β肾上腺素受体在舌癌CAL-27细胞系的表达及β受体阻滞剂对其增殖、迁移、侵袭的影响

目的: 研究舌癌CAL-27细胞系中β-AR的表达及β受体阻滞剂对其增殖、迁移、侵袭的影响。方法: 采用Pan CK抗体对培养的正常口腔上皮细胞进行鉴定;免疫组织化学法及qRT-PCR法检测β-AR在舌癌CAL-27细胞的表达;CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell法分别检测普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞增殖、迁移、侵袭的影响。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果: β1-AR、β2-AR在CAL-27细胞的表达均显著高于正常口腔上皮细胞（P<0.05）;β2-AR在CAL-27细胞的mRNA水平表达低于正常口腔上皮细胞而β1-AR表达高于正常口腔上皮细胞;两种药物对CAL-27细胞增殖均有抑制作用,药物浓度>50 μmol/L时,普萘洛尔抑制增殖的作用更强（P<0.05）;2种药物浓度>2.5 μmol/L,对CAL-27细胞迁移均有抑制作用,普萘洛尔的抑制作用更强;药物浓度>1.0 μmol/L,2种药物对CAL-27细胞侵袭均有抑制作用（P<0.05）,普萘洛尔对CAL-27细胞迁移抑制作用更强。结论: 在舌癌CAL-27细胞中, β1-AR在mRNA水平的表达高于正常口腔上皮细胞而β2-AR的表达低于正常口腔上皮细胞;低浓度普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞的增殖无明显抑制作用,但能抑制CAL-27的迁移和侵袭。     

神经肽P物质对人牙髓干细胞生物学行为的影响

目的探讨神经肽P物质对人牙髓干细胞（hDPSC）生物学行为的影响。 方法组织块法分离、培养hDPSC,通过流式细胞术和茜素红染色鉴定hDPSC。用不同浓度的神经肽P物质[0（对照组）、0.1 nmol/L、10 nmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L]干预hDPSC,在第24、48、72和96 h通过细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞增殖能力;在48 h时通过Transwell实验检测细胞迁移能力。成血管诱导条件下干预14 d后通过小管形成实验检测细胞成管情况;通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测成管相关基因血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。采用GraphPad Prism 8软件对数据进行统计学分析。 结果成功分离、培养hDPSC。流式细胞术结果显示,细胞表面标记物CD29、CD90、CD34和CD45表达率分别为99.90%、99.90%、0.40%和0.04%;茜素红结果显示,成骨诱导组形成较明显的矿化结节。CCK-8结果显示,对照组在48、72、96 h的相对增值率分别为（100.0 ± 0.4）%、（100.0 ± 0.7）%和（100.0 ± 1.9）%,实验组在48 h时开始促进细胞增殖,72、96 h各浓度实验组均显著促进hDPSC的增殖,差异具有统计学意义（F_{48 h} = 50.1,P_{48 h}<0.001;F_{72 h} = 323.5,P_{72 h}<0.001;F_{96 h} = 253.6,P_{96 h}<0.001）,最佳浓度10 μmol/L时,48、72和96 h的细胞增殖率分别为（119.0 ± 1.0）%、（148.4 ± 3.5）%和（140.8 ± 1.0）%;Transwell结果显示,与对照组穿膜数量（5.0 ± 1.4）相比,实验组均对hDPSC的迁移具有促进作用（F = 310.3,P<0.001）,最佳效应浓度为10 nmol/L,穿膜数量为（87.6 ± 8.3）;成血管诱导14 d后,小管形成实验结果显示,各浓度的P物质实验组与对照组相比均可促进hDPSC小管形成情况（F_{小管分支点数} = 43.7,P_{小管分支点数}<0.001;F_{相对小管长度} = 19.4,P_{相对小管长度} = 0.0001）;RT-PCR结果显示,0、0.1 nmol/L、10 nmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L实验组VEGFR2的相对表达量分别为（1.000 ± 0.023）、（1.129 ± 0.076）、（1.474 ± 0.101）、（1.285 ± 0.055）和（1.213 ± 0.160）;VEGF的相对表达量分别为（1.000 ± 0.026）、（1.211 ± 0.023）、（1.242 ± 0.070）、（1.679 ± 0.043）和（1.138 ± 0.156）,P物质组与对照组相比,差异均有统计学意义（F_VEGFR2 = 10.43,P_VEGFR2 = 0.001 4;F_VEGF = 29.87,P_VEGF<0.001）。 结论P物质对hDPSC的增殖、迁移和成血管能力具有一定促进作用。     

