CD4+CD25+调节性T 细胞对乳腺癌细胞上皮间质转化和ALDH1+干样细胞的影响*

目的:研究CD4+CD25+调节性T 细胞（regulatory T cells ,Tregs）对乳腺癌细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition ,EMT ）、细胞迁移侵袭能力,及ALDH1+干样细胞比例的影响。方法:采用免疫磁珠法分离乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+Tregs,CD4+CD25+Tregs与乳腺癌BT474、MCF-7 细胞系共培养（共培养组）,BT474、MCF-7 单独培养（对照组）。 检测共培养组和对照组乳腺癌细胞EMT 相关标志物表达的变化,及细胞迁移和侵袭能力的变化。此外,检测BT474 细胞中ALDH1+干样细胞、微球形成能力和自我更新能力的变化。结果:CD4+CD25+Tregs诱导BT474 和MCF-7 细胞间质性标志物表达增高,诱导MCF-7 细胞上皮性标志物E-cadherin 表达降低。CD4+CD25+Tregs诱导BT474 和MCF-7 细胞迁移和侵袭能力上调。共培养组BT474 细胞中ALDH1+干样细胞比例、微球体形成能力、自我更新能力较对照组增强。结论:CD4+CD25+Tregs可诱导乳腺癌细胞发生EMT ,增强细胞体外迁移和侵袭能力,同时促进ALDH1+干样细胞增加。      

原发性肝癌患者外周血和癌组织中调节性T细胞数量及其临床意义

目的 探讨原发性肝癌患者外周血中调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞(Treg/CID4+)比值和肝癌组织中Treg数量及其临床意义.方法 63例原发性肝癌患者均行根治性手术切除,采用流式细胞术检测患者手术前外周血中Treg/CD4+比值,用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中Treg的表达.结果 原发性肝癌患者外周血中Treg/CD4+比值显著高于乙型肝炎患者(P<0.01)及正常对照组(P<0.01).癌组织中Treg数量为(15.69±13.29)个/mm2,癌旁肝组织、10例乙型肝炎肝组织、10例正常肝组织中未见或极少见Treg.外周血中Treg/CD4+比值与癌组织中Treg数量呈正相关(P=0.024).外周血和癌组织中Treg数量高者,术后5年生存率低(P值分别为0.042、0.019);癌组织中Treg数量高者,术后5年无瘤生存率低(P=0.001).结论 原发性肝癌患者外周血和组织中调节性T细胞水平升高;外周血中Treg/CD4+比值及癌组织中Treg数量可作为预测患者根治术后预后的免疫学指标.     

原发性肝癌患者调节性T细胞与预后的关系

目的：探讨肝细胞肝癌 （HCC） 患者T淋巴细胞亚群对其预后的影响。方法： 对138例HCC患者的临床病理资料进行回顾性分析, 采用流式细胞技术 （FCM） 检测早晚期HCC患者外周血T淋巴细胞不同分群占外周血单个核细胞 （PBMC） 的比例,Kaplan-Meier法检验T淋巴细胞亚群对HCC患者生存的影响。结果： 138例HCC患者的1年生存率为61%, 2年生存率为39%, 早晚期HCC患者的中位生存时间分别为28、 12个月。晚期HCC患者的CD4+T细胞比例低于早期患者, 调节性T细胞 （Treg） 与NK细胞比例高于早期患者, 并且差异均有统计学意义 （P<0.05）。单因素分析显示T淋巴细胞亚群中Treg是影响HCC患者预后的相关因素。在进一步分析影响Treg的因素时发现有肝硬化的HCC患者外周血Treg比例及绝对数高于无肝硬化的HCC患者 （P=0.029）, 铁蛋白 （Ferr） 正常的HCC患者外周Treg绝对数高于Ferr水平高的HCC患者 （P=0.027）。结论： HCC患者的Treg在一定程度上影响其预后, Treg比例>7%是影响晚期肝硬化HCC患者预后的独立危险因素。     

MicroRNA与肿瘤上皮-间质转化关系的研究进展

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,在肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。microRNA(miRNA)作为一类长度为19-25个核苷酸的短链非编码RNA,是转录后调控网络中重要的调控因子,与肿瘤EMT相关基因表达之间关系密切,已成为肿瘤领域的研究热点。现对近年来miRNA与肿瘤EMT关系的研究进展做一综述。     

