lncRNA Neat1介导p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路调控白蛋白诱导HK-2细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA核富集丰富转录本1(lncRNA Neat 1)通过miR-204-3p介导p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路调控白蛋白诱导HK-2细胞凋亡的机制。方法 将HK-2细胞分为对照组(正常培养)、模型组(白蛋白损伤模型)、p38抑制药组(10μmol·L^-1p38抑制药SB203580处理后造模)、OV-Neat 1组(转染Neat 1过表达质粒后造模)和OV-Neat 1+p38抑制药组(转染Neat 1过表达质粒,再用p38抑制药SB203580处理后造模)。用细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞增殖活力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-204-3p、B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果 对照组、模型组、p38抑制药组、OV-Neat 1组和OV-Neat 1+p38抑制药组的细胞增殖活性分别为0.95±0.02、0.70±0.01、0.78±0.0...     

藁本内酯对帕金森病细胞模型的保护作用及其机制研究

目的 研究藁本内酯对帕金森病细胞模型的保护作用及其作用机制。方法 取对数生长期的SK-N-SH细胞使用200μmol·L^-1的MPP⁺处理48 h,构建帕金森病细胞模型；以正常培养基培养的细胞作为对照组。藁本内酯组加入终浓度为30.0μmol·L^-1藁本内酯进行培养；P79350组加入30.0μmol·L^-1的藁本内酯后，实验结束前1 h加入50μmol·L^-1的P79350处理细胞；对照组和MPP⁺组加入不含药物的培养基培养。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力；以流式细胞术检测细胞周期情况和细胞凋亡率；以蛋白质印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(p38 MAPK/JNK)信号通路和增殖、凋亡相关蛋白的表达水平。结果 对照组、MPP⁺组和10.0、20.0、30.0、50.0、100.0和200.0μmol·L^-1藁本内酯组的细胞存活率分别为(100.00±1.91)%、(35...     

唑来膦酸对高糖诱导的成骨细胞分化、凋亡和氧化应激的影响

目的 探讨唑来膦酸对高糖诱导的成骨细胞分化、凋亡和氧化应激的影响。方法 将人成骨细胞hFOB 1.19分为对照组、高糖组(5.5 mol·L^-1葡萄糖)、低剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-11 mol·L^-1唑来膦酸)、中剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-10 mol·L^-1唑来膦酸)、高剂量实验组(5.5 mol·L^-1葡萄糖+1×10^-9 mol·L^-1唑来膦酸)。通过细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞增殖活性,用碱性磷酸酶（ALP）染色检测ALP活性,用Alizarin red S染色检测钙结节形成情况;用蛋白质印迹（Western Blot）法检测唑来膦酸对高糖诱导的hFOB 1.19细胞分化以及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路相关蛋白表达的影响;用流式细胞术检测唑来膦酸对高糖诱导的hFOB 1.19...     

灵芝酸D通过调控p53/Bax通路对人结直肠肿瘤细胞的作用机制研究

目的 探究灵芝酸D（GAD）对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组：空白对照组（完全培养基）、低(5μmol·L^-1 GAD)、中(10μmol·L^-1 GAD)、高(20μmol·L^-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α+20μmol·L^-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53（p53）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为（96.33±2.62）%,（95.00±1.63）%,（70.33±5.91）%和（49.00±3.56）%;4组Caspase-...     

紫云英苷对肺癌A549细胞增殖、迁移、凋亡和氧化应激的影响

目的 探讨紫云英苷(AG)对肺癌A549细胞增殖、迁移、凋亡和氧化应激的影响及其机制。方法 将体外培养的A549细胞分为AG低(AG-L)、中(AG-M)、高(AG-H)剂量(分别给予25、50、100μmol·L^-1 AG处理)组和AG-H+核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路激活剂SFN(AG-H+SFN,100μmol·L^-1 AG+10μmol·L^-1 SFN)组及对照组(正常培养不做处理)。用噻唑蓝法、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移和凋亡能力，用蛋白质印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。结果 对照组和AG-L、AG-M、AG-H组及AG-H+SFN组的细胞增殖活力(48 h时光密度值)分别为0.62±0.04、0.54±0.03、0.43±0.03、0.34±0.03和0.48±0.03,迁移细胞数分别为(121.06±11.79)、(101.1...     

