芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

目的 从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法 将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^-1芸香苷+10ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^-1芸香苷+10 ng·mL^-1 IL-1β+1μmol·L^-1沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+...     

槲皮素介导铁死亡途径对高渗刺激诱导的干眼细胞模型的保护作用

目的 探讨槲皮素对高渗透压诱导的人角膜上皮细胞HCE-2损伤的影响及其作用机制。方法 将HCE-2细胞随机分为对照组(正常渗透压)、模型组(高渗透压)、低剂量实验组(高渗透压+31.25μg·mL^-1槲皮素)、中剂量实验组(高渗透压+62.50μg·mL^-1槲皮素)、高剂量实验组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素)、Erastin组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素+30.00μmol·L^-1铁死亡诱导剂Erastin)。用细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,用C11-BODIPY 581/591探针染色检测活性氧(ROS)水平,用试剂盒法测定细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,用实时荧光定量聚合酶链反应实验和蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二氢乳酸脱氢酶(DHODH)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、Erastin组细胞存活率分别为(100.00±3.97)%、(50.05±5.83)%、...     

甘草水提物联合Erastin对二肽基肽酶4诱导结直肠癌细胞铁死亡的作用

目的:探究甘草水提物(licorice extracts, LE)联合铁死亡诱导剂Erastin能否通过二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase-4,DPP4)诱导人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)发生铁死亡。方法:将DLD-1细胞随机分为Control组、L-LE组(50μg·mL^-1 LE)、H-LE组(100μg·mL^-1 LE)、H-LE+Erastin组(100μg·mL^-1 LE+30 nmol·L^-1 Erastin)、H-LE+Erastin+Sita(DDP4抑制剂)组(100μg·mL^-1 LE+30 nmol·L^-1 Erastin+31.25μg·mL^-1 Sita),药物干预24 h。行细胞克隆实验和EDU-594细胞增殖实验测定细胞克隆及增殖情况,ELISA检测细胞Fe²⁺含量及DPP4活性变化,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ...     

利拉鲁肽抗CXC趋化因子配体16诱导的人足细胞脂质沉积作用及机制

目的 探讨利拉鲁肽(liraglutide)抗CXC趋化因子配体16(CXCL16)诱导的人足细胞脂质沉积的作用及机制。方法 (1)葡萄糖40 mmol·L^-1刺激人足细胞24 h，棕榈酸250μmol·L^-1刺激人足细胞6 h,Western印迹法检测足细胞CXCL16蛋白表达水平。(2)重组CXCL16 100μg·L^-1刺激足细胞0,6,12和24 h,Western印迹法检测足细胞裂隙素蛋白表达水平。(3)足细胞分为细胞对照组、CXCL16 100μg·L^-1组、CXCL16+利拉鲁肽10,50和100 nmol·L^-1组及CXCL16+辛伐他汀100 nmol·L^-1组，加药2 h后加重组CXCL16 100μg·L^-1继续培养24 h，油红O染色检测足细胞脂滴面积。(4)足细胞分为细胞对照组、CXCL16100μg·L^-1组、CXCL16+利拉鲁肽100 nmol·L^-1组和CX...     

灵芝酸D通过调控p53/Bax通路对人结直肠肿瘤细胞的作用机制研究

目的 探究灵芝酸D（GAD）对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组：空白对照组（完全培养基）、低(5μmol·L^-1 GAD)、中(10μmol·L^-1 GAD)、高(20μmol·L^-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α+20μmol·L^-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53（p53）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为（96.33±2.62）%,（95.00±1.63）%,（70.33±5.91）%和（49.00±3.56）%;4组Caspase-...     