乳腺癌上皮间质转化与耐药关系的研究进展

肿瘤上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是指肿瘤在各种因素作用下上皮细胞转变为具有高侵袭、转移能力间质表型的过程。EMT与细胞上皮表型标志物E-钙黏蛋白表达下调、间质表型标志物上调和相关基因表达改变有关。EMT的发生能够促进乳腺癌侵袭、转移和干细胞特性获得,诱导乳腺癌细胞对化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗产生获得性耐药。同时研究发现,乳腺癌耐药细胞能够发生EMT,并获得干细胞表型。因此,针对乳腺癌细胞EMT的相关研究可以帮助人们在肿瘤抗耐药治疗中找到新的策略。本文旨在对EMT与乳腺癌发生获得性耐药之间关系的最新研究进展作一综述。     

肝细胞肝癌上皮间质转化的相关分子机制

侵袭和转移是造成肝细胞肝癌(HCC)预后不良的重要因素.近年来,HCC上皮间质转化(EMT)已经被认为是HCC侵袭、转移的关键细胞学基础.尽管引起和维持EMT的分子机制并没有被完全阐明,但是转化生长因子-β (TGF-β)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)、细胞核转录因子-κB (NF-κB)、Wnt/β-连接素(β-catenin)等细胞信号通路在EMT过程中的所起到的重要作用已经被证实.上述通路通过调控EMT过程直接或间接影响HCC的预后,这也为HCC的新型靶向药物的研究提供了分子基础.     

上皮间质转化与肿瘤干细胞的关系

目前越来越多的研究显示上皮间质转化(EMT)参与了肿瘤干细胞的形成以及肿瘤细胞的浸润、迁移和转移,不仅增强了癌细胞的侵袭和转移能力,还可使细胞获得自我更新等干细胞特性,促进肿瘤干细胞的产生.因此,研究EMT与常见干细胞之间的关系对于寻找控制肿瘤侵袭和转移的有效途径有非常重要的意义,亦可为肿瘤的治疗提供新的靶点.     

肝癌微环境中CD4~+CD25~+调节性T细胞与T细胞免疫的关系

目的:探讨肝细胞癌组织中CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulartory Tcell,Treg)与肿瘤微环境T细胞免疫的关系。方法:对52例肝细胞癌组织和癌旁组织用CD4、CD25双重酶标免疫组化染色和用CD8 EnVision法染色,对癌组织中Treg细胞和CD4 T、CD8 T、CD4 T/CD8 T比值进行相关性分析。结果:正常肝脏组织中未发现Treg细胞,肝癌和癌旁组织中Treg细胞单个高倍视野平均数分别为(7.6±2.84)、(5.2±1.67),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD4 T细胞单个高倍视野平均数分别为(18.2±3.57)、(25.9±3.36),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD8 T细胞单个高倍视野平均数分别为(49.9±6.61)、(49.5±6.43),两组比较无明显差异;肝癌及癌旁组织中CD4 T/CD8 T比值分别为(0.37±0.08)、(0.53±0.09),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性CD4 T淋巴细胞的数量及CD4 T/CD8 T比值呈显著负相关(P<0.01),而与浸润性CD8 T淋巴细胞的数量分布无明显相关性。结论∶Treg细胞在肝癌微环境中可能通过抑制CD4 T淋巴细胞的增殖来抑制肿瘤局部免疫。     

乳腺癌中FoxP3表达与上皮间质转化的相关性及其意义

  目的  探讨乳腺癌组织FoxP3、TGF-β1的表达和上皮间质转化(EMT)的相互关系及其临床意义。  方法  免疫组织化学法检测74例乳腺癌组织中FoxP3、TGF-β1、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达情况, 分析乳腺癌FoxP3蛋白表达与临床病理特征的关系, 以及FoxP3、TGF-β1的表达和EMT发生之间的关系。  结果  FoxP3与TGF-β1的表达率和EMT的发生率分别为36.5%(27/74)、39.2%(29/74)和40.5%(30/74)。乳腺癌FoxP3表达与淋巴结转移相关(P < 0.05), 与其他临床病理特征无关(P>0.05)。FoxP3和TGF-β1的表达之间存在相关性, 而TGF-β1可以促进EMT发生(P < 0.05)。  结论  FoxP3的表达与乳腺癌淋巴结转移和EMT的发生相关, 可能作为预测乳腺癌转移可能性的标记物。      

