缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HK11表达的影响

目的探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、己糖激酶Ⅱ（HKⅡ）表达的影响。方法人肝癌细胞HepG2分成3组：缺氧12h组、缺氧24h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下（37℃，5％CO2、2．0％O2饱和度）培养12h和24h，对照组置于正常氧浓度条件下（37℃。5％CO2、21．0％O2饱和度）培养24h。流式细胞仪检测细胞周期分布，免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达，荧光定量PCR法检测HKⅡ mRNA表达量。结果缺氧情况下细胞周期分析处于G0／G1期细胞百分比明显增多，处于G2／M期的细胞减少，并且可见到较明显的凋亡峰的形成，缺氧12h组、缺氧24h组的CO／G1期比例显著高于对照组（p〈0．05）；HIF-1α和HKⅡ在两组缺氧组与对照组比较，其表迭量明显增加（p〈0．05），缺氧24h组与缺氧12h组比较有显著性差异（p〈0．05）。结论HIF-1α可刺激人肝癌细胞HKⅡ表达的增加，细胞阻滞在Go／G1期，以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径。     

缺氧诱导因子-1对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

[目的]探讨细胞凋亡在缺氧肺损伤的作用及缺氧诱导因子-lα（hypoxia inducible factor-lα, HIF-lα）对细胞凋亡的调控作用。[方法]体外培养大鼠肺泡上皮细胞加入氯化钴（cobalt chloride, COC12 ）制作细胞缺氧模型，将小分子干扰缺氧诱导因子-l（ HIF-lαsmall interference RNA, HIF-lαsiRNA）有效的转染至细胞内，检测常氧、缺氧4、24h、小分子干扰后缺氧4、24h后HIF—lαmRNA的表达水平变化，同时应用荧光显微镜以及流式细胞术检测非转染以及转染组不同缺氧时间细胞凋亡率的变化。[结果]常氧下HIF-lαmRNA表达水平较低，随缺氧时间增加HIF-lαmRNA的表达水平明显升高（P〈0．05）；HIF-lαsiRNA可有效沉默HIF-lα，下调率为56％、57％（P〈0．01）。细胞凋亡率随着缺氧时间延长而增加（P〈0．05），48h细胞开始出现坏死现象；通过HIF—lα预处理细胞后，可降低缺氧诱导的细胞凋亡的发生率（P〈0．05）。[结论]缺氧引起肺泡上皮细胞的凋亡，随缺氧时间增加凋亡增加，HIF-lα在缺氧诱导细胞凋亡中起着重要的作用，HIF-lαsiRNA可以减少肺泡上皮细胞凋亡的发生。     

缺氧诱导因子-1与肿瘤的生长和转移

缺氧诱导因子(HIF-1)是一种异源二聚体转录因子,由α和β亚基组成,它与缺氧反应基因的HIF-1结合位点结合,启动靶基因的转录。在促进血管生成,红细胞生成,促进糖酵解,诱导或抑制凋亡等方面具有重要的作用,与肿瘤的生长和转移密切相关。     

缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HKⅡ表达的影响

目的探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)表达的影响。方法人肝癌细胞HepG2分成3组:缺氧12h组、缺氧24h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下(37℃,5%CO2、2.0%O2饱和度)培养12h和24h,对照组置于正常氧浓度条件下(37℃,5%CO2、21.0%O2饱和度)培养24h。流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达,荧光定量PCR法检测HKⅡmRNA表达量。结果缺氧情况下细胞周期分析处于G0/G1期细胞百分比明显增多,处于G2/M期的细胞减少,并且可见到较明显的凋亡峰的形成,缺氧12h组、缺氧24h组的G0/G1期比例显著高于对照组(p<0.05);HIF-1α和HKⅡ在两组缺氧组与对照组比较,其表达量明显增加(p<0.05),缺氧24h组与缺氧12h组比较有显著性差异(p<0.05)。结论HIF-1α可刺激人肝癌细胞HKⅡ表达的增加,细胞阻滞在G0/G1期,以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径。     

缺氧诱导因子-1对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

【目的】探讨细胞凋亡在缺氧肺损伤的作用及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对细胞凋亡的调控作用。【方法】体外培养大鼠肺泡上皮细胞加入氯化钴(cobalt chloride,COCl2)制作细胞缺氧模型,将小分子干扰缺氧诱导因子-1(HIF-1αsmall interference RNA,HIF-1αsi RNA)有效的转染至细胞内,检测常氧、缺氧4、24 h、小分子干扰后缺氧4、24 h后HIF-1αmRNA的表达水平变化,同时应用荧光显微镜以及流式细胞术检测非转染以及转染组不同缺氧时间细胞凋亡率的变化。【结果】常氧下HIF-1αmRNA表达水平较低,随缺氧时间增加HIF-1αmRNA的表达水平明显升高(P<0.05);HIF-1αsiRNA可有效沉默HIF-1α,下调率为56%、57%(P<0.01)。细胞凋亡率随着缺氧时间延长而增加(P<0.05),48 h细胞开始出现坏死现象;通过HIF-1αsi RNA预处理细胞后,可降低缺氧诱导的细胞凋亡的发生率(P<0.05)。【结论】缺氧引起肺泡上皮细胞的凋亡,随缺氧时间增加凋亡增加,HIF-1α在缺氧诱导细胞凋亡中起着重要的作用,HIF-1αsiRNA可以减少肺泡上皮细胞凋亡的发生。     

