脂质体转染效率的方法

目的：提高悬浮细胞脂质体转染效率。方法：将细胞分成6组，脂质体组、纤维蛋白（fibronectin)＋脂质体组、电击＋脂质体组、纤连蛋白＋电击＋脂质体组、辐射＋脂质体组、纤维蛋白＋辐射＋脂质体组。各实验组均转染EGFP－N1质粒。计算转染效率。结果和结论：脂质体与其他条件组合使用，可以较好地提高悬浮细胞转染效率。     

表阿霉素脂质体的制备与质量评价

目的:制备盐酸表阿霉素脂质体,建立HPLC含量测定方法并优选包封率测定方法.方法:采用薄膜分散-pH梯度法制备盐酸表阿霉素脂质体;采用HPLC测定药物含量;采用葡聚糖凝胶色谱、超滤及透析3种分离方法测定脂质体的包封率.结果:制备的表阿霉素脂质体粒径较小、分布较窄;3种方法测得盐酸表阿霉素脂质体的包封率分别为96.1%,98.4%,92.9%;结论:薄膜分散-pH梯度法适于制备盐酸表阿霉素脂质体,含量测定方法可靠.超滤法可以准确、快速地测定脂质体包封率.     

微柱离心高效液相色谱法测定盐酸阿霉素磁性热敏脂质体包封率

目的建立微柱离心高效液相色谱法测定盐酸阿霉素磁性热敏脂质体包封率。方法采用SephadexG-50分离脂质体和游离药物,采用高效液相色谱法测定过柱后游离药物含量和过柱前脂质体中药物含量,通过包封率计算公式得出盐酸阿霉素磁性热敏脂质包封率。结果在所选色谱条件下,脂质体其他组分不干扰样品的测定,盐酸阿霉素在5.0100.0μg/m l（r=0.9992,n=7）范围内线性关系良好。洗脱曲线研究结果表明微柱离心法能有效将盐酸阿霉素磁性热敏脂质体与游离药物分离,低、中、高3种浓度的微柱离心法平均加样回收率分别为（97.30±1.11）%、（95.97±1.26）%、（96.78±0.73）%,RSD分别为1.14%,1.32%,0.75%（n=3）。微柱离心高效液相色谱法测定3个不同批号盐酸阿霉素磁性热敏脂质体平均包封率分别为（82.77±0.88）%、（83.03±1.38）%、（80.68±0.42）%（n=3）,RSD分别为1.06%、1.65%、0.51%。结论该方法准确度高,重复性好并方便快捷,可用于盐酸阿霉素磁性热敏脂质体包封率的测定。     

索拉非尼联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 探讨索拉非尼联合奥沙利铂(L-OHP)对肝癌细胞HepG2的抑制作用及其可能的分子机制.方法 索拉非尼和L-OHP单独及联合给药后以CCK8法测定HepG2细胞的增殖,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,用Western blot观察ERK及pERK蛋白的表达.结果 索拉非尼及L-OHP单药对HepG2均有抑制作用,...     

希罗达联合奥沙利铂治疗晚期结直肠癌的临床观察

目的评价希罗达联合奥沙利铂方案治疗晚期结直肠癌的疗效与毒副反应。方法25例晚期结直肠癌患者均采用希罗达联合奥沙利铂治疗，治疗方案为：希罗达片1250mg／m^2，每天2次，第1～14天口服，休息7天；奥沙利铂注射剂130mg／m^2，第1天静滴，维持2h。21天为1个疗程，每例患者至少化疗2个疗程。通过RECIST标准评价患者治疗后的疗效，通过WHO标准观察治疗过程中出现的不良反应。结果25例患者中可评价疗效：CR0例，PR12例，SD10例，PD3例，总有效率48%（12／25）。初治患者有效率100％（3／3），复治患者有效率41％（9／22）。主要毒副反应有手足综合征（40％，10／25）、皮肤色素沉着（68%，17／25）、厌食（40％，10／25）等，但症状较轻，均可耐受；未见明显胃肠道反应；血液学毒性较低，只有16％（4／25）的患者出现I度骨髓抑制。结论希罗达联合奥沙利铂方案用药方便，疗效肯定，副作用低，可广泛应用于晚期结直肠癌的辅助化疗，特别是老年人及门诊患者。     

盐酸表柔比星长循环热敏冻干脂质体的处方工艺研究与体外释药机制探讨

目的研究盐酸表柔比星长循环热敏冻干脂质体（EPI-LTSL）的处方工艺,并探讨其体外释药机制。方法pH梯度法制备EPI-LTSL并进行冷冻干燥,正交试验优化处方,单因素试验优化工艺。通过观察不同温度下EPI在不同介质中形成沉淀的性状,探索EPI-LTSL的体外释药机制。结果最佳处方及工艺为药脂比1∶10,DPPC/MSPC为82∶8,水化介质为250mmol/L柠檬酸盐（pH4.0）。空白脂质体经15000psi（103MPa）高压均质循环5～6次,100nm聚碳酸酯膜挤压过膜3次;调节脂质体外相pH后,35℃水浴20min载药。冻干脂质体内外相乳糖浓度为9%,采用中速预冻（-65℃）及缓慢的解吸干燥可以制备较好的冻干品。EPI与柠檬酸盐形成的沉淀在42℃可以完全溶解,而在25℃成絮状或片状沉淀。结论制备的EPI-LTSL载药量和包封率较高,粒径较小。冻干脂质体外观平整,内部疏松多孔,色泽鲜亮,复水迅速且粒径变化较小。以柠檬酸盐为水化介质制备的EPI-LTSL,在25℃时包载于脂质体内相的EPI以沉淀稳定存在,而在42℃时可完全溶解释放出来。