口腔扁平苔藓患者血清中白细胞介素-12和白细胞介素-27表达与免疫功能的相关性

目的了解口腔扁平苔藓（OLP）患者血清中白细胞介素（IL）-12和IL-27的表达与患者免疫功能状况的相关性,探讨IL-12和IL-27在OLP免疫发病机制中的作用及意义。方法 选取对照组健康者20例和OLP组患者30例（其中网纹型15例,糜烂型15例）,通过流式细胞术分析OLP患者外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+56[自然杀伤细胞（NK）]的表达情况,散射比浊法检测患者体液免疫指标免疫球蛋白（Ig）G、IgA、IgM、C3、C4的表达情况。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清中IL-12和IL-27的表达水平,分析IL-12和IL-27的表达与OLP患者免疫功能状况及临床特征的相关性。结果 与实验室标准值相比,OLP患者细胞免疫中CD3+、CD4+、CD8+水平降低,CD19+水平增高（P<0.05）;体液免疫中IgM水平增高,C4水平降低（P<0.05）。OLP患者血清中IL-12与IL-27表达水平均高于对照组（P<0.05）。同时相关分析显示,OLP患者血清中IL-12和IL-27的表达水平呈正相关关系（r=0.912,P<0.01）。但是IL-12及IL-27表达水平与OLP体征计分、病程计分等临床特征无相关性（P>0.05）。OLP患者中IL-12和IL-27的表达与CD16+56（NK）存在负相关关系（r₁=-0.416,P₁=0.022;r₂=-0.392,P₂=0.032）,与IgG存在正相关关系（r₁=0.445,P₁=0.014;r₂=0.549,P₂=0.002）。结论OLP患者主要以细胞免疫功能低下为主,同时伴有一定程度的体液免疫功能的紊乱。IL-12和IL-27的异常高表达可能协同引起且促进了OLP的炎症发生发展,并且通过机体代偿性负反馈作用参与了对炎症性免疫应答的调节,在OLP的发病机制中起到了一定作用。     

乙醇诱导舌鳞状细胞癌上皮细胞间质转化

目的探讨乙醇对舌鳞状细胞癌（TSCC）细胞上皮间质转化的影响。 方法乙醇诱导TSCC细胞株SCC9和SCC15,倒置显微镜下观察处理前后细胞形态及排列情况;Wound healing和Transwell实验检测乙醇处理前后细胞迁移和侵袭能力;Western blot和免疫荧光检测E-cadherin和Vimentin表达情况。数据分析采用SPSS 19.0统计软件,计数资料之间比较采用卡方检验,E-cadherin和Vimentin蛋白表达变化采用单因素方差分析。 结果倒置显微镜下可见乙醇诱导后的SCC9和SCC15细胞由上皮细胞形态向间质细胞形态转化,细胞失去极性和紧密连接,由多边形、铺路石样转变为类似成纤维细胞样形态,细胞呈梭形,部分伸出伪足,细胞间隙增宽甚至丧失,排列较为杂乱、松散;Wound healing实验中,乙醇处理后的SCC9和SCC15细胞划痕愈合更快,迁移能力明显增强（χ²_{SCC9,24 h}= 15.668,P_{SCC9,24 h}= 0.001;χ²_{SCC15,24 h}= 4.703,P_{SCC15,24 h}= 0.028;χ²_{SCC9,48 h}= 3.391,P_{SCC9,48 h}= 0.042;χ²_{SCC15,48 h}= 2.386,P_{SCC15,48 h}= 0.136）;Transwell实验则证实乙醇处理后的SCC9和SCC15细胞的侵袭能力明显增强,SCC9相对侵袭率为384.24%（χ²= 26.917,P<0.001）,SCC15相对侵袭率为428.49%（χ²= 32.880,P<0.001）;Western blot和免疫荧光结果显示乙醇诱导后SCC9和SCC15细胞E-cadherin表达下调（F= 131.533,P_SCC9<0.001,P_SCC15= 0.001）,Vimentin表达上调（F= 355.388,P_SCC9<0.001,P_SCC15<0.001）。 结论乙醇可诱导TSCC细胞发生上皮间质转化,促进其侵袭和迁移。     

