不同能量密度非剥脱点阵激光早期防治兔耳增生性瘢痕的疗效观察

目的 初步探讨早期防治兔耳增生性瘢痕形成的最佳激光能量密度及其可能的治疗机制。方法 12只健康新西兰大耳白兔,在10只兔耳部进行增生性瘢痕造模,成功形成61处增生性瘢痕,随机分为2组（1周组30处和3周组31处）。这两组兔耳瘢痕又分别随机分为A组（密度100 PPA、能量10 mJ激光）、B组（100 PPA、50 mJ激光）、C组（169 PPA、10 mJ激光）、D组（169 PPA、50 mJ激光）、E组（不接受激光处理）。除去3周组E组外,余均为每组6处瘢痕。2只大耳白兔未行瘢痕造模,作为F组（空白对照组）。免疫组化观察干预后1周兔耳皮肤组织中MMP-13表达情况,干预后3周兔耳皮肤组织行HE、Masson染色,观察瘢痕结构,计算瘢痕增生指数。各组瘢痕增生指数的比较采用Kruskal-Wallis H检验,MMP-13平均吸光度的比较采用单因素方差分析。结果 HE染色显示,A、B、C、D各组真皮层厚度较F组（正常皮肤组织）增厚,胶原纤维数量增加,但较E组（未处理瘢痕组）真皮厚度明显变薄,胶原纤维数量减少,排列相对有秩。A、B、C、D组间真皮层厚度未见明显差异。6组间瘢痕增生指数差异有统计学意义（H = 22.757,P < 0.05）。两两多重比较显示,B、C、D组瘢痕增生指数（2.597 ± 0.344、2.850 ± 0.282、2.658 ± 0.134）均显著低于E组（3.460 ± 0.583,均P < 0.05）。Masson染色显示,A、B、C、D各组真皮层厚度较E组明显变薄,胶原纤维排列不规则,但A、B、C、D各组间真皮层厚度及胶原纤维数量未见明显差别。免疫组化显示,在相同激光密度条件下,高能量（50 mJ）组的MMP-13表达水平明显高于低能量（10 mJ）组（P < 0.05）;而相同激光能量条件下,A组MMP-13水平显著高于C组（P < 0.01）,但B组与D组间差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 非剥脱点阵激光对于早期增生性瘢痕的干预有效。相同密度下,50 mJ能量激光干预效果优于10 mJ能量激光,推测高能量激光能更好刺激细胞外基质的重组以及上调MMP-13的表达,从而早期防治增生性瘢痕。     

2940nm点阵铒激光对兔耳增生性瘢痕血管内皮生长因子的影响

目的研究2940nm点阵铒激光对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳腹侧增生性瘢痕模型;将兔耳创面分为激光组（A组）和对照组（B组）,A组用2940nm点阵铒激光治疗,B组不予治疗;观察创面愈合时间和瘢痕增生情况。A组在治疗前、治疗后第7、14、30d分别收集标本,B组在以上相同时间点及瘢痕自然生长后70d分别收集标本,测量A、B组每个瘢痕增生指数（SEI）,HE染色观察瘢痕组织病理变化及免疫组化法检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的水平。结果 A组治疗后第7、14、30dSEI分别为（2.52±0.13）mm、（1.67±0.09）mm、（1.18±0.10）mm,B组分别为（2.64±0.57）mm、（2.76±0.38）mm、（2.78±0.29）mm,A组治疗后3个时间点瘢痕逐渐减小,与B组相比明显下降;HE染色观察示A组治疗后第7、14、30d瘢痕组织内血管由粗大变细小,胶原纤维由排列不齐变排列整齐,B组无明显变化;免疫组化示A组VEGF水平逐渐降低,而B组与治疗前瘢痕内VEGF表达无明显差异。结论 2940nm点阵铒激光治疗的有效性可能与其下调与增生性瘢痕相关的VEGF表达有关。     

