皮肤科学基础

20141518 p73第2外显子第4和14位基因多态性与人乳头状瘤病毒易感性的相关性研究/齐蓓（中国医科院北京协和医院皮肤病医院）,张小华,陈琴芳…//中华皮肤科杂志.-2014,47（4）.-267~270收集南京地区尖锐湿疣患者83例、Bowen样丘疹病患者11例的皮损和血样,以在性病门诊进行健康体检的性病高危人群150例为阴性对照，采用直接测序法检测皮损中感染的HPV—DNA序列，并在GenbankBlast上进行比对，鉴定HPV型别，抽提尖锐湿疣和Bowen样丘疹病患者以及阴性对照组的血样DNA，以shP73引物对p73基因片段进行扩增和测序，检测患者和阴性对照组的p73第2外显子第4和14位基因的多态性，分析HPV易感性和宿主p73基因多态性之间的相关性。     

尖锐湿疣患者皮损中HPV的检测分型及HPV6b L1变异分析

目的 探讨温州地区尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）感染型别及HPV6基因多态性。 方法 采用基因芯片检测73例CA患者皮损组织HPV 21种基因型的感染率,对所获得的11例患者的HPV6阳性者行HPV6b L1基因测序分析。 结果 73例CA患者标本中检出HPV阳性61例,总的阳性检出率为83.56％。在61例HPV阳性患者,其中单一型别阳性检出率为93.44％,单一型别感染中以HPV11（29.51％）型为主,其次为HPV6 （18.03％）型;混合型感染阳性检出率为6.56％,以HPV6+11型感染为主。此外,CA患者HPV 6b L1基因测序结果表明,6个位点的核苷酸存在多态性,其中810位点A/T变异存在于所有标本,可能为温州地方株突变。结论 HPV11、6型感染为CA的主要致病型别,HPV 6b L1基因存在多处突变。     

某些外生殖器表皮肿瘤皮损中HPVDNA的检测和分型

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染与外生殖器部位表皮增生性疾病发生的相关性。方法采用通用型引物PCR方法对151例外生殖器表皮增殖性病变进行HPVDNA的检测,应用限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法进行HPVDNA分型。结果30例尖锐湿疣HPVDNA全部阳性,其中HPV6占60%,HPV11占26.7%;40例Bowen样丘疹病、5例生殖器部位Bowen病、6例Queyrat增生性红斑HPVDNA的阳性率分别为55%、100%、33.3%,主要型别为HPV16;18例外生殖器浸润性鳞状细胞癌中HPVDNA的阳性率为27.8%,均为HPV16;32例黏膜白斑和20例乳房外Paget病HPVDNA均为阴性。结论尖锐湿疣主要由HPV6,其次由HPV11感染所致;Bowen样丘疹病、表皮原位癌包括Bowen病、Queyrat增生性红斑的发生可能与HPV16感染有密切关系;外生殖器浸润性鳞状细胞癌中,HPV16感染可能是多种致癌因素中的一个重要因素;外生殖器部位黏膜白斑和乳房外Paget病的发病可能与HPV感染无关。     

女性鲍恩样丘疹病患者外阴皮损及宫颈HPV感染情况

近年研究发现,鲍恩样丘疹病的发生与人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,尤其是高危型HPV。高危型HPV与宫颈癌的发生密切相关。为探讨女性鲍恩样丘疹病外阴皮损及宫颈HPV的感染情况,我们对18例女性鲍恩样丘疹病患者的外阴皮损及宫颈进行了低危型HPV6/11及高危型HPV16、18DNA检测。     

p16INK4a与HPV感染相关疾病

p16是抑制CDK4和6的肿瘤抑制蛋白。高危型HPV中的致癌基因E7可使p16^INK4a失去pRb的反馈性抑制而过度表达且功能异常。低危型HPV感染相关的尖锐湿疣中p16^INK4a免疫活性表现为离散、点状分布的阳性。中高危HPV感染相关的鲍恩样丘疹病中p16^INK4a免疫活性表现为弥漫强阳性。p16^INK4a较HPV型别能更客观地推测尖锐湿疣、鲍恩样丘疹病恶变的可能。     