苦杏仁苷对流感病毒FM1诱导的微血管内皮细胞通透性的影响

目的 研究苦杏仁苷对甲型流感病毒FM1诱导的微血管内皮细胞(PMVEC)通透性增加的影响及其作用机制。方法 将PMVEC随机分为对照组、模型组(100 TCID₅₀ FM1)、苦杏仁苷低剂量组(100 TCID₅₀ FM1+4.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)、苦杏仁苷中剂量组(100 TCID₅₀ FM1+8.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)、苦杏仁苷高剂量组(100 TCID₅₀ FM1+16.0 mg·mL^-1苦杏仁苷)及740Y-P组(100 TCID₅₀ FM1+16.0 mg·mL^-1苦杏仁苷+50μmol·L^-1的PI3K激活药740Y-P)。以噻唑蓝(MTT)法、Transwell法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞增殖、细胞通透性、炎性因子表达水平和蛋白表达水平。结果 对照组、模型组和苦杏仁苷低、中、高剂量组的白细胞介素-6(IL...     

依托咪酯对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨依托咪酯对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将人CHON-001软骨细胞分为空白组(常规培养基培养)、模型组(用10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、高剂量实验组(用5μmol·L^-1依托咪酯+10 ng·mL^-1 IL-1β培养)、抑制药组[用5μmol·L^-1无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制药IWR-1-endo+10 ng·mL^-1 IL-1β培养]、抑制药+高剂量实验组(用10 ng·mL^-1 IL-1β+5μmol·L^-1依托咪酯+5μmol·L^-1 IWR-1-endo培养)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖情况,用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中促炎因子的含量;用蛋白质印迹法测定基质金属蛋白酶(...     

二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的机制研究

目的 研究CXC趋化因子受体4(CXCR4)在二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡中的作用。方法 喉癌Hep-2细胞分成对照组(0μg·mL^-1二氢杨梅素)、低剂量实验组(20μg·mL^-1二氢杨梅素)、中剂量实验组(40μg·mL^-1二氢杨梅素)、高剂量实验组(80μg·mL^-1二氢杨梅素)、高剂量实验+Vector组(80μg·mL^-1二氢杨梅素+pcDNA3.1)、高剂量实验+CXCR4组(80μg·mL^-1二氢杨梅素+pcDNA3.1-CXCR4)。以蛋白质印迹法检测CXCR4、剪切的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,以噻唑蓝(MTT)方法检测细胞存活率,以流式细胞术测定细胞凋亡。结果 对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量实验+Vector组、高剂量实验+CXCR4组喉癌细胞中CXCR4蛋白表达水平分别为0.58±0.04,0...     

槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的 研究槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响和机制。方法 分离婴幼儿血管瘤内皮细胞,分成对照组、实验低剂量组(80μmol·L^-1槲皮素)、实验中剂量组(160μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量组(320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+pcDNA组(转染阴性对照载体,320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+高迁移率蛋白1(HMGB1)组(转染HMGB1过表达载体,320μmol·L^-1槲皮素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞增殖情况,用流式细胞术分析细胞凋亡情况,用蛋白质印迹法检测HMGB1、剪切的胱天蛋白酶3(C-caspase-3)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果 对照组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+pcDNA组、实验高剂量+HMGB1组细胞中HMGB1蛋白表达水平分别为0.89±0.09,0.76±0.08,0.63±0.06,0.55±0.05,0.56...     

基于PI3K/Akt信号通路探讨姜黄素诱导A549细胞凋亡的机制

目的 观察并探讨姜黄素对非小细胞肺癌A549细胞的作用及其机制。方法 将A549细胞分为空白组(正常培养)和低、高剂量实验组(分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)及激动药+低、高剂量实验组(先用50μmol·L^-1 Recilisib Sodium干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)、抑制药+低、高剂量实验组(先用25μmol·L^-1 PI3K-IN-1干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)。用MTT法测定细胞增值率；用流式细胞术测定细胞凋亡情况；用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)mRNA的相对表达水平；用蛋白质印迹法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果 空白组、低剂量实验组、高剂量实验组、激动药+低剂量实验组、抑制药+低剂量实验组、激动药+高剂量实验组、抑制药+高剂量实验组的细胞活力分别为(100...     