上皮-间质转化与肿瘤耐药性的研究进展

上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞表型向间质细胞表型转变的过程,在肿瘤发生及其演变中发挥着重要的作用。近期研究表明,EMT在多种肿瘤的化疗耐药中发挥重要作用,而化疗药物也能增强肿瘤的恶性程度包括诱导EMT表型的产生。本文结合国内外最新报道,对EMT与肿瘤耐药关系的研究进展进行综述。      

LGR5与肝癌上皮间质转化的关系

目的:研究LGR5与原发性肝癌侵袭转移过程中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)间的关系。方法:采用免疫组织化学的方法(SP法),分别检测20例原发性肝癌组织、20例癌旁组织及14例正常肝组织中LGR5、E-钙黏蛋白(E-CAD)及N-钙黏蛋白(N-CAD)的表达情况。并分析它们与原发性肝癌临床病理参数的关系。结果:LGR5、E-CAD、N-CAD的表达:在20例肝癌组织中,LGR5、E-CAD、N-CAD的阳性表达分别为15例（75%）、7例（35%）及16例（80%）。在20例癌旁组织中,阳性表达分别为11例（55%）、11例（55%）及11例（55%）。在14例正常肝组织中,阳性表达分别为4例（29%）、11例（79%）及4例（29%）。统计分析表明,LGR5在肝癌中的阳性表达率均明显高于癌旁及正常组织（P<0.05）。而E-CAD在肝癌中的阳性表达率则明显低于癌旁及正常组织中的阳性表达（P<0.05）。同时,N-CAD在肝癌中的阳性表达率明显高于癌旁及正常组织（P<0.05）。LGR5、E-CAD、N-CAD在原发性肝癌中的表达与临床病理参数的关系:LGR5的表达与患者术前肝功能有关（P<0.05）,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、分级、HBV、肝硬化、甲胎蛋白(AFP)等差异无统计学意义;而E-CAD、N-CAD的表达与术前肝功能、年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、HBV、肝硬化、甲胎蛋白差异均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析结果:E-CAD、N-CAD表达呈负相关（r=-0.999,P<0.05）。而LGR5与E-CAD表达呈负相关（r=-1.00,P<0.05）,与N-CAD的表达呈正相关（r=0.998,P<0.05）。结论:原发性肝癌中存在明显的上皮间质转化现象。LGR5与原发性肝癌侵袭转移过程中上皮间质转化有关。     

酸性环境诱导肝癌HepG2细胞EMT

目的 研究酸性环境对肝癌HepG2细胞上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法分别在酸性和碱性条件下培养HepG2细胞,观察细胞形态的区别。划痕实验检测两组细胞的迁移能力,Matrigel侵袭实验检测细胞的侵袭能力。RT-PCR检测两组细胞EMT相关基因mRNA的表达水平,Western blot检测两组细胞EMT相关基因蛋白的表达水平。结果 酸性条件下培养的HepG2细胞形态明显从上皮型转变为间质型;酸性条件下HepG2细胞的迁移能力明显强于碱性条件下;酸性条件下HepG2细胞穿越Matrigel的数量明显多于碱性条件下;酸性条件下HepG2细胞EMT相关基因Vimentin、Slug、Snail及Zeb1的mRNA表达以及EMT相关蛋白Vimentin和MMP9的表达强度均明显高于碱性条件下。结论 酸性环境能诱导肝癌HepG2细胞EMT的发生。     

核转录因子-κB与肿瘤上皮间质转化

 核转录因子-κB（NF-κB）是肿瘤上皮间充质转化（EMT）的重要调节因子。肿瘤发生EMT能够增强肿瘤浸润及远处转移能力,是肿瘤耐药的原因之一。目前研究发现,信号转导因子Snail、Slug、Twist、Zeb等在NF-κB调控肿瘤EMT中起重要作用。药物及靶向干扰NF-κB可以逆转肿瘤EMT。NF-κB有望成为将来肿瘤治疗的有效靶点之一。     

PD-1在肝细胞癌肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及与预后的相关性

背景与目的:程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)在调节外周免疫耐受中发挥重要作用,PD-1在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)肿瘤浸润淋巴细胞中的表达状态与效应细胞CD8+T淋巴细胞的关系尚不清楚,探讨HCC肿瘤浸润淋巴细胞中PD-1的表达及预后意义...     