尖锐湿疣组织中HPV型别检测及HPV11型L1基因的克隆与测序

目的分析黑龙江地区尖锐湿疣组织感染的HPV型别分布情况,并对HPV11型流行株L1基因进行克隆和测序,检测序列变异情况。方法提取30例尖锐湿疣组织标本中的DNA,用HPVL1区通用引物及特异性HPV6b,11,16,18型引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布。对其中4株HPV11型阳性标本L1基因,经酶切、连接,分别构建pSP73-HPV11L1重组质粒,并对其L1片段进行测序。结果30例标本中,HPV6b和11型感染数分别为11例,各占36.7%;有2例合并HPV6b/11/16型的混合感染,占总病例数的6.7%;1例HPV16型单独感染,未鉴定出HPV18型感染,其他型别5例。pSP73HPV11L1重组质粒测序后,4株HPV11L1基因序列完全一致,可认为是黑龙江省流行株。其序列与原始株序列相比,仅发现了两处同义点突变。结论黑龙江地区尖锐湿疣组织中HPVDNA检出率为100%,以6b和11型为主,偶见高危型别16型感染。克隆测序表明黑龙江省流行株HPV11型L1基因高度保守。     

Toll样受体和免疫细胞在尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病皮损中的表达

目的:探讨尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病患者皮损内天然免疫和获得性免疫功能变化情况.方法:应用EnVision法对尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病皮损进行Toll样受体(TLR)2、4及CD3、CD4、CD8、CD68免疫组化标记.结果:①尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病皮损中均有TLR2和4阳性表达,TLR 2在棘细胞、基底细胞、真皮浅层炎性细胞中强表达;②尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病真皮浅中层均有以CD3+、CD8+.CD68+细胞为主的明显炎性细胞浸润,尖锐湿疣浸润细胞量明显多于鲍恩样丘疹病.结论:①尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病皮损内表皮细胞及单核巨噬细胞Toll样受体阳性表达,说明当人乳头瘤病毒(HPV)病毒入侵时,表皮细胞和单核巨噬细胞能对HPV抗原进行识别和处理.②尖锐湿疣和鲍恩样丘疹病的真皮浅中层均发生了以淋巴细胞和单核巨噬细胞浸润为主的细胞免疫反应,且CD47CD8+比值明显下降,但两病的局部免疫仍存在异常.     

性传播疾病

顽疣净对郎格汉斯细胞分泌IL-12和表达CD80，CD11c,MHC-Ⅱ的影响;尖锐湿疣和鲍温样丘疹病皮损中MCM-2蛋白的检测;尖锐湿疣、鲍恩样丘疹病、Bowen病及鳞状细胞癌皮损中生存素的表达;以5-氨基酮戊酸诱导荧光定位诊断尖锐湿疣的临床研究;尖锐湿疣治疗的现状与进展（综述）     

原位杂交检测鲍温样丘疹病及Bowen病中HPV16 DNA

采用生物素标记的核酸探针原位杂交技术,检测了30例鲍温样丘疹病、15例Bowen病中16型人乳头瘤病毒(HPV16)感染的组织定位及染色模式。结果显示,30例鲍温样丘疹病中,HPV16阳性13例;15例Bowen病中,HPV16阳性6例。鲍温样丘疹病、Bowen病中HPV16感染累及棘细胞全层;主要为核内团块状着色。Bowen病中,HPV16感染尚累及基底层细胞且存在HPV的点状染色模式。提示鲍温样丘疹病与Bowen病比较,HPV16感染的组织定位及染色模式均有所不同。     

男性尖锐湿疣皮损HPV基因芯片型别分析

目的探讨本地区男性尖锐湿疣患者皮损中的HPV型别感染情况及其临床意义。方法采用基因芯片微阵列技术对200例男性尖锐湿疣皮损进行26种HPV基因型别检测。结果男性尖锐湿疣患者皮损中HPV检出率为99.00%(198/200),检出的198例阳性患者中单一型别感染42.42%(84/198),以HPV6/11为主(94.00%);多重HPV混合感染以高低危HPV混合感染为主(P<0.05),18～35岁组较>35岁组高危HPV感染率偏多(P<0.05),皮损部位间存在HPV型别差异(P<0.05)。皮损中检测出HPV7型感染4例和HPV67型感染1例。结论男性尖锐湿疣皮损以HPV6/11型感染为主,并多伴有其他HPV型别感染;年龄、皮损部位和感染重数影响HPV型别分布。     

尖锐湿疣和鲍温样丘疹病中Livin,Caspase-3的表达及相关性分析

目的探讨尖锐湿疣(CA)和鲍温样丘疹病(BP)中凋亡抑制蛋白(Livin),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达,并进行相关性分析。方法选取CA,BP皮损和正常成年人包皮组织各30例,采用免疫组化法检测Livin,Caspase-3蛋白的表达。结果 Livin在BP组中阳性率(3.833±1.533)高于CA组(3.033±1.866)及正常对照组(2.733±1.112),Caspase-3在正常对照组中阳性率(3.833±1.556)高于CA组(1.733±1.856)及BP组(2.000±1.640),差异均有统计学意义(P均<0.05)。在CA,BP及正常对照组中Livin与Caspase-3的表达均无相关性(P均>0.05)。结论 Livin,Caspase-3可能在HPV感染相关的皮肤增殖性疾病中发挥一定作用。     