白细胞介素22对人牙周膜成纤维细胞核因子κB受体活化因子配体、骨保护素表达的影响

目的探讨白细胞介素22（IL-22）对人牙周膜成纤维细胞（hPDLF）表达核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）的影响;并进一步研究IL-22是否与牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）具有协同刺激作用。 方法酶消化法结合组织块法原代培养hPDLF,免疫细胞化学染色法鉴定其来源;取第3~ 5代细胞给予不同浓度（0、5、10、25、50、100 ng/mL）IL-22刺激,培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒（CCK-8）进行细胞毒性实验;采用5、10、25 ng/mL IL-22作用于hPDLF 72 h,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测RANKL、OPG mRNA的表达;随后选择最佳刺激浓度10 ng/mL IL-22,与1 μg/mL Pg-LPS分别或协同刺激hPDLF 72 h,实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测RANKL、OPG mRNA和蛋白水平的表达。采用单因素方差分析对数据进行统计分析。 结果50、100 ng/mL IL-22刺激hPDLF后,细胞活力明显下降（F_{24 h}= 15.17,F_{48 h}= 76.37,F_{72 h}= 24.409,P<0.05）;5、10、25 ng/mL IL-22均可上调hPDLF RANKL mRNA表达（F= 32.88,P<0.05）,但是对OPG mRNA表达无明显影响（F= 0.719,P= 0.555）;10 ng/mL组和25 ng/mL组上调RANKL mRNA表达较5 ng/mL组显著（P<0.05）;1 μg/mL Pg-LPS亦可显著上调hPDLF RANKL mRNA和蛋白水平的表达;而10 ng/mL IL-22与1 μg/mL Pg-LPS协同作用下RANKL mRNA和蛋白表达可进一步显著上调（F_mRNA= 36.67,F_蛋白= 41.24,P<0.05）,但是对OPG的表达无明显影响（F_mRNA= 0.652,P= 0.593;F_蛋白= 1.271,P= 0.313）。 结论IL-22可通过影响hPDLF表达RANKL/OPG参与牙周炎骨破坏,并且与Pg-LPS具有协同作用。     

过表达TAZ促进口腔舌鳞癌细胞增殖迁移和侵袭的作用机制研究

目的 :探究过表达Tafazzin(TAZ)对口腔舌鳞癌CAL-27、SCC-15细胞增殖迁移侵袭的影响及其作用机制。方法:利用成功过表达TAZ的慢病毒载体转染CAL-27、SCC-15细胞,分为过表达TAZ组(overexpression TAZ, OE TAZ)和对照组(negative control, NC)。用CCK-8实验检测细胞增殖;用划痕实验检测细胞的迁移;用Transwell实验检测细胞侵袭。相关基因的mRNA水平和蛋白水平分别利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测。结果:qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达TAZ病毒转染成功;过表达组较对照组增殖升高,迁移侵袭明显增强;增殖相关蛋白p-Erk,p-Akt表达量升高,上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏连蛋白(E-Cadherin)降低,波形蛋白(Vimentin)升高。结论:过表达TAZ可能通过影响p-Erk、p-Akt、E-Cadherin、Vimentin的表达促进口腔舌鳞癌CAL-27、SCC-15细胞的增殖迁移和侵袭。     

低氧对人牙周膜细胞增殖、细胞周期及分化潜能的影响

目的研究低氧对人牙周膜细胞（hPDLC）增殖、细胞周期以及干细胞表面标志物（STRO-1和CD146）表达水平的影响。 方法采用组织块法体外分离培养hPDLC;取第3~5代细胞分别在常氧和低氧（1.5%~2.0% O₂）条件下培养12、24、36、48 h,采用MTT法检测低氧对细胞增殖的影响;并通过流式细胞术检测低氧条件下细胞周期的变化以及细胞表面STRO-1和CD146表达水平的变化。 结果两组细胞增殖率随时间延长而增加,12和24 h低氧组细胞增殖率比常氧组稍高,差别无统计学意义。36和48 h低氧组增殖活性较常氧组降低,差异有统计学意义（t_{36 h} = 3.538,P_{36 h} = 0.024;t_{48 h} = 5.349,P_{48 h}= 0.006）;12 h低氧组细胞的增殖指数（PI）比常氧组低,24和36 h低氧组细胞PI比常氧组高,但差异均无统计学意义,48 h低氧组细胞PI比常氧组高,差异有统计学意义（t_{48 h}=-5.768,P_{48 h}= 0.004）;4个时间点低氧组细胞STRO-1和CD146的表达水平与常氧组比较差异无统计学意义。 结论低氧抑制hPDLC的增殖,但促进hPDLC DNA合成;hPDLC在低氧条件下能保持其分化潜能。     