小剂量氯胺酮联用丁基苯酞的抗抑郁作用及其机制

目的 研究小剂量氯胺酮(Ket)联用丁基苯酞(NBP)的抗抑郁作用及其机制。方法 建立皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的体外抑郁模型,PC12细胞分成6组：空白对照组、模型对照组(CORT 400μmol·L^-1)、对照A组(CORT 400μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)、对照B组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1)、阳性对照组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.1μmol·L^-1)、联合组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)。CCK-8法检测细胞存活率,荧光显微镜观察细胞神经元形态变化,蛋白免疫印迹法评价联合用药对损伤细胞p-ERK/ERK、脑源性神经营养因子(BDNF)、synapsin蛋白表达变化。将ICR小鼠随机分为模型对照组、NBP...     

藁本内酯对帕金森病细胞模型的保护作用及其机制研究

目的 研究藁本内酯对帕金森病细胞模型的保护作用及其作用机制。方法 取对数生长期的SK-N-SH细胞使用200μmol·L^-1的MPP⁺处理48 h,构建帕金森病细胞模型；以正常培养基培养的细胞作为对照组。藁本内酯组加入终浓度为30.0μmol·L^-1藁本内酯进行培养；P79350组加入30.0μmol·L^-1的藁本内酯后，实验结束前1 h加入50μmol·L^-1的P79350处理细胞；对照组和MPP⁺组加入不含药物的培养基培养。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力；以流式细胞术检测细胞周期情况和细胞凋亡率；以蛋白质印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(p38 MAPK/JNK)信号通路和增殖、凋亡相关蛋白的表达水平。结果 对照组、MPP⁺组和10.0、20.0、30.0、50.0、100.0和200.0μmol·L^-1藁本内酯组的细胞存活率分别为(100.00±1.91)%、(35...     

替莫唑胺联合EZH2抑制药GSK343对垂体瘤GH3细胞体外侵袭性的影响

目的 研究替莫唑胺(TMZ)联合zeste基因增强子类同源物2(EZH2)抑制药GSK343对GH3细胞凋亡和侵袭的作用及机制。方法 使用不同浓度的TMZ处理细胞筛选TMZ处理剂量,并将GH3细胞随机分为空白组、TMZ低剂量组(200μmol·L^-1TMZ)、TMZ高剂量组(400μmol·L^-1TMZ)、GSK343组(20μmol·L^-1 GSK343)、TMZ+GSK343组(400μmol·L^-1TMZ和20μmol·L^-1GSK343)。药物处理48 h后用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞存活率,以原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术检测细胞凋亡情况,以Transwell实验检测细胞侵袭能力,以蛋白质印迹法检测细胞相关蛋白表达。结果 空白组、TMZ低剂量组、TMZ高剂量组、GSK343组、TMZ+GSK343组TUNEL阳性细胞率分别为(4.31±0.71)%、(15.36±0.91)%、(22.26±2.13)%、(13.05±0.71)%和(34....     

阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

桑皮苷A逆转K562/阿霉素耐药细胞化疗多药耐药的研究

目的 研究桑皮苷A对人白血病耐药细胞K562/阿霉素耐药细胞（K562/ADM）化疗耐药的影响。方法 实验分为溶媒（DMSO）对照组、阳性对照组(10μmol·L^-1维拉帕米处理48 h,再用5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h或2μg·mL^-1罗丹明123孵育1.5 h)、阿霉素单用组(5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h)、阿霉素合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^-1桑皮苷A处理48 h,再用5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h)、罗丹明123合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^-1桑皮苷A处理48 h,再用2μg·mL^-1罗丹明123孵育1.5 h)。用噻唑蓝（MTT）实验初步确定桑皮苷A的逆转耐药作用;再以细胞内阿霉素蓄积实验,罗丹明123（Rho123）蓄积及外排实验进一步研究桑皮苷A的逆转耐药作用;分别用聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹（Western blot）法检测桑皮苷A对K562/AD...     