巨大尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒型别检测

目的 探讨巨大尖锐湿疣患者皮损人乳头瘤病毒（HPV）-DNA型别。方法 收集门诊2007年1月至2010年1月巨大尖锐湿疣患者67例,凯普导流杂交基因芯片技术对疣体行HPV-DNA分型检测。结果 67例巨大尖锐湿疣患者中63例检测出HPV-DNA,阳性率为94.02%。HPV-DNA阳性者中检出低危型HPV 84例次（占60.87%）,高危型HPV 54例次（占39.13%）。HPV亚型仍以低危型HPV6、11为主,但高危型HPV16、18偏高。结论 巨大尖锐湿疣感染高危型HPV16、18偏高。     

尖锐湿疣、鲍恩样丘疹病、Bowen病及外阴鳞状细胞癌皮损中端粒酶的表达

目的 探讨端粒酶在正常组织、良性增殖性疾病及恶性肿瘤中的表达情况及其临床意义。方法 采用免疫组化方法检测皮损中端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达情况,并对所有鲍恩样丘疹病和Bowen病病例进行组织病理分析。结果 正常人对照组、尖锐湿疣组及外阴鳞状细胞癌组中任两组间hTERT表达强度差异均有统计学意义,其阳性率依次增高。鲍恩样丘疹病组较尖锐湿疣组hTERT表达强度高,两组差异有统计学意义;虽与Bowen病组比较差异无统计学意义,但较外阴鳞状细胞癌组表达强度低,差异有统计学意义。组织病理上,Bowen病比鲍恩样丘疹病细胞异形性更明显。结论 端粒酶在正常组织、良性增殖性疾病及恶性肿瘤中的表达强度呈梯度升高,提示端粒酶激活在细胞增生及永生化中均发挥重要作用。     

鲍恩样丘疹病皮损中细胞周期调控蛋白表达与人乳头瘤病毒感染的研究

目的 探讨鲍恩样丘疹病（BP）皮损中人乳头瘤病毒（HPV）感染与细胞周期相关因子细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白E（Cyclin E）及其依赖性蛋白激酶抑制蛋白p27表达的相关性。方法 基因芯片法检测BP皮损组织中人乳头瘤病毒感染（HPV）类型,免疫组化方法检测44例BP皮损组织及10例正常包皮环切组织中细胞周期调控蛋白Cyclin D1、Cyclin E及p27的表达水平。结果 44例BP中HPV感染率为100%,高危型感染38例,占86.36%,其中含HPV16感染者30例,占68.18%,单一HPV16感染者16例,合并其他高低危混合感染者14例,其他高危型感染为8例,低危感染6例,主要为HPV6型感染。在BP组织中,HPV高危组（u = 53.00,P < 0.05）、高低危混合组（u = 12.00,P < 0.01）,低危组（u = 5.00,P < 0.01）中Cyclin D1表达较正常组显著增高,高低危混合组（u = 44.00,P < 0.01）、低危组（u = 22.50,P < 0.05）Cyclin D1表达较高危组显著增高;Cyclin E在HPV高危组（u = 0.00,P < 0.01）,高低危混合组（u = 4.00,P < 0.01）,低危组（u = 1.50,P < 0.01）的表达显著高于正常组织,高危组显著高于低危组（u = 11.00,P < 0.01）;p27的表达在HPV高低危感染中差异无统计学意义。p27在年龄 > 50岁组较20 ~ 30岁组（u = 47.00,P < 0.05）、31 ~ 50岁组（u = 55.50,P < 0.05）显著增高。Cyclin E的表达在年龄 > 50岁组较20 ~ 30岁组（u = 45.50,P < 0.05）显著增高。还发现,女性患者Cyclin E的表达明显高于男性患者（u = 137.50,P < 0.05）。结论 不同HPV感染类型中,细胞周期调控蛋白Cyclin D1、Cyclin E及p27的表达存在差异。     

Pigmented condyloma acuminatum

We herein report a case of pigmented condyloma acuminatum in the genital region. A histopathological examination revealed keratinocyte proliferation, papillomatosis and basal pigmentation. Cellular atypia was rarely observed. The patient also had ordinary skin‐colored nodules on the coronal sulcus. Polymerase chain reaction amplification with consensus primers for human papillomavirus (HPV) and subsequent sequencing confirmed an infection of HPV type 6. Pigmented condyloma acuminatum is not rare; however, making the differential diagnosis between bowenoid papulosis and seborrheic keratosis is sometimes difficult. The mechanism of pigmentation in such cases remains unknown and requires further investigation. HPV typing is a useful method for diagnosing the disease.     