A型肉毒素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及机制

目的 探讨A型肉毒素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及可能的机制。方法 SPF级大耳兔建立增生性瘢痕动物模型,随机分成3组：A型肉毒素组(A组)、复方倍他米松组(B组)和对照组(C组)。A、B两组待瘢痕增生达到高峰即伤后第30天,均瘢痕内注入药物,每个创面0.1 mL/次,2周/次,共注射2次,而C组不做任何治疗。于伤后第58天切取兔耳创面作为标本,对比3组瘢痕增生指数、胶原容积分数、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)及神经肽P物质(neuropeptide substance P,SP)表达的差异。结果 A、B、C三组的瘢痕增生指数分别为(1.20±0.15)mm、(1.17±0.10)mm和(2.64±0.34)mm;胶原容积分数为(63.67±2.25)%、(62.08±2.19)%和(79.08±4.80)%;VEGF的表达分别为(24.44±2.62)%、(23.75±2.58)%和(34.39±2.49)%;...     

疏血通注射液对兔耳增生性瘢痕MMP-2和ɑ-SMA表达的影响

目的：观察疏血通注射液对兔耳增生性瘢痕基质金属蛋白酶2（MMP-2）和ɑ-平滑肌肌动蛋白(ɑ-SMA)的影响。方法：选择新西兰白兔9只，创建兔耳增生性瘢痕动物模型，造模成功后30天（待创面上皮化后）,将其随机分为3组：疏血通组,曲安奈德组和空白对照组,每组3只。分组注射药物20天后取材，检测瘢痕厚度并计算瘢痕增生指数，苏木素-伊红（HE）和VG染色观察组织学结构和胶原纤维的表达，qRT- PCR 和免疫印迹法检测瘢痕组织中MMP-2和ɑ-SMA mRNA和蛋白的表达。结果：疏血通组瘢痕厚度和瘢痕增生指数,MMP-2 mRNA和蛋白水平，ɑ-SMAmRNA和蛋白水平分别为36.67±1.74和1.19±0.07，0.28±0.04， 0.53±0.06，1.40±0.34，0.56±0.06，曲安奈德组分别为35.33±3.51和1.25±0.15，0.18±0.01，1.03±0.17，0.50±0.03，0.39±0.03；空白对照组分别为85.00±7.38，2.77±0.37，1.01±0.07，0.83±0.06，4.43±0.47，0.81±0.05。HE和VG染色显示，疏血通组与曲安奈德组成纤维细胞及胶原纤维排列较空白对照组减少和稀疏。结论：疏血通注射液能够抑制瘢痕增生，降低MMP-2和ɑ-SMA蛋白的表达。     

强功率UVA1照射对增生性瘢痕动物模型瘢痕形成的影响

目的 探讨不同剂量UVA1对全层皮肤缺损诱导的兔耳增生性瘢痕模型的影响情况。方法18只新西兰白兔双耳腹面手术切除2 cm × 5 cm全层皮肤至筋膜,建立兔耳增生性瘢痕模型后,随机分成3组,每组6只兔,将每只兔左耳分别于伤后即刻、1个月、2个月开始用不同剂量大功率UVA1照射,右耳为非照射组。各照射组又分为两个剂量照射组,兔耳分别每次照射UVA1 60 J/cm2、110 J/cm2,连续30次。结果 创伤建模1个月、2个月后开始照射UVA1组,与照射前比较,高剂量组照射后瘢痕处真表皮厚度（282.32 ± 58.60;336.50 ± 98.34）和真皮胶原含量（24.91 ± 16.88;34.47 ± 8.90）均显著降低（P < 0.05）;照射组与非照射组在UVA1照射前后差值的比较,高剂量组照射后瘢痕处表真皮厚度差值（-143.52 ± 42.91;-142.44 ± 49.96）和真皮胶原含量差值（-56.39 ± 15.04;-48.35 ± 10.44）的差异有统计学意义（P < 0.05）;各照射组UVA1对瘢痕皮肤厚度（811.68 ± 79.03;659.08 ± 178.98）和胶原含量（67.80 ± 9.06;61.35 ± 12.91）的影响均存在剂量依赖性（P < 0.05）。而创伤建模的同时照射UVA1组,两种剂量的UVA1照射后瘢痕处皮肤厚度和胶原含量较非照射耳均显著增加（P < 0.05）。结论 上皮化后开始UVA1照射可使瘢痕变软,皮肤变薄,胶原含量降低。创伤同时照射UVA1不仅不能阻止瘢痕模型的建立,反而加重瘢痕。     