原儿茶酸抑制结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡的机制研究

目的 探讨原儿茶酸对结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡影响和机制。方法 肺泡巨噬细胞NR8383分成对照组、模型组(结核分枝杆菌Rv1654诱导)、实验低剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,20μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验中剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,40μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+Vector组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染阴性对照载体,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+TLR2组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染TLR2过表达载体,80μmol·L^-1原儿茶酸处理)。用蛋白质印迹(Western blot)法检测Toll样受体2(TLR2)蛋白的表达水平,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+Vector组、实验高剂量+TLR2组肺...     

白藜芦醇基于NF-κB p65通路对脑胶质瘤细胞的作用

目的 探讨白藜芦醇对脑胶质瘤细胞U251的增殖和上皮间质转化(EMT)的影响及对核转录子kappa B p65(NF-κB p65)通路的调节作用。方法 将第3代对数生长期U251细胞随机分为对照组、白藜芦醇组、激动剂组和激动剂+白藜芦醇组,对照组细胞不做处理,白藜芦醇组细胞加入50μmol·L^-1白藜芦醇处理,激动剂组细胞加入1μg·mL^-1脂多糖(LPS)刺激,激动剂+白藜芦醇组细胞加入LPS 1μg·mL^-1刺激12 h后再用50μmol·L^-1白藜芦醇预处理12 h, MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA检测白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Transwell实验检测细胞侵袭能力以及蛋白印迹法检测上皮钙黏蛋白(E-cad)、神经钙黏蛋白(N-cad)、波形蛋白(vimentin)和p-p65蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,白藜芦醇组细胞存活率、IL-6、IL-1β、TNF-α含量以及N-cad、vimentin和p-p65蛋白相...     

三叶青总黄酮增强三阴性乳腺癌细胞对EGFR-TKI敏感性的机制研究

目的 探讨三叶青总黄酮（RTF）对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制药（EGFR-TKI）药物吉非替尼（GEF）敏感性的影响及其机制。方法 以不同浓度的RTF或RTF联合不同浓度的GEF处理MDA-MB-231细胞后,采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力;将细胞分为对照组（培养基处理）、RTF(25μg·mL^-1 RTF处理)组、GEF(10μg·mL^-1 GEF处理)组、GEF+RTF组(10μg·mL^-1 GEF和25μg·mL^-1 RTF共同处理)和GEF+RTF+RAPA组(10μg·mL^-1 GEF、25μg·mL^-1 RTF和10 nmol·L^-1 RAPA共同处理)。流式细胞仪检测细胞周期与凋亡;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）和自噬相关蛋白微管相关...     

基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的 研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 (1)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100～800μmol·L^-1孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^-1孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。(2)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^-1孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb2 1.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^-1预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^-1及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。(3)将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb2 12.5μmol·L^-1组,采用AnnexinV-FITC/PI流式...     

天麻活性成分20C对6-羟基多巴胺诱导的PC12细胞损伤及帕金森病模型小鼠的保护作用

目的研究天麻活性成分20C对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞损伤及帕金森病(PD)模型小鼠的保护作用。方法 (1)用6-OHDA 100μmol·L^-1单独(模型组)或与20C 0.01,0.10和1.00μmol·L-1共同(模型+20C组)孵育PC12细胞6 h,采用MTT法检测细胞存活率;用6-OHDA 100μmol·L^-1和20C1.00μmol·L^-1共同孵育PC12细胞6 h,采用免疫荧光染色法检测细胞DNA和RNA氧化损伤。(2) C57BL/6小鼠分为正常对照组、模型组、模型+左旋多巴(L-dopa)组和模型+20C组。采用单侧纹状体双位点注射6-OHDA方法制备PD小鼠模型,造模3周后,模型+L-dopa组和模型+20C组小鼠开始ig给予20C 100 mg·L^-1或L-dopa 40 mg·g^-1,连续给药4周后,采用免疫组化法观察小鼠纹状体和黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达;Western印迹法检测黑质TH表达水平;透射电镜观察小鼠黑质神经...