槲皮素通过调控GAS5/miR-18b-5p轴抑制神经内分泌肿瘤细胞活性的研究

目的 探讨槲皮素抑制胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NEN)的作用机制。方法 将人胰腺神经内分泌瘤细胞BON-1细胞随机分为对照组、槲皮素组(80μmol·L^-1槲皮素)、槲皮素+si-NC组(转染si-NC+80μmol·L^-1槲皮素)、槲皮素+si-生长抑制特异性基因5(GAS5)组(转染si-GAS5+80μmol·L^-1槲皮素)。用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA相对表达水平,用荧光原位杂交(FISH)实验检测细胞中GAS5和miR-18b-5p的阳性表达情况。结果 双荧光素酶报告基因结果发现,GAS5与miR-18b-5p靶向结合。对照组、槲皮素组、槲皮素+si-NC组、槲皮素+si-GAS5组细胞的GAS5表达水平分别为1.00±0.13、1.72±0.19、1.78±0.14和1.16±0.11,miR-18b-5p表达水平分别为1.00±0.15、0.67±0.08、0.72±0.06和0.95±0.11,Bax m...     

米非司酮联合STAT3抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的 研究米非司酮联合p38丝裂原活化蛋白激酶（STAT3）抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 收集本院2020年2月～9月收治的子宫内膜异位症患者活检时的子宫内膜组织,分离人子宫内膜异位症细胞。将细胞分成对照组（正常培养）、米非司酮组(0.01mmol·L^-1米非司酮处理)、AG490组（40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理）、联合组(0.01 mmol·L^-1米非司酮+40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理)。用噻唑蓝实验检测细胞增殖情况;用碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期;用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;用膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡情况; Transwell小室检测细胞侵袭情况。结果 对照组、米非司酮组、AG490组、联合组的子宫内膜异位症细胞存活率分别为（100.00±11.00）%,（76.56±8.94）%,（83.12±6.69）%和（50.29±6.27）%;这4组G0/G1比例分别为（42.74±4.94）%,（5...     

米非司酮联合STAT3抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的 研究米非司酮联合p38丝裂原活化蛋白激酶（STAT3）抑制药AG490对子宫内膜异位症细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 收集本院2020年2月～9月收治的子宫内膜异位症患者活检时的子宫内膜组织,分离人子宫内膜异位症细胞。将细胞分成对照组（正常培养）、米非司酮组(0.01mmol·L^-1米非司酮处理)、AG490组（40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理）、联合组(0.01 mmol·L^-1米非司酮+40μmol·L-1STAT3抑制剂AG490处理)。用噻唑蓝实验检测细胞增殖情况;用碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期;用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;用膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡情况; Transwell小室检测细胞侵袭情况。结果 对照组、米非司酮组、AG490组、联合组的子宫内膜异位症细胞存活率分别为（100.00±11.00）%,（76.56±8.94）%,（83.12±6.69）%和（50.29±6.27）%;这4组G0/G1比例分别为（42.74±4.94）%,（5...     

鸢尾苷元对血管紧张素Ⅱ作用下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨鸢尾苷元对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用差速贴壁法获得纯化的大鼠心肌成纤维细胞,采用MTT法和原位末端标记法检测鸢尾苷元或磷脂肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,采用RT-PCR检测鸢尾苷元对AngⅡ作用下心肌成纤维细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA表达的影响,Western blot法检测鸢尾苷元对AngⅡ作用下心肌成纤维细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-Akt、T-Akt表达的影响。结果 AngⅡ能明显促进心肌成纤维细胞增殖,抑制细胞凋亡;给予50,100和200μmol·L^-1鸢尾苷元后,AngⅡ使心肌成纤维细胞促增殖和抑凋亡作用明显受到抑制,且200μmol·L^-1鸢尾苷元作用最显著。200μmol·L^-1鸢尾苷元能够明显抑制AngⅡ诱导的Bcl-2 mRNA和p-Akt、Bcl-2蛋白的表达;减弱AngⅡ对Bcl-2 mRNA和蛋白表达的...     

丝裂原活化蛋白激酶参与血小板源生长因子刺激的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖(英文)