转化生长因子β1增强糖酵解促进舌鳞状细胞癌细胞上皮间充质转化及迁移与侵袭

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）对舌鳞状细胞癌（TSCC）糖酵解活性和上皮间充质转化（EMT）及迁移与侵袭的影响。 方法利用10 ng/mL TGF-β1处理TSCC SCC9细胞1、2、3 d,收集细胞上清液检测葡萄糖和乳酸表达变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TGF-β1处理1、2、3 d后糖酵解关键酶表达变化;应用10 ng/mL TGF-β1处理TSCC SCC9细胞2、4、6 d,在倒置显微镜下定时观察细胞形态;Western blot检测TGF-β1诱导2、4、6 d后EMT上皮标记蛋白E-cadherin、间质标记蛋白Vimentin、Snail和Slug的表达变化;Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;同等培养条件下未经TGF-β1处理的为对照组。SPSS 13.0统计软件进行数据分析。 结果在TGF-β1诱导条件下,TSCC SCC9细胞葡萄糖摄取量在2和3 d时[（34.1 ± 1.2）、（47.1 ± 2.3）mmol]较对照组显著升高（t_{2 d}= 17.941,P_{2 d}= 0.003;t_{3 d}= 24.430,P_{3 d}= 0.002）,同时SCC9细胞乳酸生成量在2和3 d时[（46.4 ± 1.0）、（60.2 ± 2.0）mmol]较对照组明显增加（t_{2 d}= 50.230,P_{2 d}= 0.005;t_{3 d}= 26.883,P_{3 d}= 0.004）;TGF-β1处理后,糖酵解关键酶HK2表达在2和3 d时（1.21 ± 0.04、1.30 ± 0.06）均高于对照组,差异有统计学意义（t_2d= 6.111,P_{2 d}= 0.026;t_{3 d}= 6.423,P_{3 d}= 0.023）;糖酵解关键酶PKM2表达在2和3 d时（1.048 ± 0.002、1.071 ± 0.010）与对照组相比,差异无统计学意义（t_{2 d}= 20.693,P_{2 d}= 0.072;t_{3 d}= 9.875,P_{3 d}= 0.081）;糖酵解关键酶PFKP在2和3 d时（0.820 ± 0.010、0.839 ± 0.036）表达较对照组明显升高（t_{2 d}= 21.829,P_{2 d}= 0.020;t_{3 d}= 9.853,P_{3 d}= 0.022）;糖酵解关键酶GLUT1表达在2和3 d时（0.503 ± 0.007、0.589 ± 0.019）均高于对照,差异具有统计学意义（t_{2 d}= 30.693,P_{2 d}= 0.015;t_{3 d}= 21.173,P_{3 d}= 0.012）。在TGF-β1诱导下,与对照组相比,TSCC SCC9细胞从鹅卵石状变为长梭形,同时EMT上皮标记蛋白E-cadherin表达在2、4和6 d时（0.69 ± 0.03、0.67 ± 0.04、0.65 ± 0.04）较对照组降低,差异有统计学意义（t_{2 d}= 7.187,P_{2 d}= 0.019;t_{4 d}= 6.631,P_{4 d}= 0.022;t_{6 d}= 6.690,P_{6 d}= 0.022）,间质标记蛋白Vimentin（1.089 ± 0.134、0.706 ± 0.025、0.620 ± 0.010）表达在2、4、6 d处与对照组相比表达升高（t_{2 d}= 6.948,P_{2 d}= 0.020;t_{4 d}= 16.710,P_{4 d}= 0.004;t_{6 d}= 6.157,P_{6 d}= 0.025）,EMT转录因子snail在2 d时（1.14 ± 0.17）表达与对照组（0.77 ± 0.10）相比表达升高（t= 3.794,P= 0.015）,EMT转录因子slug在2 d时（1.85 ± 0.11）表达与对照组（0.93 ± 0.02）相比表达升高（t= 15.385,P= 0.014）;与对照组（20.0 ± 2.0）相比,TGF-β1处理后细胞迁移能力（45.7 ± 11.6）显著增加（t= 4.529,P= 0.017）,细胞侵袭能力（58.7 ± 5.0）较对照组（22.3 ± 1.5）明显升高（t= 15.571,P= 0.015）。 结论TGF-β1增强糖酵解,并促进TSCC细胞EMT及迁移和侵袭。     

沙利霉素对舌鳞癌细胞体外增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨沙利霉素对口腔舌鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步分析其影响机制。方法:CCK8法检测沙利霉素和顺铂分别作用于CAL-27细胞和EA.hy926细胞后,对细胞增殖的影响;Transwell小室法检测沙利霉素对CAL-27细胞侵袭和迁移能力的作用;Western 免疫印迹检测沙利霉素对CAL-27细胞中E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）和β连环蛋白（β-catenin）表达的影响。采用SPSS20.0 软件包对数据进行统计学分析。结果:沙利霉素抑制CAL-27细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性,且其增殖抑制作用强于顺铂（P<0.05）;经过沙利霉素(4 μmol/L）处理过的CAL-27细胞,其侵袭和迁移能力均显著低于空白对照组(P<0.05);沙利霉素上调CAL-27细胞中E-cadherin蛋白的表达水平,并且下调vimentin和β-catenin蛋白的表达水平。结论:沙利霉素能够明显抑制CAL-27细胞的增殖能力,显著减弱CAL-27细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制癌细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)有关。     