蛋氨酸对肝癌细胞生长影响的实验研究

目的：观察蛋氨酸对肝癌细胞和肝细胞生长的影响。方法：将肝癌细胞株BEL－7402、肝细胞株L－02分别置于不含蛋氨酸而含同型半胱氨酸培养基（et^-Hcy^ )和含蛋氨酸对各组细胞生长的影响。结果：肝细胞株L－02在Met^-Hey^ 和Met^ Hcy^-中生长无差异，细胞总数及处于各细胞周期细胞数量的比例无明显差异。与Met^ Hcy^-组相比，在Met^-Hcy^ 培养基中的BEL－7402细胞生长受抑，G0G1期细胞比例下降，S期细胞比例升高。结论：培养基中缺少蛋氨酸，肝癌细胞株BEL－7402的生长受到抑制。     

缺氧诱导因子-1α调节研究的进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)广泛参与哺乳动物细胞中缺氧诱导产生的适应性反应,是机体细胞适应低氧的重要转录调节因子.HIF-1蛋白α亚基(HIF-1α)受细胞内氧分压精细调节,对于低氧环境中机体的生存和肿瘤组织的生长具有重要意义.正常氧分压条件下,HIF-1α通过泛素-蛋白水解酶系统迅速降解,在胞浆中含量很低.当受到细胞氧分压降低或其它调节因素作用时,HIF-1α降解途径被阻断,从而在胞浆中积聚、活化,并转移到细胞核,与HIF-1蛋白β亚基(HIF-1β)形成二聚体HIF-1分子,后者与相应的靶基因序列结合,调节基因的转录.在对HIF-1α蛋白质稳定性及转录活性的调节过程中,其氨基酸残基的羟基化和磷酸化是多种因素的主要调节方式.     

缺氧条件下大豆异黄酮对胃癌细胞增殖和缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:研究缺氧条件下大豆异黄酮(soy bean isoflavone,SI)对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用及可能机制。方法:运用产气袋法(GasPaK)制造缺氧条件,实验分为正常对照、SI、缺氧对照和缺氧SI四组,用MTT法检测常氧和缺氧条件下药物效应。流式细胞仪分析各组细胞周期分布,透射电镜观察细胞超微形态的改变,免疫细胞化学法检测各组细胞缺氧诱导因子HIF-1α和FAS的表达。结果:不同浓度SI在常氧和缺氧条件下都对人胃癌细胞株SGC-7901生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系,细胞均滞留于G2/M期,缺氧条件下SI组抑制作用增加,细胞凋亡率增加。透射电镜观察常氧下SI处理后细胞出现凋亡,缺氧条件下出现凋亡和坏死。SI在不同氧条件下均上调Fas表达,并能下调因缺氧表达增加的HIF-1。结论:SI对人胃癌细胞生长有抑制作用,其机制可能通过阻抑细胞周期进程,上调FAS蛋白表达,从而诱导胃癌细胞凋亡而实现的。缺氧条件下SI抑制作用增强,抑制HIF-1α的表达可能是其重要机制。     

缺氧诱导因子1的调节基因与妊娠高血压综合征

缺氧诱导因子1是一种缺氧反应基因的中介因子，功能是通过调控其靶基斟的表达来维持体内的氧平衡。研究发现，缺氧诱导因子1参与妊娠高血压综合征的低氧反应，其调节基因在妊娠高血压综合征的发病及病理生理过程中具有重要作用。就缺氧诱导吲子1的调节基因与妊娠高血压综合征关系的研究进展作综述。     

缺氧诱导因子-1在宫颈癌发生中的作用研究

缺氧诱导因子-1是一种重要的缺氧应答调控因子，能与缺氧反应基因上特定位点结合，启动靶基因的转录，使机体对缺氧产生一系列适应性反应。其在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。该文就缺氧诱导因子-1的生物学特性和在宫颈癌中的研究现状作以概述。     

缺氧诱导因子-1对卵巢恶性肿瘤的影响

临床上已经有许多证据表明缺氧的肿瘤细胞不仅增加肿瘤对放化疗的抗拒性，且使之更具有侵袭性，容易发生远处转移。当肿瘤缺氧时可通过缺氧诱导因子-1／血管内皮生长因子诱导血管生成，以及通过影响细胞周期的进程、增殖和凋亡速率抑制肿瘤的生长，同时细胞间的黏附力降低，使肿瘤细胞处于暂时性的相对静态并保持其侵袭力为日后的生长及转移做准备。     