青蒿素、青蒿琥酯抗皮肤瘢痕的研究

目的 检测青蒿素和青蒿琥酯对兔耳增生性瘢痕模型瘢痕防治的效果.方法 用青蒿素和青蒿琥酯配制外用膏剂治疗兔耳腹侧增生性瘢痕模型,用药28 d后切取瘢痕HE染色、VG染色,检测瘢痕组织的增生指数、成纤维细胞数密度及胶原纤维面积密度.结果 青蒿素、青蒿琥酯配制的膏剂组均较对照组瘢痕平坦、柔软且成纤维细胞胞体变小,胶原纤维排列较稀疏、整齐.青蒿素组增生指数、成纤维细胞数密度、胶原纤维面积密度分别为(1.452±0.27)、(3638.245±463.0)细胞/mm2、(32.29±6.9)%;青蒿琥酯组增生指数、成纤维细胞数密度、胶原纤维面积密度分别为(1.445±0.24)、(3585.016±638.9)细胞/mm2、(34.74±8.27)%.两实验组检测指标均小于基质对照组及空白对照组,P＜0.01.青蒿素组与青蒿琥酯组相比较,P＞0.05,差异无统计学意义.结论 青蒿素、青篙琥酯膏可有效地抑制动物实验性皮肤瘢痕.     

高压氧对兔耳增生性瘢痕形成过程中缺氧诱导因子1α和胰岛素样生长因子Ⅰ受体表达的影响北大核心CSCD

目的 探讨高压氧对兔耳增生性瘢痕的形成及瘢痕组织中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、胰岛素样生长因子Ⅰ受体（IGF-1R）表达的影响.方法 选取20只新西兰大白兔建立兔耳瘢痕模型,随机分成实验组和对照组,实验组根据给予高压氧时间不同分为7d、14 d、21 d及28 d组,每组4只共48个创面,实验组术后立即给予高压氧处理,对照组处于常氧压空气环境中.术后第29天切取瘢痕组织进行苏木精-伊红（HE）染色,观察形态学差异,计算瘢痕增生指数;免疫组化法检测HIF-1α、IGF-1R的表达.结果 HE染色可见实验组成纤维细胞数量及胶原纤维含量较对照组明显减少.对照组瘢痕增生指数为4.28±0.22,7d、14 d、21 d及28 d实验组分别为3.64±0.29、3.46±0.21、3.29±0.21、3.16±0.15,各组间差异有统计学意义（F=77.70,P＜0.05）.免疫组化检测可见,各实验组HIF-1α、IGF-1R的表达量均较对照组显著降低（P＜0.01）,14 d组两因子表达量较7d组、21 d组较14 d组减少（均P＜0.05）,28 d组与21 d组比较,差异无统计学意义（均P＞0.05）.结论 高压氧可降低兔耳瘢痕组织中HIF-1α、IGF-1R的表达,对兔耳增生性瘢痕的形成有明显抑制作用.     

兔自体脂肪来源干细胞对增生性瘢痕的作用研究

目的观察兔自体脂肪来源干细胞对增生I生瘢痕的影响。方法建立兔耳增生性瘢痕模型,左、右耳分别设为实验组和对照组。分别于1、7、20d对实验组兔耳增生性瘢痕环形注射兔自体脂肪来源干细胞（浓度5×106／ml）;对照组增生性瘢痕注射同样剂量的生理盐水,观察第35d瘢痕大体形态学及组织学变化。结果实验组瘢痕增生高度及持续时间明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论兔白体脂肪来源干细胞对兔耳增生性瘢痕有抑制作用。     