古曲抑菌素A对脂多糖诱导人牙髓细胞炎症反应的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对脂多糖（LPS）诱导人牙髓细胞（hDPC）炎症反应的影响。 方法采用酶组织块法体外分离培养hPDC,按处理因素不同分为空白对照组、LPS组（1 μg/ml）、TSA（25或50 nmol/L预处理）+LPS（1 μg/ml）组,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和ELISA检测促炎因子白细胞介素（IL）-6、IL-8 mRNA及蛋白表达量,Western blot检测NF-κB信号通路关键信号蛋白IKKα/β、p65及IκB-α磷酸化程度的变化。IL-6、IL-8 mRNA及蛋白表达采用方差分析,NF-κB信号通路Western blot结果采用独立样本t检验。 结果TSA（25 nmol/L）预处理能显著降低LPS刺激引起的IL-6、IL-8 mRNA与蛋白表达（F_{IL-6 mRNA}= 22.538,P_{IL-6 mRNA}= 0.002;F_{IL-8 mRNA}= 20.253,P_{IL-8 mRNA}= 0.002;F_IL-6蛋白= 9.327,P_IL-6蛋白= 0.007;F_IL-8蛋白= 9.6894,P_IL-8蛋白= 0.011）;LPS刺激能激活NF-κB信号通路中关键蛋白p-IKKα/β、p-p65和p-IκB-α的表达,而TSA预处理可降低IKKα/β（t_{30 min}= 6.437,P_{30 min}= 0.003;t_{60 min}= 6.386,P_{60 min}= 0.003;t_{120 min}= 4.368,P_{120 min}= 0.012）和IκB-α磷酸化程度（t_{15 min}= 3.822,P_{15 min}= 0.019;t_{30 min}= 4.467,P_{30 min}= 0.011）。 结论TSA可显著抑制LPS刺激下hDPC促炎因子的分泌,同时降低IKKα/β和IκB-α磷酸化程度,提示TSA可能通过降低NF-κB信号通路活性抑制牙髓炎症发展。     

低温时效性对牙科用氧化锆耐磨性能的影响

目的探讨低温时效对牙科用氧化锆耐磨性能的影响。 方法本实验对偶球为对照氧化锆球和经低温时效处理的氧化锆球（134℃,100 h）,对磨材料为牙釉质（n= 8）,每个氧化锆对偶球（n= 8）对应1个牙釉质样本。将样本和对偶球固定在磨耗试验仪上,磨耗实验条件：10 000、20 000和50 000个磨耗循环,频率1.2 Hz,载荷49 N。随后用三维轮廓扫描仪确定每组牙釉质样本磨痕的体积损失和深度损失,并测定磨耗前后氧化锆球表面的粗糙度。用微压痕实验方法检测氧化锆球的维氏硬度。应用SPSS 20.0软件包对实验数据进行统计学分析,采用双因素方差分别分析牙釉质样本的深度损失（μm）和体积损失（mm³ × 10^-3）以及氧化锆对偶球的粗糙度（μm）,采用单因素方差分析氧化锆对偶球硬度结果,选择Tukey HSD检验进行组间两两比较。 结果实验结果显示,10 000次磨耗循环后低温时效处理组和对照组牙釉质样本的深度损失（1.43 ± 0.07,1.46 ± 0.12）和体积损失（2.36 ± 0.45,2.31 ± 0.34）差异无统计学意义（F_深度损失= 0.721,P_深度损失= 0.610;F_体积损失= 0.0552,P_体积损失=0.801）;而经过20 000和50 000次磨耗循环后老化处理组对磨的牙釉质样本深度损失（F_{20 000}= 4.573,P_{20 000}= 0.0364;F_{50 000}= 49.385,P_{50 000}<0.001）和体积损失（F_{20 000}= 5.769,P_{20 000}= 0.0210;F_{50 000}= 61.792,P_{50 000}<0.001）显著低于对偶球为对照组氧化锆球组。10 000和20 000次磨耗后低温时效组的氧化锆球的表面粗糙度（0.0402 ± 0.0055,0.0366 ± 0.0061）与对照组（0.0406 ± 0.0035,0.0391 ± 0.0059）差异均无统计学意义（F_{10 000}= 0.0314,P_{10 000}= 0.873;F_{20 000}= 0.693,P_{20 000}= 0.416）,而磨耗50 000次后老化处理组氧化锆球的粗糙度（0.0596 ± 0.0045）显著高于于对照组氧化锆球（0.0386 ± 0.0027）,差异有统计学意义（F_{50 000}= 128.793,P<0.001）。低温时效处理组氧化锆的维氏硬度为1257.0 ± 54.5（HV1）显著低于对照组氧化锆球1385.8 ± 28.7（HV1,F= 124.789,P<0.001）。 结论低温时效处理导致牙科用氧化锆材料硬度降低,耐磨性能下降（20 000和50 000次磨耗循环后）。     