选择大鼠主动脉平滑肌细胞作为细胞模型 ,观察丝裂原活化蛋白激酶 ( MAPK)信号通路在血小板源生长因子 ( PDGF)诱导的血管平滑肌细胞( VSMC)增殖中的作用。用 [3 H]Td R参入率作为衡量 VSMC增殖的指标 ,以 Western-印迹方法 ,用磷酸化一抗测 MAPK磷酸化的程度作为衡量 MAPK活性的指标 ,实验结果发现 ,PDGF( 0 .0 2 - 2 0μg·L-1)诱导 VSMC增殖呈剂量依赖性。 PDGF( 2μg· L-1)能持续性激活 MAPK。用 PD980 59( 1 0 -1 0 0 mol· L-1)预处理 1 5min后 ,MAPK活性较对照组均有明显差别 ( P<0 .0 5) .MAPK反义寡核苷酸能明显抑制 PDGF诱导的 MAPK的激活 ,并明显抑制 VSMC[3 H]Td R参入。上述结果表明 ,MAPK参与 PDGF促细胞增殖的信号途经 ,它的持续性激活与细胞增殖有关 ,针对 p42 /p44MAPK设计的反义寡核苷酸类能有效抑制 PDGF诱导的血管平滑肌细胞增殖。     

丝裂原活化蛋白激酶参与血小板源生长因子刺激的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖(英文)

选择大鼠主动脉平滑肌细胞作为细胞模型 ,观察丝裂原活化蛋白激酶 ( MAPK)信号通路在血小板源生长因子 ( PDGF)诱导的血管平滑肌细胞( VSMC)增殖中的作用。用 [3 H]Td R参入率作为衡量 VSMC增殖的指标 ,以 Western-印迹方法 ,用磷酸化一抗测 MAPK磷酸化的程度作为衡量 MAPK活性的指标 ,实验结果发现 ,PDGF( 0 .0 2 - 2 0μg·L-1)诱导 VSMC增殖呈剂量依赖性。 PDGF( 2μg· L-1)能持续性激活 MAPK。用 PD980 59( 1 0 -1 0 0 mol· L-1)预处理 1 5min后 ,MAPK活性较对照组均有明显差别 ( P<0 .0 5) .MAPK反义寡核苷酸能明显抑制 PDGF诱导的 MAPK的激活 ,并明显抑制 VSMC[3 H]Td R参入。上述结果表明 ,MAPK参与 PDGF促细胞增殖的信号途经 ,它的持续性激活与细胞增殖有关 ,针对 p42 /p44MAPK设计的反义寡核苷酸类能有效抑制 PDGF诱导的血管平滑肌细胞增殖。     

基于高内涵分析技术研究山萘酚的人肾近曲小管细胞HK-2毒性及机制

目的 基于高内涵分析技术探究山萘酚的肾细胞毒性作用及机制。方法 人肾近曲小管细胞HK-2分为细胞对照组(二甲亚砜终浓度<0.01%)、山萘酚5,10,20,50和100μmol·L^-1组及多柔比星(Dox)10μmol·L^-1组。Hoechst 33342染色和噻唑蓝(MTT)比色法分别检测活细胞数目和细胞存活率;荧光探针DCFH-DA,Mito-Tracker Red CMXRos和Fluo-4 AM分别检测活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)和Ca²⁺内流水平;化学发光法检测细胞ATP含量;AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡率;Hoechst 33342染色检测DNA含量;免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路蛋白[p38MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、c-Jun N端激酶(JNK)、p-JNK、细胞外信号调节激酶(ERK)和p-ERK]和酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路蛋白(p-STAT3和STA...     

红芪多糖对糖尿病周围神经病变ob/ob小鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响北大核心CSCD

目的观察红芪多糖(HPS)对糖尿病周围神经病变(ob/ob)小鼠坐骨神经中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法将50只ob/ob小鼠按体重随机分为模型组、低、中、高剂量实验组和对照组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠为正常组。正常组和模型组均给予5 mL·kg^(-1)·d^(-1)蒸馏水;对照组按30 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给予0.04 mg·mL^(-1)α-硫辛酸;低、中、高剂量实验组分别按50,100和200 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给予20 mg·mL^(-1)HPS。6组小鼠每天灌胃给药1次,连续给药8周。用Power Lab生理检测仪检测小鼠的运动神经传导速度(MNCV),用蛋白质印迹法测定坐骨神经组织中磷酸化p38 MAPK(p-p38MAPK)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白的表达水平。结果治疗8周后,低、高剂量实验组和对照组、模型组、正常组的MNCV分别为(40.35±2.12),(43.74±3.21),(42.70±3.36),(40.29±1.79)和(46.95±2.36)m·s^(-1),p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相对表达量分别为1.03±0.02,0.77±0.05,0.86±0.06,1.20±0.03和0.63±0.04,IL-6蛋白相对表达量分别为0.77±0.03,0.67±0.01,0.72±0.01,0.87±0.02和0.56±0.03。模型组的上述指标与正常组和高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论HPS可通过下调p-p38MAPK/p38MAPK及IL-6的表达,从而改善对糖尿病周围神经病变的炎症反应。     