原位分子杂交检测尖锐湿疣病损中鼠双微体2基因的表达

目的：通过研究尖锐湿疣病损中鼠双微体(MDM)2基因的表达情况,探讨MDM2在尖锐湿疣过度增殖及潜在癌变中的作用。方法：采用原位分子杂交方法检测32例尖锐湿疣患者病损和10名正常人皮肤组织中MDM2 mRNA的表达情况．同时用PCR法检测人乳头瘤病毒(HPV)型别。结果：32例外阴尖锐湿疣患者病损中MDM2 mRNA阳性表达22例,占68．75％,其中,HPV6/11型18例,HPV16/18型4例。正常皮肤组织中未检测到MDM2基因表达。结论：MDM2基因的异常表达可能与尖锐湿疣过度增殖及潜在癌变有关,但其与HPV型别的关系尚须作进一步的研究。     

203例女性外阴尖锐湿疣患者宫颈HPV基因型检测及分析

目的:探讨206例女性外阴尖锐湿疣(CA)患者宫颈感染人乳头瘤病毒( HPV)的基因型分布.方法:采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术,对203例女性外阴尖锐湿疣患者宫颈进行HPV感染分型检测.结果:在203例宫颈标本中,本芯片共能检测21种HPV亚型,本实验检测出20种,未发现HPV43型.203份宫颈组织标本中HPV阳性123例,检出率是60.59％,其中单一型别阳性率是65.04％ (80/123),多重型别阳性率是34.95％ (43/123);各型别检出率由高到低依次是HPV11 (35.77％)、6(28.45％)、16( 12.19％)、52( 12.19％)、58(8.98％)、68(8.13％)、66( 6.50％)、CP8304 (5.69％),18(4.87％)、33(4.87％)、44(4.87％)、39(3.25％).结论:根据本组病例,对于女性外阴尖锐湿疣患者,应重视宫颈HPV基因分型的检测;高危型及多重型别感染者有必要进一步检查及随访.     

552例男性HPV感染者基因型分布及临床特征分析

目的:分析人乳头瘤病毒在男性感染者中的基因型分布及临床特征.方法:回顾性分析我院2017年1月至2021年7月HPV基因分型检测阳性的男性患者临床资料.结果:共分析552例男性HPV感染者,其中HPV6、11、16和51是最常见的感染亚型,占比分别为35.51％、23.73％、16.49％、10.14％.HPV高危亚型...     

Bowenoid papulosis and squamous cell carcinoma of the genitalia: suspected sexual transmission

The human papillomavirus causes a variety of genital lesions: condyloma acuminatum, bowenoid papulosis (carcinoma in situ), and squamous cell carcinoma. Only condylomata have been documented to be sexually transmitted. We report clinical and histopathologic evidence of suspected female to male transmission of bowenoid papulosis to the penis from a woman with condylomata acuminata, squamous cell carcinoma in situ, and focally invasive squamous cell carcinoma of the vulva. These findings indicate a need for thorough clinical and histopathologic evaluation of any anogenital lesions resembling condylomata and occurring in sexual partners. Conservative yet thorough destruction of bowenoid papulosis and squamous cell carcinoma in situ appears to be the treatment of choice.     

复发性尖锐湿疣患者HPV感染模式和细胞免疫功能的分析

目的:了解复发性尖锐湿疣(CA)患者的人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型和感染模式,以及其外周血T淋巴细胞亚群的表达情况。方法:据纳入标准,选择135例初诊CA患者,将治疗3个月后疣体复发患者81例设为复发组;疣体治疗消失后,随访3个月内未复发患者54例设为治愈组;治疗前对两组患者用聚合酶链式反应(PCR)方法检测HPV亚型;在治疗和随访3个月的截止点采血,应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,并与20例健康对照者进行比较。结果:复发组和治愈组HPV感染均以低危亚型HPV6/11为主。复发组单一亚型感染40例(49.38%),混合亚型感染41例(50.62%);治愈组单一亚型感染36例(66.67%),混合亚型感染18例(33.33%),两组HPV感染模式的构成比有统计学差异(2=3.93,P0.05)。复发组外周血T细胞与治愈组比较,CD3+总T细胞[(68.13±8.03)%]降低,CD4+T细胞百分率[(32.42±4.88)%]降低,CD8+T细胞百分率[(38.61±4.19)%]升高,CD4+/CD8+比值降低,差异均有统计学意义(P值均0.01);复发组与正常对照组比较,CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD4+/CD8+比值差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:HPV亚型混合感染模式和T淋巴细胞亚群免疫功能异常是促使尖锐湿疣复发的重要因素。