促红细胞生成素对人牙髓细胞迁移能力的作用

目的研究促红细胞生成素（EPO）对人牙髓细胞（hDPC）迁移能力的影响,并初步探讨相关分子机制。 方法实时荧光定量聚合链反应（PCR）检测EPO对hDPC表达趋化因子mRNA的影响;Transwell实验观察不同浓度的EPO对hDPC迁移能力的影响;Western blot检测不同时间点hDPC中p38、ERK1/2、JNK磷酸化水平的变化;细胞划痕实验观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路抑制剂对EPO诱导hDPC迁移的影响。 结果EPO上调趋化因子CXCR4、SDF-1 mRNA的表达（t_CXCR4= 5.727,P_CXCR4= 0.005;t_SDF-1= 3.412,P_SDF-1= 0.027）;与对照组相比,EPO显著促进hDPC的迁移能力（F= 207.775,P_{10 U/ml}= 0.000,P_{20 U/ml}= 0.000,P_{40 U/ml}= 0.000）;EPO可升高MAPK信号通路中关键蛋白ERK1/2（t_{15 min}= 6.554,P_{15 min}= 0.000;t_{30 min}= 17.305,P_{30 min}= 0.000;t_{60 min}= 8.913,P_{60 min}= 0.000;t_{120 min}=-5.896,P_{120 min}= 0.934）和p38的磷酸化程度（t_{15 min}= 4.396,P_{15 min}= 0.004;t_{30 min}= 6.447,P_{30 min}= 0.000;t_{60 min}= 34.676,P_{60 min}= 0.000;t_{120 min}= 4.689,P_{120 min}= 0.003）;MAPK信号通路抑制剂U0126、SB203580可抑制EPO诱导的hDPC迁移（t_EPO-U0126= 2.422,P_{EPO- U0126}= 0.025;t_EPO-SB203580= 3.837,P_EPO-SB203580= 0.001）。 结论EPO上调趋化因子CXCR4和SDF-1 mRNA的表达,通过激活MAPK信号通路,促进hDPC迁移。     

丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞 CAL-27抑制作用的研究

[摘要] 目的 探讨丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞CAL-27的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 丹参素处理CAL-27细胞,MTT法检测丹参素对CAL-27细胞活性的影响。划痕实验检测丹参素对CAL-27细胞的迁移能力的作用。Transwell实验检测其对细胞的侵袭能力的作用。结果 MTT显示,在丹参素浓度为40 μg/mL、60 μg/mL和80 μg/mL时,丹参素对CAL-27细胞增殖的抑制可呈剂量和时间依赖性。划痕实验中,24h组与对照组相比,具有显著差异性（P<0.01）。Transwell侵袭实验结果表明,丹参素可降低CAL-27细胞的侵袭能力。结论 在体外条件下,丹参素在一定浓度范围内可抑制CAL-27细胞的增殖,降低CAL-27细胞的迁移及侵袭能力。     

热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌CAL-27细胞增殖及侵袭的影响

目的: 探讨热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制。方法: 将培养的舌鳞癌细胞株CAL-27分为4组。①沉默Id-1组（Id-1-siRNA）—用siRNA基因转染法沉默舌鳞癌CAL-27细胞中Id-1的表达,RT-PCR法检测其Id-1的mRNA表达变化;②热疗组（HT）—细胞置于42.5℃恒温培养箱内40min;③联合组（HT+ Id-1-siRNA）—siRNA基因转染法沉默细胞内Id-1的表达后进行42.5℃、40 min的热疗处理;④空白对照组—常规培养细胞。通过CCK8和Transwell侵袭实验,分别检测CAL-27细胞的增殖能力和侵袭能力变化; Western免疫印迹法检测CAL-27细胞中PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: siRNA能成功沉默CAL-27细胞内Id-1的表达,沉默Id-1组与空白对照组相比,Id-1的mRNA表达水平下降81.6%。沉默Id-1和热疗均可抑制CAL-27细胞的增殖和侵袭能力,下调PI3K、p-Akt蛋白表达（P<0.05）,热疗联合沉默Id-1作用于CAL-27细胞后的结果更为显著（P<0.01）。结论: 热疗协同沉默Id-1可显著抑制人舌鳞癌细胞的增殖及侵袭能力,其作用是通过PI3K/Akt信号通路来实现。     