人参皂苷Rg3抑制肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制

目的 探讨人参皂苷Rg3通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制肺癌细胞增殖与侵袭的机制。方法 体外培养人肺癌细胞(A549),分为对照组(正常培养),低剂量实验组(30μmol·L^-1人参皂苷Rg3),高剂量实验组(60μmol·L^-1人参皂苷Rg3)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估人参皂苷Rg3对肺癌细胞存活率的影响,用流式细胞术检测肺癌细胞经处理之后的凋亡率,用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测重要凋亡基因的表达,用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,同时检测细胞内的氧化应激状况,用蛋白质印迹法检测PI3K和Akt磷酸化的水平。结果 对照组和低、高剂量实验组细胞活力分别为(98.67±0.88)%、(82.67±2.40)%和(74.77±3.09)%,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、0.87±0.02和0.71±0.01,caspase-3 mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、1.22±0.07和1.36±0.04,活性氧(...     

黄芪甲苷对食管鳞癌细胞凋亡的影响

目的 研究黄芪甲苷对食管鳞癌细胞凋亡的影响及其调控机制。方法 体外培养Eca109细胞,用不同浓度(0、20、60和120μmol·L^-1)的黄芪甲苷处理细胞,并把细胞随机分为4组：Control组、AST组(120μmol·L^-1黄芪甲苷处理)、AST+pcDNA-NC组(120μmol·L^-1黄芪甲苷处理+转染pcDNA-NC)、AST+pcDNA-SATB1组(120μmol·L^-1黄芪甲苷处理+转染pcDNA-SATB1)。用细胞计数法-8（CCK-8）检测各组细胞增殖情况,用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测各组细胞SATB1、Bcl-2、Bax和Cl-caspase-3蛋白表达量。结果 Control组、AST组、AST+pcDNA-NC组、AST+pcDNA-SATB1组的SATB1的蛋白表达量分别为0.89±0.11,0.34±0.06,0.38±0.06,0.76±0.09,72 h OD值分别为1.16±0.14,0.57±0.08,0.64±0.08,0.89±...     

唑来膦酸盐通过p38 MAPK信号通路调控高糖微环境下成骨细胞分化

目的 探讨唑来膦酸盐（ZOL）对高糖微环境下小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的影响及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）通路的调节作用。方法 体外培养MC3T3-E1细胞并分为低糖（LG）组、LG+ZOL组、高糖（HG）组、HG+ZOL组。ZOL为0.1μmol/L,LG、HG的葡萄糖浓度分别为5.5 mmol/L和16.5 mmol/L。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖水平;鬼笔环肽染色观察细胞骨架;试剂盒检测细胞碱性磷酸酶（ALP）活性;茜素红染色检测细胞矿化结节生成情况;免疫荧光法检测Wnt5a、p38 MAPK的荧光表达强度。另设HG+ZOL+p38 MAPK通路抑制剂（SB203580）组,SB203580为10μmol/L。Western blot检测5组细胞中Wnt5a、p38 MAPK、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）、骨形态发生蛋白2(BMP2)和Ⅰ型胶原蛋白（COLⅠ）的表达水平。结果 4组细胞增殖水平差异无统计学意义（P>0.05）。与LG组比较,LG+ZOL组细胞骨架清晰程度,ALP活性,茜素红矿化结节生成,W...     

嗜铁蛋白对血管内皮细胞的损伤作用及葛根素的保护机制

目的探讨葛根素对嗜铁蛋白诱导EA.hy926型血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法嗜铁蛋白以不同作用时间(0、24、48、72 h)及浓度(0、5、10、20μmol·L-1)刺激EA.hy926细胞,MTT法及流式细胞术分别测细胞增殖及凋亡,比色法测乳酸脱氢酶(LDH)活性、ELISA测高敏C反应蛋白(hs-CRP)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,Western blot测p-p38 MAPK、t-p38 MAPK、Bax、Bcl-2蛋白表达,加入葛根素(10、50、100μmol·L-1)和p38 MAPK抑制剂SB203580(20μmol·L-1)检测葛根素的干预作用及机制。结果与空白组比较,10μmol·L-1嗜铁蛋白作用48 h可显著抑制EA.hy926细胞增殖,上调p-p38 MAPK及Bax蛋白表达促进细胞凋亡,诱导分泌hs-CRP及MCP-1,并增加LDH活性(P<0.05);50、100μmol·L-1葛根素均可显著减轻嗜铁蛋白诱导的EA.hy926细胞增殖抑制、下调p-p38 MAPK及Bax蛋白表达以抑制细胞凋亡、减少嗜铁蛋白诱导EA.hy926细胞分泌hs-CRP及MCP-1并降低LDH活性(均P<0.01),且较SB203580更为显著(均P<0.05)。结论嗜铁蛋白可诱导血管内皮细胞损伤,葛根素可抑制p38 MAPK通路减轻嗜铁蛋白诱导的血管内皮细胞损伤。     