一种增生性瘢痕动物模型的建立

目的建立一种兔耳瘢痕动物模型,观察兔耳腹侧创面在伤后不同时间瘢痕增生的情况。方法于38只新西兰兔的72只兔耳腹面手术切除2 cm×5 cm全层皮肤,创面用1%磺胺嘧啶银冷霜外敷包扎至愈合,换药隔日1次。未做手术的4只兔耳作对照。术后连续8个月观察兔耳创面自然愈合情况;用光镜观察兔耳创面瘢痕增生情况;分别用计算机图像分析系统和游标卡尺测量瘢痕胶原含量和瘢痕指数变化情况。结果兔耳创面上皮化后其色泽、厚度和质地均经历从瘢痕形成、成熟到退化的演变过程;1个月的瘢痕指数0.41±0.14,胶原含量30.69±12.39,分别较3-8个月为低(P<0.05),其变化与人体增生性瘢痕增生程度的消长趋势吻合。结论兔耳腹面全层皮肤缺损诱导的增生性瘢痕动物模型与人体增生性瘢痕相似,该模型可作为研究增生性瘢痕的发生机制及评估其治疗方法的较好的动物模型。     

多磺酸黏多糖乳膏对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及机制研究

【摘要】 目的 探究多磺酸黏多糖乳膏对增生性瘢痕形成的抑制作用及机制。方法 在新西兰白兔（16只）双耳建立直径6 mm的圆形全层创面，构建兔耳增生性瘢痕模型，每只兔耳3个瘢痕创面，左耳瘢痕作为多磺酸黏多糖乳膏实验组，右耳瘢痕为基质对照组，分别外涂多磺酸黏多糖乳膏和基质乳膏，1只兔耳用药量约0.4 g，2次/d，连续6周。分别在用药开始第0天（手术14 d）、14天（手术后28 d）和42天（手术后56 d）取瘢痕组织进行HE染色、Masson染色和免疫组化实验，评估组织病理评分，检测瘢痕厚度、胶原纤维密度和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值。采用t检验和单因素方差分析比较两组各指标差异。结果 HE染色结果显示，与给药前相比，给药42 d对照组存在大量细胞外基质沉积、炎症细胞浸润和局部充血等，而实验组未见明显改变 。给药0、14、42 d，对照组兔耳瘢痕组织病理结构评分明显升高，分别为4.16 ± 1.61、6.50 ± 1.46、6.53 ± 1.34（F = 13.69，P = 0.001），而实验组无明显变化（4.65 ± 1.52、5.13 ± 1.83、5.38 ± 1.60；F = 0.78，P > 0.05）。Masson染色结果显示，给药42 d对照组胶原纤维含量极高，被染成深蓝色，而实验组胶原纤维含量有所下降 ；随着给药时间的增加，与给药前相比，对照组瘢痕组织厚度明显增加（F = 5.64，P = 0.007），而实验组无明显变化（F = 1.48，P > 0.05）。免疫组化结果显示，与给药0 d相比，实验组和对照组各时点Ⅲ型胶原蛋白表达均无明显改变（F = 0.22、0.92，均P > 0.05），但对照组Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比例明显上升（F = 7.47，P < 0.001；F = 4.70，P = 0.005）；给药42 d，与对照组相比，实验组Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值明显下降（t = 3.04，P = 0.007；t = 2.35，P = 0.030） 。结论 多磺酸黏多糖乳膏局部应用可有效降低瘢痕厚度和抑制胶原纤维增生以及Ⅰ型胶原蛋白表达，预防和抑制瘢痕增生。     