改良迷你临床演练方法在口腔正畸科考核中的初步应用

目的探讨将Tweed分析法与迷你临床演练（Mini-CEX）相结合,建立适用于口腔正畸专科的临床考核方案的效果。 方法通过将Mini-CEX方法与正畸学Tweed分析表进行结合,并补充细化评分表,从而建立了一种新型口腔正畸学教学考核方法,称为改良Mini-CEX考核。于2019年9月,从上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科随机选取6名在培口腔专科培训医师作为考生,对考生进行改良Mini-CEX考核,由5名正畸专家对其表现进行打分。应用SPSS 21.0软件对打分结果进行统计,计算肯德尔和谐系数（W）并进行显著性检验。 结果不同考官在评价同一考生时,考官间的打分具有显著的一致性（W₁ = 0.742,P₁ = 0.001;W₂ = 0.666,P₂ = 0.003;W₃ = 0.720,P₃ = 0.001;W₄ = 0.628,P₄ = 0.004;W₅ = 0.555,P₅ = 0.011;W₆ = 0.330,P₆ = 0.1293）。在医疗面谈、体格检查、临床判断、卫生教育、组织效能和整体表现6项,打分具有显著的一致性（W₁ = 0.620,P₁ = 0.008;W₂ = 0.588,P₂ = 0.012;W₃ = 0.885,P₃<0.001;W₄ = 0.625,P₄ = 0.008;W₅ = 0.835,P₅ = 0.001;W₆ = 0.930,P₆<0.001）,仅人文关怀一项未通过一致性检验（W = 0.147,P = 0.598）。 结论改良Mini-CEX具有标准程序,建立明确的得分细节,可以考核全面、获得公正客观,在不同考官间具有良好一致性,适用于当前口腔正畸学的考核与评价。     

Nd:YAG激光对口腔鳞癌CAL-27细胞迁移的影响

目的探讨1064 nm Nd:YAG激光对口腔鳞癌CAL-27细胞迁移的影响。方法体外培养鳞癌CAL-27细胞,取处于对数生长期的细胞接种于24孔板中并继续培养24 h,分0、120、240、360、480 s五组接受激光照射,对应剂量为0、44.4、88.8、133.2、177.6 J/cm~2,划痕后分别于0、12、24、48 h在倒置显微镜下观察划痕变化并拍照,以研究激光照射对细胞迁移影响。结果低剂量激光照射后细胞划痕区域愈合程度提高,而高剂量激光照射后,细胞划痕区域愈合程度降低。结论低剂量Nd:YAG激光照射对鳞癌CAL-27细胞迁移有一定促进作用,而高剂量Nd:YAG激光照射则会对鳞癌CAL-27细胞的迁移产生明显抑制作用。     

颞下颌关节紊乱病不同症状患者心理因素调查

目的研究颞下颌关节紊乱病（TMD）不同症状患者心理社会因素,尤其是焦虑的差别,为心理治疗对策提供试验依据。 方法206例就诊于天津医科大学口腔医院的TMD患者和201名无症状志愿者,填写症状自评量表（SCL-90）和状态-特质焦虑问卷（STAI）,根据患者主诉分组。采用SPSS 17.0统计软件,采用独立样本t检验和单因素方差分析对所有数据进行统计学分析。 结果（1）TMD患者SCL-90量表中的躯体化、抑郁、焦虑、敌对、精神病性因子得分及总分高于无症状志愿者,差异有统计学意义（t_躯体化 = 3.79,P_躯体化 = 0.000;t_抑郁 = 2.14,P_抑郁 = 0.033;t_焦虑 = 2.91,P_焦虑 = 0.004;t_敌对 = 3.93,P_敌对 = 0.000;t_精神病性 = 2.48,P_精神病性 = 0.013;t_总分 = 2.80,P_总分 = 0.005）;女性TMD患者的状态焦虑及特质焦虑得分均高于女性无症状志愿者（t_状态焦虑 = 3.52,P_状态焦虑 = 0.001;t_特质焦虑 = 4.26,P_特质焦虑 = 0.000）,两组男性之间差异无统计学意义（t_状态焦虑 = 0.36,P_状态焦虑 = 0.718;t_特质焦虑 = 0.76,P_特质焦虑 = 0.453）;（2）不同症状TMD患者在躯体化和状态焦虑方面差异有统计学意义（F_躯体化 = 2.714,P_躯体化 = 0.046;F_特质焦虑 = 3.007,P_特质焦虑 = 0.031）,具有单纯疼痛症状者躯体化得分高于单纯弹响患者（P = 0.005）,单纯弹响及疼痛伴弹响患者的特质焦虑得分高于疼痛伴开口受限者（P = 0.016）。 结论TMD患者心理健康水平比无症状人群低,主要表现在躯体化、抑郁、焦虑、敌对和精神病性方面。女性TMD患者有明显焦虑特征。单纯疼痛TMD患者躯体化比单纯弹响者更为明显。     