缺氧诱导因子-1在宫颈癌发生中的作用研究

缺氧诱导因子-1是一种重要的缺氧应答调控因子,能与缺氧反应基因上特定位点结合,启动靶基因的转录,使机体对缺氧产生一系列适应性反应。其在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。该文就缺氧诱导因子-1的生物学特性和在宫颈癌中的研究现状作以概述。     

缺氧诱导因子-1对卵巢恶性肿瘤的影响

临床上已经有许多证据表明缺氧的肿瘤细胞不仅增加肿瘤对放化疗的抗拒性,且使之更具有侵袭性,容易发生远处转移。当肿瘤缺氧时可通过缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子诱导血管生成,以及通过影响细胞周期的进程、增殖和凋亡速率抑制肿瘤的生长,同时细胞间的黏附力降低,使肿瘤细胞处于暂时性的相对静态并保持其侵袭力为日后的生长及转移做准备。     

FAT10过表达对肝癌细胞HepG2侵袭及迁移能力的影响

目的 探讨FAT10过表达对肝癌细胞HepG2侵袭及迁移的影响.方法 采用脂质体转染法建立FAT10基因过表达的HepG2细胞株;采用蛋白质印迹法检测转染重组表达载体pcDNA3-FAT10后,HepG2细胞中FAT10蛋白的表达水平.体外侵袭实验及划痕实验检测FAT10基因过表达对HepG2细胞迁移及侵袭能力的改变,并采用芯片检测FAT10下游与细胞侵袭转移相关基因的差异表达.结果 蛋白质印迹法检测结果显示,转染重组表达载体pcDNA3.1-FAT10的HepG2细胞中FAT10蛋白均过表达;FAT10过表达能明显提高HepG2细胞的侵袭及迁移能力.结论 FAT10基因在HepG2细胞中过表达能提高肝癌的侵袭及迁移能力,并促进肝癌的发生及发展.     

缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）反义寡核苷酸对宫颈癌细胞增殖的影响

目的研究缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸（asHIF-1α）对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及其相关机理。方法使用宫颈癌细胞株He1a建立裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为3组,分别注射生理盐水,HIF-1α正义寡核苷酸和HIF-1α反义寡核苷酸,观察三组动物的肿瘤生长曲线,四周后处死裸鼠,计算肿瘤的体积及其抑制率,绘制皮下肿瘤生长曲线。应用免疫组化技术检测种植瘤内VEGF和HIF-1α的变化。结果 asHIF-1α有明显的抑瘤作用,肿瘤生长曲线减缓,体积抑制率为33%、瘤重抑制率为54%（P〈0.05）;反义治疗组种植瘤内HIF-1α和VEGF蛋白含量显著降低（P〈0.05）。结论 asHIF-1α对实验动物荷瘤生长具有明显的抑制作用,其机制是通过抑制HIF-1α表达,进而抑制VEGF的合成,从而使肿瘤组织的血管形成被抑制。     

缺氧诱导因子1的调节基因与妊娠高血压综合征

缺氧诱导因子1是一种缺氧反应基因的中介因子,功能是通过调控其靶基因的表达来维持体内的氧平衡.研究发现,缺氧诱导因子1参与妊娠高血压综合征的低氧反应,其调节基因在妊娠高血压综合征的发病及病理生理过程中具有重要作用.就缺氧诱导因子1的调节基因与妊娠高血压综合征关系的研究进展作综述.     

高海拔地区缺氧诱导因子与妊娠期高血压疾病病因研究

妊娠期高血压疾病(hypertension disorder complicatingpregnangcy,HDCP)是妊娠期所特有的疾病,同样也是在高海拔地区严重威胁母儿安全的疾患之一。虽然HDCP病因学说众多,但是至今尚无定论,由于HDCP病变的核心是胎盘局部缺血缺氧引起的,低氧诱导因子的参与在此过程中起关键作用     

缺氧诱导因子-1与子痫前期

缺氧诱导因子-l(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是由α和ββ两个亚单位形成的二聚体,其功能是体内氧平衡的主要调节因子,通过与靶基因特定序列DNA结合而调控其转录.新近研究发现HIF-1参与了与子痫前期相关的低氧反应基因表达的调节,在子痫前期病理生理过程中起到关键作用.研究HIF-1及其相关因子在子痫前期疾病发生、发展中的作用,期望为子痫前期疾病的治疗寻找新靶点.     

缺氧诱导因子-1与子痫前期

缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是由α和β两个亚单位形成的二聚体,其功能是体内氧平衡的主要调节因子,通过与靶基因特定序列DNA结合而调控其转录。新近研究发现HIF-1参与了与子痫前期相关的低氧反应基因表达的调节,在子痫前期病理生理过程中起到关键作用。研究HIF-1及其相关因子在子痫前期疾病发生、发展中的作用,期望为子痫前期疾病的治疗寻找新靶点。