长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗兔耳增生性瘢痕的实验研究

目的 通过建立兔耳增生性瘢痕模型,评价长脉冲1064 nm激光治疗增生性瘢痕的疗效.方法 选用新西兰长耳白兔10只,雌雄各半,体质量2.0～2.5 kg.在所有兔耳腹侧面建立增生性瘢痕模型,每只兔耳4处1.5 cm x 1.5 cm正方形造模.10只兔子共80个创面形成增生性瘢痕74处,将左侧和右侧兔耳增生性瘢痕块分为对照组和治疗组,治疗组应用长脉冲1064 nm激光照射,对照组未予治疗.30 d后观察实验组及对照组瘢痕的颜色、质地;彩色超声测量瘢痕厚度;瘢痕取材,HE染色和CD31免疫组化染色,记数瘢痕成纤维细胞密度和微血管密度;Masson染色观察胶原纤维.结果 激光治疗组较对照组瘢痕颜色变浅,质地变柔软,瘢痕厚度变薄,对照组搬痕的平均厚度为3.089 mill,治疗组为2.137 mm,两组比较,t=5.72,P<0.01.对照组血管密度均值为68.056个/mm2,治疗组为38.333个/mm2,两组比较,t=4.93,P<0.01,治疗组血管密度较对照组明显降低.成纤维细胞数量均值对照组为355.000个/mm2,治疗组为166.940个/mm2,两组比较,t=13.36,P<0.01,治疗组成纤维细胞数量明显减少.Masson染色观察对照组胶原纤维排列紊乱,治疗组胶原纤维排列疏松,规则.结论 长脉冲1064 nm激光可以促进早期增生性瘢痕消退,对瘢痕增生具有抑制作用.

Abstract：

Objective To evaluate the therapeutic effect of long-pulsed Nd:YAG 1064 laser on hyperplastic scars by using a rabbit ear model.Methods Five female and five male New Zealand long-ear white rabbits weighting 2.0-2.5 kg were used in this experiment.Four square full-thickness skin wounds sized 1.5 cm x1.5 cm were created on the ventral surface of each ear to develop a model of hyperplastic scar.Finally,a total of 74 hyperplastic scars developed on the 80 wounds,and the scars on the left and right ears served as the control (unirradiated) and treatment (irradiated with long-pulsed 1064 nm Nd:YAG laser) group,respectively.After 30 days of irradiation,the color and texture of scars were observed and the scar thickness was measured by color Doppler ultrasonogTaphy.Then,the scars were harvested followed by the analysis of density of fibroblasts and microvessels as well as the changes in collagen fibers in scars by HE staining,CD31 staining and Masson staining,respectively.Results A decrease was observed in the color,hardness and thickness of scars in the irradiated ears compared with the unirradiated ears.The average thickness of scars,microvessel density and fibroblast density in scars were significantly lower in the treatment group than in the control group(2.137vs.3.089 am,t=5.72,P<0.01;38.333/mm2vs.68.056/mm2,t=4.93,P<0.01;166.940/mm2vs.355.000/mm2,t=13.36.P<0.01).Masson staining revealed a disorganized arrangement of collagen fibers in the control group but a sparse and regular alignment in the treatment group.Conclusion Long-pulsed 1064 nm Nd:YAG laser may promote the shrinkage and suppress the hyperplasia of scars.     

瘦素抗体对兔耳增生性瘢痕组织转化生长因子-β1 mRNA表达的影响

目的 探讨瘦素抗体对兔耳增生性瘢痕组织内转化生长因子（TGF）-β1mRNA表达的影响。方法 新西兰大白兔15只,每只大白兔双耳腹侧作直径约7 mm,深达软骨膜的圆形切口共6个,共获得兔耳增生性瘢痕模型90个,随机分为3组。生理氯化钠液组：生理氯化钠液外用40 d;瘦素抗体外用组：2 ng/ml瘦素抗体外用40 d;瘦素抗体外用 + 注射组（联合用药组）：2 ng/ml瘦素抗体外用14 d后,每周注射1次2 ng/ml瘦素抗体,共3次。术后第40天各组均取瘢痕组织,计算瘢痕增生指数、组织病理学检查及测定瘢痕组织内TGF-β1mRNA表达。 结果 瘦素抗体外用组和联合用药组瘢痕增生指数及瘢痕组织中TGF-β1mRNA的表达明显下降,与生理氯化钠液组相比较,差异具有统计学意义,但两组之间比较,差异无统计学意义。组织病理学表明,生理氯化钠液组毛细血管增生明显,有大量成纤维细胞,核大、密集,排列不规则;瘦素抗体外用组与联合用药组成纤维细胞数量明显较少,核较小,排列相对规则。结论 瘦素抗体治疗能降低兔耳增生性瘢痕组织内的TGF-β1mRNA表达。