双硫仑对口腔鳞癌细胞上皮-间充质转化的影响及机制探讨

目的 基于Smad4突变状态探讨双硫仑对口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响。方法 将2017年6月—2018年6月在安徽医科大学附属口腔医院进行肿瘤切除术的46例OSCC患者手术切除的癌组织和癌旁组织切片纳入研究,同时购置人舌鳞状细胞癌细胞系SCC-25和CAL-27。采用免疫组织化学染色观察组织中Smad4的表达情况,Western免疫印迹测定细胞中Smad4的表达情况,分析双硫仑对TGF-β1诱导的细胞EMT迁移、侵袭、形态学以及p38、JNK和ERK表达的影响。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计分析。结果 癌组织中Smad4阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05)。双硫仑浓度为5、10、20 μmol/L时,SCC-25和CAL-27细胞存活率与对照组相比无显著差异(P>0.05),双硫仑浓度≥30 μmol/L后,SCC-25和CAL-27细胞存活率显著小于对照组(P<0.05)。经TGF-β1处理后,SCC-25和CAL-27细胞形态由上皮样转变为间质样,上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)表达显著降低,波形蛋白(Vimentin)和神经性钙黏附蛋白(Snail)表达显著升高,迁移能力显著增强(P<0.05)。经双硫仑+TGF-β1处理后,随着双硫仑浓度上升,SCC-25和CAL-27细胞形态改变逐渐减小,E-cadherin蛋白表达逐渐升高,Vimentin和Snail蛋白表达逐渐降低,迁移能力逐渐减弱(P<0.05)。TGF-β1刺激后5 min后,SCC-25和CAL-27细胞中p-ERK水平逐渐上升,在15 min时达到最大值,随后逐渐降低(P<0.05)。经20 μmol/L双硫仑+TGF-β1处理后,SCC-25和CAL-27细胞中p-ERK水平随作用时间延长而逐渐下降(P<0.05)。结论 双硫仑可通过阻断MAPK信号通路中ERK磷酸化,达到抑制Smad4突变与Smad4非突变OSCC细胞EMT作用。     

A型肉毒毒素复合罗哌卡因治疗三叉神经痛的疗效

目的评价A型肉毒毒素（BTX-A）复合罗哌卡因治疗特发性三叉神经痛的临床效果。 方法选取2018年12月至2019年10月在中国医科大学附属口腔医院就诊的特发性三叉神经第三支疼痛患者20例，随机数字表法分为试验组、对照组，每组10例。试验组采用BTX-A复合罗哌卡因治疗，对照组采用卡马西平治疗。两组治疗前及治疗后1 h、6 h、12 h、1周、1个月、3个月和6个月行视觉模拟量表（VAS）评分比较疼痛程度，同时统计和比较疼痛发作频率及睡眠质量，进行疗效评价。使用SPSS 20.0软件进行数据分析。 结果试验组疼痛VAS评分在治疗后1 h、1个月分别为0.4 ± 0.5和2.8 ± 3.1，分别低于对照组（1.2 ± 1.0、5.1 ± 1.4），差异均有统计学意义（t_{1 h}=-2.191，P_{1 h}= 0.047；t_1个月=-2.155，P_1个月= 0.045）；试验组治疗后1个月睡眠质量评分为7.8 ± 3.2，对照组为10.8 ± 2.4，差异有统计学意义（t=-2.395，P= 0.028）；试验组疼痛发作频率在治疗后1周、1个月、3个月均低于对照组，而在治疗后6个月高于对照组，差异均有统计学意义（t_1周=-2.900，P_1周= 0.010；t_1个月= -4.544，P_1个月= 0.001；t_3个月=-5.156，P_3个月= 0.000；t_6个月= 3.391，P_6个月= 0.003）。 结论BTX-A复合罗哌卡因可缓解特发性三叉神经痛，改善患者的睡眠状况。     

lncRNA CASC9通过调节miR-125a-3p/VEGF对口腔鳞癌CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探究长链非编码RNA癌症易感性候选基因9(lncRNA CASC9)对口腔鳞癌(OSCC)CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的调控机制。方法:构建lncRNA CASC9敲低的CAL-27细胞,并在lncRNA CASC9敲低细胞系中进行microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)的回复。检测细胞中lncRNA CASC9、miR-125a-3p和VEGF mRNA水平,检测细胞增殖、迁移及侵袭能力以及细胞中VEGF蛋白表达。结果:敲低lncRNA CASC9表达后,CAL-27细胞增殖活性、迁移与侵袭能力、VEGF mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),miR-125a-3p水平升高(P<0.05)。敲低lncRNA CASC9可显著抑制细胞在体内移植瘤生长和血管生成(P<0.05)。下调miR-125a-3p表达可减弱lncRNA CASC9敲低对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭以及对体内移植瘤生长和血管生成的抑制作用(P<0.05)。结论:lncRNA CASC9可能通过调节miR-125a-3p/VEGF促进OSCC细胞增殖、迁移和侵...