Prognostic value of tumor-infiltrating FOXP3 regulatory T cells in patients with hepatocellular carcinoma

Aims

CD4⁺ CD25⁺ forkhead box P3 (FOXP3)⁺ T_reg accumulate in malignant tumors and negatively regulate anti-tumor immunity. To determine the prognostic value of tumor-infiltrating regulatory T cells (T_reg), we conducted a retrospective study on 164 patients with hepatocellular carcinoma (HCC) who underwent curative hepatic resection.

Methods

We investigated the number of tumor-infiltrating FOXP3⁺ T_reg in formalin-fixed HCC specimens. The number of FOXP3⁺ T_reg for each case was calculated as the total number of positive cells per 10 high-power fields (HPF) on light microscopy. Long-term survival rate after resection according to the number of FOXP3⁺ T_reg was accessed by univariate and multivariate analyses.

Results

The mean and median numbers of tumor-infiltrating T_reg were 29.0 and 14 per 10 HPF for FOXP3⁺ T_reg. The number of FOXP3⁺ T_reg was positively correlated with preoperative serum alpha-fetoprotein levels. The disease-free survival rate was significantly lower in patients with high T_reg counts (≥14, n = 84) than in those with low T_reg counts (<14, n = 80) (13.6% vs. 25.7% at 5 years; P = 0.02). By multivariate analysis, the high T_reg counts, presence of portal vein invasion, and elevation of preoperative aspartate aminotransferase level were independent predictive factors of tumor recurrence.

Conclusions

The high number of tumor-infiltrating T_reg is an independent predictive factor of tumor recurrence after hepatic resection for HCC.     

BMP4 通过诱导EMT 促进肝癌迁移侵袭*

目的:检测BMP 4 在肝癌中的表达并探讨BMP 4 在诱导肝癌EMT 中的作用,进而研究其对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测肝癌组织中BMP 4 的表达,分析其与肝癌临床病理资料之间的关系。将BMP 4 表达质粒转染至肝癌细胞系HepG2 中,诱导BMP 4 外源性过表达。观察BMP 4 转染前、后HepG2 的细胞形态学改变;Westernblot检测转染前、后HepG2 中BMP 4、EMT 相关蛋白（E-cadherin、Vimentin）表达变化情况;划痕和侵袭实验检测BMP 4 对细胞迁移侵袭能力的影响。结果:BMP 4 与患者的年龄、病理分级、临床分期、不良预后密切相关。BMP 4 过表达后HepG2 呈现典型的EMT 形态学改变,E-cadherin 表达下调、Vimentin 表达上调、细胞的迁移侵袭能力显著增强。结论:BMP 4 与肝癌临床病理资料密切相关,并可能通过诱导EMT 促进肝癌细胞的迁移侵袭能力。      

Risk characteristics with seven epithelial-mesenchymal transition-related genes are used to predict the prognosis of patients with hepatocellular carcinoma

BackgroundEpithelial-mesenchymal transition (EMT)-related genes (ERGs) have been shown to play an important role in cancer invasion, tumor resistance, and tumor metastasis of hepatocellular carcinoma. This study sought to examine the prognostic value of ERGs and other pre-hepatoma genes.MethodsRelevant data from The Cancer Genome Atlas (TCGA) were analyzed and synthesized. Specifically, 1,014 ERGs were downloaded and subject to a gene set enrichment analysis; 318 different EAG expressions were found, and the possible molecular mechanism of EAG was predicted by GO analysis and KEGG analysis. To determine the prediction of ERGS, a Cox regression model was used to establish a risk hypothesis. Based on risk patterns, patients were divided into high- or low-risk groups. Kaplan-Meier and receiver operating characteristic (ROC) curves confirmed the predictive value of the model.ResultsSeven prognostically relevant ERGs (i.e., ECT2, EZH2, MYCN, ROR2, SPP1, SQSTM1, and STC2) were identified. Using Cox’s regression analysis method, appropriate cases were selected to establish a new risk prediction model. Under the risk model, the overall survival rate of the low-risk group samples was higher than that of the high-risk group samples (P<0.00001).ConclusionsIn short, we developed a risk model for liver cancer based on ERGs terminology. This model improve the postpartum treatment of patients with liver cancer.