大麻二酚对人子宫内膜癌细胞活性的影响

目的 研究大麻二酚对子宫内膜癌Ishikawa细胞的活性、增殖、迁移生物学作用以及促凋亡的作用机制。方法 用0,5,10,20μmol·L^-1的大麻二酚处理Ishikawa细胞24 h。用细胞计数法-8（CCK-8）、集落形成实验和Transwell实验分别测定细胞增殖和迁移情况;用Hoechst 33258染色及AnnexinⅤ-FITC/PI双重染色方法检测Ishilawa细胞凋亡情况;用DCFH-DA荧光染料对细胞活性氧进行检测;以蛋白质印迹（Western blot）法检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞色素C（Cyto C）抗体、活化的胱天蛋白酶-3（cleaved caspase 3）的蛋白表达情况。结果 CCK-8检测显示,5,10,20μmol·L^-1大麻二酚组的细胞增殖率分别为（82.38±9.63）%,（47.38±5.32）%,（36.06±4.14）%,具有浓度依赖性。与对照组相比,5,10,20μmol·L^-1大麻二酚组细胞克隆形成率分别为（78.22±8...     

白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖与p38 MAPK的关系研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)抑制人结肠癌细胞生长的作用与p38 MAPK的可能关系。方法利用结晶紫染色、Western blot和流式细胞术检测Res对LoVo细胞增殖的抑制作用;Western blot分析Res对LoVo细胞凋亡的促进作用,以及Res对p38 MAPK磷酸化的影响;利用p38MAPK抑制剂,通过结晶紫染色和Western blot实验,分析Res抑制结肠癌LoVo细胞增殖的作用与p38 MAPK之间的关系。结果与对照组相比,Res在20μmol·L~(-1)时就能明显抑制LoVo细胞增殖(P<0.05),并促使细胞周期阻滞在S期,上调PCNA蛋白水平;Res能呈浓度依赖性增加Bad的蛋白水平,而抑制Bcl-2蛋白表达;Res对p38 MAPK总蛋白水平无明显影响,但可明显增加p38 MAPK的磷酸化水平;抑制p38 MAPK明显促进LoVo细胞增殖,并能减弱Res对LoVo细胞增殖的抑制作用、对Bad表达促进作用和对Bcl-2表达的抑制作用。结论 Res对LoVo细胞的增殖具有抑制作用并促进凋亡,其机制可能与Res促进p38 MAPK的磷酸化有关。     

柚皮素对Aβ25-35损伤PC12细胞丝裂原激活蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶通路的调控效应研究

目的探讨柚皮素对体外培养的Aβ_25-35损伤PC12细胞的保护作用及相关信号通路的调控机制。方法将生长至对数期的PC12细胞接种于培养瓶培养24 h,弃掉旧培养液后,随机分为空白组(培养液)、模型组(150μmol·L-1 Aβ_25-35)、实验组-1(4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_25-35)和实验组-2(10μmol·L-1 U0126+4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_25-35),使每组细胞浓度为20μmol·L-1(除空白组),给药24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3)和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK1/2)的蛋白表达量。结果空白组、模型组、实验组-1、实验组-2的细胞总凋亡率分别为(4.13±0.55)%,(34.70±1.66)%,(11.26±0.77)%,(23.52±0.80)%;Bax蛋白表达量分别是0.24±0.06,0.76±0.03,0.21±0.02,0.68±0.04;Bcl-2蛋白表达量0.61±0.04,0.20±0.04,0.55±0.03,0.34±0.02;Caspase-3蛋白表达量0.13±0.03,0.40±0.03,0.21±0.04,0.31±0.02;p-ERK1/2蛋白表达量0.86±0.03,0.48±0.06,0.78±0.04,0.50±0.07。模型组与空白组、实验组与模型组和实验组-2与实验组-1比较,上述指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论柚皮素可通过丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)/细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated protein kinase, ERK)信号通路改变Bax、Caspase-3、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达量,抑制细胞凋亡,对Aβ_25-35损伤的PC12细胞有保护作用。